番茄同源四倍体离体诱导研究

[目的]利用组织培养技术与秋水仙素相结合进行番茄四倍体的离体诱导研究。[方法]以番茄品种渝粉109为试验材料,在建立番茄植株高效离体再生体系的基础上,以带绿芽生长点的子叶愈伤组织为诱导材料,利用秋水仙素分别采用混培法和浸渍法进行番茄同源四倍体的离体诱导。[结果]以带绿芽生长点的子叶愈伤组织为诱导材料,番茄同源四倍体离体诱导采用混培法,0.2%的秋水仙素处理48 h时获得了最高诱导率,为50.0%;浸渍法虽然诱导率较高,但对外植体的药害程度大。[结论]通过混培法获得了较高的诱导率,为番茄品种改良和种质资源的创新与丰富提供了一条新的途径。     

诱导番茄同源四倍体的研究

人工诱导番茄四倍体,当作遗传传递的工具,有重要的育种用途。籍助染色体重组工程,诱导番茄多倍化,实现基因转移,不仅可获得座果多而品质好的番茄新品系。还可克服远缘杂交中的不亲和性、杂种不孕性等,从而培育新品种。试验结果表明:用中等剂量的秋水仙素处理减数分裂前的细胞,并结合涂抹幼苗生长点的方法,产生番茄四倍体的频率大,植株茎部粗壮,叶色深而宽厚,座果多而果实大。但需加强田间管理,才可在生产中应用。     

白菜同源四倍体的诱导及其细胞学研究

采用秋水仙素茎尖处理技术,对二倍体白菜进行了同源四倍体的诱导,并结合细胞学观察,对诱变一代和二代的减数分裂行为与结实率的关系进行了初步研究。结果表明：（１）用０．１％的秋水仙素药液在气温１０℃下处理幼苗生长点７２ｈ,诱变效果最好,幼苗存活率为８６％,植株的变异率达４２％。（２）变异株的自交后代经染以体数目鉴定,有８５．７％的株系为同源四倍体,加倍成功率为３５．７４％。（３）四倍体的结籽率与小孢子母     

花蕾型金银花同源四倍体的诱导和鉴定

[目的]为选育金银花优良品种提供材料。[方法]以当年生银翠蕾嫩枝茎段为外植体,进行愈伤组织和不定芽培养,对获得的不定芽采用秋水仙素浸泡法和培养基中添加秋水仙素法诱导多倍体,并进行染色体鉴定。[结果]染色体观察结果表明,7:30 a.m.取材,用0.2%的秋水仙素溶液浸泡3 h,用1.0 mol/L盐酸溶液在60℃下处理18 min的材料中,中期细胞多,染色体分散和着色均较好,而且可以看到清晰的点状染色体。染色体鉴定结果表明,秋水仙李浓度对多倍体诱导率有显著影响,用0.4%秋水仙李浸泡16 h的诱导率为50.0%,在秋水仙李浓度为1.0 g/L的培养基中培养8 d的诱导率为43.8%。[结论]该研究为金银花同源四倍体的诱导与鉴定提供了一定的试验依据。     

水稻体细胞同源四倍体的人工诱导及遗传特性研究

以４种基因型水稻灿粳杂种二倍体为材料，在幼穗离体培养过程和种子发芽期，分别用不同浓度秋水仙素处理愈伤组织和发芽种子，诱变获得水稻同源四倍体。结果表明，秋水仙素３００ｍｇ／ｌ和５００ｍｇ／ｌ的浓度处理愈伤组织，四倍体最高诱导率分别达到４５．５％和５６．３％，平均诱导率比种子发芽期的四倍体诱导率提高１０倍左右。种子发芽期为２５０－５００ｍｇ／ｌ较低浓度的秋水仙素诱导效果较好，四倍体诱导率为２．９－５．     

同源四倍体茄子诱变技术的研究

用秋水仙碱作诱变剂获得同源四倍体茄子,处理的最佳浓度为1%;关键时期是幼苗生长至二叶一心期涂抹幼苗生长点;滴苗的适宜次数为2次,即A、D两处理比较好,其诱变率为6.0%～8.62%。不同品种诱变效果不同。     

张良姜同源四倍体诱导

为解决张良姜繁殖系数低、容易感染病菌的问题,进一步加快张良姜育种进程,以河南省鲁山县张良镇种姜为材料,首先建立张良姜茎尖离体培养再生体系,进一步利用秋水仙碱对其体细胞染色体进行诱导加倍.结果表明,张良姜茎尖不定芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,不定芽诱导率达83.33％.不...     

三球悬铃木体细胞同源四倍体诱导及鉴定

将三球悬铃木愈伤组织置于含有不同浓度秋水仙素的双层WPM培养基上诱导四倍体植株,用变异植株根尖细胞染色体计数和成熟叶片单细胞DNA含量测定的方法进行倍性分析。结果表明,悬铃木愈伤组织在秋水仙素浓度为1000mg.L-1的双层培养基上预培养72h处理时,四倍体诱导率最高,为20.9%。根尖染色体压片结果表明,三球悬铃木二倍体染色体数为2n=2x=42,四倍体为2n=4x=84。此外,诱变出的四倍体植株与二倍体相比,具有生长慢,茎变粗,叶片变宽,节间变短,单个气孔面积增大,气孔密度减少等特征。     

库拉索芦荟的组织培养和快速繁殖

以库拉索芦荟（Aloe veraL)茎段为外植体，MS培养基配以不同浓度的IBA，NAA和6-BA进行离体组织培养，结果表明，以MS 6-BA4mg/L NAA0.2mg/L培养基对芽的诱导效果最佳，芽的诱导分化率最高，且试管苗健壮，整齐；增殖培养基以MS 6-BA3mg/L NAA0.2mg/L效果最佳，既有利于芽苗增殖，又有利于芽苗长高；生根培养基用1/2MS NAA0.5mg/L效果最好，可在2周内长根。     

芦荟原生质体的分离

[目的]为进一步的离体培养快速繁殖奠定基础,同时也为原生质体的融合(体细胞杂交)提供条件。[方法]采用酶解的方法以芦荟的叶片为材料进行原生质体分离。[结果]用芦荟的叶肉细胞可成功分离出原生质体,而且活力较高,可达90%以上。[结论]芦荟原生质体的成功分离主要取决于材料的来源、酶液的组成。另外还受酶解液的渗透压、温度和pH值影响。     

芦荟原生质体融合的研究

以芦荟叶片为试材,采用酶解方法进行原生质体分离,并在此基础上对斑纹芦荟和不夜城芦荟进行原生质体融合。结果表明,以芦荟的叶肉细胞为试材,可成功分离出原生质体,而且活力较高,达90%以上。聚乙二醇（PEG）融合的结果可获得部分融合体。芦荟原生质体的成功分离主要取决于材料的来源、酶液的组成,另外还受酶解液的渗透压、温度和pH值等影响。融合的效率主要受融合剂的浓度、原生质体的生理状态及处理的时间等影响。     

不同光质处理对库拉索芦荟有效成分的影响

[目的]研究不同光质对库拉索芦荟有效成分的影响。[方法]以库拉索芦荟为试验材料,运用植物化学法和高效液相色谱法测量了红、蓝不同光质处理下,芦荟中可溶性糖、可溶性蛋白和蒽醌类物质的含量。[结果]结果表明,与对照（白光照射）相比,红光照射下可溶性糖、可溶性蛋白和蒽醌类物质的积累有所下降,分别减少了17％、24％、2％;蓝光照射下可溶性糖和可溶性蛋白的含量分别减少33％、27％,而蒽醌类物质的含量增加了44％。[结论]蓝光有利于蒽醌类次生代谢物的积累。     

芦荟多糖生物活性研究进展

综述了芦荟多糖在免疫调节、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抗辐射等方面的生物活性,指出了进一步研究芦荟多糖生物活性机理亟待解决的问题及影响芦荟产业快速发展的技术问题。     

芦荟离体快速高效增殖技术的研究

以美国大叶芦荟为材料，就激素配比和接种方式进行芦荟离体快速增殖技术的研究，结果表明，细胞分裂素配合低浓度的生长素可使芦荟的增殖系数净增的60％，最佳增殖培养基为MS＋4．0mg/L BA 0.2mg/L IAA，研究采用的4种接种方式增殖系数跨度在11．2－17．5之间，其中方式3和方式4为理想的接种方式，增殖系数是已有报道水平的3－4倍，最佳的生根培养基为1／2MS＋0．5－1．0mg/L NAA或1／2MS＋0．5－1．0mg/L IAA，另外，就如何降低组培苗的生产成本提出了建议。     

水分胁迫对中华芦荟部分药用成分含量的影响

研究了水分胁迫处理对药用植物中华芦荟的甙、多糖、总糖、可溶性糖、蛋白质及脯氨酸含量以及生物量的影响.结果表明：甙含量与土壤含水量呈极显著的负相关,水分胁迫增加了单位干质量叶片中的甙含量;叶片中的主要药用成分之一多糖含量明显下降,总糖的含量也不断减少;而可溶性糖和脯氨酸含量明显上升,与土壤含水量呈显著负相关;受到水分胁迫的中华芦荟与对照比较,整株、地上部分和根的鲜重均下降,并且胁迫强度愈大降低愈多.说明随着水分胁迫不断增加,中华芦荟次生代谢活跃,光合作用减弱,同化能力下降,从而增加了甙的含量,积累的碳水化合物总量不断减少,而在一定程度的水分胁迫处理中,可溶性糖和脯氨酸含量的增加与其增强植物抗性的生理功能密切相关.随着干旱失水,芦荟多糖含量及生物量的减少降低了芦荟的经济价值.     

外源硅缓解库拉索芦荟盐胁迫伤害效应的细胞生理学分析

为探索硅(Si)增强微咸水长期灌溉下库拉索芦荟(Aloe veraL.)耐盐性的机制,研究了盐(NaCl 100mmol.L-1)胁迫下加Si(2.0 mmol.L-1)处理30 d对库拉索芦荟叶同化组织细胞中矿质离子分布、叶绿体超微结构和腺苷三磷酸(ATP)酶活性的影响。X-射线能谱微域分析结果表明,盐胁迫下加Si,芦荟叶同化组织细胞中钠离子(Na )和氯离子(Cl-)相对含量显著下降,伴随着钾离子(K )相对含量显著升高、钾钠比(K /Na )显著增大。同时,加Si利于保持芦荟叶绿体正常形态,保护光合层片精细结构,显著缓解盐胁迫对其光合细胞器的伤害。利用电镜-细胞化学技术首次表明,提高浇灌溶液中可溶性Si含量水平,明显增强盐胁迫下芦荟叶同化组织细胞中胞间连丝、质膜和液泡膜ATP酶活性。外源Si增强盐胁迫下芦荟叶同化组织细胞中ATP酶活性是其改善叶同化组织细胞中的离子分布、缓解芦荟盐胁迫伤害效应的重要机制。     

改进的CTAB法提取中华芦荟叶总RNA

[目的]为分离中华芦荟次生代谢相关基因,构建成熟叶cDNA文库,探索从适合富含多糖和凝胶植物组织中提取高质量RNA的方法。[方法]以中华芦荟成熟叶为材料,采用改进的CTAB方法提取纯化芦荟叶总RNA。[结果]所提取的叶总RNAOD260/OD280值为1.88,电泳显示28 S1、8 S条带完整清晰,以此RNA为模板的RT-PCR结果显示目标特异条带。[结论]用该方法提取的RNA可用于cDNA合成、文库构建等后续分子生物学实验。     

库拉索芦荟根腐病与土壤—植株养分状况的关系研究

 调查了云南元江芦荟基地施肥状况、根腐病发病率,并采集和测定了叶片和根际土壤样品中营养元素含量。调查分析结果显示,库拉索芦荟根腐病发病率与土壤中速效磷含量呈显著的正相关,与土壤中其它速效养分以及芦荟叶片养分含量无显著的相关性。与海南健康库拉索芦荟叶片及其根际土壤养分状况相比,元江库拉索芦荟病株根际土壤中碱解氮、有机质、速效钾、速效钙、速效镁、速效硼含量,以及叶片中钾、硼含量较低,但其根际土壤中速效磷含量较高。元江库拉索芦荟根腐病可能主要与施肥不合理,大量偏施磷肥和糖泥引起的土壤—植株养分失调、病菌滋生和抵抗力下降有关。