间接荧光抗体法快速检测病禽组织中的新城疫抗原

利用间接荧光抗体法(IFA)对用新城疫病毒(NDV)攻毒鸡胚的卵黄、胚体、尿囊液、尿囊膜和人工感染鸡、自然病死鸡的心、肝、脾、肺、肾、脑、盲肠扁桃体、法氏囊等8种脏器进行检测。结果鸡胚收集液、6例人工感染和15例自然病例的脏器检测结果均为阳性;脏器以肝、脾、肺、脑的检出率最高,检出效果最好。     

家畜疫病血清学诊断的方法

血清学诊断是建立在抗原与相应抗体发生可见反应原理的基础上,有的反应是不见状态,可应用补体、溶血以及荧光素、酶和同位素标记等指示系统,使其成为可见或可测状态。血清学方法具有严格的特异性和较高的敏感性,在传染病的诊断、病原微生物的分类和鉴定以及抗原分析等方面,均具有广泛的应用。用已知抗体,对分离获得的病原微生物予以     

青海牦牛新孢子虫病的血清学诊断

使用新孢子虫（Neopora caninum）的全虫体速殖子或来自速殖子的抗原出现一些无法避免的问题，由于这些抗原与它相近虫体T．gondii间存在交叉反应，容易产生假阳性。因此，需要建立一个可靠的、敏感的和特异性的诊断方法用来检测N．caninum的特异性抗体。在本研究中进行了ELISA诊断方法的建立，并且用纯化的重组抗原GST-NcSAGlt作为ELISA诊断抗原，进行了牦牛N．caninum抗体的检测。     

鸡传染性支气管炎血清学诊断方法研究进展

鸡传染性支气管炎 (IB)是由传染性支气管炎病毒 (IBV)引起鸡的一种急性、高度接触性呼吸道和泌尿生殖道疾病。该病在幼鸡主要表现为罗音、咳嗽、呼吸困难及死亡等 ,产蛋鸡则通常发生产蛋量和蛋的品质下降 ,输卵管受到永久性的损伤而丧失产蛋能力 ;发生肾型传支的病鸡还表现为拉淀粉糊样粪便 ,肾脏苍白、肿大 ,肾小管和输卵管内有大量的尿酸盐沉积 〔1〕。 IB于 1931年由 shalk首先报道于美国 ,并由Beach和 Schalm于 1936年确定了该病病原 〔2〕。 1937年Beaudette和 Hudson首次在鸡胚上成功培养该病毒〔3〕。 196 2年 Winterfeild等首…     

河北张家口地区猪瘟免疫状况血清学调查

猪瘟(CSF)是由瘟病毒属的猪瘟病毒(CSFV)引起的猪的一种热性高度接触性传染病,各年龄阶段的猪和不同品种的猪对其均易感.猪瘟呈世界性分布,由于其危害程度高,对养猪业造成经济损失巨大,所以世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类传染病,并规定为国际重点检疫对象.     

猪传染性脑脊髓炎的血清学诊断

1病毒中和试验康复猪和隐性感染猪均能产生特异性抗体。抗体检查有多种血清学方法,其中病毒中和试验最适合。材料有标准抗原,用猪传染性脑脊髓炎（PTEV）在单层细胞上增殖后,反复冻融三次,零下20℃冻存备用。标准阳性血清,用PTEV纯化抗原免疫血清抗体阴性的健康猪,采血、分离血清备用。标准阴性血清与其他阴性血清的制备方法相同,还有96孔微量细胞培养板、微量移液器、温箱等。将血清置于56℃水浴中灭活30分钟。     

鸭源大肠杆菌荧光抗体的制备及直接荧光抗体染色法的建立

荧光抗体技术又称免疫荧光技术,它是在免疫学、生物化学和显微镜技术发展的基础上建立起来的一项技术,现已广泛应用于多种疾病的诊断与检测[1].大肠杆菌感染动物出现严重的菌血症和败血症,表现为严重的心包炎、肝周炎、气囊炎和腹膜炎等.对大肠杆菌病的诊断,通常采取平板划线分离细菌,进一步进行生化鉴定和血清型鉴定以及分子水平的鉴定.这一方法操作过程复杂,检测费时费力.     

应用免疫胶体金标记技术对狂犬病病毒形态发生学的抗原定位研究

利用包埋后免疫胶体金标记技术，通过透射电子显微镜，对感染ＢＨＫ２１细胞的鹿狂犬病病毒进行了形态发生的抗原定位。结果：感染细胞的细胞质内有５种包涵体，其中４种被免疫胶体金特异性标记，这些病毒抗原是多成分的，另一种未被免疫胶体金标记的包涵体可能是病毒核酸；感染细胞的细胞质内大量堆积的病毒前体物质包涵体，其中可能有病毒装配后多余的成分，表明病毒各组分并不是按比例需要而合成的。     

犬瘟热的荧光抗体技术诊断及治疗

犬瘟热（canine distemper,CD）是由犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）感染引起的犬的急性、高度接触性传染病,流行广,发病率、致死率高,对养犬业危害巨大.目前,我国兽医临床上对CD的诊断主要为经验性判断,常导致误诊.因而,研制一种简便、准确、快速的诊断CDV的方法就成为当务之急.免疫荧光抗体（IFA）是目前国际公认的诊断CDV的较好方法.此研究采用间接荧光抗体技术,进一步提高了该技术检测CD的敏感性、特异性和临床实用性,并对检出的CD病例进行治疗,现将具体情况介绍如下.     

中等毒力鸡新城疫抗原抗体复合物疫苗的免疫效果

用中等毒力新城疫病毒Mukteswar株作为复合物疫苗抗原,与新城疫抗体配制不同比例的4种复合物疫苗,用1日龄SPF雏鸡进行免疫效果试验。试验1～4组分别免疫复合物疫苗,试验5组免疫常规新城疫活疫苗,试验6组为空白对照组。免疫后3周采血测定血凝抑制(HI)抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验1～6组HI抗体效价分别为28.38、29.0、25.5、23.85、28.43、22.14,攻毒后1～6组鸡的死亡率分别为0%、0%、20%、40%、0%及80%。结果表明,中等毒力新城疫病毒Mukteswar株与特异性抗体制备的复合物疫苗,可以减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。     

家畜传染病常用血清学诊断的方法

血清学诊断是建立在抗原与相应抗体发生可见反应这个原理的基础上,有的反应是不可见状态,可应用补体、溶血以及荧光素、酶和同位素标记等指示系统,使其成为可见或可测状态。1直接凝集试验细菌、红血球等颗粒性抗原与相应的抗体在电解质参与下,发生反应,相互凝集形成团块,这种现     

荧光抗体法检测猪细小病毒

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)为引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一.猪细小病毒感染的主要特征是孕猪在怀孕前容易受到感染,可引起胚胎或胎儿的感染和死亡,导致母猪发生流产,死胎,胎儿木乃伊化及新生仔猪的死亡.目前,国内外检测猪细小病毒的方法主要有原位杂交、银加胶体金检测法、ELISA双抗体夹心法、聚合酶链反应和荧光抗体法等.免疫荧光技术是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应.笔者认为荧光抗体法较适用,而关于此方法的报道甚少,因此进行了以寻求快速、特异的直接荧光抗体检测方法为目的的研究.     

犬瘟热病毒抗体检测方法的比较研究

用犬瘟热（ＣＤ）弱毒和自制的高免犬血清，建立了检测犬瘟热病毒（ＣＤＶ）抗体的中和（ＳＮ）试验、间接荧光抗体技术（ＩＦＡＴ）和间接免疫酶染色法。这３种方法对３８份ＣＤ弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明，当被检血清稀释度为１∶１００时，ＳＮ试验、ＩＦＡＴ和间接免疫酶染色法测定时的阳性血清数分别为２９，７和３１份，ＩＦＡＴ和间接免疫酶染色法测定结果相对于ＳＮ试验结果的符合率分别为４２．１％和９４．７％。同时发现，当ＳＮ试验测定的血清效价在１∶１００以上时，ＩＦＡＴ测定结果总是在１∶２５以上，间接免疫酶染色法测定结果总是在１∶１００以上。３种方法以各自初步确定的ＣＤＶ血清抗体效价完全保护值指标计算所测血清的完全保护率，ＳＮ试验为７６．３％，ＩＦＡＴ为７８．９％，间接免疫酶染色法为８１．６％。据此认为，ＩＦＡＴ和间接免疫酶染色法均可部分代替ＳＮ试验用于ＣＤ疫苗免疫效果的评价、免疫犬抗体水平的监测以及ＣＤ的流行病学调查     

免疫器官中肾型鸡传染性支气管炎病毒的定位和动态分布

以鼠抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（肾型IBV）的高免血清为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测石蜡切片肾型IBV抗原的间接酶标抗体染色技术。应用该技术对人工感染肾型IBV C9001株鸡免疫器官中的病毒进行了检测，结果胸腺和法氏囊是病毒主要侵害的免疫器官，脾脏，盲肠扁桃体仅呈一过性感染，哈氏腺未检测到，法氏囊从感染后2－12天，胸腺从感染后3－8天均检测到病毒抗原，阳性染色主要集中于法氏囊淋巴滤泡髓质区和胸腺小叶髓质区淋巴细胞和网状细胞胞浆内。     

新城疫复合物疫苗对1日龄雏鸡免疫效果的研究

用新城疫病毒La Sota株作为复合物疫苗抗原,与新城疫特异性中和抗体混匀配制成4种不同比例的复合物疫苗,用1日龄普通雏鸡进行免疫效果对比试验。试验1~4组分别为免疫复合物疫苗1~4,试验5组免疫常规新城疫活苗,试验6组为空白对照组。免疫后3周采血测定HI抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验结果显示,试验1~6组HI抗体效价分别为3.2log2、3.1log2、3.3log2、3.2log2、3.1log2、2.9log2;攻毒后,试验1~6组鸡的死亡率分别为15%、20%、0%、35%、30%、50%。因此,新城疫病毒La Sota株与新城疫特异性抗体制备成复合物疫苗,能保持疫苗中抗原的免疫原性,并可减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。     

禽流感诊断技术的研究进展

禽流感不仅在全球造成了巨大的经济损失,也对人类的健康乃至生命安全提出了前所未有的挑战,本文主要对目前禽流感病毒抗体和病毒病原的检测技术作一简要综述。     

血清学检测的雄性特异性抗原Fab抗体的特异性鉴定

旨在研究血清学检测的雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体的特异性。以从噬菌体Fab抗体库中筛选到具有较高雄性特异性结合活性的重组噬菌体克隆为基础,构建Fab抗体的可溶性表达噬质粒,并诱导和纯化该抗体片段,利用免疫荧光FITC/DAPI共染技术和ELISA分析其特异性。结果表明,该抗体在约49 ku处有条带出现。在Fab抗体和H-Y抗血清的细胞免疫荧光比较分析试验中发现,从雌、雄鼠脾细胞的阳性细胞数量和平均荧光强度的角度分析,Fab抗体的雄性特异性强于抗血清。石蜡切片免疫荧光定量分析显示,Fab抗体与雄鼠肝脏的结合活性明显高于对应雌鼠,差异极显著(t=20.73,P=0.002 3<0.01),而H-Y抗血清与雄鼠肝脏的结合活性略高于对应雌鼠,差异显著(t=7.11,P=0.019 2<0.05)。以C57BL/6雄鼠脾细胞、睾丸细胞作为抗原的ELISA分析显示,Fab抗体具有雄性特异性,但Fab抗体的OD值低于抗血清。结果提示,Fab抗体的雄性特异性高于H-Y抗血清,但其雄性特异性结合活性低于H-Y抗血清,Fab抗体在具备雄性特异性的同时,仍有少量雌性非特异性结合,Fab抗体的体外亲和力成熟可作为后续研究工作,以获...     

斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记SPA，建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色，阳性者出现红色斑点，结果易于判断。整个试验过程仅需5min，操作简单，与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot—ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较，符合率达98．4％和98．9％。说明该法微量、特异、敏感可靠，检测时间短，效果直观，非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。     

猪囊虫循环抗原的特异性

用兔抗囊虫粗抗原IgG,以ELISA双抗体夹心法检测病、健猪血清,阳性率分别为10.68％和5.30％,两者之间无显著差异;经免疫复合物解离处理后,病、健猪血清的阳性率分别为35.29％和2.3％,两者之间差异显著。琼脂凝胶双扩散试验查明,某些病、健猪血清中存在一种共同的抗原成分,导致交叉反应。这种成分不易被3.5％PEG沉淀。病猪血清中还存在一种特异抗原成分,其反应性强,主要以免疫复合物的形式存在。     

应用ELISA法诊断非典型猪瘟的报告

近年来,猪瘟的流行特征发生了重要变化,出现了以非典型、隐性感染为主的流行趋势,致使猪瘟的临床诊断更为困难.酶联免疫吸附试验(ELISA)是快速检测猪瘟的有效方法.本试验通过应用ELISA法检测非典型猪瘟病例,摸索出诊断非典型猪瘟的可靠方法.发现非典型猪瘟——流产型猪瘟病例,其血清中不含抗病毒抗体,因此诊断本病必须通过检测病毒的方法.