高效液相色谱法测定蔬菜中的类胡萝卜素

对 4种类胡萝卜素的高效液相色谱 (HPLC)测定方法进行比较 ,选出了适合本实验室的测定方法 :分析柱为Nova pakC18(3 9mm× 30 0mm) ,以乙腈和三氯甲烷 (92∶8)为流动相 ,检测波长为 4 70nm和 4 5 0nm双波长 ,并采用该方法对胡萝卜、南瓜、羽衣甘蓝 3种蔬菜的数百份样品进行了α 胡萝卜素、β 胡萝卜素及茄红素含量的测定     

葡萄果皮花青素提取工艺优化研究

利用高效液相色谱(HPLC)对提取葡萄果皮中花青素的提取液、提取方法和色谱条件进行比较,采用正交实验设计选择最佳的提取工艺,利用5种花青素峰面积分析夏黑葡萄果皮所含花青素的含量。试验结果表明,提取液为甲醇：水=1:1,磷酸调pH=2.0,提取时超声辅助提取30min,为最佳的工艺提取出夏黑葡萄果皮中花青素的含量,色谱条件为流动相A：水/乙腈/甲酸= 40/50/10(v/v/v),流动相B：水/乙腈/甲酸= 87/3/10(v/v/v),柱温45℃,进样量20μL,检测波长520 nm,梯度洗脱条件为:(1)0-15 min,6% A-30% A;(2)15-30 min,30% A-50% A;(3)30-35 min,50% A-60% A;(4)35-40 min,60% A-6% A,呈现的色谱图分离度更好,总体效果更佳。     

基于HPLC法11种枸杞鲜果β-胡萝卜素含量分析

为挖掘高β-胡萝卜素含量枸杞种质,对11种山西临汾产枸杞鲜果中β-胡萝卜素含量进行研究。选取11个品种枸杞鲜果样品,用高效液相色谱法测定β-胡萝卜素含量。采用C6-100B色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)进行分离,正己烷:甲醇(40∶60, V∶V)为流动相进行洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长为450 nm,柱温35℃,进样体积20μL。结果显示,β-胡萝卜素标准曲线在0.501 2～10.042 6 mg/L范围内线性关系良好,R2=0.999 8,加标回收率在92.4%～98.2%之间。检测限为0.5μg/100 g。11种山西临汾产枸杞子中β-胡萝卜素含量平均值分别为(200.98±10.51)、(200.71±3.04)、(271.40±5.76)、(103.04±4.96)、(162.89±3.88)、(212.20±5.78)、(68.92±1.18)、(124.20±10.40)、(120.82±1.95)、(103.56±2.40)和(98.55±1.84)μg/100 g。研究表明,11个品种枸杞鲜果的β-胡萝卜素含量差异极显著(P<0.01...     

泡桐叶片总DNA甲基化水平测定方法

采用高效液相色仪,色谱柱为Thermo Hypersil C18BDS,以pH4.0的甲醇-戊烷磺酸钠10mmol/L-三乙胺(10-90-0.2,v/v)为流动相,流速0.5mL/min,柱温30℃,在Waters2487紫外-可见分光光度检测器273nm处,测定泡桐叶片DNA水解样中胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,泡桐叶片DNA总甲基化水平用5-甲基胞嘧啶占DNA样品中总胞嘧啶碱基的百分数表示。     

番茄碱的高效液相色谱分析

以新疆优势资源里格尔87-5番茄品种为原料,通过乙醇提取,中性Al2O3柱层析法纯化番茄碱粗品,确定了HPLC分析番茄碱的色谱条件:色谱柱型为Zorbax-NH2(4.6mm×150mm),流动相:浓度0.01mol/L的Na2HPO4与乙腈体积比为30∶70,柱温为35℃,流速为1.0mL/min,检测波长为205nm。     

酱牛肉加工过程中硫胺素的含量变化研究

采用高效液相色谱法对酱牛肉加工过程中的硫胺素含量变化进行研究。以ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇、乙酸钠(0.05 mol/L,pH值6.5)体积比35∶65为流动相,荧光检测。精密度与重复性试验RSD均在3%以内,加标回收率在93.66%~105.06%。结果表明,酱牛肉中的硫胺素在腌制的过程中含量略有降低(p>0.05),在高温煮制的过程中含量显著降低(p<0.05),低温煮制结束后,含量显著增加(p<0.05)。     

大豆异黄酮组分HPLC快速分析技术及其在豆腐加工中的应用

大豆异黄酮育种与大豆制品加工研究需要进行大批量样品12种异黄酮组分的快速定量分析。在前人研究基础上利用Agilent 1100高效液相色谱(HPLC)系统,以大豆品种南农95C-13为材料,研究大豆苷元,大豆苷,乙酰基大豆苷,丙二酰基大豆苷,染料木苷元,染料木苷,乙酰基染料木苷,丙二酰基染料木苷,黄豆苷元,黄豆苷,乙酰基黄豆苷,丙二酰基黄豆苷等12种标准品外标法快速定量技术。从样品制备与色谱条件对分析12种异黄酮组分的准确度和分离度入手,确定分析流程,以(科丰1号×南农1138-2)的184个重组自交系(NJRIKY)为材料,研究豆腐加工中总量和各组分的变化特点。(1)样品以80%甲醇水溶液50℃超声1 h提取;色谱条件为,检测波长254 nm, 柱温36℃,流速2.0 mL min^–1, 进样量 10 μL, 流动相0.1%(V/V)乙酸水溶液(A)和100%甲醇(B),0~2 min,27% B (V/V)→2~3 min,27%~38% B→3~10 min, 38% B→10~12 min,38%~39% B→12~14 min, 39% B→14~15 min, 39~27% B梯度洗脱;在15 min内将12个组分良好分离,各组分峰面积与其相应浓度均呈良好线性关系(R²为0.9976~0.9999);加标回收率均大于99%,变异系数低于2%。(2)NJRIKY群体籽粒、豆乳、豆腐异黄酮总量和组分的大量分析验证了HPLC快速技术的效果。籽粒异黄酮总含量(3 695.00 μg g^–1)在豆乳加工中平均85.15%转入豆乳 (3 146.12 μg g^–1),14.85% (548.88 μg g^–1)进入豆渣。传统豆腐加工通过硫酸钙絮凝,只有17.32% (639.89 μg g^–1)转入豆腐,67.83% (2 506.23 μg g^–1)留在黄浆水中。豆乳中12种组分含量比籽粒稍低,均以丙酰基染料木苷含量最高;而豆腐中乙酰基染料木苷和乙酰基黄豆苷缺失,以染料木苷元与大豆苷元含量较高。大豆科丰1号与南农1138-2杂交重组后家系间的异黄酮遗传变异增大,增加了对其遗传改良的潜力。     

HPLC法测定无核紫葡萄中白藜芦醇含量

采用高效液相色谱法测定无核紫葡萄中白藜芦醇的含量。使用Shimpack VP—ODS色谱柱,甲醇—水(体积比为65∶35)为流动相,流速0.8mL/min,柱温35℃,检测波长306nm,在此条件下进行检测。结果显示,无核紫葡萄中白藜芦醇的平均回收率为99.147%,RSD为1.727%。本方法测定准确可靠、简便、快速。     

小麦新品种克丰7号的选育与推广

黑龙江省是我国主要春小麦产区之一,常年播种面积在133万hm²左右,现在从最高年份的227万hm²已降到1997年的110万hm²。小麦面积逐年下降的主要原因是农民种麦成本高,商品麦品质较差,不符合市场需求,导致外来小麦及面粉进入我省市场,致使我省小……     

土壤中矮壮素 缩节胺的残留对番茄酱品质的影响

采用HPLC-MS/MS技术,同时测定土壤中的矮壮素和缩节胺残留。土壤样品经缓冲溶液提取后,经Agilent ZORBAX Rx-Sil(100 mm×3.0 mm,1.8μm)型色谱柱分离,以含10 mmol/L NH4CH2COOH+0.2%HCOOH的水溶液和甲醇(体积比60∶40)为流动相进行等度洗脱,经正离子多反应监测模式测定目标化合物。结果表明,2种化合物在质量浓度1.0~50.0μg/L线性关系良好,定量限(LOQ)矮壮素为0.8μg/L,缩节胺为0.6μg/L;加标回收率平均为97.6%~99.5%;相对标准偏差(RSD)平均为2.5%~2.9%,适用于检测土壤中矮壮素和缩节胺。     

大白菜种子蛋白分离的高效液相色谱法的研究

该文首次利用高效液相色谱法时大白菜种子的水溶性蛋白质进行了分析,确定了适宜的色谱分析条件:选用径向加压型Nova-Pak C_(18)反相色谱柱(规格为8mm (?).d.×10cm length,填充颗粒为球形,直径4μm,Waters Co.)以甲醇水溶液进行洗脱,种子中各蛋白组分得到了比较好的分离。洗脱时采用混合梯度洗脱方式:0-20分钟,从9%甲醇水溶液(A)到35%甲醇 0.02%三氧乙酸(B)的线性梯度洗脱;20-45分钟,以B洗脱液进行等强度洗脱.流速均为0.8ml/min。洗脱后的各组分用紫外光/可见光检测器在280nm处进行监测。实验结果还表明:不同提取液对色谱分离的结果有一定的影响,用0.1%巯基乙醇水溶液提取时,色谱峰的分离效果较好,主要组分的色谱峰比较显著,因而比较适于大白菜种子的分析。     

辣椒果实类胡萝卜素的提取与测定方法研究

旨在探索和优化辣椒果实类胡萝卜素提取与高效液相色谱(HPLC)检测体系。以辣椒成熟果实为材料,采用单因素试验与L9(33)正交试验相结合的方法,对提取溶剂、料液比、提取温度和时间及材料预处理等5 个因素进行探讨,优化辣椒果实类胡萝卜素提取工艺;进而对流动相种类、配比和流速等进行优化。结果表明：以二氯甲烷-乙醇（V二氯甲烷:V 乙醇=1:1）为提取溶剂,在料液比为1:18,50℃恒温提取60 min,辣椒果实类胡萝卜素产率最高。利用L600-2 高效液相色谱仪,在色谱条件为：流动相A为甲醇-乙腈（V甲醇:V 乙腈=55:45）,流动相B为100%甲基叔丁基醚,A:B为90:10 等度洗脱,流速为1 mL/min,进样量为20 μl 时能较好地鉴定辣椒果实类胡萝卜素主要组分。本试验优化的辣椒果实类胡萝卜素提取和HPLC测定法,操作简便,提取率高,重复性好,为今后辣椒果实类胡萝卜素的提取和测定提供了参考。     

饼肥与无机肥的不同配比对白肋烟烟叶中的游离氨基酸的影响

建立了一种用于烟草中游离氨基酸测定的反相高效液相色谱法。实验采用超声波水解、邻苯二甲醛/3-巯基丙酸作为衍生剂进行柱前衍生。色谱柱为依利特C18柱(4.6mm i.d. ×250mm,5μm),流动相A为18mmol/L的醋酸钠溶液（pH7.2）含体积分数为0.002%的三乙胺和0.3%的四氢呋喃,流动相B组成为：100mmol/L的醋酸钠溶液（pH7.2）-乙腈-甲醇（体积比为1:2:2）,流速为1.0ml/min,柱温为40℃。荧光检测器,激发波长350nm,发射波长450nm。方法的回收率为95.3% ~100.7%,RSD为2.32%~9.24%(n=6)。该方法简便、准确、重现性好。测定不同肥料配比生产的白肋烟烟叶中17种游离氨基酸的含量。结果表明,不论有机肥与无机肥怎样配比,天冬氨酸的含量与各氨基酸相比都是最高的;随着饼肥的加入,大部分氨基酸的含量是先增加后逐渐降低的趋势, 15%饼肥+85%无机肥与30%饼肥+70%无机肥配比时,大部分游离氨基酸的含量接近,30%饼肥+70%无机肥配比时的游离氨基酸总量最高,综合考虑,30%饼肥+70%无机肥配比时的烟叶质量最好。     

等位变异Vrn-B1a和Vrn-B1b的春化效应及其在黄淮冬麦区小麦品种中的分布

春化基因Vrn-B1是决定黄淮冬麦区小麦品种冬春性的主要基因之一, 研究其不同显性等位变异的低温春化作用效应及分布, 对该区小麦品种选育和推广具有重要意义。以等位变异Vrn-B1a品种皖麦33与等位变异Vrn-B1b品种豫麦34为亲本构建杂交组合, 对其F₂代进行5~35 d的低温春化处理, 并在温室(22±3℃,16 h昼/8 h夜)鉴定抽穗期, 结合分子标记分析低温春化处理时间对各等位变异型抽穗期的影响。同时对228个黄淮冬麦区小麦品种进行相关位点分子检测, 分析该基因等位变异的分布特点。各春化处理均使两种等位变异小麦植株的抽穗期提前, 但Vrn-B1a抽穗时间比Vrn-B1b晚约2 d。从春化处理当天至处理后25 d, 2种等位变异类型的抽穗时间均随春化时间的延长而缩短; 继续延长春化时间, 抽穗期不再缩短, 表明满足两种等位变异完成春化的低温时间为20~25 d。在228个品种中, Vrn-B1位点有214个(93.9%)隐性和14个(6.1%)显性等位变异。其中, 显性等位变异Vrn-B1a有6个, 占总品种数的2.6%; Vrn-B1b有8个, 占总品种数的3.5%。在黄淮冬麦区小麦品种中, 春化基因Vrn-B1位点至少存在Vrn-B1a和Vrn-B1b两种显性等位变异类型, 两种等位变异类型纯合小麦植株的抽穗时间不同。     

红叶石楠提取类胡萝卜素的工艺条件研究

在单因素试验基础上,采用正交试验优化红叶石楠绿叶中类胡萝卜素的提取工艺条件,并用柱层析分离纯化粗提液中的类胡萝卜素。结果表明,在40℃下以丙酮∶乙醇=1∶1为提取剂,料液比1∶10,浸提时间1.5 h,类胡萝卜素含量可达51.26μg/g。该类胡萝卜素粗提液经过柱层析法初步分离纯化,纯化倍数可达1.41。     

Capillary zone electrophoresis analysis of gliadin proteins from Chinese and Yugoslav winter wheat cultivars

Gliadin proteins extracted from fifteen Chinese and Yugoslav winter wheat cultivars were fractionated using a new separation technique – Capillary Zone Electrophoresis (CZE). Different CZE conditions were defined to optimize resolution and reproducibility of gliadin separations. Excellent resolution and high reproducibility of gliadin CZE patterns were obtained by using 47 cm length, 50 μm i.d. capillaries at 15 kV and 30° C in sodium borate buffer system with acetonitrile (ACN) and sodium dodecyl sulfate. By using these CZE conditions, gliadin proteins from each cultivar were easily separated into more than 35 components. This resolution is generally superior to that of one- and two-dimensional electrophoresis and RH-HPLC. Analysis of reproducibility of gliadin CZE patterns from Chinese cultivar ‘Lumai 6’ showed that the average relative standard deviation (RSD) for peak migration times and heights was 0.21% and 4.06%, respectively. Gliadin electrophoregrams of all cultivars studied showed clear qualitative and quantitative differences, including presence or absence of some major peak, migration times and heights of peaks. Specifically, some closely related cultivars that were not differentiable by A-PAGE, were readily differentiated by CZE. In addition, winter wheat cultivars from China and Yugoslavia showed greater differences in gliadin compositions revealed by CZE. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

转细胞凋亡抑制基因OpIAP和p35增强小麦对纹枯病的抗性

Op IAP(Orgyia pseudotsugata inhibitor of apoptosis protein)是黄杉毒蛾核型多角体病毒中编码细胞凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)的基因,p35基因编码苜蓿斜纹夜蛾核型多角体病毒中具细胞凋亡抑制作用的35 k Da蛋白。本研究人工合成了Op IAP和p35基因,构建了同时含有Op IAP和p35表达盒的转双价基因载体p Ubi:p35-RSS1P:Myc-Op IAP,两基因分别由玉米泛素基因启动子(Ubiquitin,Ubi)和水稻蔗糖合酶-1启动子(sucrose synthase-1 promoter,RSS1P)驱动。通过基因枪介导法将该载体导入小麦品种扬麦16,获得双价转基因小麦。对T0~T2代植株,利用PCR、RT-PCR、q RT-PCR及Western blot分析,确认导入的外源Op IAP和p35基因能够在4个转双价基因小麦株系中遗传并表达。用来源不同、致病力不同的禾谷丝核菌强致病株型R0301和WK207对转双价基因小麦的T1、T2代植株分别进行纹枯病抗性鉴定,结果表明,与受体扬麦16相比,双价转基因小麦的T1、T2代植株对纹枯病的抗性明显提高,说明Op IAP和p35基因的表达可以增强转基因小麦对来源不同、致病力不同的禾谷丝核菌的抗性。     

Diversity in the carotenoid profiles and the expression of genes related to carotenoid accumulation among citrus genotypes

Carotenoids are not only important to the plants themselves but also are beneficial to human health. Since citrus fruit is a good source of carotenoids for the human diet, it is important to study carotenoid profiles and the accumulation mechanism in citrus fruit. Thus, in the present paper, we describe the diversity in the carotenoid profiles of fruit among citrus genotypes. In regard to carotenoids, such as β-cryptoxanthin, violaxanthin, lycopene, and β-citraurin, the relationship between the carotenoid profile and the expression of carotenoid-biosynthetic genes is discussed. Finally, recent results of quantitative trait locus (QTL) analyses of carotenoid contents and expression levels of carotenoid-biosynthetic genes in citrus fruit are shown.     

The effect of temperature on seed set and embryo development in reciprocal crosses of wheat and barley

Summary The effect of temperature on seed set and embryo development in reciprocal crosses of barley and wheat was assessed in crosses involving two spring barley varieties (Betzes, Martonvásári 50) and one wheat variety (Chinese Spring). Detached tillers placed in nutrient solution were pollinated in controlled environments at constant day-night temperature regimes (12, 15, 18 and 21° C) with a light intensity of 30,000 lux and a relative humidity of 80%. When barley was used as the female, lower temperatures (12 and 15° C) produced the maximum seed set, whereas for the reciprocal cross, the highest temperature (21° C) produced the best seed set in the Chinese Spring × Betzes combination.Low temperature retarded the embryo development. The highest numbers of hybrid plants were produced at 18° C and 21° C in the barley × wheat cross and in the wheat × barley cross, respectively. Embryos of about 1.5 mm length in the barley × wheat cross, and of about 1.0 mm length in the wheat × barley cross germinated successfully. The smallest embryo giving rise to hybrid plants was 0.57 mm in the barley × wheat cross and 0.51 mm in the wheat × barley cross.