白僵蚕高效液相色谱指纹图谱的研究

建立白僵蚕甲醇提取物高效液相色谱指纹图谱,可较完整地反应白僵蚕内在化学信息,全面评价白僵蚕的质量。采用梯度洗脱高效液相色谱法对获取的指纹图谱数据进行相似度分析,建立了白僵蚕的指纹图谱。以主要的7个共有峰的相对保留时间和相对峰面积作为白僵蚕指纹图谱的相关技术参数,对10份白僵蚕样品测定得出的7个主要共有峰的相对保留时间重现性好,相对峰面积有明显差别。白僵蚕高效液相色谱指纹图谱可用于评价白僵蚕的质量。     

基于HPLC特征图谱结合化学计量学方法评价不同产地角倍和肚倍的质量

目的：采用高效液相色谱法（HPLC）测定对不同来源五倍子两种形态肚倍和角倍进行HPLC特征指纹图谱研究,并通过聚类分析和主成分分析深入研究五倍子药材不同形态中有效成分差异,为五倍子的质量控制及评价提供参考。方法：采用HPLC梯度洗脱法对肚倍和角倍样品进行测定,并记录色谱图,按《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》对色谱图进行匹配生成肚倍和角倍的特征图谱,进行相似度分析。采用化学计量学软件origin 2018对肚倍和角倍进行聚类分析、主成分分析（PCA）研究。结果：分别建立了肚倍和角倍的 HPLC 特征指纹图谱共有模式,标识了没食子酸、没食子酸甲酯、1,2,3,6-四-O-没食子酰葡萄糖、1,2,3,4,6-五-O-没食子酰葡萄糖4个特征峰。角倍与肚倍相似度低,可通过聚类分析、主成分分析将其分为 2 大类从两者的HPLC特征指纹图谱相比,肚倍比角倍多了5个峰,保留时间为20.3 min、26.0min、27.6min、54.6min、75.9min,同时少了49.1 min相对位置的保留峰。结论：通过分析不同产地的五倍子角倍和肚倍中特征性化学成分,表明肚倍的有效成分多于角倍。利用相似度研究、聚类分析技术及主成分分析,可有效区分二者,为五倍子药材质量综合评价和利用提供参考。     

滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱的建立及多成分含量测定

建立滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱,并对多种成分进行含量测定。色谱柱为Agilent 5 HC-C₁₈(250.0 mm×4.6 mm, 5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,采用PDA检测器在190～400 nm处进行全波长扫描,提取最大波长色谱图。对10批样品进行HPLC分析,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价”生成指纹图谱,并对样品中多种成分进行含量测定。试验成功建立了滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱,确定共有峰,同时对9种成分进行含量测定,方法学考察符合要求。本研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法操作简便,测定成分全面,重复性好,可为滋阴清热降糖丸质量标准的修订提供参考。     

响应面法优化川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的提取工艺研究

对川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷抗炎活性成分进行提取工艺研究，建立快速高效的提取方法，提高药材的利用率。以川西獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷三种环烯醚萜苷为研究对象，考察提取次数、液料比、提取时间、乙醇浓度以及提取温度5个因素对川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷提取率的影响，通过响应面法和Box-Behnken优化得到最优工艺参数。结果表明：川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的最优提取工艺参数为：提取次数2次，提取时间60 min，液料比46 mL·g^-1，乙醇浓度73%，提取温度50℃；验证结果显示在该条件下川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的提取率为4.73 mg·g^-1，与预测值4.75 mg·g^-1相差0.0 255 mg·g^-1,RSD<5%。实验所采用的超声法提取川西獐牙菜中三种环烯醚萜苷的优化工艺可行，耗时短、效率高、简单易行，能够满足提取要求。     

藏药刺柏HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮含量测定

试验旨在建立藏药刺柏的HPLC指纹图谱,运用2种统计方法分析不同产区的刺柏药材质量差异。采用HPLC-DAD技术,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,梯度洗脱,建立刺柏药材的指纹图谱并对指标性成分进行测定含量。对6批不同藏药刺柏进行相似度评价,并运用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行分类分析。结果表明,刺柏药材HPLC指纹图谱共有峰16个,对14号峰进行指认为穗花杉双黄酮;6批刺柏药材的相似度均>0.90;CA将不同产地刺柏药材分为3类,反映了6个不同产区刺柏药材的质量特征;PCA结果显示前4个主成分的累积贡献率达到96.13%,6个化学成分代表刺柏药材质量。说明建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可有效控制刺柏的质量,为药材质量控制提供科学依据。     

HPLC法测定川西獐牙菜中獐牙菜苷的含量

目的:测定川西獐牙菜中獐芽菜苷的含量。方法:采用高效液相色谱法进行测定。色谱条件:SunfireTMC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为甲醇,B为超纯水,分析时间为60min,(梯度洗脱:0min时,A:B体积比为25:75;25min时,A:B体积比为60:40;26min时,A:B体积比为90:10;36min时,A:B体积比为25:75,持续至60min),流量为0.8ml/min,检测波长:为254nm,柱温:25℃;进样量为10μl。结论:本研究所建立的检测方法可快速有效地测定川西獐牙菜中獐牙菜苷的含量。     

兽用原料药博普总碱的HPLC特征谱图的建立

建立HPLC特征谱图控制兽用原料药博普总碱的质量。HPLC 特征谱图包含4个特征峰，用对照品定性鉴别4个特征峰分别为原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱。考察检测波长、流动相条件、柱温、流速、色谱柱品牌对各特征峰相对保留时间的影响，确定优化后的高效液相条件，并具有良好的精密度、稳定性和重复性。分析15批博普总碱原料药的液相图谱，样品的相似度均大于0.95，并对特征峰的相对保留时间进行了规定，为原料药博普总碱质量控制提供了依据。     

HPLC指纹图谱法评价市售僵蚕的品质

为了科学评价僵蚕的品质,建立了僵蚕的高效液相色谱指纹图谱分析方法,并对市售13个批次僵蚕药材的指纹图谱进行比较分析。结果发现这13批僵蚕的HPLC指纹图谱上共有11个明显的色谱峰,通过与标准品比对确定其中4个色谱峰分别为芦丁、紫云英苷、槲皮素和山奈酚; 13个批次僵蚕药材的指纹图谱具有显著差异,仅有5个共有特征峰,而且共有峰峰面积相差较大,相对标准偏差(RSD)分布在43. 31%~90. 62%之间。以共有模式R为基准,对市售僵蚕药材特征指纹图谱进行相似度计算,结果显示13个样品中相似度大于0. 90的有8个样品,相似度在0. 85~0. 90之间的有1个样品,相似度低于0. 85的有4个样品。结果表明,建立的僵蚕HPLC指纹图谱专属性强、稳定性好,能较真实、全面地反映僵蚕的特征;所测市售僵蚕药材品质参差不齐,在化学成分组成和含量上均有显著差异。     

利用RP-HPLC指纹图谱技术评价中草药添加剂的质量研究

为寻求控制一种新的防控猪高热综合征中草药饲料添加剂质量的有效方法,本研究采用反相高效液相色谱指纹图谱技术评价中草药添加剂质量,并对其主要成分定量分析方法进行探讨。液相色谱的条件为:Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)和Agilent保护柱,柱温25℃,流速1 mL/min,以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为280 nm。通过对黄芩苷、橙皮苷、甘草苷对照品和12批次中草药饲料添加剂RP-HPLC指纹图谱的分析,建立了该中草药添加剂RP-HPLC指纹图谱,获得包括有甘草苷、橙皮苷和黄芩苷等相对稳定的15个共有特征峰。定量分析表明每克中草药添加剂样品中平均含量黄芩苷为(8.488±1.084)mg,橙皮苷为(6.321±0.379)mg,甘草苷(0.218±0.157)mg。本研究建立的定性和定量检测方法可用于新的中草药添加剂的质量检测。     

黄芩黄酮HPLC特征图谱制定研究

试验旨在制定黄芩黄酮HPLC特征图谱。采用高效液相色谱（HPLC）法，对16批黄芩黄酮样品测定分析，制定了黄芩黄酮特征图谱。结果显示，试验确定了样品8个共有特征峰，通过标准品比对以及借助高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用仪进一步分析，确认了4个特征成分，分别为黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素，并初步确定了另外4个特征成分。以黄芩苷的色谱峰为参照峰（S峰），8个特征峰的相对保留时间的相对标准偏差（RSD）<3%。研究表明，该特征图谱制定方法具有良好的重复性、精密度、稳定性，为黄芩黄酮作为兽用中药开发的质量控制提供了参考。     

不同产地甘草的HPLC指纹图谱研究

目的:研究甘草的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:利用HPLC方法,梯度洗脱。色谱条件为:Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速0.8 m L/min,柱温30℃,流动相A为乙腈,流动相B为(pH值3)磷酸溶液,流动相A梯度洗脱(10%~90%乙腈),分析时间为65 min。结果:HPLC指纹图谱分析显示,21个不同批次和产地的甘草样品在276 nm处共获得包括甘草苷(5号峰)在内的10个共有峰,相似度分析结果均在0.99以上。方法学考察表明,精密度、稳定性、重现性均良好。结论:甘草的指纹图谱特征性及专属性强,可用于全面控制甘草的质量,确保每批产品的均一性。     

蓝刺头药材总黄酮的高效液相色谱指纹图谱研究

本实验旨在通过建立蓝刺头总黄酮的高效液相色谱指纹图谱，为评价蓝刺头药材的质量提供依据。色谱柱为Apollo C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm），流动相为甲醇-1%甲酸（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为331 nm，柱温为30℃，进样量为40μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）、SPSS 22.0统计学软件和SIMCA-P12.0软件对10批蓝刺头所含总黄酮的色谱数据进行化学计量学分析。结果表明：建立的蓝刺头总黄酮的指纹图谱共有模式，共标定了10个共有峰，其中8号峰为芹菜苷峰；10批药材相似度较好，主成分分析和聚类分析均将10批药材分为3类；结合偏最小二乘回归分析得到引起蓝刺头药材批次间总黄酮成分差异的4个色谱峰。综上，所建立的高效液相色谱指纹图谱方法结果准确、稳定，可为蓝刺头药材的质量控制提供依据。     

甘肃道地药材当归土炒饮片质量标准研究

目的:建立土炒当归饮片质量控制方法,为制定土炒当归饮片质量标准提供参考。方法:按照2005年版《中国药典》规定,对土炒当归饮片的性状、显微鉴别、水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物和薄层色谱进行分析,并采用高效液相指纹图谱法对其化学成分及相对含量进行研究。结果:土炒当归表面微挂土色,符合当归饮片土炒的传统炮制标准;其水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的平均含量分别为5.8%、14.6%、6.9%和49.7%,但不同产地当归有明显差异,土炒后灰分和酸不溶性灰分较未炮制前有所增加;建立了不同产地土炒饮片的化学指纹图谱,确定了11个共有峰,其相对含量因产地不同虽略有差异,但色谱图概貌一致,相似度均大于90%。结论:根据《中国药典》规定,并结合高效液相指纹图谱法建立了土炒当归质量评价标准,为土炒当归饮片的生产、经营及鉴定提供参考标准。     

不同产地蜂胶HPLC指纹图谱测定及真伪判定

对不同产地来源的62个蜂胶样品用Venusil MP C184．6mm×250mm,5μm为色谱柱,甲醇：0．4％H3PO4=60：40为流动相,在360nm波长下进行了HPLC的指纹图谱测定。将蜂胶HPLC指纹图谱分为六个区域,提出了以第四区的1号峰、2号峰、5号峰为蜂胶鉴别的主要依据,结合六个区域的指纹图谱进行真伪鉴别。采用本文研究的方法,进行了长期的蜂胶真伪判定实践,证明该方法具有可操作性强、准确度高的特点。     

饲用植物蒲公英水提物HPLC特征图谱研究及聚类和主成分分析

研究旨在运用高效液相色谱法（HPLC）建立饲用植物蒲公英水提物的特征图谱，并用聚类分析和主成分分析对蒲公英水提物进行质量评价。采用Sunfire C18色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸水为流动相，流速为0.8 m L/min，进样量10μL，柱温35℃，检测波长329 nm，将22批蒲公英水提物色图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012年版）中，选取分离度、峰型较好的8个峰为特征峰，得到蒲公英水提物特征图谱，并进行相似度评价、聚类分析和主成分分析。结果表明：试验建立的蒲公英水提物HPLC特征图谱共确定了8个特征峰，指认了单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸和菊苣酸4个色谱峰，相似度结果为0.869～0.999，说明22批蒲公英水提物质量相对稳定；当欧氏距离为4时，聚类分析将22批不同产地的蒲公英分成3类，S6一类，S4一类，其余批次为一类；主成分分析中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸具有最大的贡献度。通过相似度评价、聚类分析和主成分分析与特征图谱相结合，可为蒲公英水提物质量评价提供参考。     

HPLC-PDA法测定17种兽药中非法添加多西环素

建立了17种兽药中非法添加多西环素的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂,以醋酸盐缓冲液-乙腈(80:20)为流动相,二极管阵列检测器进行全波长(200~400 inia)扫描,检测波长为280 nm,并通过液相色谱保留时间、紫外光谱信息和峰纯度检查,对非法添加物质进行定性鉴别和定量测定。结果表明,该色谱条件下,多西环素与其他物质峰分离良好。多西环素在5~500μg/mL浓度范围内线性良好,回收率在86.5%~118.1%之间,RSD为0.2%~4.5%,检测限为0.5 mg/g。本方法准确、可靠、重现性好,可用于兽药制剂中多西环素的定性和定量检测。     

江苏韩信草HPLC指纹图谱及其芹菜素含量测定

为了建立江苏不同产地韩信草高效液相色谱指纹谱图,测定其有效成分芹菜素的含量,试验采用HPLC-二极管阵列检测器,Agilent Eclipse XDB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,0.5%冰醋酸水溶液-乙腈流动相,梯度洗脱,检测波长275 nm的色谱方法对10批江苏不同产地韩信草建立HPLC指纹图谱共有模式,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对谱图进行分析。结果表明:江苏10批不同产地韩信草的HPLC指纹图谱中确定15个共有峰,相似度均大于0.91。指认13号共有峰为芹菜素,线性范围为7.00～70.00 μg/mL(r=0.9997),10批样品芹菜素含量均在1.25～1.48 mg/g。说明多批样品具有一致性。所建立的方法灵敏、准确、重复性好,可作为韩信草药材质量控制的参考依据。     

石香薷水提物HPLC特征图谱的研究

石香薷药材用于精油提取后的水提液中仍含有大量生物活性物质,具有开发为饲料添加剂的价值,从而实现石香薷资源的综合利用。采用HPLC法,按照优化后的色谱条件对24批石香薷水提取物样品的化学成分进行测定分析。建立了不同产地石香薷水提物的HPLC特征图谱,共确定8个特征峰,经对照品比对确定特征峰5、7、8分别为野黄芩苷、迷迭香酸和黄芩素-7-甲醚,设定迷迭香酸为参照峰（S峰）,特征峰1～8的相对保留时间的规定值分别为0.176、0.444、0.495、0.676、0.765、0.954、1.000、1.618,精密度、重复性和稳定性考察中各特征峰相对保留时间的相对标准偏差（RSD）分别为0.03%～0.57%、0.01%～0.31%、0.04%～0.15%,相对峰面积的RSD分别为0.88%～2.60%、1.39%～3.33%、1.95%～4.54%。该研究建立的HPLC特征图谱具有良好的精密度、稳定性和重复性,为石香薷水提物作为饲料添加剂开发的质量控制提供了依据。     

不同灭菌程序对双黄连注射液质量的影响

为优选双黄连注射液最佳灭菌条件,采用《中华人民共和国兽药典》2015版中灭菌法下湿热灭菌法中3种灭菌程序对双黄连注射液进行灭菌,运用高效液相色谱法、中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.0版本)对3批双黄连注射液的3种有效成分含量、指纹图谱相似度进行比较.结果表明,在湿热灭菌法下,双黄连注射液采用121℃×30 m...     

十堰地区连翘叶HPLC指纹图谱的建立及抗氧化抑菌谱效关系研究

试验旨在通过研究十堰地区不同产地连翘叶HPLC指纹图谱与抗氧化、抑菌活性之间的谱效关系，初步确定其抗氧化、抑菌活性物质基础，为其质量控制方法研究提供参考。试验构建十堰地区十个不同产地的连翘叶HPLC指纹图谱，运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）确定共有峰。2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基（ABTS+）清除法测定抗氧化活性，牛津杯法测定连翘叶水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性；灰色关联度和主成分分析法相结合阐明指纹图谱中多成分和药效数据之间的谱效关系。结果显示，连翘叶水提物的指纹图谱确定了13个共有峰，灰色关联度法计算出12个共有峰与抗氧化和抑菌效果的关联度均大于0.6，主成分分析构建的主成分综合评分结果也与实际药理活性结果相符。研究表明，十堰地区连翘叶具备开发潜力，其中以化龙堰和青石村产地的质量最优。连翘叶的抗氧化和抑菌活性为多组分协同作用的结果，特征成分连翘酯苷A、连翘苷、芦丁为强关联药效基础物质，连翘叶水提物整体活性与这些特征成分含量呈正相关。