红掌愈伤组织和再生团块发育过程中糖和蛋白质的组织化学研究

以红掌叶片诱导出的4类愈伤组织和气生根根段诱导的再生团块为试材,研究糖和蛋白质在愈伤组织衰老与再生团块发生发育过程中的变化。经石蜡切片PAS和汞溴酚兰组织化学染色观察发现,糖主要以颗粒状存在于愈伤组织细胞中,并有明显的围绕核的现象,蛋白质主要集中于细胞核及其周围。糖和蛋白质的含量在黄绿愈伤组织中有明显的从外向内减少的梯度变化;深绿愈伤组织中梯度不太明显。糖在金黄色愈伤组织中含量很低,没有梯度;在褐色愈伤组织中散乱分布。蛋白质含量变化在金黄色愈伤组织中由外层细胞向内层细胞有一定的梯度但不明显;在褐色愈伤组织中没有梯度。刚形成的再生团块的糖和蛋白质含量在由外向内的细胞中有明显的梯度变化,在再生团块膨大生长过程中两者含量少,没有梯度变化。分化期再生团块中的糖主要集中在分裂旺盛的分生细胞团和维管组织周围,蛋白质则集中于分生细胞团的细胞中。在各类愈伤组织和再生团块中均出现各种特化细胞。糖的含量及其梯度变化是愈伤组织和再生团块分化的重要内在条件,蛋白质含量以及核形态是否完整是愈伤组织和再生团块分化的关键。     

花烛不同愈伤组织解剖结构的观察

 以花烛(Anthurium andraeanum ) ‘Jolanba’8种不同培养时期或不同激素处理的愈伤组织为材料, 通过显微观察研究了花烛离体形态发生途径和8种愈伤组织离体形态差异的解剖学特点。结果表明,花烛离体形态发生途径以间接器官(不定芽) 发生为主, 且发生于愈伤组织近表层; 同时也存在体细胞胚途径, 发生于愈伤组织表面或内部。8种愈伤组织在结节( nodule) 的类型、分生细胞的数量及分布等方面存在差异。分生细胞的数量和分布与芽的分化有较好的相关性, 愈伤组织表层分生细胞分布较多, 分化的芽也较多, 而愈伤组织内部分生细胞分布较少, 分化的芽也较少。噻二唑苯基脲( TDZ) 对分生细胞和体细胞胚有较好的诱导作用。愈伤组织的表面划痕和再次切割有利于再生芽的分化。     

菠萝非胚性愈伤组织的类型及其器官发生

以菠萝[Ananas comosus(L.)Merr.]非胚性愈伤组织为材料,利用离体培养及组织细胞学等方法研究了其在增殖、分化过程中的特性和再生规律。在增殖培养基上经过3次以上继代培养后,非胚性愈伤组织形态上逐渐表现出一定差异。根据其形态结构、分化能力和组织细胞学特征,可把非胚性愈伤组织分为节瘤状组织、薄壁组织团、致密深层愈伤组织和表面疏松愈伤组织4种类型;在增殖培养基MS+3.0mg/LBA+2.0mg/LNAA上,一种类型的非胚性愈伤组织通常只会生长出同类型的非胚性愈伤组织,但通过改变培养基配方等方法可使不同类型之间发生转换。同时,增殖继代过程中的器官发生现象很常见,通常是在薄壁愈伤组织表面细胞分化成具有分生能力的细胞,然后进行不定芽的分化。4类非胚性愈伤组织都可以通过拟原球茎、多芽体以及不定芽的形式进行器官发生;也可以经胚性诱导由体细胞胚发生途径再生成植株,其中拟原球茎产生体细胞胚的能力最强,多芽体其次。生长素及细胞分裂素对非胚性愈伤组织的形态结构、分化途径以及增殖能力有很大的影响。     

石斛兰组织培养和细胞学观察

以石斛兰杂交种的茎尖、茎节和幼嫩小叶片作为外植体均可诱导出愈伤组织。愈伤组织在同一培养基上可同时出现不定芽和拟原球茎，两者都能进一步发育成完整幼苗。拟原球茎和不定芽分别来自愈伤组织的表层细胞和深层细胞。由愈伤组织、不定芽和拟原球茎交错在一起的团块可以多次切割继代培养，进行大量无性繁殖。     

石榴2种外植体再生方法在遗传转化研究中的优势比较

【目的】为了利用‘突尼斯软籽’石榴开展遗传转化研究,【方法】分别以叶片和茎段为外植体,探讨了不同灭菌时间和不同植物生长调节物质对2种外植体再生的影响,并对2种愈伤组织再生体系进行了比较。【结果】结果表明,茎段比叶片更容易灭菌,但叶片更容易长出绿色致密愈伤组织并分化更多的不定芽,而茎段分化的愈伤相对较为疏松,分化的不定芽也相对较少;来自茎段愈伤组织的不定芽比来自叶片的更容易长高;叶片比茎段再生体系建立所需时间要短;少量翠绿的叶片刀口处可以直接产生不定芽,可以直接利用叶片进行遗传转化的侵染,简化愈伤形成这一步骤,而茎段未发现此现象。在遗传转化试验中,茎段和叶片2种外植体愈伤组织抗生素敏感性试验结果均无显著性差异。【结论】研究结果认为,2者相比,叶片愈伤组织再生体系更适宜于石榴的遗传转化研究。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

马缨杜鹃离体叶片高效再生不定芽及其组织细胞学研究

以马缨杜鹃（Rhododendron delavayi var. delavayi）试管苗叶片为材料，采用噻苯隆（TDZ）或玉米素（ZT）结合NAA诱导离体叶片再生植株，并对再生过程进行形态学和组织细胞学观察。结果表明，TDZ诱导马缨杜鹃离体叶片发生不定芽的作用强于ZT，WPM + TDZ 0.08 mg • L-1 + NAA 0.01 mg • L-1 是马缨杜鹃离体叶片再生不定芽的最佳培养基，芽的分化率和分化数量分别为83.33%和4.29个；其再生方式为器官直接发生，且属于多起源，再生过程依次经历细胞增殖、细胞脱分化、细胞再分化、不定芽原基形成与发育4个关键阶段。     

苹果离体叶片再生体系两步培养法的研究

通过对苹果离体叶片两步再生法的研究,建立了乔纳金苹果试管苗的叶片再生体系。试验表明,2, 4-D能促进愈伤组织的形成和增殖,影响外植体脱分化和再分化的趋向。BA影响外植体形成愈伤组织的能力,对不定芽再生具有显著影响。IAA对愈伤组织的形成几乎无影响,但对再生不定芽的生长影响较大。诱导愈伤组织的培养基为MS+BA 1 0mg·L-1 +IAA 0 2mg·L-1 +2, 4 -D 0 8mg·L-1时诱导率可达100%;分化不定芽的培养基为MS+BA4 0mg·L-1 +IAA0 2mg·L-1时最高分化率也达 100%。暗培养 1月左右即可得到再分化的不定芽。     

固化剂(Gelrite)浓度对草莓花药愈伤组织诱导及分化的影响

1971年Ｆｅｗｌｅｒ等首先由草莓花药经愈伤组织分化培养出不定芽并形成植株。 1979年 ,中国农业科学院果树研究所从草莓花药培养获得了单倍体植株(薛光荣等 ,1980 )。草莓花药培养可通过愈伤组织阶段经器官发生或胚状体形成完整植株 (ＩｓａｃＶ等 ,1994 ;徐振南等 ,1995 ) ,但愈伤组织不定芽分化率较低。影响愈伤组织分化能力的因素是多方面的 ,其中包括愈伤组织本身的结构及生理状况 (王海波 ,1991)。冯双华等 1998年曾报道琼脂浓度对水稻花药愈伤组织诱导率、愈伤组织的形态及其植株再生具有明显的影响。近年的研究表明 ,以Ｇｅｌｒｉｔ…     

六月鲜枣愈伤组织诱导及胚状体发生

采用5因素4水平的正交试验设计,对六月鲜枣的幼叶、嫩茎、冷藏5d后的花药、花后48～50d的胚乳,利用3因素3水平的正交试验设计,对花后58～60d的幼胚及子叶,进行愈伤组织诱导再分化试验。探讨了不同激素、碳源和基本培养基对产生愈伤组织的影响。结果表明:碳源对胚乳、花药器官,基本培养基对嫩茎、幼叶、花药愈伤组织的诱导有显著影响,而且生长素种类和浓度对不同外植体的愈伤组织诱导作用不同;嫩茎、子叶及幼胚较易诱导产生愈伤组织,但只有子叶及幼胚产生的愈伤组织具较强的再生能力,并可诱导出不定芽,不定芽分化率分别为51.1%和9.5%,ZT较BA易诱导愈伤组织产生不定芽,不定芽转移生根成苗获得了完整植株。另外,用子叶及幼胚培养获得了大量胚状体,且胚状体最终可发育成苗。     

6-Benzylamino purine stimulates in vitro shoot organogenesis in Eucalyptus erythronema, E. stricklandii and their interspecific hybrids

In vitro bud and shoot organogenesis was investigated for the ornamental plants Eucalyptus erythronema var. erythronema, E. stricklandii and their interspecific hybrids cv. ‘Urrbrae Gem’ and ‘Hybrid 2.5’ by using 0.0, 0.1, 0.25, 0.5 or 1.0 μM BAP on apex and leaf explants. Callus developed on all explants and increased with all concentrations of BAP without significant differences between BAP concentrations. Buds formed on apex and leaf explants of E. erythronema and E. cv. ‘Urrbrae Gem’ especially with 1.0 μM BAP, but these buds rarely developed into shoots. Bud clusters formed on E. erythronema and E. cv. ‘Urrbrae Gem’ apex and leaf explants whereas E. stricklandii and ‘Hybrid 2.5’ produced fewer, individual buds on the explant. Shoots regenerated from apex explants of all genotypes with all levels of BAP, whereas few shoots of any genotype regenerated from leaf explants regardless of the number of buds formed. Shoots from apex explants could be multiplied successfully. Light microscopy showed meristems developed within the callus, and at the callus and bud surfaces. However, few shoots developed considering the level of bud and meristem formation. This report is the first for successful shoot organogenesis and multiplication in an ornamental eucalypt.     

大岩桐高频再生体系建立的两种途径

采用大岩桐(Sinningia speciosa) 的叶片、叶柄和根外植体, 经过两种途径建立大岩桐的高效离体再生体系。第1种途径是: 外植体先形成愈伤组织, 愈伤组织分化出不定芽, 再生成不定根, 进而形成再生苗; 第2种途径是: 外植体先形成少量愈伤组织和根, 再产生不定芽, 进而形成再生苗。第1种途径所采用的培养基MS +BA 2.0 mg·L - 1 +NAA 0.2 mg·L - 1 +蔗糖30 g·L - 1 , 芽诱导率达到99.04% , 根诱导率达到98.81% , 每块外植体分化的不定芽数达5.53个; 第2种途径中以MS +NAA 1.0 mg·L - 1 +蔗糖30 g·L - 1为最佳培养基, 芽诱导率达到90.38% , 根诱导率达到100% , 每块外植体分化的不定芽数达2.44个。在3种外植体中以叶片的再生频率最高。经过连续的组织培养, 在大岩桐的再生苗中得到了一些表型变异植株, 包括叶片形态的改变, 植株叶序的改变以及花的改变。其中以叶序和花的改变最有价值,可以为叶序调控机理和成花及花变异机理研究提供良好材料。     

色素万寿菊叶片再生体系的建立及优化

以色素万寿菊叶片为外植体,探讨了不同的植物生长调节剂组合、AgNO3、凝胶剂及不同的继代培养基对叶片器官发生的影响。结果表明：6-BA 3.0 mg · L-1 + IAA 3.0 mg · L-1 + 蔗糖30.0 g · L-1 + 植物凝胶6.0 g · L-1的MS培养基适宜不定芽的分化,不定芽分化率达97.5%,将分化13 d的叶片外植体转接到组织培养瓶中,30 d后56.7%的不定芽可发育成高约5 cm的植株,再生植株在MS培养基上生根率为100%,移栽成活率达100%。     

火百合子房薄层培养器官发生的细胞组织学研究

 以火百合(Lilium ‘Star Gazer’) 子房薄层组织为外植体, 接种在附加BA 2.0 mg·L ^-1和NAA 0.2 mg·L ^-1的MS培养基上, 诱导出愈伤组织及器官。经细胞组织学观察表明: 细胞启动及愈伤组织产生于外植体近轴面和侧面的切口边缘及内方, 继而形成瘤状、棒状及胚珠状的突起, 之后从这些愈伤组织分化形成器官。火百合子房薄层培养中器官发生有3种方式: ①在愈伤组织表面形成芽; ②在愈伤组织内部或近表面形成根; ③在同一块愈伤组织表面形成芽, 内部形成根, 再通过维管系统连成1个完整的植株原始体。     

怀地黄愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

研究了植物生长调节剂和接种方式对怀地黄叶片愈伤组织诱导的影响和细胞悬浮培养体系的建立。结果表明:将叶片正接在MS+2,4-D 1mg/L+6-BA 0.4mg/L培养基上,愈伤组织生长良好,诱导率达100%;在该培养基上多次继代,可形成3种类型的愈伤组织,其中Ⅰ型愈伤组织淡黄色、颗粒透亮、分散性好且疏松易脆,适合进行细胞悬浮培养;在MS+2,4-D 3mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基中,悬浮培养细胞生长曲线呈"S"型,培养15d时细胞干重达最大值,为4.94g/L。     

球根海棠离体培养的形态发生研究

 球根海棠外植体可在同一条件下同时诱导不定芽和胚状体, 经间接途径和直接途径的体细胞胚胎发生频率均很高, 体细胞胚为单细胞起源或多细胞起源。以再生嫩叶为继代中间体, 在较高温度(28 ℃) 下诱导, 可建立高效扩繁体系。纵切芽丛继代形成大量愈伤组织, 愈伤组织继代半年后几乎完全丧失分化能力, 发生激素驯化作用, 而且愈伤组织细胞染色体数目已发生广泛变异。     

噻重氮苯基脲对贯叶金丝桃胚性愈伤诱导和分化的影响

系统研究了不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)对贯叶金丝桃胚性愈伤的诱导和植株再生的影响。结果表明:诱导胚性愈伤的最适外植体为叶柄,诱导率可达100%。在诱导胚性愈伤和分化的最适培养基MS+0.05mg/L TDZ+0.2mg/L NAA上,不定芽分化率为55%。第1代培养基上,愈伤增殖迅速,绿色的胚性细胞团数目从原来的单个生长提高为平均5.6个。经2、3代培养,愈伤停止生长,胚性细胞团数量逐渐减少。