猪流行性腹泻最新研究进展和防控策略

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea, PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）引起的猪的一种急性接触性肠道传染病,以呕吐、腹泻、食欲下降和脱水为基本特征。2010年来该病的流行区域和强度有不断扩大和增强的趋势,哺乳仔猪致死率高达100%,给我国乃至世界养猪业带来很大冲击。为了使广大养猪人对此病基本特点及最新研究进展有一个及时性了解,并能够采取有效的防控措施,文章就PED流行特点、发病机制、诊断和防控等方面的研究做一简要总结。     

猪流行性腹泻分子生物学诊断方法研究进展

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的乳猪的一种以呕吐、腹泻和脱水为主要特征的急性接触性肠道传染病。由于与该病类似的肠道性传染病较多,所以仅通过临床症状和病理组织学变化很难做出准确的诊断。只有借助实验室诊断技术进行鉴别诊断才能作出确诊。随着对PEDV基因组分子生物学研究的不断深入,多种分子生物学诊断技术开始出现,本文针对该病现有的分子生物学诊断方法进行概述。     

猪流行性腹泻疫苗的研究

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是由尼多目（Nidovirales）、冠状病毒科（Comnaviridae）、冠状病毒属（Coronavirus）α-冠状病毒中的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的猪的一种急性、高度传染性的肠道疾病,该病以急性肠炎、呕吐、水样腹泻和脱水为主要特征。各种日龄的猪均易感,尤其是哺育仔猪,发病率高达100％,死亡率为30％～80％。     

猪流行性腹泻疫苗免疫母猪后哺乳仔猪免疫效果ELISPOT和ELISA检测

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的猪的一种急性接触性肠道传染病,以呕吐、腹泻、食欲下降和脱水为基本特征,各年龄段均易感染,尤以哺乳仔猪受害最重.本论文通过调查上海本地PED的流行情况,用市场上现有的主要PED疫苗免疫母猪,对窝产仔猪进行连续的免疫反应监测,观察其体液免疫和细胞免疫的变化,结合之前监测结果对疫苗免疫效果进行评估,为猪场筛选合适疫苗,制定合理的免疫程序,预防与控制PED提供理论依据.     

猪流行性腹泻病毒的实验室检测方法和生产防控措施

近年来,猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)呈现出全球性的流行及暴发,发病率及病死率逐年升高,经济损失巨大,严重阻碍了养猪业的健康可持续发展。文章综述了国内外研究者近年来在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的实验室检测方法以及生产防控措施等方面的研究进展,以期为研究者提供参考。     

猪流行性腹泻病毒繁殖条件的研究

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea Virus,PEDV)引起的一种严重的病毒性传染病。该病可导致哺乳仔猪发生严重的腹泻、呕吐、脱水,并且致死率极高,给养猪业带来了巨大的危害。实验为了提高PEDV的繁殖滴度,对PEDV的培养条件进行优化并连续体外传代培养分别从改变胰酶浓度、吸附时间和培养方式三个方面进行了PEDV的传代培养,最终提高了病毒的滴度(TCID_(50)),从而降低了该病毒的致病性。     

猪流行性腹泻病毒的特性研究

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)引起的一种严重的病毒性传染病。对于大多数的病毒性腹泻疾病来说,防治措施一般选择疫苗免疫。近年来,有关猪流行性腹泻病毒疫苗的研究已经取得了一定的进展,包括灭活疫苗、弱毒疫苗、转基因植物疫苗、乳酸杆菌疫苗、亚单位疫苗和联合疫苗等。实验参照2010年版《中华人民共和国兽药典》第3部的要求对该病毒的特性进行了系统研究与记录,为PEDV HLJBX株可作为弱毒疫苗候选株的研究提供了进一步的参考资料。     

猪流行性腹泻的诊断及防制措施

<正>猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的猪的一种高度接触性肠道传染病,近年来在我国流行较为严重,造成了较大的经济损失。2011年10月28日~12月10日,四川省乐山市某猪场发生疫情,笔者将该起猪流行性腹泻病例的诊断及处置过程报告于后,并提出综合防制措施,以供同行参考。     

猪流行性腹泻病毒检测技术研究进展

猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的一种高度接触性肠道传染病,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征,给养猪业带来严重的经济损失。及时准确地诊断PEDV感染对于预防和控制PED至关重要,目前已经开发了许多用于PEDV、病毒蛋白及核酸的检测方法,包括病毒分离、酶联免疫吸附试验、直接免疫荧光检测、免疫组织化学技术、免疫层析技术等免疫学方法;RT-PCR、实时定量RT-PCR、核酸等温扩增技术、CRISPR-Cas系统检测技术等分子生物学方法。本文针对PEDV的抗原检测技术和方法进行综述,以期为PEDV的临床监测和PED的防控提供参考。     

我国猪流行性腹泻流行现状与防控进展

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diamhea virus, PFDV)引起的以猪只呕吐、腹泻、脱水和生长缓慢为主要特征的猪传染性肠道疾病,自2010年底在我国大范围暴发以来,给我国养猪业带来毁灭性打击,造成巨大的经济损失,目前已成为我国养猪业最大的威胁之一。文章综述了我国猪流行性腹泻的流行现状及主要的防控措施,以期为我国猪流行性腹泻的防控提供参考。     

猪流行性腹泻病毒研究进展

猪流行性腹泻病毒是引起猪腹泻的重要病原体之一,广泛流行于世界各地,造成了重大的经济损失。文章阐述了猪流行性腹泻病毒的分子生物学特点,概括了病毒的检测方法,并对近年来流行病学及疫苗的研发情况进行了综述,以期对猪流行性腹泻病毒研究提供帮助。     

Research Progress on Porcine Epidemic Diarrhea Virus

Porcine epidemic diarrhea (PED) caused by porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) is a contagious acute gastrointestinal infection, which has brought great economic losses to the pig industry in recent years.The article reviewed advances in molecular biology, methods of detection, genetic variation and vaccine development to provide references for further study in preventing porcine epidemic diarrhea.     

猪流行性腹泻病毒抗体ELISA检测方法的建立

为检测猪血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体水平,以纯化的PEDV作为包被抗原,优化ELISA反应条件,建立了检测PEDV血清IgG抗体的诊断方法:当血清OD_(450nm)值0.31时,判定阳性;当OD_(450nm)值小于0.26时,判定阴性;当OD_(450nm)值介于两者之间判定可疑。结果表明,试验建立的ELISA抗体检测方法可用于检测猪血清中猪流行腹泻病毒抗体、监测猪流行腹泻病的流行情况和评价相关疫苗的免疫效果。     

广西猪流行性腹泻流行病学调查

对广西6个市的6个规模化猪场进行了猪流行性腹泻流行病学调查。对其中4个猪场统计,在11090头猪中,患流行性腹泻的猪4658头,发病率为42%;死亡265头,病死率为5.69%。对6个猪场的170头份血清检测,阳性血清14份,阳性率为8.24%。结果表明广西的一些规模化猪场有猪流行性腹泻存在。     

猪流行性腹泻及新型疫苗研究进展

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是危害养猪业健康发展的重要疾病之一,具有急性、高度传染性的特征,给养猪业造成了严重的经济损失。猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）感染会破坏动物机体的消化系统,造成患病猪食欲下降、呕吐以及严重腹泻等,且药物治愈后的仔猪也会因为生长发育不良等因素严重影响生产,给养殖户带来巨大的困扰。2010年PEDV高致病变异毒株在中国暴发流行,导致PED的发病率和死亡率大幅升高,严重影响中国养猪生产。此次PED的暴发流行引起了养猪行业的密切关注,相关研究领域的学者对PEDV致病机制和PED新型疫苗进行了更加深入的研究,亚单位疫苗、病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、转基因植物疫苗和核酸疫苗5种PED新型疫苗相继被开发,并取得全新的突破和进展。与传统的PED灭活苗和PED弱毒疫苗相比,PED新型基因工程疫苗具有安全性好、制备简单、免疫效果好等优点。文章着重对PEDV发病机理和5种PED新型疫苗的研究进展展开综述,从而加深对PEDV和PED新型疫苗的了解,以期为PEDV感染的预防和控制措施提供参考。     

Research Advances on Porcine Epidemic Diarrhea and New Vaccine

Porcine epidemic diarrhea (PED) is one of the important diseases that endanger the healthy development of the pig industry.It has acute and highly infectious characteristics,causing severe economic losses to the pig industry.Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) infection could destroy the animal's digestive system,cause the appetite of sick pigs to decline,vomit,and severe diarrhea.And the piglets cured by drugs will also have a serious impact on production due to factors such as poor growth and development,which will bring huge problems to the farmers.The outbreak of PEDV highly pathogenic mutant strains in China in 2010 led to a significant increase in the incidence and mortality of PED,which severely affected pig production in China.The outbreak of PED has drawn close attention from the pig industry.Scholars in related research fields have conducted more in-depth research on the pathogenic mechanism of PEDV and the new PED vaccine.Five new types of PED vaccines,including subunit vaccine,virus live vector vaccine,bacterial live vector vaccine,transgenic plant vaccine and nucleic acid vaccine,have been developed successively,and new breakthroughs and progress have been made.Compared with the traditional PED inactivated vaccine and PED attenuated vaccine,the new PED genetically engineered vaccine has the advantages of good safety,simple preparation,and good immune effect.This article focuses on the pathogenesis of PEDV and the research progress of five new PED vaccines,so as to deepen our understanding of new PEDV and PED vaccines,in order to provide references for prevention and control measures of PEDV infection.     

猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的猪的一种急性、高度传染性肠道疾病,给养猪业造成了严重的经济损失。本研究以纯化的PEDV 为包被抗原,通过优化 ELISA 反应条件,建立了间接 ELISA 抗体检测方法,其反应条件为：抗原最佳包被浓度为 20 μg/mL,血清标准品最佳稀释度为 1：500,包被时间为4℃过夜,5%小牛血清37℃封闭1 h,二抗 1：10 000稀释,37℃作用1 h,抗体临界值为 D_{450 nm}≥ 0.289判为阳性,D_{450 nm}≤ 0.236判为阴性,介于二者之间为可疑。检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、细小病毒和口蹄疫病毒标准血清抗体均为阴性,重复试验变异系数均小于10%,对江苏、江西、福建、广东地区74份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达84%,表明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于 PEDV 抗体检测和流行病学调查。     

Establishment of Indirect ELISA Detection Method for Porcine Epidemic Diarrhea Virus

Porcine epidemic diarrhea (PED) is an acute, highly contagious enteric disease of pigs. Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) is the causative agent of PED. PED has caused significant economic losses to the pig industry. In this study,the purified PEDV as the coating antigen, by optimizing the ELISA reaction conditions,the indirect ELISA antibody detection method was established. The optimized reaction conditions were as follows: Antigen working concentration was 20 μg/mL; Serum sample dilution was 1:500;It was coated at 4℃ overnight; The plates were blocked by 5% calf serum incubated at 37℃ for 1 h; The secondary antibody was diluted at 1:10 000,incubated at 37℃ for 1 h. It was judged as positive when the cutoff value D_{450 nm}≥0.289,as negative when D_{450 nm}≤0.236,and as suspicious between 0.289 and 0.236.It could not react with the positive sear of other six viruses such as porcine respiratory and reproductive syndrome virus,porcine circovirus 2, classical swine fever virus, porcine parvovirus,pseudo rabies virus and foot-and-mouth disease virus. The variation coefficient of repeated test was less than 10%.74 pig serum samples from Jiangsu, Jiangxi, Fujian and Guangdong were detected,and the positive rate was 84%.It indicated that this method could be used for PEDV epidemiological surveys and diagnosis in the future.     

猪流行性腹泻防控研究概况

猪流行性腹泻病毒(PEDV)主要的致病特点是引起仔猪急性腹泻、呕吐、脱水及死亡,PEDV的感染也可引起怀孕母猪腹泻、厌食,从而影响母猪的正常繁殖功能。自2010年以来,PEDV变异毒株的流行已对全球的生猪产业造成严重影响,而已有的防控措施已经不能应对新的流行态势。近年来,针对PEDV变异毒株流行变化以及防控措施的研究越来越多,许多新的技术及手段已经应用到本病的控制中。论文以此为基础,分析了当前猪流行性腹泻病毒的流行特点,重点讨论不同检测方法和疫苗制剂的研究进展,以及其应用于变异毒株防控中的现状及前景。     

2株猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及ORF3基因的克隆与序列分析

为研究、防控广东地区猪流行性腹泻,首先通过RT-PCR法确定某猪场粪便样品中存在猪流行性腹泻病毒,随后利用Vero细胞进行盲传,最后经核酸类型鉴定、RT-PCR、病毒TCID50的测定、目的基因测序和序列分析等方法,确认分离到2株猪流行性腹泻病毒毒株,命名为PEDV GDKP-2013和PEDV GDKP2-2013,通过ORF3全基因核苷酸序列分析可知,GDKP-2013株与GDKP2-2013株与经典参考毒株的氨基酸序列一致性为 JX261936-CHGD-01,98.2%,98%;JQ039903-CH-GD-2011,98.6%,98.4%;AF353511-CV777,95.4%,95.1%;KC344845-STPED0810,95.1%,94.8%;EU054929-DR13,95.5%,95.2%;KF272920-USA-Colorado-2013,95.1%,94.8%,表明此2毒株与国内分离株的氨基酸同源性高,与韩国、泰国和美国分离株的氨基酸同源性要低一些,同时,与疫苗参考株的氨基酸同源性也相对较低;基因系统进化分析可知,GDKP-2013株与GDKP2-2013株主要处在Ⅰa分支,均与弱毒疫苗株（Ⅰb分支）相互之间遗传进化关系较远。