克氏原螯虾卵黄发生过程中卵巢和大颚器孕酮含量的变化

运用放射免疫测定法,研究克氏原螯虾卵黄发生过程中卵巢和大颚器的孕酮含量变化。其中次级卵黄发生早期的卵巢孕酮含量最高,卵黄发生前期卵巢孕酮含量次之,次级卵黄发生中期的卵巢孕酮含量显著降低,产后期卵巢检测不出孕酮含量,表明随着卵巢的成熟和产卵,卵巢中的孕酮含量逐渐下降,推测孕酮与卵黄发生的启动有关,而在不同发育时期的大颚器中均未能测到孕酮。     

克氏原螯虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化

在克氏原螯虾的卵巢发育周期中,大颚器的组织结构呈现周期性变化：大颚器逐渐增大,颜色由白色透明变为淡土黄色;细胞数目增多,细胞直径和细胞间隙增大;基膜逐渐形成并增厚颗粒血细胞逐渐增多。到卵黄发生期,大颚器的这些形态结构变化到达顶峰。产卵后大颚器细胞解体,随着卵巢的重新发育,大颚器也重新发育。     

克氏原螯虾卵黄发生过程中卵巢和大颚器孕酮含量的变化

运用放射免疫测定法，研究克氏原螯虾卵黄发生过程中卵巢和大颚器的孕酮含量变化。其中次级卵黄发生早期的卵巢孕酮含量最高，卵黄发生前期卵巢孕酮含量次之，次级卵黄发生中期的卵巢孕酮含量显著降低，产后期卵巢检测不出孕酮含量，表明随着卵巢的成熟和产卵，卵巢中的孕酮含量逐渐下降，推测孕酮与卵黄发生的启动有关，而在不同发育时期的大颚器中均未能测到孕酮。     

克氏原螯虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化

在克氏原螫虾的卵巢发育周期中,大颚器的组织结构呈现周期性变化：大颚器逐渐增大,颜色由白色透明变为淡土黄色;细胞数目增多,细胞直径和细胞间隙增大;基膜逐渐形成并增厚;颗粒血细胞逐渐增多。到卵黄发生期,大颚器的这些形态结构变化到达顶峰。产卵后大颚器细胞解体;随着卵巢的重新发育,大颚器也重新发育。同时,在卵巢发育周期中,卵黄发生期大颚器细胞直径与卵母细胞直径的线性关系最为显著,相关系数最大,r＝0．926;大颚器细胞直径也最大,与其它时期相比都具有极显著性差异。     

克氏原螫虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化

在克氏原螫虾的卵巢发育周期中,大颚器的组织结构呈现周期性变化：大颚器逐渐增大,颜色由白色透明变为淡土黄色;细胞数目增多,细胞直径和细胞间隙增大;基膜逐渐形成并增厚;颗粒血细胞逐渐增多。到卵黄发生期,大颚器的这些形态结构变化到达顶峰。产卵后大颚器细胞解体;随着卵巢的重新发育,大颚器也重新发育。同时,在卵巢发育周期中,卵黄发生期大颚器细胞直径与卵母细胞直径的线性关系最为显著,相关系数最大,r＝0．926;大颚器细胞直径也最大,与其它时期相比都具有极显著性差异。     

稻田养殖克氏原螯虾研究

开展了稻田养殖克氏原螯虾的研究。结果表明:稻田养殖克氏原螯虾是可行的,并可获得较好的养殖效益。     

克氏原螯虾卵巢发育Ⅲ期与Ⅳ期的比较蛋白质组学研究

克氏原螯虾作为经济虾蟹类的重要代表,是淡水虾类重要水产养殖资源.目前在规模化养殖过程中优质苗种的供应短缺现状,是制约克氏原螯虾产业发展的瓶颈之一.人工养殖条件下,雌虾卵巢易出现发育迟缓甚至停滞现象而导致雌、雄性腺发育不同步是优质苗种短缺的首要根本原因.分析可知,克氏原螯虾卵巢从卵黄发生前期(Ⅲ期)到卵黄发生期(Ⅳ期)的发育过渡是卵母细胞能否顺利发育成熟的关键点.本研究对克氏原螯虾卵巢发育Ⅲ期和Ⅳ期卵巢组织总蛋白质组双向电泳的等电聚焦条件、上样量等关键因素进行了优化,运用PDQuestTM软件对获得的凝胶图谱进行了图像分析,并对表达差异蛋白质点(丰度差异≥2倍)进行了串联质谱鉴定.结果显示:在等电总伏特数不低于8500V·h、样品上样量为200 μg时,可以获得较清晰的凝胶图谱;利用串联质谱分析挖取的52个差异蛋白质点,其中共成功鉴定29个(包括22种蛋白质);分析表明,相对于发育Ⅲ期卵巢蛋白质组,在Ⅳ期卵巢蛋白质组中有13种蛋白质表达量有下调,9种蛋白质表达量有上调.研究结果将对于揭示克氏原螯虾的卵巢发育分子调控机制奠定一定基础,同时对于了解其他虾蟹类动物的性腺发育机理也将积累重要分子生物学资料.     

克氏原螯虾与红螯螯虾血相的比较研究

对克氏原螯虾与红螯螯虾的血相进行了比较研究。结果表明 :克氏原螯虾与红螯螯虾的血细胞均由无颗粒细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞组成 ;其血细胞数量分别为 7.0 2× 10 6个 /ml和 1.6 5× 10 6个 /ml。 2种螯虾的血细胞大小与核质比均存在显著差异 ;无颗粒细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞占血细胞总量的百分比在克氏原螯虾为 10 .2 1%、74 .4 1%和 15 .4 8% ,在红螯螯虾为 13.72 %、6 8.84 %和 17.5 4 %。     

克氏原螯虾卵巢发育与产卵周期变化的观察

对克氏原螯虾性腺(卵巢)在不同季节和不同生长阶段进行连续1 a(从2007年4月至2008年3月)跟踪解剖观察,以期探明克氏原螯虾卵巢成熟发育机理和繁殖生理规律。结果显示:克氏原螯虾卵巢发育一般分为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期和Ⅵ期6个时期,卵巢发育初期(Ⅰ期)呈白色透明状,未见卵粒;Ⅱ期和Ⅲ期卵巢中的卵粒颜色逐步变黄加深;发育至Ⅳ~Ⅴ期,卵黄沉积后的卵粒呈深褐色;产卵后的卵巢(Ⅵ期)呈空管状,残存有少量未成熟的卵子。在长江流域(江苏地区),2007年4~6月份的雌虾卵巢发育时期以Ⅱ~Ⅲ期为主,卵巢出现频率最高值为46.7%;2007年7~8月克氏原螯虾25 g以上的个体多数卵巢已达到Ⅳ期,卵巢出现频率为40.0%~50.0%;2007年9~11月卵巢成熟系数为1.99%~2.92%,均高于其他月份;2007年12月至2008年3月卵巢发育时期以产卵后的第Ⅵ期为主,出现频率最高达60.0%。表明,在自然条件下克氏原螯虾大部分个体一般1 a只产1次卵且主要集中在秋冬季,同时其繁殖孵幼存在明显的不同步性。     

克氏原螯虾养殖探讨

阐述了克氏原螯虾的生物学特性、经济价值及人工养殖技术。     

Cloning and Sequence Analysis of Prophenoloxidase from Haemocytes of the Red Swamp Crayfish, Procambarus clarkii

The full-length cDNA sequence of prophenoloxidase was obtained through RACE technology. The complete cDNA sequence is 3 721-bp long, containing an open reading frame （ORF） of 1 881 bp, a 154-bp 5′-untranslated region, and a 1 686- bp 3′-untranslated region with three potential functional poly（A） signals （AATAAA）. The molecular mass of the deduced amino acid sequence （627 aa） was 72.3 kDa with an estimatedpI of 5.88. It contained putative copper-binding sites （copper A： 131, 135, 167 and copper B： 301,305, 341）, and a tentative complement-like motif （GCGWPDHL）. Eight potential N-linked glycosylation sites were predicted to be present in P. clarkii prophenoloxidase. Similar to those in other arthropod prophenoloxidases reported so far, no signal peptide was detected in the crayfish prophenoloxidase. The phylogenetic trees confirmed that P. clarkii prophenoloxidase was most closely related to that of freshwater crayfish P. leniusculus and more closely related to other crustacean prophenoloxidases from shrimp, prawn, and lobster than to the insect prophenoloxidases. Besides, two putative introns were found in this sequence of genomic DNA.     

克氏原螯虾不同发育阶段卵巢中EST同工酶比较

[目的]研究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)卵巢成熟过程EST的变化。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,分析了卵黄形成期和成熟期卵巢中酯酶同工酶(EST)的表达情况。[结果]所研究的两个阶段卵巢中EST同工酶的表达可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ共3个区。其中Ⅰ区和Ⅱ区卵黄形成期EST表达较强,酶带明显比成熟期浓,尤其是Ⅰ区,卵黄形成期EST同工酶的表达最强。相反,在Ⅲ区,成熟期EST酶带明显比卵黄形成区浓。[结论]在克氏原螯虾卵子成熟过程中,EST基因的表达存在时间差异性。     

克氏原螯虾母体规格对后代生长特性的影响

对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)两种规格母体后代的生长特性进行了研究.结果表明,从两种规格母体上刚离体的早期幼虾经过40 d的培育,后代的体重差异不显著(P＞0.05),小规格母体后代的个体间差异较大,存活率均较低.分级后,再培育40 d,两种规格母体的后代生长性状差异极显著(P＜0.01),大规格母本的后代显著大于小规格母本的后代,随着培育时间延长幼虾体重变异系数和体长变异系数下降明显.     

克氏原螯虾无公害养殖技术与发展建议

结合无公害水产养殖标准,阐述了目前我国克氏原螫虾(Procambarus clarkii)无公害养殖的养殖模式、养殖环境、种苗、饲养管理和病害防治方面的现状,并针对克氏原螯虾养殖现状中的不足之处提出了一些发展建议.     

克氏原螯虾池塘和稻田集约化养殖技术及工艺

详尽地阐述了克氏原螯虾池塘及稻田养殖技术,包括养殖池塘的建造、池塘养殖具体实施方法,养殖稻田的清整、稻田养殖具体实施方案等,为克氏原螯虾养殖生产提供借鉴.     

Tropomyosin基因在克氏原螯虾(Procambarus clarkii)卵巢发育过程中的表达

原肌球蛋白Tropomyosin是虾蟹类的主要致敏物质,除此以外在其他方面功能的研究非常少。本研究克隆了克氏原螯虾Tropomyosin基因,进行了同源序列比对,并分析了Tropomyosin基因在克氏原螯虾卵巢发育过程中的转录水平表达模式。研究结果显示,Tropomyosin蛋白序列高度保守,在虾蟹类甲壳动物中,8个抗原决定簇序列几乎完全一致。本研究克隆的基因存在3个核苷酸位置(c61—t,g118—a,c359—t)的变化,但是均不处于抗原决定簇内,免疫原性不受影响。Tropomyosin基因mR NA在克氏原螯虾卵巢组织中表达量很低,但是随着卵巢的发育存在表达差异,即呈现一个先提高再降低的峰型特征。本研究暗示Tropomyosin除过敏原特性外,可能也受性腺发育的部分调控影响。     

克氏原螯虾池塘放养密度对 浮游生物群落的影响

研究了在克氏原螯虾和河蟹3 个放养密度水平下浮游生物群落的变动情况。结果表明：可能由于浮游动物的摄食对浮游植物产生影响,二者生物量的消长在大多数池塘中都呈负相关。随着养殖密度的增加,浮游植物生物量增加,而浮游动物有所减少;前者的优势种群由硅藻门和绿藻门变为裸藻门、蓝藻门和甲藻门等有害藻类,后者由枝角类、哲水蚤和剑水蚤等大型浮游动物变为轮虫、原生动物和无节幼体等小型浮游动物为主。浮游动植物比值与虾蟹放养密度呈显著的负相关性。在考虑生态效益和经济效益最适的情况下,以中密度养殖最为适宜。     

全价配合饲料条件下克氏原螯虾幼体及成体消化酶的活力研究

[目的]探讨全价配合饲料条件下克氏原螯虾幼体及成体消化酶的活性。[方法]取克氏原螯虾幼体全消化道组织,成体胃、肠组织,对克氏原螯虾蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等消化酶活性进行测定。[结果]克氏原螯虾幼体的淀粉酶活性较高,胃蛋白酶活性较低;纤维素酶和脂肪酶活性相差不大,且活性均小于淀粉酶活性。成体的胃和肠中蛋白酶及淀粉酶比活力均较高,而纤维素酶和脂肪酶的比活力较低,且蛋白酶比活力为胃大于肠,淀粉酶比活力为肠略大于胃,纤维素酶和脂肪酶比活力在胃和肠中无明显差异。[结论]该研究为克氏原螯虾的水产养殖中专用饲料的开发提供了参考资料。     

克氏原螯虾同步化与非同步化育苗效果分析

[目的]为不同规模的克氏原螯虾养殖单位提供相应的育苗技术。[方法]利用克氏原螯虾秋冬季节生殖需要一定水位的生态习性,采用降低育苗池水位的方法同步化培育苗种,并与非同步化育苗技术的效果进行比较。[结果]同步化育苗的苗种规格较小,但能在同一时间内获得规格较整齐的苗种,适合大规模养殖单位同期进苗。非同步化育苗的苗种规格较大,能在夏季养成商品虾提早上市,但无法获得大量规格整齐的苗种,只能分期分批获得不同规格的苗种,适合在不同时期供应小规模的养殖单位。同步化育苗累计出苗尾数、出苗重量和商品虾收获重量分别是非同步化育苗的1.78、0.93、0.80倍。[结论]同步化育苗能满足大规模养殖单位的需要;非同步化育苗可以不断收获苗种和商品虾,能满足小规模养殖单位的需要。