我国饲料中黄曲霉毒素B_1污染的分布规律研究

采用酶联免疫(ELISA)法测定全国11个省份共计1013份饲料样品中黄曲霉毒素B1含量,了解我国饲料中黄曲霉毒素B1污染情况及分布规律。结果表明,饲料中黄曲霉毒素B1检出率高达99.51%,但超标率较低,平均为2.27%;不同省份饲料中黄曲霉毒素B1含量差异极显著(P<0.01),贵州省最高,河南省、四川省较高,福建省最低,其余7省居中;黄曲霉毒素B1含量由高到低依次为棉粕、家禽配合饲料、菜粕、玉米、仔猪配合饲料、麦麸、豆粕、鱼粉和小麦。我国饲料普遍受到黄曲霉毒素B1的污染,但饲料原料中黄曲霉毒素B1的超标率低,含量在不同区域和饲料种类间存在差异。     

原料黄曲霉对牛奶品质的影响

黄曲霉毒素是一类主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的代谢产物,其中以黄曲霉毒素 B1最为多见,危害性也最强,而牛奶检测超标的黄曲霉毒素 M1则是黄曲霉毒素 B1的代谢产物。目前各个国家对各种食品中的黄曲霉毒素 B1以及黄曲霉毒素 M1的含量都有严格限制。本文就黄曲霉毒素的产生、危害、检测、饲料黄曲霉毒素的控制措施等方面进行了简述,以期对奶牛生产有指导意义。     

饲料中黄曲霉毒素污染现状、影响因素及其对反刍动物瘤胃微生物发酵的影响

黄曲霉毒素是由生长在温暖潮湿环境中的黄曲霉菌所产生的对人体和畜禽危害性很大的一类毒素,其在饲料中的污染在全世界具有一定的区域性和季节性。尤其在中国南方地区夏季高温高湿条件下极易发生饲料霉菌毒素污染,对中国畜牧养殖业造成了极大的危害和损失。作者主要从黄曲霉毒素的种类、饲料污染现状、影响因素及其对反刍动物瘤胃消化代谢的影响等方面进行了综述。     

酶联免疫吸附(ELISA)法检测饲料中黄曲毒素B1的探讨

利用三氯甲烷对黄曲毒素B1有较强选择性作用的特点，用它作为黄曲毒素B1的提取液，对浓缩饲料和成分较复杂的配混合饲料进行纯化处理，使测试结果的准确性与重复性都得到提高，取得令人满意的结果。     

仔猪黄曲霉毒素B1中毒的诊治

黄曲霉毒素中毒是由于动物采食被黄曲霉产生的黄曲霉毒素B1污染的饲料而引起的一种危害极大的中毒病.毒素主要破坏肝脏、血管和中枢神经,病畜表现全身出血、消化障碍和神经症状等.     

饲喂黄曲霉毒素B_1对奶山羊乳中黄曲霉毒素M_1分泌规律与转化率的影响

为研究饲粮中添加单一剂量黄曲霉毒素B1(AFB1)后奶山羊乳中黄曲霉毒素M1(AFM1)的分泌规律及AFB1转化为AFM1的转化率,选择3只健康、体重接近的泌乳中期关中奶山羊,每只羊饲喂1 mg AFB1。饲喂后0、4、8、24、32、48、56、72、80、96、104及120 h采集羊乳,测定AFM1含量。结果表明:1)饲喂AFB1前(0 h),羊乳中未检出AFM1,但是饲喂AFB1后4 h,在收集的羊乳中均检出了AFM1;2)3只试验在羊乳中AFM1含量存在差异,但是其分泌规律非常相似,均呈先升高后急剧下降再缓慢下降的趋势;3)羊乳中AFM1的峰值出现在饲喂AFB1后4~8 h;4)羊乳中AFM1平均含量在56 h时为0.39μg/kg,低于我国限量值(0.5μg/kg),到120 h平均含量为0.02μg/kg,低于欧盟限量值(0.05μg/kg);5)各时间点AFB1转化为AFM1的最大平均转化率为0.19%,出现在4 h;6)饲喂AFB1后24 h内的AFM1平均转化率之和占AFM1总转化率的81%。结果提示,AFM1在奶山羊乳中的排出时间主要集中在采食AFB1后的24 h内。     

Aflatoxin B1 toxicosis in dairy calves pretreated with selenium-vitamin E

Effects of a single IM injection of selenium-vitamin E (Se-E; 5 mg of Se + 68 IU of alpha-tocopherol/60 kg of body weight) as a pretreatment 14 days before an oral dose of aflatoxin B1 (1.0 mg/kg) were studied in 24 dairy calves. Treatment groups were designated as follows: group 1 = no Se-E or aflatoxin B1 (control); group 2 = Se-E supplementation only; group 3 = aflatoxin B1 dose only; and group 4 = Se-E supplementation before aflatoxin B1 dose. Clinical signs of toxicosis in aflatoxin B1-treated calves included anorexia, ataxia, rough haircoats, increased respiration rates, dyspnea, dehydration, and nasal discharge. Packed-cell volume, RBC, WBC, and hemoglobin were increased in aflatoxin-treated calves. Significant increases in serum aspartate aminotransferase (P less than 0.05) and gamma-glutamyl-transferase (P less than 0.001) activities and prothrombin times (P less than 0.001) were observed in aflatoxin-treated calves, indicating that there was hepatic involvement. Although aflatoxin exposure caused a significant decrease in body weight (P less than 0.01) and feed intake (P less than 0.001) in treatment groups 3 and 4, Se was demonstrated to interact significantly (P less than 0.001) with aflatoxin B1 for feed intake, causing an improved feed intake in treatment group 4 calves.     

水产养殖饲料黄曲霉毒素B1的ELISA快速检测

黄曲霉毒素B1(AflatoxinsAFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素),前者为基本毒性结构,后者与致癌有关。AFB1可由黄曲霉、寄生曲霉和A.nomius产生,其理化性状稳定,可通过食物链从一种生物体转移到另一种生物体,导致人体中毒。鉴于此,欧盟规定用于动物饲料产品中AFB1最高残留限量(MRL)不能超过2.0μg/kg。基于抗原抗体特异性反应建立起来的ELISA方法,具有简单、快速、灵敏度高、处理样品量大、重复性好等特点,已成为实验室最常用的药物残留快速筛选方法之一。本实验利用荷兰E.D生产的黄曲霉毒…     

动物体内细胞色素酶P3A4与饲料黄曲霉毒素B1毒性的关系

黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)作为黄曲霉主要的代谢产物之一,进入动物体内后主要影响动物的抗氧化系统和免疫系统,是霉菌毒素中主要的致病致癌物质。AFB1代谢主要存在于动物肝脏中,肝微粒体中的细胞色素酶P450(cytochrome P450,CYP450s)是动物体内参与多种药物及毒物代谢的主要酶类。细胞色素酶P3A4(cytochrome P3A4,CYP3A4)是CYP450s的同工酶,主要参与肝脏内AFB1的代谢。进入动物机体内的AFB1经CYP3A4代谢的产物一部分与DNA、RNA结合产生致毒效应;另一部分在谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)等作用下进入血液和尿液,发生解毒效应。在饲料中添加抗氧化剂对于缓解AFB1的毒性有良好效果。饲料中添加一些天然物质或化学成分可以适当抑制肝脏内CYP3A4的活性,对于研究AFB1对机体的损伤具有重要意义,还可为开发新的饲料添加剂提供新思路。     

黄曲霉毒素B1化学发光免疫检测方法的建立

在利用化学法合成吖啶酯标记的黄曲霉毒素B1(AFB1)抗原(AFB1-BSA-AE)的基础上,建立了化学发光免疫分析法(CLIA)检测样品中的黄曲霉毒素B1(AFB1)含量。结果表明,该方法对应的回归线方程为y=-16.995Ln(x)+166.06,R2=0.9996,AFB150%竞争抑制浓度(IC50)为0.924 ng/m L,检测的线性范围为0.1~5.0 ng/m L。在黍米样品中的加标回收率为75%~115%,变异系数为0.36%~1.20%。     

Subchronic Toxicity of Dietary Aflatoxin B1 to Channel Catfish

Abstract

Means for growth rate, hematocrit, hemoglobin concentration, and erythrocyte count of channel catfish Ictalurus punctatus fed 10,000 μg aflatoxin B₁ (AFB₁) per kilogram of feed for 10 weeks were significantly lower than those of fish fed 2,154 μg/kg or a lower concentration (P < 0.05). Mean leukocyte count was significantly higher in the fish fed the highest concentration of AFB₁ (P < 0.05). Gross appearance and behavior of all fish were normal. Histopathological effects were observed only in fish fed the highest concentration of AFB₁. These fish had foci of necrotic hepatocytes mixed with basophilic hepatocytes. Spaces, apparently resulting from hepatocellular necrosis, were present within the basophilic foci. Sinusoids in the head (hematopoietic) kidney were dilated and circular in profile. Increased hematopoietic activity of blood-forming tissues was apparent from the presence of numerous immature blood cells. The intestinal mucosal epithelium accumulated excessive amounts of iron pigments. Gastric glands in the stomach were necrotic and contained infiltrating macrophages.     

农业部发布《饲料药物添加剂使用规范》

为加强兽药的使用管理，进一步规范和指导饲料药物添加剂的合理使用，防止滥用饲料药物添加剂，根据《兽药管理条例》的规定，农业部今年 7月以农牧发 [2001]20号文发布《饲料药物添加剂使用规范》 (以下简称《规范》 )，并就有关事项通知如下： 　　一、凡农业部批准的具有预防动物疾病、促进动物生产作用，可在饲料中长时间添加使用的饲料药物添加剂 (品种收载于附录一 )，其产品批准文号须用“药添字”。生产含有“附录一”所列品种成份的饲料，必须在产品标签中标明所含兽药成份的名称、含量、适用范围、停药期规定及注意事项等。 　　…     

黄曲霉毒素B_1与M_1对小鼠肠道细菌多样性的影响

试验旨在研究黄曲霉毒素B_1与M_1(AFB_1与AFM_1)对小鼠肠道细菌多样性的影响。选取体况良好的4周龄ICR(CD-1)雄性小鼠40只,随机分成4组,每组10个重复,每个重复1只小鼠,其中AFB_1组小鼠每只每天灌胃0.3mg/kg体重AFB_1,AFM_1组小鼠每只每天灌胃3.0mg/kg体重AFM_1,AFB_1+AFM_1组每只每天灌胃AFB_1与AFM_1的混合溶液,其中AFB_1终浓度0.3mg/kg体重,AFM_1终浓度3.0mg/kg体重,以上3组毒素溶剂均为1.0%二甲基亚砜水溶液。对照组小鼠每只每天灌胃1.0%二甲基亚砜水溶液。每只灌胃剂量均为200μL,每天09∶00灌胃一次,连续灌胃28d。灌胃结束后,处死并解剖小鼠,收集结肠内容物,采用16SrRNA测序的方法对肠内容物细菌多样性进行测序分析。结果显示:在细菌群落的门水平、科水平及属水平,与对照组相比,3个毒素处理组小鼠肠道内容物细菌优势菌群均未发生明显排序变化(P>0.05),但不同的毒素处理仍造成了不同分类水平下细菌菌群丰度的显著变化:与对照组相比,AFB_1组及联合灌胃组小鼠肠内致病菌或条件致病菌,如Facklamia、Staphylococcus、Corynebacterium属细菌丰度显著升高(P<0.05);而AFM_1组与对照组相比未见显著差异(P>0.05)。综合试验结果,AFB_1单独作用或与AFM_1联合作用可诱导小鼠肠道内致病菌或条件致病菌细菌增殖,改变肠道健康微生物区系,损伤肠道微生物屏障功能。     

蒙脱石及改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1的吸附研究

分别研究了在pH2．06及pH8．01条件下及有无赖氨酸存在时蒙脱石及改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1的吸附和解吸规律。结果表明，蒙脱石和改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1均有较强的吸附性，吸附量随黄曲霉毒素B1含量增加而增加，两者呈直线相关。当吸附反应体系中赖氨酸含量为0．2％、0．4％时，不影响蒙脱石及改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1的吸附。蒙脱石和改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1的吸附量大小相近，但改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1的吸附量不受边面封闭剂的影响，且改性蒙脱石吸附黄曲霉毒素B1后，黄曲霉毒素B1的解吸率较蒙脱石低，表明有机改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1有更高的吸附稳定性。     

黄曲霉毒素B1致病机制及防治研究进展

黄曲霉毒素(aflatoxins, AFs)是一类来自于霉菌中的剧毒物质, 其中以黄曲霉毒素B₁(aflatoxin B₁, AFB₁)的毒性最强、危害性最大。AFB₁是一种具有强致癌性及剧烈毒性的双呋喃环类毒素, 广泛分布于霉变的玉米、花生、大米和大豆等粮油作物中, 由AFB₁引发的人与动物中毒事件给当前食品安全和畜禽养殖等行业的发展造成了严重危害。AFB₁已被证明能够引起机体氧化应激、细胞凋亡、细胞焦亡、基因突变及免疫系统损伤。作者阐述了AFB₁抑制机体免疫系统、破坏机体免疫耐受性的免疫毒性作用; 介绍了AFB₁促进活性氧生成、激活Nrf2-ARE通路、诱导机体氧化应激和炎症反应进而造成器官损伤的器官毒性作用; 分析了AFB₁利用细胞死亡相关受体调控外源性细胞凋亡作用, 以及通过一系列细胞凋亡相关蛋白诱导内源性细胞凋亡作用, 还可利用肝细胞经典焦亡途径引发炎症反应, 继而引发非正常死亡的细胞毒性作用; 回顾了近年来关于AFB₁基因毒性与其去毒措施的作用机制及其研究进展。本综述有望为针对AFB₁致病机制的深入研究及相关防治药物的研发提供参考, 并为发霉粮油作物的去毒措施的选择提供有效依据。     

降解AFB1的枯草芽孢杆菌S1分离与鉴定

【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素（aflatoxin,AF）的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B₁（alflatoxin B₁,AFB₁）污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB₁的结构类似物香豆素为唯一碳源筛选降解AFB₁效率最高的菌株,并对其进行形态学、生理生化和16S rDNA鉴定。取AFB₁与适量筛选菌株的发酵液混合,使AFB₁的浓度为1 μg/mL,37℃、150 r/min培养,测定培养不同时间AFB₁降解率;应用差速离心法分别制取上清液、菌悬液和菌体,将菌体超声裂解后制得胞内液,测定不同组分对AFB₁的降解率;对上清液分别进行蛋白酶K、蛋白酶K+SDS和热处理,检测处理后上清液AFB₁降解率;分别用不同浓度的饱和硫酸铵沉淀处理上清液,检测AFB₁降解率;应用7 ku透析袋对上清液进行浓缩,检测AFB₁降解率,从而判断菌株活性成分的性质和分布。将鸡肝细胞分为AFB₁组、AFB₁-菌株组、菌株组和空白对照组,用实时荧光定量PCR检测各组鸡肝细胞中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosisi factor alpha,TNF-α）和Bcl-2-associated X蛋白（Bax）基因的相对表达量。【结果】经初筛和复筛,从编号为S₁的绵羊粪便样品中分离出1株菌株,其降解AFB₁的活性最高,降解率可达60.36%。菌株S₁在LB固体培养基上培养12 h,可观察到淡黄色不透明菌落,表面光滑,有隆起,镜检革兰氏染色呈阳性,杆状。16S rDNA基因进行PCR扩增并进一步测序分析,其序列与LC55966.1的同源性为100%。综合16 S rDNA序列分析和生理生化结果鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌发酵液与AFB₁（1 μg/mL）反应4、12、24、48和72 h,降解率分别达到10.98%、25.36%、46.24%和52.65%和80.84%。上清液AFB₁降解率显著高于菌悬液和胞内液（P<0.05）。热处理后,上清液的AFB₁降解活性降低,而经蛋白酶K和SDS处理后降解活性基本丧失。用不同浓度饱和硫酸铵处理的上清液AFB₁降解率差异不显著（P>0.05）,而经透析浓缩后的上清液AFB₁降解率显著高于硫酸铵处理的上清液沉淀蛋白（P<0.05）。在鸡胚胎肝脏原代细胞上,与AFB₁组相比,AFB₁经枯草芽孢杆菌S₁降解后诱导IL-6、TNF-α以及Bax的表达量均显著降低（P<0.05）。【结论】筛选到1株枯草芽孢杆菌S₁,其具有较高的降解AFB₁的活性,其降解活性主要来自于培养液上清中的蛋白质;AFB₁经降解后其毒素显著降低。     

黄曲霉毒素B_1对肉鸡肝线粒体膜通透性的影响

<正>黄曲霉毒素被世界卫生组织的癌症研究机构划定为一类致癌物,是一种毒性极强的物质[1],主要对动物肝脏造成损害。其中,黄曲霉毒素B1(AFB1)最为多见,其毒性和致癌性也最强,能够在细胞中引起染色体失常和DNA破损。当机体发生癌变时,其肿瘤细胞代谢旺盛,需求能量大,结果在线粒体结构与功能上都有所反映,线粒体膜通透转换孔的变化在此过程中起关键性的调控作用,目前尚未见有关黄曲霉毒素诱导线粒体膜通透性的影响。本试验研究了肉鸡AFB1慢性中毒与肝线粒体膜通透性的变化,为AFB1诱导肝损伤和肝癌的机理研究提供理论依据。     

蒙脱石纳米复合物吸附猪日粮中黄曲霉毒素B1效果的研究

选用120头体重(29.8±1.3)kg的"杜长大"三元杂交猪,随机分为4个处理组,每组3个重复,每个重复10头猪(公母各半)。试验猪分别饲喂基础日粮、基础日粮添加0.3%蒙脱石纳米复合物(MN)、基础日粮添加0.1 mg/kg黄曲霉毒素B1(AFB1)、基础日粮添加0.1 mg/kg AFB1和0.3%MN,试验期90 d,以研究MN缓解猪黄曲霉毒素中毒症、降低猪体组织中黄曲霉毒素B1残留量的效果,并初步探讨其作用机理。结果表明:(1)在基础日粮中添加0.1 mg/kg的黄曲霉毒素B1,显著降低了试验猪的日增重和饲料转化效率,严重损害了试验猪的肝脏功能,造成了相关指标的异常升高或降低;(2)在黄曲霉毒素B1污染的日粮中添加0.3%的MN,显著降低了黄曲霉毒素B1在猪体组织中的残留量,明显改善了试验猪的生长性能,减轻甚至消除了黄曲霉毒素B1对动物生长性能和肝脏功能等的不良影响。     

不同吸附剂对黄曲霉毒素B_1吸附效果的研究

作者通过体外试验和动物饲养试验,研究3种吸附剂对黄曲霉毒素B1(AFB1)的吸附效果.3种吸附剂分别是吸附剂A(主成分为酵母培养物提取物)、吸附剂B(主成分为水合铝硅酸盐)、吸附剂C(为复合物,主成分为酵母培养物及水合铝硅酸盐).体外试验研究pH为2.0、6.0、8.0的磷酸盐缓冲液(PBS溶液)、人工胃液和肠液环境下3种吸附剂对AFB1的吸附能力,比较pH 8.0条件下3种吸附剂对AFB1的结合速率.结果表明,各种条件下吸附剂B的吸附能力最强.pH 8.0条件下,吸附剂B在10 min内对AFB1吸附率达到97.69%,且60 min内吸附率一直处在96.03%以上.吸附剂A和吸附剂C对AF BI的作用效果较吸附剂B弱.动物饲养试验选择240只1日龄健康雄性AA肉仔鸡,随机分为8个处理,每个处理3个重复,每个重复10只鸡,饲养周期21 d.结果表明,与基础组相比较,AFB1组(污染水平为98.8 μg/kg)肉仔鸡生长性能和肝脏功能发生显著变化,吸附剂A、B、C均能不同程度地缓解AFB1对肉仔鸡生长性能和肝脏损伤方面的毒性作用,与吸附剂A、C相比,吸附剂B能更有效的防止肉仔鸡黄曲霉毒素B1中毒.结果提示,使用吸附剂B能很好的降低AFB1对肉仔鸡的危害程度.