重组病毒环境安全试验

为检测重组病毒的环境安全性,将构建的重组病毒免疫小鼠、豚鼠、仔猪、犊牛,通过PCR、中和抗体、病毒分离培养等方法,对接种动物饲养环境中的水、土壤及粪便进行基因检测和病毒分离培养;将重组病毒分别与粪便、土壤、水等比混合后分别置于37℃、4℃、-20℃下,研究其存活能力.结果表明:重组鸡痘病毒饲养环境中的水、土壤、粪便中未检测出病毒基因,重组鸡痘病毒在自然条件下存活时间短,免疫重组鸡痘病毒的动物不能将病毒传染给亲密接触的同居动物,不会污染环境和威胁人类健康.     

鸡痘病毒分子生物学研究进展

鸡痘病毒是痘病毒科禽痘病毒属的代表种，鸡痘病毒可以作为病毒载体表达外源基因。许多研究者致力于研究其生物学特性和应用研究，本文就鸡痘病毒的分子生物学研究进展加以综述。     

浅谈鸡痘的防治

鸡痘是由鸡痘病毒引起的一种病毒性疾病。由于近年来鸡痘疫苗使用较好。本病毒属散发，很少有爆发型，本病发病率高，但死亡率低，常并发葡萄球菌等细菌型疾病。鸡痘病毒抵抗力较强，在上皮细胞屑中的病毒，完全干燥和阳光照射数周后仍能保存活力．冷冻干燥和50％甘油可使病毒长期保持活力，达数年之久。但游离的病毒在1～2％氢氧化钠或10％醋酸或0．1％汞中很快被灭活．在腐败环境中病毒迅速死亡。     

蛋鸡鸡痘的临床表现及其综合防控措施

正鸡痘主要是由鸡痘病毒引发的一种综合型传染疾病,具体可分为鸡痘病毒、火鸡痘病毒、鸽痘病毒、鹌鹑痘病毒、麻雀痘病毒和金丝雀痘病毒等,这些具体的病毒存在着联系,具有较强的传染性,对蛋鸡的生长及产蛋十分不利。鸡痘病感染后蛋鸡的无毛处会出现痘疹,并且还会伴随口腔黏膜出现纤维素性,患病后蛋鸡的体重会迅速下降,严重的阻碍蛋鸡的生长,并且会导致蛋鸡产蛋量大幅     

鸡痘病毒和葡萄球菌混合感染的病原分离与鉴定

通过对四川雅安市某肉鸡场疑似鸡痘病毒与细菌病混合感染的病鸡材料进行病毒和细菌的分离,获得一株病毒和一株细菌。分离的病毒毒株通过半套式PCR鉴定为鸡痘病毒,细菌菌株通过革兰氏染色和生化试验鉴定为葡萄球菌。药物敏感性试验筛选出此葡萄球菌的敏感药物为丁胺卡那霉素。结合此病爆发的临床症状和流行病学特征,诊断为鸡痘病毒与葡萄球菌的混合感染。     

猪瘟病毒E2基因重组鸡痘病毒的构建及免疫保护试验

应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组鸡痘病毒表达载体FPV-P11上,构建出重组鸡痘病毒转移载体FPV-pSY-E2.用脂质体将该质粒转染至鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)后,通过蓝斑纯化试验筛选出重组鸡痘病毒FV282-CSFV-E2.PCR证实E2基因已整合至鸡痘病毒基因组中.重组鸡痘病毒3次腹腔接种小鼠,ELISA检测血清猪瘟病毒抗体滴度为1:4096.给猪颈部和腹股沟皮下分点注射免疫3次,4周后用CSFV石门强毒株以100 LD<,50>接毒量攻击,结果保护率为75%.本试验为猪瘟重组鸡痘病毒活载体疫苗的研制奠定了基础.     

H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗的免疫效力

利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒疫苗免疫SPF鸡和无母源抗体的商品鸡，通过比较免疫后血凝抑制(HI)抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标评价其免疫保护作用。免疫后21d，重组鸡痘病毒免疫组仅有13％～20％鸡的HI抗体检测呈阳性。在同亚型禽流感病毒攻击后，重组鸡痘病毒疫苗免疫组产生了100％的保护率，而未免疫组全部死亡。结果表明：重组鸡痘病毒疫苗不能激发高滴度HI抗体应答，但可抵御同亚型禽流感病毒致死性攻击，保护效果达到或优于目前应用的灭活苗，显示出良好的应用前景。     

H9亚型禽流感病毒血凝素基因重组禽痘病毒的构建

【目的】获得表达H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组禽痘病毒。【方法】将含禽痘病毒启动子LP2EP2驱动的HA基因,插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681/HA。用脂质体将其转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达HA的重组禽痘病毒rFPV-HA。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选后,对重组病毒进行多次蚀斑克隆,并用间接免疫荧光法对感染重组病毒鸡胚成纤维细胞中HA的表达产物进行鉴定。【结果】以重组禽痘病毒DNA为模板,利用HA基因特异引物进行PCR,扩增出1条约1.7 kb左右的带。以间接免疫荧光法证实重组禽痘病毒能表达HA。【结论】成功构建了表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒,且构建的重组禽痘病毒能表达具有生物学活性的HA。     

农村散养鸡鸡痘的诊断与防治

鸡痘是由鸡痘病毒引起,该病毒属于痘病毒科,禽痘病毒属。农村散养鸡由于对防疫不重视或疫苗防疫种类不全,极易发生鸡痘疫病。该病在本地区许多农村散养鸡中时有发生。1发病情况近期鸡东地区许多农村散养鸡陆续发病,开始有个别发病,以后病鸡逐渐增多,且每天出现死亡现象。养殖户曾用恩诺沙星、土霉素、红霉素、喉管散等药物治疗,均无疗效。经笔     

鸡痘病的防治措施

正鸡痘是由禽痘病毒引起的一种高度接触性病毒性传染病,秋冬季节易流行,笔者在实际工作中指导养殖户采取免疫为主的综合防治措施,取得良好效果。1流行病学鸡痘的病原为禽痘病毒,是一种比较大的痘病毒,从皮肤病灶脱落下来的干痘痂,它的毒力可以保存几个月之久。常用的消毒药物10min可以杀死病毒。鸡痘病毒的传染途径,主     

鸡痘病原分离鉴定及油乳剂灭活苗研制

从发病鸡病变组织采集病料 ,通过鸡胚接种和细胞培养分离病毒 ,经电镜观察、包涵体检查和理化特性检查证明分离病毒为鸡痘病毒 ;用分离毒株研制出鸡痘油乳剂灭活苗 ,配合鸡痘鹌鹑化弱毒苗使用 ,用于鸡痘的预防 ,经临床应用效果良好。     

共表达猪瘟病毒E0、E2基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性

【目的】研究共表达猪瘟病毒E0、E2基因的重组鸡痘病毒rFPV-E0-E2的遗传稳定性。【方法】将重组鸡痘病毒rFPV-E0-E2在鸡胚成纤维细胞上连续传20代,取第5、10、15和20代重组病毒进行以下检测:用蓝斑试验鉴定各代重组病毒纯度;用PCR方法扩增猪瘟病毒E0、E2基因,进行基因序列分析;用间接免疫荧光实验检测各代重组病毒中猪瘟病毒E0、E2基因的表达。【结果】各代次重组病毒产生的蚀斑均为蓝色,表明病毒纯度稳定。从各代重组病毒DNA中均扩增出了约700 bp和1 200 bp的条带,分别与E0和E2基因片段长度一致,基因序列分析发现,第5、10、15代重组鸡痘病毒中的E0、E2基因序列与原始转移载体序列完全一致,第20代重组病毒插入基因有2处发生了点突变(即E0基因139位A→G,E2基因413位A→G),其编码的氨基酸也发生了相应变化(即E0蛋白47位Thr→Ala,E2蛋白138位Glu→Gly),但蛋白抗原表位未发生明显的变化。间接免疫荧光实验检测到各代重组病毒均能正常表达目的蛋白。【结论】重组鸡痘病毒rFPV-E0-E2在鸡胚成纤维细胞上传20代以内,具有良好的遗传稳定性,插入的猪瘟病毒E0、E2基因能够正确稳定表达。     

GPMV HN基因于禽痘病毒载体中的构建与表达

本研究利用基因重组技术构建含有鹅副粘病毒主要保护性抗原基因-HN基因和报告基因-LacZ基因的重组禽痘病毒转移载体;利用脂质体介导的方法将所构建的转移载体与禽痘病毒FPV-017共感染鸡胚成纤维(Chicken Embryo Fibroblasts,CEF)细胞,通过蓝白筛选获得重组病毒;间接免疫荧光试验结果显示重组禽痘病毒中HN基因在CEF细胞中获得表达,并且表达产物具有良好的反应原性;为进一步的重组禽痘病毒的免疫保护性的研究奠定基础。     

表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的免疫原性

以鸡痘病毒为载体，构建含马立克氏病病毒（MDV）gI基因的重组鸡痘病毒（rFPV)，并在鸡胚成纤维细胞（CEF）中表达gI基因，用重组FPV（命名为rFPV-MDV648gI）感染CEF，结果显示：rFPV-MDV648gI能在CEF中稳定复制。进一步用rFPV-MDV648gI接种无特定病原（SPF）鸡皮下组织，结果表明：鸡对rFPV-MDV648gI具有抗体反应性。     

夏季猪痘病的诊断与防治

正猪痘病是由猪痘病毒引起的一种急性、热性传染病。猪痘的病原有两种,分别猪痘病毒(只感染猪,属痘病毒科猪痘病毒属)和痘苗病毒(除猪外还感染牛、鸡等其他动物,属痘病毒科正痘病毒属,痘病毒科共6个属),无交互免疫性,即感染前者恢复后仍可感染后者。猪痘病毒有种属特异性,只能引起猪感染发病,猪痘病毒在猪组织细胞内增殖,在患病动物细胞核内可见空泡和包涵体。痘病毒可感染多种动物,如牛、绵羊等,在患病动物细胞核内可见包涵体。     

鸡痘的防治

正鸡痘,是由鸡痘病毒引起的一种高度接触性传染病,是鸡的一种常见病,死亡率不高,但影响生长和产蛋。鸡痘病毒随病鸡的皮屑及脱落的痘痂等散布在饲养环境中,通过蚊虫叮咬等经皮肤或黏膜侵入其他鸡体,尤其是创伤部位更易被入侵。由于今年的温度高、湿度大,很多鸡场都发生了鸡痘,此病应引起鸡群养殖户的高度重视。     

鸡痘病毒载体研究进展

本文就鸡痘病毒作为基因工程重组疫苗的重要载体研究的进展作以综述，主要包括鸡痘病毒表达载体的构建，外源基因在重组鸡痘病毒中的表达及免疫效果，并对鸡痘病毒载体的研究及开发应用前景加以展望。     

怎样防治鸡痘病

鸡痘是鸡的一种急性、高度接触性传染的病毒性疾病。病原是鸡痘病毒。病的特征是在鸡体无毛或少毛的皮肤上发生痘疹，或在口腔、咽喉部粘膜形成纤维素坏死性假膜。该病可使鸡增重缓慢，消瘦；产蛋量暂时下降，并可并发其他传染病、寄生虫病，引起鸡的高死亡率。本病主要发生于鸡、火鸡和鸽。     

开产蛋鸡要防鸡痘病

鸡痘病的病原体是孢疹病毒，无论鸡的大小都易被感染，育成鸡患了鸡痘病会影响生长，产蛋鸡感染鸡痘病毒，就会影产蛋，严重的痘疹会使体温升高，喉头阻塞，继发感染，造成鸡的死亡．有关防治措施介绍如下．