中药牛皮消多糖体外抗新城疫病毒作用的研究

为探讨牛皮消多糖（CAP）对体外抗新城疫病毒（NDV）能力的影响,本试验用水提醇沉法提取牛皮消多糖,通过苯酚硫酸法和红外光谱对牛皮消多糖进行检测,采用MTT法测定牛皮消多糖对鸡胚成纤维细胞（CEF）的安全浓度,多糖的安全浓度统一为625 μg/mL,选择安全浓度范围内的（39.06~625 μg/mL）5种浓度的各级多糖,用3种加药方式（先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加药）检测牛皮消多糖对NDV的阻断、抑制及直接杀灭作用。结果显示,先接病毒后加多糖组和多糖与病毒感作后加药组CAP₅₀、CAP₃₀、CAP_t、CAP₈₀和CAP₇₀均能显著抑制NDV感染CEF的能力,两组各级多糖抑制率分别为131.23%、110.12%、108.15%、100.24%、93.07%和61.76%、43.73%、44.51%、29.02%、37.45%;先加多糖后接病毒组CAP₅₀、CAP₃₀能显著抑制NDV感染CEF的作用（P<0.05）,阻断作用下对NDV的抑制率可达到15.82%、8.33%,其余各组在安全浓度范围内对NDV无抑制作用。各组中药牛皮消多糖均有较好的抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用和直接杀灭作用强于对其阻断作用。CAP₅₀及CAP₃₀的抗NDV活性较强,可作为进一步研究材料并具备一定的研究价值。     

葫芦多糖体外抗鸡新城疫病毒作用的研究

为研究葫芦多糖抗新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV） 活性,本试验采用水提醇沉法提取葫芦总多糖及4种分级多糖,通过苯酚-硫酸法及红外光谱对葫芦多糖进行检测,MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞（CEF）的安全浓度,多糖的安全浓度统一定为78.125 μg/mL,以3种加药方式（先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加药）,检测葫芦多糖对NDV的阻断、抑制及直接杀灭作用。结果表明,葫芦总多糖及4种分级多糖均具有抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用及直接杀灭作用强于对NDV的阻断作用。70%、80%梯度醇沉的葫芦多糖（LSP₇₀、LSP₈₀）及总多糖（LSP_t）,抑制作用下的病毒抑制率分别为40.41%、44.54%、61.85%,杀灭作用下的病毒抑制率分别为44.74%、58.76%和59.38%,阻断作用下对NDV的抑制率,其中LSP₈₀组最高达37.14%,其余各组均低于25%。综上可知,70%、80%梯度醇沉的葫芦多糖及葫芦总多糖的抗NDV活性较好,可作为进一步研究的材料。     

间接免疫荧光技术研究黄芪多糖体外抗新城疫病毒作用

为探究间接免疫荧光技术辅以MTT法研究黄芪多糖(APS)抗新城疫病毒(NDV)感染鸡胚成纤维细胞(CEF)作用的可行性。将安全浓度范围内不同浓度APS和NDV以预防和治疗两种方式加入CEF培养体系中,MTT法测定CEF活力,间接免疫荧光技术检测NDV增殖情况。结果显示预防组CEF增殖活力强于治疗组,治疗组NDV的增殖量较预防组大,P<0.05或P<0.01。表明间接免疫荧光技术能直观的反应病毒在细胞上的增殖情况,该技术联合MTT法研究中药抗病毒作用可靠、可行。     

玉屏风多糖体外抗新城疫病毒效果的研究

以新城疫病毒(NDV)感染鸡胚和鸡胚成纤维细胞,探索玉屏风多糖(Yupingfeng polysaccharides YPF-P)及其含药血清的抗病毒效果。SPF兔采用500 mg/kg体重YPF-P灌服给药,于第1、3、5、7天采集全血,制备不同浓度含药血清;培养SPF鸡成纤维细胞(CEF),分别加入不同浓度的YPF-P及其含药血清,进行细胞毒性试验;采用先加多糖后加病毒、先加病毒后加多糖、多糖和病毒感作后同时加入的3种给药方式,观察YPF-P及其含药血清对病毒的阻断、抑制和直接杀灭作用。结果与正常对照组相比,不同浓度YPF-P(0.625、1.25、2.5、5、10 mg/m L)和7 d的YPF-P含药血清的CEF细胞活性均显著增强(P<0.05或P<0.01)。CEF培养24 h后,YPF-P抑制病毒作用明显,与NDV对照组相比差异极显著(P<0.01);3种给药方式与NDV对照组相比,含药血清组细胞活性均极显著升高(P<0.01)。表明YPF-P及其含药血清均对CEF无毒副作用,且可显著增强细胞活性;YPF-P及其含药血清有较好的抑制病毒毒性的作用。     

七种中药抗鸡新城疫病毒作用的研究

金银花、板蓝根、黄芪、蒲公英、鱼腥草、连翘和黄芩7种中药是临床常用于防治畜禽疾病的药物,其对鸡新城疫病毒的抗病毒效果试验未见系统研究。试验通过鸡胚法研究了7种中药对鸡新城疫病毒的抗病毒效果,为其临床应用和药物组方奠定了理论基础。现将结果报道如下。1试验材料鸡新城疫病毒(NDV)LaSota株,由黑龙江八一农垦大学动物科技学院微生物教研室提供;金银花、板蓝根、黄芪、蒲公英、鱼腥草、连翘、黄芩,均购自哈尔滨市中药材批发市场;9日龄非免疫鸡胚,购自哈尔滨市某种鸡场。2试验方法2.1中药溶液的制备采用水提醇沉法提取中药有效成分…     

新城疫病毒糖蛋白致病作用的研究

本实验以分子生物学和现代免疫学方法,对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国毒株Ｆ４８Ｅ９和ＬａＳｏｔａ等毒株的糖蛋白的致病作用进行了探讨。结果表明,ＮＤＶ Ｆ和ＨＮ蛋白为糖蛋白,强弱毒株之间Ｆ蛋白裂解位点的氨基酸序列有明显的不同,并决定了毒株的毒力,但ＮＤＶ的致病作用尚需ＨＮ、Ｆ蛋白的协同作用,单一的Ｆ或ＨＮ蛋白不能构成ＮＤＶ的致病作用。     

3种中药成分组方体外抗新城疫病毒作用研究

在已知的3种具有较强抗新城疫病毒(NDV)作用的中药成分组方的基础上,利用细胞病变观察与MTT比色相结合的方法,研究这3种组方对NDV吸附DF1细胞及其增殖、释放过程的影响。结果显示:在吸附阻断试验中,3种组方均能阻碍病毒吸附细胞或阻断已吸附上细胞的病毒进入细胞,说明组方浓度、组方加入方式和病毒吸附时间均能够影响病毒对细胞的感染;在复制抑制和病毒释放阻断试验中,测定的试验组OD570值显著高于相应的病毒对照组,说明3种组方均能够抑制病毒的增殖和阻碍病毒的释放。结果表明,3种组方能够阻断NDV吸附细胞和/或干扰病毒的增殖和释放而表现抗病毒作用。     

抗新城疫病毒中药组方的筛选及其抗病毒作用

首先从三七总皂苷、菊花总黄酮、黄芩苷、氧化苦参碱、板蓝根生物碱、黄芪多糖及板蓝根多糖中选取三种中药成分按照一定比例组成10个中药组方,随后将这些组方先在细胞上筛选,选出抗新城疫病毒作用较强的组方,最后应用鸡胚接种试验验证其抗病毒活性。结果表明,通过细胞筛选,组方1、5、6、7、9、10的抗病毒效果最好,通过鸡胚接种试验测定后各组方试验组的血凝价显著低于病毒对照组,说明各组方均有较好的抗病毒作用,并且不同加药方式及药物浓度均对其抗病毒能力有一定的影响。     

抗新城疫病毒因子抗病毒作用的研究

用新城疫病毒乳化疫苗免疫鸡，从高免卵黄中提取抗新城疫病毒因子，观察其对未免疫和免疫过的新城疫流行鸡群的治疗效果。结果对未免疫的新城疫流行鸡群的保护率为４４％（Ｐ〈０．０５），对免疫过的新城疫流行鸡群的保护率为８９％（Ｐ〈０．００１），临床治疗也显示出较好的效果。该因子在冰箱中贮存４ａ不失效。该制剂可能为防治鸡新城疫提供一种新的方法。     

新城疫病毒弱毒疫苗的免疫研究

新城疫病毒长春株（ＮＤＶ ＣＣ株）经生物学及分子生物学特性研究证明为新城疫病毒弱毒株,以ＮＤＶ ＣＣ毒株制成弱毒疫苗,采用饮水、滴鼻和肌肉注射免疫等方式,分别免疫７日龄雏鸡,免疫鸡未出现不良反应。免疫后７ｄＨＩ效价为２＾５以上,６０ｄ后均能维持较高的ＨＩ值,免疫后１４ｄ用ＮＤＶ强毒攻击,其保护率可达到１００％（１０／１０）。     

中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒抑制作用研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金丝桃素混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药金丝桃素注射液对鸡胚无毒性作用。中药金丝桃素与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫是由新城疫病毒引起禽类的高度接触性传染病。该病表现为发病较急、死亡率较高,给养禽业造成巨大的经济损失。该病被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病。本文主要叙述了新城疫病毒基因组的结构和功能,以及新城疫疫苗的最新进展。     

新城疫病毒载体研究进展

随着反向遗传学操作技术的发展,重组新城疫病毒载体成为当今病毒载体系统研究的热点之一.论文在综述了新城疫病毒的安全性评价、分子生物学特性的基础上,着重介绍了以新城疫病毒作为病毒载体表达外源基因应用于基础研究、疫苗研究和作为基因治疗载体等研究概况.     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、高度接触性禽类传染病,被世界动物卫生组织(OIE)定为法定必报传染病,我国也将其列为一类动物疫病,本文从新城疫病毒的形态及分子结构、致病力的分子基础、分子流行病学特征和基因工程疫苗等分子生物学相关研究进展进行了综述。     

五种中草药抗鸡新城疫病毒作用研究

本实验对山茶叶、轮叶党参、卵叶芍药、苦味西葫芦、狼毒大戟5种中草药的提取物进行了体外、体内抗鸡新城疫病毒(NDV)筛选，结果表明山茶叶抗NDV作用较强，其对NDV的灭活率和抑制率分别为56．14％、58．59％。     

白毛藤生物碱体外抗新城疫病毒作用研究

采用醇提法从白毛藤中提取了水溶性生物碱和脂溶性生物碱,并测定其对鸡胚成纤维细胞的最大无毒浓度(TD0)、半数中毒浓度(TD50)、抑制50%细胞病变的药物浓度(IC50)和治疗指数(TI),应用先加药物后接种病毒、先接种病毒后加药物、病毒和药物同时加入、病毒和药物体外作用2h后再同时加入四种方式测定了生物碱的体外抗NDV效果.试验结果表明:白毛藤水溶性生物碱的TD0、TD50、IC50和TI分别为6.25mg/ml、11.32 mg/ml、2.48 mg/ml和5.脂溶性生物碱的TD0、TD50、IC50和TI分别为6.25mg/ml、14.27 mg/ml、1.56 mg/ml和9;两种生物碱均有一定的抗NDV作用,其中水溶性生物碱以先加药物后加病毒的方式抗病毒效果较强.脂溶性生物碱以先接种病毒后加药及病毒和药物体外作用2h后再同时加入的方式抗病毒效果较强,且与其浓度成正相关.     

地榆水提液抗新城疫病毒作用研究

为探索地榆水提液对新城疫病毒(NDV)的作用,将1 g生药/m L地榆水提液倍比稀释后分别接种9~11日胚龄鸡胚,通过观察鸡胚孵化情况测定药物的安全浓度。结果表明地榆水提液在≤12.5 mg/个时鸡胚均能孵化出壳。在此基础上设定6.25和3.125 mg/个两个浓度并通过3种加药模式以10×ELD50NDV接种9~11日胚龄鸡胚。通过鸡胚存活时间、72 h胚体长度以及各组尿囊液HA阳性率的测定研究药物对NDV的作用。结果表明攻毒对照组鸡胚于72 h内全部死亡,HA阳性率达100%,而药物处理组鸡胚的存活时间和胚体长度均长于攻毒对照组,6.25 mg/胚处理组中混合作用组、先加药组和后加药组的HA阳性率分别为0、6.7%、26.7%,3.125 mg/胚处理组的分别为0、6.7%、40%。本试验表明地榆水提液在鸡胚中对NDV具有明显的预防和直接抑制作用。     

纳米银体外抗新城疫病毒作用及机制研究

为研究纳米银体外抗新城疫病毒(NDV)的作用,并初步探讨其作用机制,运用细胞培养技术和MTT方法,分析纳米银对NDV感染HeLa细胞的预防、治疗作用以及对NDV的直接灭活作用;通过血凝抑制试验和神经氨酸酶活性抑制试验,观察纳米银对血凝素—神经氨酸酶活性物质的影响;采用透射电镜负染技术观察纳米银对新城疫病毒形态结构的直接影响.结果显示:NDV可通过不同途径感染HeLa细胞,纳米银组的细胞存活率与NDV对照组比较有明显的统计学差异(P＜0.01);在体外将NDV和纳米银作用不同时间后,NDV血凝效价明显降低;纳米银对NDV神经氨酸酶活性的抑制率均高于80％,而病毒对照组和溶剂组的抑制率均低于20％;透射电镜观察表明,纳米银对NDV形态结构的破坏作用随着时间的延长而增加.结果表明,纳米银在体外对NDV具有明显的抑制作用,其抑制机制可能与纳米银破坏病毒粒子结构及抑制神经氨酸酶活性有关.     

鸵鸟新城疫病毒分子流行病学研究

应用RT-PCR、基因序列测定和分析以及鸡胚平均死亡时间(MDT)等方法,对1997～2000年间从中国北方分离的10株鸵鸟源新城疫病毒进行了F-糖蛋白基因序列测定、系统进化分析、基因分型和毒力测定。结果显示：10株鸵鸟源新城疫病毒分属Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ四个基因型。除1株为中发型毒株,其他均为速发型毒株；分析表明,引起鸵鸟发病的新城疫毒株有多种不同的来源。