ICR小鼠胰岛内nestin阳性细胞的分离培养及特性鉴定

通过向ICR小鼠胆总管注射胶原酶Ⅴ的方法体外分离胰岛,并从中分离培养出nestin一细胞,之后通过低糖、低血清诱导其分化产生类胰岛样细胞团.结果显示,小鼠胰岛内存在nestin-细胞,将其分离纯化后在体外低糖(2.5 mmol/L)和低血清(2％)条件下可诱导分化为胰岛样细胞团；表明nestin-细胞具有胰腺干/祖细胞的特性.     

胰腺胚胎发育调控机制及胰腺干细胞诱导分化方法研究进展

近年来糖尿病发病率逐年增加,研究如何控制和预防糖尿病成为世界性课题。传统的治疗方法不仅不能从根本上解决高血糖也不能有效地控制糖尿病并发症。胰岛移植技术的出现为临床治疗糖尿病提供了新的途径,但是胰岛数量的不足和胰岛移植出现的免疫排斥反应制约了胰岛移植技术的发展。因此,通过自体胰腺干细胞分化修复胰腺组织从而达到平稳血糖和控制糖尿病并发症成为一种新的技术手段。论文综述胰腺胚胎发育调控机制、胰腺干细胞的定位及体外诱导分化方法等方面的研究进展。     

牛磺酸对STZ诱导大鼠胰岛细胞外液中SOD、GSH-PX、MDA及T-AOC含量的影响

试验旨在研究牛磺酸(Tau)对链脲佐菌素(STZ)处理后的胰岛细胞保护作用,探讨牛磺酸防治糖尿病的作用机制,为应用牛磺酸防治糖尿病提供理论依据。将体重为250~300 g大鼠麻醉后,胆总管原位灌注胶原酶V,38 ℃水浴消化胰腺组织。Histopaque 1077密度梯度离心纯化胰岛细胞,DTZ检测纯度,葡萄糖刺激检测胰岛细胞活性;再将分离纯化后的胰岛细胞分成6组:正常对照组(对照组)、牛磺酸对照组、链脲佐菌素组(STZ组) 、牛磺酸高剂量组(20 mmol/L Tau组)、牛磺酸中剂量组(10 mmol/L Tau组)、牛磺酸低剂量组(5 mmol/L Tau组);培养24 h后,测定细胞外液中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)的含量。结果表明,3个水平的Tau组和Tau对照组胰岛细胞外液中的SOD、GSH-Px、T-AOC的含量较STZ组有明显的提高。同时3个水平的Tau组和Tau对照组胰岛细胞外液中的MDA较STZ组有明显的降低。因此,牛磺酸能够提高STZ诱导的胰岛细胞抗氧化能力,从而对胰岛细胞具有一定的保护和修复作用。     

Ⅱ型糖尿病大鼠动物模型的构建与验证

将171只体质量200~250g 7周龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(Ⅰ组,25只)和Ⅱ型糖尿病模型组(Ⅱ组,146只),采用高脂高糖饲料喂养结合STZ腹腔注射的方法建立Ⅱ型糖尿病大鼠动物模型,定期对大鼠体质量、空腹血糖、糖耐量、血清胰岛素及胰腺组织等指标进行检测。结果显示:第42天,与正常对照组相比,模型组大鼠体质量显著升高(P0.05),血糖无明显差异(P0.05),糖耐量曲线下面积增大(P0.05),胰腺外分泌腺内大量脂肪异位沉积;第56天,与正常对照组相比,模型组体质量显著降低(P0.05),血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数显著升高(P0.05),糖耐量曲线下面积显著增大(P0.05),胰岛素敏感指数显著降低(P0.05),胰岛减小、减少,胰岛形状不规整,部分胰岛细胞内脂质沉积;模型组成模率70%、死亡率5%、淘汰率25%。结果表明:对SD大鼠采用高脂高糖配方饲料结合低剂量链脲佐菌素腹腔注射可成功制备Ⅱ型糖尿病大鼠动物模型,并具有Ⅱ型糖尿病基本特征胰岛素抵抗及胰岛β细胞轻度损伤同时出现的临床特点,是研究Ⅱ型糖尿病及其新药开发的理想动物模型。     

刺五加对糖尿病动物模型的降血糖影响初探

为了探讨长白山天然野生刺五加对实验性糖尿病小鼠血糖的影响,试验选用昆明种小鼠,禁食12h,腹腔注射四氧嘧啶,选择性破坏胰岛β细胞,造成小鼠实验性糖尿病模型。取40只糖尿病模型小鼠随机分为刺五加高、中、低剂量组和四氧嘧啶模型组,另取重量相近的正常10只昆明种小鼠作为空白对照组。刺五加高、中、低剂量组分别给予5.00,1.25,0.25g/kg的刺五加水煎液灌胃,四氧嘧啶模型组和空白对照组给予同体积的生理盐水。连续灌胃15d,测定其空腹血糖,观察模型小鼠血糖变化。结果表明,刺五加高、中剂量组的血糖值分别为（13.51±1.42）mmol/L、（15.39±0.79）mmol/L,与模型对照组（19.62±1.28）mmol/L相比,极显著降低血糖水平（P＆lt;0.01）。低剂量组（17.39±0.64）mmol/L与模型对照组相比,差异显著（P＆lt;0.05）。由此可见,长白山野生刺五加对实验性小鼠具有降血糖作用。     

胰腺干细胞体外诱导分化研究进展

胰腺干细胞是一种多能干细胞,具有无限分裂和永久自我更新的能力,可在特定因素的影响或诱导下,分化成胰腺导管、胰岛、外分泌腺泡等特定胰腺组织类型,甚至肝细胞.由胰腺干细胞诱导分化的胰岛β细胞在治疗Ⅰ型糖尿病和纠正部分Ⅱ型糖尿病中具有重要意义.论文就胰腺干细胞的存在部位、诱导干细胞为胰岛β细胞的生物活性物质、诱导分化为胰腺β细胞的方法及调控胰腺干细胞分化的信号通路等方面做一综述.     

干细胞治疗1型糖尿病研究进展

1型糖尿病是一种具有遗传倾向的慢性病。该类型糖尿病是由胰岛β细胞受到自身免疫的攻击产生不可逆破坏所致,属于胰岛素依赖性糖尿病。传统的治疗方法有胰岛素注射治疗和胰腺胰岛移植等。近几年随着干细胞研究的发展,诱导干细胞分化形成可分泌胰岛素的类β细胞的技术日渐完善,这为治疗1型糖尿病提供了新的技术支持。文章阐述了1型糖尿病的发病机制及干细胞应用于糖尿病治疗的研究进展。     

单侧肾切除联合链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠建模方法改进与评价

优化单侧肾切除联合链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DKD)大鼠建模方法,研究该模型大鼠的肾脏病变特点,为药物药效学评价和临床基础研究提供稳定平台。选取健康雄性大鼠12只,随机分为单侧肾切组(UNX组)和糖尿病肾病组(DKD组)。采用背侧横行切口配合皮内缝合的方法切除右肾,术后大鼠腹腔一次性注射STZ 40mg/kg诱导糖尿病,UNX组大鼠给予相同剂量柠檬酸缓冲液。动态检测两组大鼠体重、血糖、24h尿蛋白变化,并于第12周末观察大鼠肾脏病变。采用该手术方式,大鼠术后成活率可达100%。与UNX组相比,DKD组大鼠体重增长缓慢或负增长(P<0.01),24h尿蛋白明显增多(P<0.01),血糖维持在28mmol/L^32mmol/L。肾脏病变符合早期DKD表现。背侧横行切口配合皮内缝合右肾摘除术,联合腹腔注射STZ诱导的DKD大鼠造模方法成模率高。该模型与人类糖尿病肾病早期临床症状、病理变化相似,适用于DKD的机制研究及药物研发。     

2型糖尿病合并肾性高血压模型的建立及评价

制备一种发病过程类似于人类2型糖尿病合并肾性高血压疾病的大鼠模型。大鼠高脂高糖膳食4周后,予快速腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液28mg/kg,制作成2型糖尿病模型。2周后,连续3d均测得空腹血糖(FBG)≥7.8mmoL/L或随机血糖(RBG)≥16.7mmol/L,为2型糖尿病成模标准。待血糖稳定后,再用改良的"两肾一夹法"结扎肾动脉,造成一侧肾动脉狭窄,形成肾性高血压。2周后,连续3d均测得大鼠收缩压(SBP)≥140mmHg,同时FBG≥7.8mmol/L或RBG≥16.7mmol/L,确定为2型糖尿病合并肾性高血压模型制作成功。4周后,模型大鼠血糖、血压稳定。与空白对照组相比,复合模型组大鼠出现体重减轻、空腹血糖升高、糖化血红蛋白值升高(P0.01),血压升高(P0.01);与糖尿病组和假手术组相比,复合模型组大鼠血肌酐,尿素氮变化不明显(P0.05),但血压明显升高(P0.01);同时,彩超结果显示,复合模型组大鼠左侧肾脏、肾动脉直径均变小,血流速增快。大鼠高脂高糖膳食后,用低剂量链脲佐菌素(STZ)溶液腹腔注射,再用改良的"二肾一夹"法制备的2型糖尿病合并肾性高血压大鼠模型,在一定程度上较好地模拟出该疾病的发病特点,可为2型糖尿病合并肾性高血压后的临床及试验研究提供一个稳定、实用、有效的新模型。     

氧化应激在硒缺乏致鸡胰岛β细胞功能损伤中的作用

为探讨氧化应激在硒缺乏致鸡胰岛β细胞功能损伤中的作用,1日龄海兰白蛋鸡200只,随机分为两组,缺硒组饲喂低硒日粮(硒含量为0.032 mg/kg),对照组饲喂正常日粮(硒含量为0.282 mg/kg).分别于30,45,60及75日龄采取全血和胰腺,检测血清和胰腺中抗氧化酶(GSH-Px、SOD、CAT)活性,GSH、MDA含量,放射免疫法检测血清和胰腺中胰岛素和C肽含量,荧光法测定全血和胰腺中硒的含量.结果表明:缺硒组全血和胰腺中硒含量呈下降趋势,血清和胰腺中GSH-Px、T-SOD、CAT活性、GSH含量均低于对照组,MDA含量高于对照组,同时血清胰岛素、C肽含量下降,胰岛C肽及胰岛素分泌贮备减少,均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05).缺硒可使鸡血清和胰腺内抗氧化酶活性下降,胰岛β细胞功能降低,表明氧化应激是硒缺乏致鸡胰岛β细胞功能受损的主要原因.     

Serum lipase activities and pancreatic lipase immunoreactivity concentrations in dogs with exocrine pancreatic insufficiency

OBJECTIVE: To determine serum lipase activities and pancreatic lipase immunoreactivity (PLI) concentrations in dogs with exocrine pancreatic insufficiency (EPI). ANIMALS: 74 healthy dogs and 25 dogs with EPI. PROCEDURES: A diagnosis of EPI was made on the basis of clinical signs, low serum trypsin like immunoreactivity (TLI) concentration, and response to treatment with enzyme replacement. Median values for fasting serum lipase activity and serum PLI concentrations were compared between the 2 groups with a Mann-Whitney U test. RESULTS: Median fasting serum lipase activity was not significantly different between dogs with EPI (366.0 U/L) and healthy dogs (294.5 U/L), and only 1 dog with EPI had a serum lipase activity less than the lower limit of the reference range. Median serum PLI concentration was significantly lower in dogs with EPI (0.1 microg/L) than in healthy dogs (16.3 microg/L). All dogs with EPI had serum PLI concentrations less than the lower limit of the reference range. CONCLUSION AND CLINICAL RELEVANCE: Serum lipase activity is not limited to the exocrine pancreas in origin, whereas serum PLI is derived only from the exocrine pancreas. Unlike in serum TLI concentrations, there was a small degree of overlap in serum PLI concentrations between healthy dogs and dogs with EPI. Serum TLI concentration remains the test of choice for diagnosis of EPI.     

Oral bleeding associated with pancreatic enzyme supplementation in three dogs with exocrine pancreatic insufficiency

Three dogs with exocrine pancreatic insufficiency developed oral bleeding during treatment with pancreatic enzyme supplements. According to the owners of the dogs, bleeding from the oral cavity developed during or shortly after consumption of meals containing the pancreatic enzyme supplement. Oral bleeding stopped in all dogs when owners reduced the dose of the pancreatic enzyme supplement. In 2 dogs, the decrease in the dose of the pancreatic enzyme supplement did not affect fecal consistency. However, in the third dog, the decrease in dose led to a recurrence of clinical signs. Findings in these dogs suggest that high doses of pancreatic enzyme supplements can cause oral bleeding in dogs with pancreatic insufficiency, but that oral bleeding can be successfully managed by dose reduction in most dogs.