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《林业科学》2016,(10)
【目的】棕榈疫霉是农林业生产上的一种危害严重的病原菌,建立棕榈疫霉的快速分子检测技术对于预测疫病发生情况、及时采取有效的防治方法控制疫病的传播和流行、减少经济损失具有重要意义。【方法】采用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立了以基因间隔区(intergenic spacer,IGS)为靶标的快速、简单、特异和灵敏的棕榈疫霉菌的检测方法。以IGS基因为靶序列,利用环介导等温核酸扩增技术,设计了多组LAMP引物,同时建立并优化了LAMP反应体系与条件,最终筛选出1组扩增反应结果较好的LAMP引物,采用该组引物进行特异性、灵敏度和实际应用的验证。在扩增前加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为反应指示剂,根据HNB的颜色变化判定反应结果。【结果】整个检测过程在等温64℃条件下仅需80 min即可通过肉眼直接目测试验结果。在特异性试验中,通过HNB显色只有在棕榈疫霉菌株中能观察到天蓝色的阳性反应,而在其他疫霉、腐霉和真菌的供试菌株仍为紫色的阴性反应;在灵敏度试验中,PpIGS-LAMP技术检测灵敏度达到10fg.μL~(-1)目标菌纯DNA;在实际应用中,PpIGS-LAMP技术能够快速检测出采自田间的木薯根部土壤中目标菌和人工接种发病木薯组织样品的目标菌。【结论】本研究在国内外首次采用环介导等温扩增技术检测棕榈疫霉,建立了1种快速、高灵敏度、高特异性、可视化的棕榈疫霉的LAMP检测方法。建立的棕榈疫霉菌的LAMP检测方法在80 min内可完成待检样品的检测过程,显著缩短检测时间,降低基层部门的检测成本,为棕榈疫霉引起疫病的检疫和所致病害的快速诊断提供了新的检测技术。 相似文献
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<正> 在研究西双版纳橡胶树疫霉(Phyt-ophthora de Bary)的过程中,看到所鉴定的四个疫霉种对橡胶树的致病力不同:柑桔褐腐疫霉(P.citrophthora),辣椒疫霉(P.capsici)致病力强而棕榈疫霉(P.palmivora)、恶疫霉(P.cactorum)较弱。这和用不同的方法采集疫霉,获得的种的比例不同有着密切的关系,用以橡胶材料作钓饵的方法,弱致病种的得率低;用直接分离法,则得率提高(余永年等,1986年)。研究不同疫霉种的致病力,对研究疫霉的生物学特性和病害防治有一定意义。本试验对上述四种疫霉作致病力的测定和比较。 相似文献
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本文报道了云南十二种热带作物的疫霉菌病害的分布、危害,和对108个疫霉分离物的鉴定结果。为害热带作物的疫霉有柑桔褐腐疫霉(Phytophthoracitrophora)、辣椒疫霉(P.capsci)、寄生疫霉(P.parasitica)、棕榈疫霉(P.palmivora)、黄瓜疫霉(P.melonis)(暂定)等五个种,其中,柑桔褐腐疫霉分布广,为害严重,是优势种。 相似文献
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《林业科学研究》2019,(6)
[目的]通过研究新源县和巩留县野苹果林中疫霉菌的种类和致病性差异,为探讨新疆野苹果林衰亡原因提供基本资料,为野苹果林病害防治提供科学依据。[方法]采用疑似疫霉病害样品采集、土壤诱捕、林间溪流诱捕等方法对新疆野苹果林中的疫霉菌进行了调查采样和监测诱捕,并利用选择性培养基分离获得疫霉纯菌株。通过形态学观察和rDNA-ITS序列分析相结合的方法对所获得的疫霉菌株进行分类鉴定,并通过离体叶片接种试验对所鉴定的疫霉菌进行致病性测定。[结果]依据形态学特征和序列分析,鉴定得到5个种共计88株疫霉,分别为65株湖沼疫霉Phytophthora lacustris Brasier,Cacciola,Nechwatal,JungBakonyi、16株节水霉状疫霉Phytophthora gonapodyides(Petersen) Buisman、3株多寄主疫霉Phytophthora plurivora T. JungT. I. Burgess、2株聚疫霉Phytophthora gregata T. Jung,M. J. C. StukelyT. I. Burgess和2株Phytophthora sp.1。将前4种疫霉接种离体野苹果叶片后,发现它们均产生病斑,其中湖沼疫霉在离体叶片上产生的病症最为明显。[结论]新疆野苹果林中具有多种疫霉菌,且所鉴定的4种疫霉菌均对野苹果叶片有一定的致病性。 相似文献
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试验用稀释两倍的P.D.A 培养基做基础培养基,另加利福平、制霉素、氨比西淋、苯来特、五氯硝基苯配制成选择性培养基,从南京玄武湖公固、雨花台烈士陵园和东善桥林场等处的雪松病株和枯死株下的土壤中分离樟疫霉病菌获得成功。其培养基材料在国内市场上容易买到,用量少,效果好。另用植物组织做诱饵,检测土壤樟疫霉试验结果表明,刺槐嫩茎、嫩叶惑病性强,检出率高,是定性检测疫霉菌的一种理想的诱饵材料。 相似文献
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用9种植物病原菌为供试菌。采用经典生长速率法对艾蒿提取液的离体活性进行测定。结果表明:在生药质量浓度为0.1g/mL时,艾蒿提取液对9种病原真菌均表现出不同程度的抑制作用,其中艾蒿乙醇提取液对串珠镰刀菌的抑制作用最明显,抑制率达到98.2%;对致病疫霉Ⅰ、仁果丛梗孢、瓜果镰刀菌的抑制率达70%以上;艾蒿丙酮提取液对串珠镰刀菌、仁果丛梗孢、致病疫霉Ⅰ的抑制率分别为78%、72%和67%。 相似文献
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用瑞毒霉和乙磷酸对由寄生疫霉和樟疫霉引起的菠萝心腐病,以及由樟疫霉引起的根腐病进行了防治,植前以600ppm瑞毒霉和1,200ppm乙磷铝浸种苗防治效果显著。亚磷酸是乙磷铝水解后的一种产物,每公顷用3.36—6.72千克防治心腐病效果显著,同时因由此防治了根腐病,植株生长增长。温室研究表明,乙磷铝和亚磷酸都能在24小时内向下传导,结果控制了根腐病。在夏威夷,菠萝心腐病和根腐病是由滋生土壤的真菌—寄生疫霉和樟疫霉引起的。其症状已由Mehrlich描述过。腐霉也能引起菠萝根腐病。用其它农药防治心腐病已有报导。引进的两种新内吸性农药瑞毒霉和乙磷铝,使根腐病的防治也有了可能。据报导,在其他国家已应用这两种杀菌剂防治菠萝心腐病,不论是植前浸种苗或是植后植株喷药,乙磷铝降低了心腐病死亡率,并使成活植株的总根量和植株量增加。夏威夷在雨量多的情况下,菠萝心腐病、根腐病使这个地区经济受到严重的影响,因此需要进一步开展防治试验,以确定最低有效用药量和最有效的施药方法;由于乙磷铝水解之后产物亚磷酸存在于菠萝叶片和果内,因此做了亚磷酸对防病作用的试验。研究结果如下。 相似文献
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从中国江苏省刺槐上得到的樟疫霉两个分离物是樟疫霉的异形体(atypical forms).其中的一个分离物属于A_1交配型,另一个是属于同宗配合的homothallic.本文是樟疫霉在中国的首次报告. 相似文献
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云南五种用材竹的致霉菌及其致霉特性研究 总被引:5,自引:3,他引:2
从室内和野外发霉变色的五种竹材上分离鉴定并回接替龙竹材,得知30多种真菌可引起竹材霉变。其中,致霉性较强的有枝抱(CladosPoriumspp.)、青霉(Penicilliumssp.)、曲霉(As-pengillsspp.)、节菱孢(Arthriniumspp.)、链格孢(Alternariaalternata)、绿木霉(Trichodermaviride.)、毛霉(Mocorspp.)、毛壳菌(Chaetomiumspp.)等。文中描述了除青霉、曲霉、毛霉以外的致霉性强的12种菌的形态特点,分析了它们的致霉特征及致霉能力。 相似文献
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小蜜环菌是内蒙古大兴安岭林区分布较广的野生食用菌,可引起松树根朽病。由小蜜环菌所引起的林木根朽病是世界上分布最广的一种病害,它能侵染的针阔叶树种达二百余种,不论老龄或幼龄林木都能被侵染受害。该病使根的皮层和木质部腐朽,以致枯萎死亡。!分类:菌类界、真菌门、 相似文献