兽医临床上胶体金检测常见问题的分析

胶体金是常用的标记技术,以胶体金作为示踪标志物应用于抗原、抗体的新型免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在兽因临床使用的免疫印迹技术几乎都使用了胶体金标记,但经常会遇到一些问题,现将其分析介绍如下。     

免疫胶体金技术基本原理及其在疾病检测中的应用进展

近年来胶体金标记技术迅速发展,应用范围也逐渐扩大,不仅应用于光镜和电镜水平定位、定性及定量研究含有抗原物质的组织、细胞及亚细胞结构,还应用于免疫转印、流式细胞术、液相免疫测定、固相斑点金/银染色、免疫层析法(immunochromatography)和快速免疫金渗滤法(Dot immuogol     

胶体金标记抗体的制备及Dot-IGSS检测IBDV方法的建立

胶体金标记是当前生物学研究中比较理想的标记技术.1984年,Moremans等首次建立了固相载体上的斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS),莫照兰等[1]以亲和素胶体金为标记物建立了检测鸡传染性法氏囊病毒的斑点免疫金银染色技术.     

斑点金免疫渗滤测定法检测耕牛血吸虫病的效果观察

免疫胶体金技术是以胶体作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型免疫标记技术，没有潜在致癌物质的酶显色底物。斑点金免疫渗滤测定法是将斑点酶标与免疫胶体金结合起来的一种新型免疫标记技术。该测定方法是将被检抗体（血清或血纸浸出液）直接点样在硝酸纤维素膜上，滴加胶体金标记的血吸虫抗原，特异性抗原与抗体很快结合，在反应处发生金颗粒聚集，1min左右形成肉眼可见的红色斑点，判定检测效果。     

应用免疫胶体金标记技术对狂犬病病毒形态发生学的抗原定位研究

利用包埋后免疫胶体金标记技术，通过透射电子显微镜，对感染ＢＨＫ２１细胞的鹿狂犬病病毒进行了形态发生的抗原定位。结果：感染细胞的细胞质内有５种包涵体，其中４种被免疫胶体金特异性标记，这些病毒抗原是多成分的，另一种未被免疫胶体金标记的包涵体可能是病毒核酸；感染细胞的细胞质内大量堆积的病毒前体物质包涵体，其中可能有病毒装配后多余的成分，表明病毒各组分并不是按比例需要而合成的。     

免疫胶体金技术的应用及研究进展

免疫胶体金标记技术与免疫荧光、免疫酶、免疫铁蛋白等标记技术相比具有独特的优越性和更广泛的用途.本文综述了免疫胶体金技术的原理、特点、应用及研究进展.     

纳米胶体金免疫标记技术在牛病检测中的研究和应用

作者综述了以胶体金免疫渗滤法和胶体金免疫层析法为代表的纳米胶体金免疫标记技术近年来在牛病检测方面的研究和应用进展,并分析和预测其应用前景,为该技术在牛病临床检测领域的进一步研究与应用提供参考。     

免疫胶体金技术及在养猪业中的应用

免疫胶体金标记技术与其他三大标记技术相比具有独特的优越性和更广泛的用途,并日益受到研究者和广大工作人员的青睐.本文综述了免疫胶体金技术的原理、操作、特点、在养猪业中的应用及前景.     

免疫胶体金技术的原理与应用技术

免疫胶体金技术作为一种新兴的免疫学方法,在免疫组织化学、免疫学、生物分子识别和生物传感器等生物医学领域的研究和应用日益广泛,解决了仪器分析检测成本昂贵、技术要求高、耗时多等问题。本文简要介绍免疫胶体金技术的基本原理及应用技术,供参考。     

胶体金免疫层析技术在动物病毒性传染病诊断中的应用

自胶体金标记技术问世以来,已在妊娠检测、传染病、毒品、食品安全和兽医等领域得到了广泛的应用.就兽医领域而言,已应用在动物寄生虫、细菌、病毒以及兽药残留检测等方面.论文总结了胶体金免疫层析技术的基本原理和常见的检测抗原、抗体的方法,对胶体金免疫层析技术在动物病毒抗原和抗体检测中的应用进行了详细的介绍,并对该技术在动物病毒...     

一步法胶体金快速诊断法与ELISA检测猪瘟抗体的比较

免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。     

胶体金免疫层析技术在疾病诊断中的应用

胶体金免疫层析技术是一种应用抗原抗体特异性反应建立起来的新型免疫检测技术,因其具有方便、快捷、廉价、易保存等优点日益受到人们的重视,并在人类、动物和植物的疫病检测中广泛加以应用。本文简要介绍胶体金免疫层析技术的基本原理及其在抗原、抗体及核酸检测方面的应用,并对其存在的问题及发展前景进行分析,为该技术的深入研究与进一步应用奠定基础。     

检测犬抗狂犬病毒抗体的胶体金免疫层析法的建立及应用

为建立一种简便快速的胶体金免疫层析方法(GICA)以用于检测犬抗狂犬病毒抗体,本研究运用间接反应一步法原理,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒用以标记抗犬IgG抗体形成金-抗犬IgG抗体复合物,制成金标结合垫,加上包被有狂犬病毒糖蛋白的硝酸纤维膜,即制成胶体金免疫层析试纸条.样品中狂犬病?　 毒抗体与金标记抗体结合后沿硝酸纤维素膜移动,与膜上的糖蛋白特异结合形成肉眼可见的红色线条.试验结果显示,GICA试纸条与抗狂犬病毒抗体有特异性反应,与犬瘟热病毒、犬细小病毒等的抗体无交叉反应;GICA与标准ELISA法比较的总符合率为99.4%.结果表明,GICA试纸条检测抗狂犬病毒抗体特异性强、成本低,操作简便,不需任何仪器,特别适用于野外以及现场使用.     

胶体金技术在免疫学检测中的应用

胶体金技术是80年代首先于免疫学领域发展起来的一门新技术。最初该方法仅用于免疫电镜技术,现在已经发展到被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、免疫斑点渗滤法、免疫层析技术、生物传感器、PCR技术及染色体的基因定位的检测等生物学各个领域。目前已广泛应用于临床诊断,对医学临床检验、食品加工等产生了巨大影响。该方法最大特点是简单快速、准确直观,特别适合于广大基层单位、医院、野外作业人员以及大批量时间紧的检测和大面积普查等,因此该技术具有巨大的发展潜力和应用前景。现将胶体金技术在某些领域的主要应用做一综述,希望能够给从事相关研究的工作者提供一些帮助。     

免疫胶体金技术在兽医检验中的应用

免疫胶体金技术即免疫金标记技术（Immunogold labellingtechnique）。用胶体金作为特殊标记物的研究始于20世纪60年代初,1962年Feldberr等报道了用胶体金标记细胞进行电子显微镜的研究。1971年,Faulk和Taylor将胶体金引人免疫化学,首次用免疫金标记技术研究沙门菌壁细胞抗原成分,     

猪瘟病毒胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

为建立一种猪瘟病毒的快速检测方法，采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金，选择15nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体，对胶体金标记抗体采用低温超速离心法进行纯化，组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测，同时用直接荧光抗体试验和RT—PCR做平行试验。结果显示，用试纸条检测猪瘟病毒，10min左右即可显示结果，试纸条、直接猪瘟荧光抗体试验和RT—PCR的阳性检出率依次为36．36％（4／11）、45．45％（5／11）和72．72％（8／11）。表明，用胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟病毒操作简便，需时短，可以用于猪瘟的流行病学调查。     

布鲁氏菌BP26抗原胶体金试剂盒的研制及功能初试

目的：应用胶体金免疫层析技术建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的方法,组装试剂盒并进行初步验证。方法：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,标记重组布鲁氏菌BP26抗原和兔抗BP26多抗血清包被在硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,确定标记的最佳pH和最佳标记抗原量,检测试剂盒的灵敏度和重复性。结果：该试剂盒最佳标记pH值为6.7,最佳标记抗原量为20 μl,试剂盒的灵敏度和重复性较好。结论：该试剂盒具有较好的灵敏度和重复性,整个检测过程可在15 min内完成,能够快速检测样品血清,适用于现场快速检测。     

圆环病毒2型抗体胶体金检测试纸条的初步研制及应用

为快速检测猪群中猪圆环病毒2型抗体,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并标记纯化的猪圆环病毒Cap蛋白和兔IgG,包被至玻璃纤维膜上制备金标垫,将纯化抗原和羊抗兔IgG分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上,建立了检测猪圆环病毒2型抗体的胶体金免疫层析方法并组装检测卡。结果显示,组装的检测卡只与圆环病毒阳性血清发生特异性反应,阳性血清稀释10倍后仍然能够检出。用此检测卡与商品化ELISA试剂盒对100份临床血清进行平行检测,阳性率分别为89%和93%,两种方法符合率在95%以上。该方法操作简便、特异性强,可广泛应用于基层,也为圆环病毒疫苗效果评价提供了良好的试剂选择。     

免疫胶体金技术及其在兽医快速检测上的应用

自从1971年Faulk与Taylor创立胶体金标记技术以来,胶体金被引入免疫化学中,成为继荧光标记、酶标记和放射性免疫标记之后的又一种新型的免疫标记技术。目前该技术在医学快速检验中的应用主要是用于妊娠检测、病原体抗原或抗体检测、药物滥用检测、疾病相关蛋白检测等。该技术在动物疫病诊断方面的应用虽然起步较晚,但发展迅速。其中,免疫胶体金层析技术已成为当今兽医快速检测中最快速敏感的免疫学检测技术之一。     

应用胶体金免疫电镜技术检测鸭肝炎病毒

本研究应用胶体金免疫电镜技术和直接电镜（ＤＥＭ）、免疫电镜（ＩＥＭ）比较观察了鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＱＬ＿７９弱毒株和Ｒ＿８５９５２标准强毒株。ＱＬ＿７９株和Ｒ＿８５９５２株的形态结构是一致的，球形，大小为２０～４０ｎｍ。胶体金免疫电镜技术可作为检测ＤＨＶ的常规方法，具有简便、快速、灵敏、直观等特点。