萨福克羊精液低温液态保存效果的研究

[目的]为了提高萨福克羊精液低温液态保存的效果。[方法]用葡萄糖、柠檬酸钠、乳糖、卵黄为主要成分配制了5种萨福克羊精液稀释液,分别4、81、21、6倍稀释精液并5℃保存,通过观测精子存活时间、有效存活时间、生存指数等指标,筛选出精液保存时适宜的稀释液、渗透压、pH值及稀释倍数。[结果]4倍稀释不利于精液保存,8、121、6倍稀释精液保存效果好(P<0.01),结合母羊受胎率稀释保存倍数以8倍为宜;以葡萄糖3.0 g、柠檬酸钠2.0 g、卵黄10 ml为主要成分的稀释液保存效果优于其他4种稀释液(P<0.05)。稀释液pH值和渗透压与精液越接近保存效果越好。[结论]调整稀释液成分、稀释倍数、pH值、渗透压,可以提高萨福克羊精液低温液态保存效果。     

不同稀释液2—5℃保存鸡精液的研究

试验使用不同稀释液在2—5℃稀释保存鸡精液,测定了体外保存的精子活力和pH值变化。随保存时间的延长,不同稀释精液的精子活力和pH值下降幅度有差异。精子活力与pH值密切相关。精液稀释保存24小时的受精率以BPSE液最高(86.37％),与新鲜未稀释精液的受精率无显著差异;不同稀释液的受精蛋孵化率均无显著差异。用BPSE液加氧和减压保存的效果均无改进。Lake液以1:1(精液:稀释液,v/v)的倍数稀释,保存24小时后精子活力和pH值明显低于较高稀释倍数(1:2或1:3);保存24小时的受精率显著低于输精前加入BPSE液调整Lake液后的受精率。     

湖羊精液稀释液及冷冻保护剂的筛选

试验旨在研究不同稀释液对湖羊精液的4℃保存效果,同时探讨不同种类及浓度的冷冻保护剂对湖羊精液冷冻保存效果的影响。选择6种常见的绵羊精液稀释液配方,检测湖羊精液稀释后精子活力变化,分析精子存活时间及生存指数;另选取6种常见的精子冷冻保护剂,分3组浓度(5%、10%、15%)添加,检测细管冻精解冻后的精子活率。结果表明,6种稀释液对湖羊精液的4℃保存效果存在显著差异,其中F稀释液保存效果最佳。冷冻保护剂的种类和添加比例对湖羊精液的冷冻保存效果都存在影响,稀释液中添加5%的丙三醇对湖羊精液的冷冻保存效果最佳。     

不同稀释液对猪精液4℃保存效果的影响研究

[目的]利用改进的BF-5稀释液（命名为naBF5）,开发一种4℃液态保存猪精子的方法。[方法]把猪精子在LEN、BF5和mBF5这3种稀释液中4℃条件下保存5d,按照保存天数分别检测精子的活力、顶体形态、活率和ATP浓度并进行比较。[结果]在4℃条件下保存的1～2d,精子的活率在3种稀释液中没有显著的差异;但是第3天开始,3种稀释液中的精子活率有显著差异,在mBF5中保存的精子活率显著地高于在LEN和BF5中保存的精子。第1～5天,在mBF5和B巧稀释液中保存的精子正常顶体的百分率高于LEN稀释液中保存的精予;并且,在4℃保存5d后,在mBF5稀释液中保存的精子正常顶体的百分率要高于在BF5中保存的精子。在4℃条件下保存的第1～5天,mBF5稀释液中的精子活力百分率高于LEN和BF5稀释液保存的精子活力。在3种稀释液中,保存的第1～5天,精子活力的百分率都持续地降低。保存的第1～5天,mBF5稀释液中保存的精子ATP浓度比LEN和BF5稀释液中保存的高。保存5d之后3种稀释液中精子ATP浓度都迅速下降。[结论]在4℃条件下保存5d,与LEN和BF5稀释液相比,保存在mBF5稀释液中的精子表现出较高的活力、正常的顶体百分率、活率和ATP浓度。     

夏季山羊精液不同保存方法研究

假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精液冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精子密度,每个因素选择3个水平,以生存指数作为评价精液保存效果的指标.新鲜精液采集后检测发现品质良好,活力均值为0.87,畸形率为9.45%,符合GB20557-2006做山羊冻精标准.与去年同期比较,发现高温可造成精液品质下降.稀释液对3种保存效果影响差异均不显著(p0.05),精子密度对常温保存和低温冷藏影响差异极显著(p0.01),对冷冻影响差异不显著(p0.05).不同处理均造成精液品质下降,其中冷冻造成影响极显著.常温和冷藏下以稀释液A1、精子密度1×109个/mL保存较好,冷冻保存以稀释液A2、精子密度2×108个/mL较好.     

L-精氨酸对猪精液低温保存效果的影响

对L-精氨酸在猪精液低温保存中应用的效果进行评价,为猪精液低温保存稀释液配方的改良提供参考。采用手握法采集健康公猪精液,用含不同质量浓度L-精氨酸(0、0.50、1.00、1.50、2.00mg·mL-1)的低温保存稀释液稀释,于4℃下保存,对比7d内各组之间精子的活率、活力、畸形率、质膜和顶体完整性等参数。低温保存后,猪精液的总体质量浓度以1.00mg·mL-1组最好,其除了第1天精子活率与对照组差异不显著(P0.05)外,其他时间检测的5个指标均显著优于对照组(P0.05)。在本试验条件下,稀释液中添加1.00mg·mL-1 L-精氨酸可以明显改善4℃低温条件下猪精液的保存后质量。     

夏季山羊精液不同保存方法研究

假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精波冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精子密度,每个因素选择3个水平,以生存指数作为评价精液保存效果的指标.新鲜精液采集后检测发现品质良好,活力均值为0.87,畸形率为9.45%,符合GB20557-2006做山羊冻精标准.与去年同期比较,发现高温可造成精液品质下降.稀释液对3种保存效果影响差异均不显著(p>0.05),精子密度对常温保存和低温冷藏影响差异极显著(p<0.01),对冷冻影响差异不显著(p>0.05).不同处理均造成精液品质下降,其中冷冻造成影响极显著.常温和冷藏下以稀释液At、精子密度1×109个/mL保存较好,冷冻保存以稀释液A2、精子密度2×108个/mL较好.     

公猪精液长效稀释液配方研究

利用国内外猪精液常温保存的研究成果,设计了4个公猪精液稀释液配方(T1、T2、T3、T4),以目前四川农村猪人工授精中常用的EDTA液配方为对照,在室温条件下(16～28℃)通过逐日镜检的方法检查精子活力,每个配方5次重复,筛选出了保存期达5天、精子活力0.5级以上的配方2个(T2、T3);保存期达6天、精子活力0.5级以上的配方1个(T4).使用T4配方保存6天的稀释精液输精母猪68头,经超声波妊娠诊断仪检测母猪受胎率达86.8%.对4个精液稀释液配方在溶解后90min内的pH值变化进行了研究,各稀释液在溶解后的60min内pH值出现明显波动,之后达到平衡,表明稀释液宜在使用前1h配制好.     

犬精液冷冻技术和提高冻精受胎率的初步研究

本研究旨在探索犬精液的冷冻工艺流程及其主要技术参数,以及提高冻精受胎率的不同途径,为加快我国军、警、牧羊犬的选育工作提供技术依据。 一、犬精液冷冻技术 用乳糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、卵黄、甘油等不同成份和剂量组成三种稀释液配方(表1)。按相同比例稀释精液后,在液氮上方不     

Freezing preservation technique of honeybee semen

中华蜜蜂精液在液氮(－196 ℃)中贮存121 d,精液与含有8％二甲亚砜的三羟基氨基甲烷缓冲稀释液以1∶1.5混合,不用平衡,在广口保温瓶中距液氮面2 cm或5 cm处预冻,在35～39 ℃水浴中解冻,可产生较好的解冻后活力比率(超过60％).当室温高于20 ℃时(4月份),样本必须于13 ℃下平衡0.5 h左右,其解冻后活力比率可达30％.春季采集并冷冻的样本,其解冻后活力不如冬季采集并冷冻的.用在液氮中贮存了1～121 d的精液分别以4～5 μL的剂量给24只处女王人工授精,4只开产但首先产的不是受精卵.解冻后的精液能够于13 ℃下保存46 h.磺胺不能用于精子冷冻.     

犬精液超低温冷冻保存液筛选试验

为了提高犬的繁殖力,建立完善的犬人工授精体系和保存优秀的犬精子,本研究对8只犬进行了采精和精液的超低温冷冻保存试验,并对犬的精液超低温冷冻保存液进行了系统的筛选。结果表明,渗透压450mOsm/L的配方V(葡萄糖1.98g、蔗糖3.42g、柠檬酸钠0.59g、谷氨酸钠0.75g、三羟甲基氨基甲烷1.21g、维生素B_610mL、维生素B_(12)10mL、卵黄20mL和甘油8mL)对犬精液冷冻保存的效果最佳,解冻后精子的活率为0.58,畸形率为17.2%,满足输精和进行超低温冷冻保存精子的要求。     

猪精液冷冻与常温保存技术的研究

为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P<0.05)低于2%甘油组(21.71%)。38℃水浴解冻后的精子在39℃培养箱中4 h内活率高于0.3,而50℃水浴解冻后1 h后的活率低于0.3。精液稀释液Anderohep和BTS在常温((17±0.5)℃)保存新鲜猪精子的活率与顶体完整率上效果相似,保存3 d内精子活率达0.6以上,保存6 d内精子活率为0.3以上。结果表明,使用3%甘油冷冻保存及2种常温保存稀释液均可以较好地保存精子。     

鹅精液短期保存研究

鹅的新鲜精液进行精子活力检测后,分别用0.9%NaCl和脱脂牛奶2倍量稀释,在2～5℃、15～25℃、38～39℃,48.5℃温度下保存.结果表明:保存温度在48.5℃的精液,0.5小时精子全部死亡;在38～39℃条件下,用0.9%NaCl稀释与牛奶稀释鹅精液,精子活力变化基本无差异(P>0.05);0.9%NaCl稀释的鹅精液,在2～5℃、15～25℃、38～39℃温度条件下,保存效果无显著差异(P>0.05);牛奶稀释的鹅精液,低温保存效果较好,与其他各组比较差异极显著(P<0.01).     

6种鸡精液冷冻稀释液以及冻后保存条件比较

为探究不同稀释液对鸡精液冷冻保存效果的影响,选择LR、Lake’s、BPSE、Modified Sasaki、Beltsville和Nabi共6种稀释液对霞烟鸡精液进行冷冻,解冻后分别在37或4 ℃条件下短时间保存,分析不同冷冻稀释液和保存条件对精子活率、活力、功能完整性和抗氧化指标的影响。结果表明,6种稀释液中Lake’s稀释液的冻后活率、活力和顶体完整性最高,分别为48.20%、45.70%和45.26%;LR稀释液虽然获得了48.16%的冻后活率,但其活力显著低于Lake’s稀释液。解冻后4 ℃保存更适合鸡精子的短时间保存,Lake’s和Nabi稀释液在4 ℃条件下保存45 min后活力仍达30 %以上。虽然Nabi稀释液解冻初始时的精子活率和活力低于LR和Lake’s稀释液,但随着保存时间的延长,其冻后精子存活能力表现最佳。随着冻后保存时间的延长,LR、Lake’s和Nabi稀释液冻后精子的线粒体活性、质膜完整性和抗氧化能力均呈现下降趋势,且37 ℃保存时下降更为明显,同时LR稀释液在这些指标上表现出较差的耐受性。综上所述,Lake’s和Nabi冷冻稀释液对鸡精子冷冻保存的效果最佳;解冻后4 ℃保存可延长冻精的体外存活时间;LR稀释液虽获得了较高的冻后活率,但其活力和冻后耐保存性能较差。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的研究

选取杜洛克公猪精液作为试验材料,比较5种稀释液对猪精液的保存效果,结果表明:用葡萄糖—柠檬酸稀释液,所保存精液的pH值、精子活率、精子畸形率等品质指标表现良好,且稀释液的成本低廉,自配简单易行,适于农村养猪户推行;基层常用的葡萄糖稀释液保存3 d时的精子活率性状表现不佳,仅适合于现配现用。BL─液(美国)稀释液的保存效果也比较好,但该稀释液组分复杂,配制较难,成本也较高,可在规模养猪场中推广。     

牛磺酸对猪精子负压17℃液态保存效果的影响

为研究猪精子在17℃负压液态保存时牛磺酸对精子质量的影响,通过在Modena基础稀释液中添加不同剂量的牛磺酸,17℃负压环境下进行猪精液的保存,并利用迈朗全自动精子质量检测仪等仪器检测猪精子质量、精液pH值及精液中H2O2浓度,研究不同浓度牛磺酸对猪精液质量的影响。实验共分5个处理组,即基础稀释液中添加0、2.5、5、7.5、10 mmol·L-1牛磺酸,实验重复4次。结果表明,7.5 mmol·L-1的牛磺酸在精子活力,路径速度上都明显优于其他组(P0.05);添加牛磺酸后精液的pH值下降缓慢,且精液中H2O2浓度较对照组有不同程度的下降。由以上实验结果可知,从综合指标上看7.5 mmol·L-1的牛磺酸对在17℃负压环境下进行猪精液的保存是有利的,为猪人工授精生产实践中猪精子的保存提供了实验依据。     

不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响

[目的]研究不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响。[方法]在猪精液液态保存液中分别添加不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L)的二甲双胍,测定不同保存时间精子的活力、活率、质膜完整率、顶体完整率等指标。[结果]猪精液液态保存第3天,在不同浓度二甲双胍作用下各组间精子活力出现差异。第5天,添加1.0 mmol/L二甲双胍的保存液保存的精子活力达到38.03%,精子活率为49.03%,质膜完整率为43.91%,顶体完整率为50.88%,均高于对照组。[结论]添加二甲双胍有助于提高液态保存猪精液的质量,延长保存时间。     

牛精液低温（0℃）保存的效果研究

为研究一种Tris-卵黄稀释液0℃（冰水混合物中）保存牛精液的效果,该试验选用5头西门塔尔牛,将每头牛采集的精液等量分装,按1∶3的比例分别与试验组稀释液（Tris-卵黄专利稀释液）、对照组稀释液（基础稀释液）等温稀释处理,在0℃（冰水混合物中）状态下保存。检测保存0、 1、 2、 4、 6、 8、 10、 12 d的精子活率、顶体完整率及质膜完整性,并用保存5 d的精液进行人工授精,统计受胎率。结果表明：保存4～10 d, A组稀释液保存的精子活率显著高于B组（P<0.05）;保存10 d时,A组精子活率大于50%; 0℃保存牛精子顶体完整率、质膜完整性随保存时间的延长而逐渐降低,但不同处理间无显著差异（P>0.05）。A组稀释液保存牛精子的受胎率显著高于B组。可见,用Tris-卵黄稀释液0℃保存牛精液,保存效果较好,受胎率较高。     

美洲鲥鱼精子超低温冷冻保存技术初探

对美洲鲥鱼精液的超低温冷冻保存技术进行了研究。以解冻后精子的活力为参数,探讨了鱼用任氏液为稀释液、不同体积分数甲醇为保护剂、不同冻前平衡时间以及不同精液稀释比对美洲鲥鱼精液进行超低温冷冻保存的保护效果。结果显示,以鱼用任氏液和体积分数为10%的甲醇组成抗冻保护剂,精液稀释比(精液与抗冻保护剂的体积比)为1∶3,于4℃冰箱平衡20 min,液氮面上方6 cm处平衡10 min,然后在液氮面上平衡5 min,最后投入液氮中的保存方式,保存60 d后检查精子活力,存活率可达80%。研究结果为保护淡水鱼类的种质资源提供了理论基础。     

三种稀释液对猪精液常温保存与受胎率的影响

本文研究了三种稀释液对猪精液常温保存效果与受胎率的影响。选用三种不同稀释液对常温保存的猪精液进行稀释,并为母猪进行配种,比较不同稀释液的保存效果与受胎率。结果表明,(1)2号稀释液的保存效果较好,存活时间、生存指数与1号稀释液比较,差异极显著(P<0.01);与3号稀释液比较,差异不显著(P>0.05);(2)2号稀释液与1、3号稀释液相比也有较高的受胎率;(3)1、2、3号稀释液保存精子的畸形率间差异均不显著(P>0.05)。