沙冬青种子总黄酮活性成分分析及对小鼠免疫功能的影响

本研究旨在通过高效液相色谱-质谱联用（LC-MS）和高效液相色谱（HPLC）技术对沙冬青种子总黄酮主要活性成分进行分析及含量测定,并探索沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫功能的影响。采用LC-MS分析沙冬青种子总黄酮主要活性成分,在HPLC优化条件下用标准品对主要活性成分的含量进行测定;采用MTT法和ELISA试剂盒检测沙冬青种子总黄酮对小鼠脾淋巴细胞增殖和IL-2、IL-4生成的影响,以及总黄酮对肝脏KCs细胞的增殖和NO、NOS含量的影响;运用定量溶血分光光度法和血清溶血素HC₅₀测定法检测不同浓度沙冬青种子总黄酮对小鼠抗体生成细胞和血清溶血素的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮中主要活性成分为芒柄花素、7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄酮、黄豆黄素和穗花杉双黄酮,其中,芒柄花素含量高达52.48%,其次为7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄酮,含量为11.20%。在2.5~100 μg/mL总黄酮作用下,沙冬青种子总黄酮对脾淋巴细胞的增殖和细胞因子的产生具有明显的促进作用,尤其在20 μg/mL时脾淋巴细胞增殖率和IL-2的分泌量分别高达217.62%和159.661 pg/mL,与空白对照组相比差异极显著（P<0.01）;在40 μg/mL时,脾淋巴细胞IL-4的分泌量高达149.274 pg/mL,极显著高于空白对照组（P<0.01）。沙冬青种子总黄酮对KCs细胞的增殖及NO和NOS分泌也具有明显促进作用,在60 μg/mL时,与空白对照组相比,KCs细胞增殖率达67.77%,NO和NOS的分泌量分别达180.106和29.942 μmol/L（P<0.01）。此外,沙冬青种子总黄酮能明显促进小鼠体内抗体生成细胞和血清溶血素含量的增加。综上表明,沙冬青种子总黄酮主要活性成分为芒柄花素和7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄酮。沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫活性细胞的增殖、相关免疫细胞因子和抗体的产生与释放等都具有显著的促进作用。     

沙冬青种子总黄酮对免疫抑制小鼠免疫功能及胸腺和脾超微结构的影响

旨在深入探讨沙冬青种子总黄酮对免疫抑制小鼠的免疫功能及胸腺和脾超微结构的影响。将100只昆明种小鼠随机分为5组:空白对照组、免疫抑制组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,每组20只(雌雄各半),采用灌胃法给药,前7d,免疫抑制组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组与试验Ⅲ组小鼠均灌胃0.6mL环磷酰胺溶液;后21d,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别灌胃0.6mL黄酮剂量为50、150、250mg·(kg·d)~(-1)的总黄酮溶液,未明确写出的组别和时间点在上述给药时段相应灌胃0.6 mL生理盐水。试验28d后,分别测定碳粒廓清指数和脏器指数(胸腺、脾)及小鼠血清IL-2、IL-4含量。同时,采用扫描电镜观察脾和胸腺结构。结果表明,灌胃环磷酰胺可复制小鼠免疫抑制模型。不同剂量的沙冬青种子总黄酮能不同程度提高免疫抑制小鼠胸腺和脾指数、碳粒廓清指数、吞噬指数以及血清IL-2和IL-4含量,尤其试验Ⅱ组,总黄酮灌胃剂量为150mg·(kg·d)~(-1),其效果最为突出,与免疫抑制组比较均差异极显著(P0.01)。电镜观察显示,沙冬青种子总黄酮不同剂量试验组小鼠胸腺、脾中成熟淋巴细胞数量与免疫抑制组小鼠比较均不同程度增多,尤其试验Ⅱ组中成熟淋巴细胞数量增多最明显(P0.01),且淋巴细胞排列紧密,与周围间质间隙明显减少。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮可通过促进免疫器官淋巴细胞的增殖和成熟,改善和修复受损免疫器官组织结构,从而达到改善和增强免疫抑制小鼠免疫功能的作用,且在一定范围内具有剂量依赖效应。     

沙冬青种子总黄酮提取纯化与急性毒性及抗氧化活性研究

本研究旨在探讨沙冬青种子总黄酮的提取纯化、急性毒性和抗氧化活性等特性。采用超声辅助提取法提取纯化沙冬青种子总黄酮,用AlCl_3-CH_4O显色法进行沙冬青种子总黄酮含量测定;对纯化后沙冬青种子总黄酮进行急性毒性试验;采用体外Fenton体系产生羟基自由基(·OH)和邻苯三酚自氧化法产生超氧自由基(O^-_2),检测沙冬青种子总黄酮对·OH和O^-_2的清除作用;测定沙冬青种子总黄酮对衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮含量测定方法的精密度(RSD=0.78%)、重复性(RSD=0.52%)、稳定性(RSD=0.65%)、回收率(99.140%)均在误差范围内,提取纯化后沙冬青种子总黄酮含量达86.780%。沙冬青种子总黄酮属于无毒化合物,并对·OH和O^-_2具有良好的清除能力,在总黄酮作用剂量为1 250μg/mL时,对·OH和O^-_2的清除率分别达96.45%和50.39%。与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著提高小鼠血清SOD活力(P<0.01),其中,在150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组,小鼠血清SOD活力高达102.42 U/mL。此外,与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著降低小鼠血清中MDA含量(P<0.01),以150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组降低效果最明显。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮具有良好的自由基清除能力和抗氧化活性,从而有效改善和提高机体免疫力。     

沙冬青种子总黄酮提取纯化与急性毒性及抗氧化活性研究

本研究旨在探讨沙冬青种子总黄酮的提取纯化、急性毒性和抗氧化活性等特性。采用超声辅助提取法提取纯化沙冬青种子总黄酮,用AlCl_3-CH_4O显色法进行沙冬青种子总黄酮含量测定;对纯化后沙冬青种子总黄酮进行急性毒性试验;采用体外Fenton体系产生羟基自由基(·OH)和邻苯三酚自氧化法产生超氧自由基(O~-_2),检测沙冬青种子总黄酮对·OH和O~-_2的清除作用;测定沙冬青种子总黄酮对衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮含量测定方法的精密度(RSD=0.78%)、重复性(RSD=0.52%)、稳定性(RSD=0.65%)、回收率(99.140%)均在误差范围内,提取纯化后沙冬青种子总黄酮含量达86.780%。沙冬青种子总黄酮属于无毒化合物,并对·OH和O~-_2具有良好的清除能力,在总黄酮作用剂量为1 250μg/mL时,对·OH和O~-_2的清除率分别达96.45%和50.39%。与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著提高小鼠血清SOD活力(P0.01),其中,在150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组,小鼠血清SOD活力高达102.42 U/mL。此外,与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著降低小鼠血清中MDA含量(P0.01),以150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组降低效果最明显。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮具有良好的自由基清除能力和抗氧化活性,从而有效改善和提高机体免疫力。     

地锦草总黄酮对小鼠免疫功能及细胞因子mRNA表达影响

探讨地锦草总黄酮对小鼠免疫功能及细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-αmRNA表达影响。将小鼠随机分成4组：地锦草总黄酮高剂量组（H组）、中剂量组（M组）、低剂量组（L组）和纯水对照组（C组）,连续灌胃9 d后,检测其单核巨噬细胞吞噬功能、2%绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应、肝脏指数和脾脏指数,并用逆转录酶-聚合酶链式反应的方法检测脾脏IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA表达水平。结果显示,地锦草总黄酮3个剂量组脾脏指数、廓清指数（K）、吞噬指数（α）、24 h足跖增厚值均显著高于C组;M组和H组肝指数显著高于C组（P〈0.01）;3个剂量组均能提高IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA的表达水平,与C组相比,H组最显著。试验结果表明,地锦草总黄酮能有效提高机体的免疫功能及IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-αmRNA表达。     

插田泡总黄酮对小鼠免疫器官和抗氧化活性的影响

为研究插田泡总黄酮对小鼠免疫功能和抗氧化活性的影响,利用75%乙醇浸提获得插田泡总提取物,通过柱层析纯化得到插田泡总黄酮;45只昆明系雌鼠随机分为5组,分别用生理盐水、左旋咪唑和低、中、高剂量插田泡总黄酮灌胃21 d后,比较小鼠脏器指数,通过超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)3个抗氧化活性指标评估不同浓度插田泡总黄酮对小鼠免疫功能的影响。结果表明,在一定浓度范围内,插田泡总黄酮可以提高小鼠胸腺指数,且浓度越高,小鼠的SOD和T-AOC活性提高越明显,抑制MDA活性越强,抗氧化作用较为明显,初步表明插田泡总黄酮具有一定的增强机体免疫和抗氧化活性的作用。     

氟磺胺草醚对小鼠免疫功能的影响

氟磺胺草醚作为一种常见的选择性除草剂被广泛地应用于农作物生产中,其对生态环境具有一定的毒害作用。为研究氟磺胺草醚对小鼠免疫功能的毒性作用,试验各取32只小鼠随机分成空白对照组和3个不同剂量组,灌服给药8d后,测定其对小鼠免疫器官脏器指数及对小鼠胸腺和脾脏的脏器指数的影响,进行迟发型超敏反应试验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。结果表明,氟磺胺草醚能降低胸腺、脾脏的脏器指数;不能使小鼠迟发型变态反应减弱;抑制了吞噬细胞的吞噬功能,这表明氟磺胺草醚具有一定免疫毒性。     

亚硝酸钠对小鼠免疫功能的影响

为了研究亚硝酸钠对小鼠免疫功能的影响,试验采用分别给小鼠灌服不同剂量(12.5 mg/g、25 mg/g和50 mg/g)亚硝酸钠的方法,对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫系统中白细胞、淋巴细胞和酸性α-乙酸萘酚酯酶(ANAE)染色阳性T淋巴细胞数量以及体液免疫中血清溶血素含量等指标进行研究。结果表明:与对照组相比,灌服亚硝酸钠组小鼠的免疫器官相对重量、白细胞和淋巴细胞数量、ANAE染色阳性T淋巴细胞数量及血清中溶血素含量降低,且灌服亚硝酸钠的剂量越高,差异越显著。说明亚硝酸钠对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能有不同程度的抑制作用。     

AEWP对小鼠免疫功能的影响

近年来,由应激而导致家畜免疫功能低下,使得条件感染性疾病大量增加,对养殖业的发展造成了很大影响.条件病的病因很复杂,常由一种或几种病因引起,采用特异性免疫非常困难.目前习惯上采用抗菌类药物治疗,它们在预防和治疗家畜疾病方面起到了重要作用,但与此同时引起的药物残留及细菌耐药性亦日渐突出.因此,如何提高家畜非特异免疫力,增强自身抗病力,成为人们普遍关心的问题.     

甘氨胆酸对小鼠免疫功能的影响

目的:观察甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)对正常及免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:应用环磷酰胺或环孢菌素A所致的免疫抑制模型;采用ELISA及比色法观察了GCA对体液免疫的影响,碳廓清法测定了GCA对单核巨噬细胞的吞噬功能的影响,迟发型皮肤变态反应法观察了GCA对二硝基氯苯丙酮溶液所致小鼠迟发型皮肤过敏反应的影响,并测定了血清中IL-2、TNF-α的含量。采用流式细胞术检测了GCA对小鼠外周血T细胞亚群CD4、CD8比例的影响。结果:GCA能够显著增强正常及抑制小鼠的IgMI、gG的含量;增加外周血中T淋巴细胞CD4比例,使CD4 /CD8 比值提高;显著抑制迟发型皮肤变态反应的发生,并增加IL-2及TNF-α的含量。结论:GCA能够显著提高非特异性免疫功能;显著增强机体的体液免疫能力;显著抑制迟发型变态反应,增强正常及CsA抑制小鼠CD4 百分率、CD4 /CD8 比值,GCA具有调节机体免疫功能的作用。     

钼对小鼠免疫功能的影响

钼（Mo）是动物、植物、微生物及人类必需的微量元素，是黄嘌呤氧化酶，醛氧化酶，亚硫酸氧化酶的组成成分，参与电子传递及铁的释放与运输，影响多种物质的代谢，具有重要的生理学功能。但过量的钼可导致动物中毒，并以反刍动物最为敏感。1938年Ferguson首次报道了牧草中钼含量过高，可使放牧牛产生以剧烈腹泻为特征的中毒性疾病。目前，有关钼对动物免疫功能的影响研究较少。本试验通过对小鼠日常饮水中加入不同剂量的钼，研究钼对小鼠免疫功能的影响，为动物钼中毒防治及科学饲养提供资料。     

多糖对小鼠免疫功能的影响

为了探讨黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖对动物免疫功能的影响,本试验分为对照组和黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖组,每组选用昆明种40只,对照组灌胃1m L生理盐水,黄芪多糖、酵母胞壁多糖、虫草菌丝体多糖组,每只小鼠分别灌胃多糖140mg/kg体重,每隔10d取一次样,分别检测增重率、免疫器官指数和Ig G。结果表明:黄芪多糖、酵母胞壁多糖和虫草菌丝体多糖均可显著提高小鼠增重率、免疫器官指数及外周血Ig G含量(P0.05),说明3种多糖均能提高小鼠免疫力。     

飞机草总黄酮对小鼠免疫调节功能的影响

探讨飞机草总黄酮对免疫抑制小鼠血清免疫相关细胞因子、免疫球蛋白及免疫器官组织结构的影响。选取72只昆明小鼠随机分为6组,试验期共21 d,在试验期1-14 d,空白对照组和免疫抑制组灌胃蒸馏水,药物阳性对照组灌胃50 mg/(kg·d)左旋咪唑,飞机草总黄酮低剂量、中剂量、高剂量分别灌胃30 mg/(kg·d)、150 mg/(kg·d)和750 mg/(kg·d)总黄酮;在试验期15-21 d,空白对照组仍灌胃蒸馏水,其余各组均灌胃50 mg/(kg·d)环磷酰胺。应用酶联免疫吸附法检测小鼠血清IgG、IgM、IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,应用H.E染色法观察小鼠疫器官组织结构病理变化。结果发现各组小鼠胸腺指数、脾脏指数与空白对照组相比较均极显著下降(P<0.01);与免疫抑制组相比较,药物阳性对照组与高剂量组胸腺指数显著升高(P<0.05),高剂量组脾脏指数显著升高(P<0.05)。各组IFN-γ与空白对照组相比显著下降(P<0.05),IL-2无显著变化,免疫抑制组TNF-α较空白对照组显著下降(P<0.05),中剂量、高剂量组TNF-α较免...     

藤茶总黄酮对仔猪血清生化指标及免疫功能的影响

试验旨在研究藤茶总黄酮(AGF)对仔猪血清生化指标及免疫功能的影响。选取24头健康的仔猪随机分成4组,每组6头,对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂添加0.25%、0.5%、1%AGF的基础日粮,试验期为40d。饲养试验结束后,每组抽取2头仔猪血液进行血清生理生化指标测定。结果显示,仔猪日粮中添加AGF能够极显著提高血清白蛋白(ALB)的含量(P<0.01);降低仔猪血清尿素氮(BUN)含量,其中0.5%、1%组与对照组相比差异极显著(P<0.01);各试验组甘油三酯(TG)的含量均有所降低,其中0.25%和1%组与对照组相比差异显著(P<0.05);各试验组仔猪血清中的谷草转氨酶(AST)含量显著低于对照组(P<0.05),碱性磷酸酶(ALP)含量均有所提高,其中0.5%组与对照组相比差异极显著(P<0.01);日粮中添加AGF能够极显著的提高仔猪血清免疫球蛋白M(IgM)的含量(P<0.01),0.5%和1%组血清中免疫球蛋白G(IgG)的含量极显著高于对照组(P<0.01);0.25%和0.5%组一定程度上提高仔猪血清补体C3、C4的含量。综上所述,AGF能够增强仔猪机体代谢能力及免疫功能。     

茯苓散对免疫低下小鼠免疫功能的影响

用氢化可的松注射液制造免疫功能抑制小鼠模型,以左旋咪唑及黄芪多糖为阳性对照,设计茯苓散高(200mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)3个剂量组(以茯苓多糖计)。给各组分别灌注生理盐水或药物,连续14d。试验从3个方面6个试验进行茯苓散药效学方面的考察,即巨噬细胞功能测定(小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、茯苓散对小鼠非特异性免疫功能的影响—碳粒廓清法)、细胞免疫功能测定(茯苓散对小鼠免疫器官的影响、茯苓散对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应的影响)、体液免疫功能测定(抗体生成细胞检测、血清溶血素的测定)。结果显示,茯苓散3个剂量组均能显著提高免疫低下小鼠吞噬细胞的吞噬活性(P<0.05),吞噬细胞功能结果为阳性;茯苓散中、高剂量组能刺激脾脏、胸腺质量的增加(P>0.05),也能显著促进免疫低下小鼠的迟发型变态反应(P<0.05),细胞免疫功能结果为阳性;茯苓散3个剂量组均能显著提高小鼠的抗体生成细胞数(P<0.05),且显著增强小鼠血清凝集素水平(P<0.05),体液免疫功能结果为阳性。其中中剂量组效果最好,表明茯苓散对免疫低下小鼠的免疫功能有一定的增强作用。     

中药复方对小鼠免疫功能的影响

为了筛选能够提高免疫抑制小鼠免疫水平的中药复方。本试验采用环磷酰胺人工建立小鼠免疫低下模型。将造模成功的小鼠随机分为中药复方高、中、低剂量组(40 g/kg体重、20 g/kg体重、10 g/kg体重),模型组,阳性药物组,设置空白对照组。检测各组小鼠免疫器官指数、血清溶血素水平、腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清中免疫球蛋白Ig G、Ig M含量。结果显示:与模型组比较,复方中、低剂量组小鼠体重增长数较高,脾脏指数显著性升高(P<0.05);复方高、中、低剂量组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、吞噬指数均显著性升高(P<0.05);复方中剂量组小鼠血清溶血素含量、血清中Ig G、Ig M含量极显著性升高(P<0.01)。结果表明,中药复方中剂量组能有效拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用,提高免疫抑制小鼠的免疫功能。     

紫芪颗粒对小鼠免疫功能的影响

为研究紫芪颗粒对小鼠免疫功能的影响,利用氧化可的松造免疫抑制小鼠病理模型,分组后分给高、中、低浓度的紫芪颗粒溶液,检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数;外周血淋巴细胞E-玫瑰花环形成率;血清溶血素值;脾脏指数.结果显示,紫芪颗粒对特异性体液免疫功能和特异性细胞免疫功能以及非特异性免疫功能有增强作用.     

地黄提取物对小鼠免疫功能的影响

为研究地黄提取物对小鼠免疫功能的影响,灌胃给予小鼠地黄提取物,通过免疫器官指数、小鼠碳粒廓清指数、白细胞总数,流式细胞仪检测NK细胞活性,ELISA试剂盒检测血清中IL-2、TNF-α生成水平评价地黄提取物对小鼠非特异性免疫的影响;通过流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群(CD4~+T/CD8~+T),MTT法检测脾淋巴细胞增殖水平、血清溶血素抗体生成水平以及血清中IgG、IgA含量评价地黄提取物对小鼠特异性免疫的影响。结果显示,地黄提取物可显著提高免疫器官指数,提高碳粒廓清指数,IL-2和TNF-α水平也明显提高。T淋巴细胞比值、血清溶血素水平及脾淋巴细胞增殖率显著提高;地黄提取物不同剂量组小鼠血清IgG、IgA水平也有不同程度地提高。结果表明,地黄提取物能促进小鼠免疫功能。     

金乌散对小鼠免疫功能的影响

为了对金乌散中药复方进行实验室药效学评价,我们开展了金乌散对小鼠免疫功能影响的研究。本试验采用碳廓清法测定金乌散对单核巨噬细胞吞噬功能的影响;采用比浊法测定金乌散对小鼠血清中溶酶菌含量的影响;采用迟发型皮肤变态反应法澌定金乌散对小鼠迟发型皮肤过敏反应的影响;采用血清溶血素法测定对绵羊红细胞所致的小鼠溶血素抗体生成的影响。研究结果显示,金乌散对单核巨噬细胞的吞噬功能有显著的抑制作用,并能显著提高溶酶菌的含量,对迟发型皮肤过敏反应也有显著的抑制作用,而且能增加溶血素的含量。因此,该中药组方可影响小鼠的非特异性免疫功能和特异性免疫功能。