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毕赤酵母表达铜锌超氧化物歧化酶中试工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
正交设计优化铜锌超氧化物歧化酶毕赤酵母在摇瓶及30L发酵罐的诱导表达条件,用两步层析法纯化表达的目的蛋白,在不同温度下进行原液稳定性试验。用考马斯亮蓝检测蛋白含量,活性检测试剂盒检测目的蛋白活性。纯化后原液参照中华人民共和国药典三部2005版进行检测,用SDS-PAGE、HPLC检测纯度,免疫印迹法检测rhCu,Zn-SOD特异性,等点聚焦测定该酶等电点,地高辛法检测残余DNA含量,酶联免疫法测定残余蛋白含量。结果显示正交试验的大罐高密度发酵最适条件比摇瓶的最适条所获得的目的蛋白活性高8倍,纯化后,HPLC纯度为99.7%,原液比活性大于6.0×103 U/mg,各项检测指标达到生物制品检定标准。该酶在45、65、85、100℃的半衰期分别为240、120、30、15。具有良好的酶稳定性。本研究建立了发酵、纯化的中试工艺,获得高表达、高纯度及高比活的铜锌超氧化物歧化酶,为规模化生产奠定了基础。 相似文献
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试验研究了添加蛋氨酸螯合铜(Met-Cu)、壳聚糖螯合铜(Chitosan-Cu)、酵母螯合铜(Yeast-Cu)对肉仔鸡生产性能、营养物质消化率、血清IGg水平、嗉囊腐蚀程度、肝脏和排泄物中铜(Cu)含量以及肌肉和血清中总胆固醇的水平的影响。240只肉仔鸡(Ross208)平均分配到4个处理组中:对照组、Met-Cu组、Chitosan-Cu组、Yeast-Cu组。3个螯合铜试验组日粮铜含量均为100mg/kg。每个处理组中设6个重复,每个重复10只鸡(5只公鸡 5只母鸡)。试验结果表明,螯合铜试验组增重和采食量均高于对照组。Met-Cu组增重显著高于对照组(P<0.05),Yeast-Cu组采食量显著高于对照组(P<0.05)。各处理组料重比明显不同,由低到高依次为Met-Cu组、对照组、Chitosan-Cu组和Yeast-Cu组。各组间干物质利用率差异显著(P<0.05),螯合铜的试验组干物质利用率显著高于对照组,其中Chitosan-Cu组最高。添加螯合铜提高了嗉囊腐蚀系数,Met-Cu组肝脏铜含量最高。添加螯合铜降低了胸肌和血清中总胆固醇水平,而提高了血清高密度脂蛋白(HDL)水平。试验结果表明,在肉仔鸡日粮中以螯合铜形式添加铜100mg/kg,可以提高增重、采食量和干物质利用率,其中Met-Cu效果最好。 相似文献
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酵母铜对仔猪生长性能及抗氧化作用的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
将平均体重(18.23±3.03)kg的24头健康的松辽黑仔公猪随机分为4组,每组6头,试验1组饲喂硫酸铜250mg/kg,试验2、3、4组分别饲喂酵母铜10、50、100mg/kg,研究酵母铜和硫酸铜对7~10周龄仔猪的生长性能及抗氧化酶活性的影响。结果表明:日粮中添加50mg/kg酵母铜,在提高仔猪的生长性能及抗氧化酶活性方面与添加250mg/kg硫酸铜具有相同的作用效果。随着酵母铜浓度的增加,血清中CuZn-SOD、铜兰蛋白的活性相应提高。随着日龄的增加,CuZn-SOD、铜兰蛋白的活性逐渐增强。 相似文献
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微量元素铜的研究综述 总被引:17,自引:3,他引:14
铜是动物必需微量元素之一,在机体造血、新陈代谢、生长繁殖、维持生产性能、增强机体抵抗力等方面有不可替代的作用。近年来对铜代谢和疾病关系也进行了不少研究,发现铜缺乏可引起多种动物疾病。吴建设等(1998)对铜在机体内的代谢作了详细综述。1945年Braude首次发现日粮中添加高铜(10倍于推荐量),可明显提高猪的生产性能,之后大量试验表明高铜可提高养猪效益(7%~32%)而得到推广。但是,饲料中铜代谢后90%由粪便排出且不可降解,所以高铜导致粪排铜大量增加,环境污染严重,有些国家已经限制使用高铜日… 相似文献
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酵母培养物富含多糖、维生素、矿物质、消化酶、促生长因子和较齐全的氨基酸等,具有良好的适口性,能够增强免疫力以及促进生长的作用,是一种集营养、保健为一体的新型的微生态制剂。随着酵母培养物的研究不断深入,其开发和应用将会越来越广泛。 相似文献
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反刍动物微量元素铜营养 总被引:13,自引:1,他引:13
1 前言早在19世纪初,铜与动物营养的关系就已引起人们注意。1847年,Harless指出软体动物血铜具有重要作用。1878年,Frederiy首次从章鱼体内的蛋白复合物中分离出铜,并将该含铜蛋白质复合物命名为血铜兰蛋白。1900年,Abderhalden发现,只采食牛奶的动物易患贫血症,该症状不能靠添加铁而消除。1923年,Severy比较精确地测定了多种海洋动物各种组织内铜含量。Hart(1928)提出铜是生命必需微量元素,并指出铜在动物体血红蛋白合成过程中具有重要作用。而铜在动物营养中的作… 相似文献
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不同铜源对大鼠生长性能及组织中铜含量和血清中抗氧化酶活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
比较酵母铜作为新型铜源添加剂与硫酸铜在大鼠上的饲喂效果。选择血缘相近,体重在60~90g的Wistar健康雌鼠66只,按2因子完全随机设计,分为11个处理,每个处理6个重复,试验期10d。采用酪蛋白、玉米淀粉纯合缺铜饲粮作为基础饲粮,分别以酵母铜和硫酸铜2种不同的铜源添加10、30、60、100、250mg/kg5个水平。结果表明:不同铜源、不同铜水平、不同铜源与不同铜水平互作之间,大鼠的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)差异均不显著(P>0.05);但是酵母铜与硫酸铜相比,ADG和ADFI分别提高了2.5%和3.5%。不同铜源、不同铜水平、不同铜源与不同铜水平交互作用,对大鼠血清铜蓝蛋白、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、肝铜含量都存在极显著的影响(P<0.01)。由此可见,不同铜源和水平能够显著影响大鼠对铜的吸收利用,且酵母铜源较硫酸铜源的效果更优。 相似文献
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试验旨在研究日粮中添加酵母或酵母代谢物产品对奶牛生产性能的影响。选择70 头中国荷斯坦泌乳奶牛,按产奶量、泌乳天数和胎次等情况配对分成7组,每组10 头,其中试验1组为对照组,其余6组为试验组。对照组饲喂基础日粮,该日粮主要包含20 kg青贮、3 kg干草、2 kg苜蓿干草和9 kg泌乳期奶牛精料补充料。试验组在饲喂基础日粮的基础上再分别添加60 g益生素酵母1、50 g益生素酵母2、10 g益生素酵母3、10 g益生素酵母4、15 g益生素酵母5和15 g益生素酵母6。试验期为50 d,其中预试期10 d,正试期40 d。结果表明,不同的酵母或酵母代谢物产品对奶牛产奶量和奶成分有不同程度的影响,添加益生素酵母2试验组奶牛的产奶量与对照组相比增加显著( P<0.05)。不同的酵母及酵母代谢物产品对牛乳成分也有不同程度的影响,益生素酵母1、益生素酵母2和益生素酵母3显著提高了牛奶中乳脂含量(P<0.05);益生素酵母4显著提高了牛奶中蛋白含量(P<0.05);不同酵母或酵母代谢物产品对牛奶中干物质含量无显著影响;在体细胞数方面,添加益生素酵母2、益生素酵母3和益生素酵母4的试验组牛奶中体细胞数有一定的降低,但差异不显著(P>0.05)。因此,本试验证明饲料中添加酵母及酵母代谢物能提高奶牛的生产性能。 相似文献
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不同铜源和水平对生长猪组织铜含量和含铜酶的影响 总被引:3,自引:1,他引:3
选用54头体重约17 kg杜长大生长猪进行试验,研究日粮中添加不同铜源、不同水平铜对猪血液生化指标及组织铜沉积的影响。试验猪随机分为9个处理,每个处理3个重复,每个重复2头。各处理日粮分别为基础日粮添加以氨基酸铜(Cu-AA)、硫酸铜(CuSO4)和碱式氯化铜(TBCC)为铜源的铜10、150和250 mg/kg的日粮。研究结果表明:添加不同铜源、不同剂量铜,猪日增重和料重比均无显著差异(P>0.05);肝、肾铜含量随铜添加水平的升高而显著升高(P<0.01),在心肌铜含量方面,添加250 mg/kg铜水平显著高于添加10和150 mg/kg铜水平(P<0.01); 高剂量铜可显著提高血清铜兰蛋白活性(P<0.01),添加150 mg/kg铜可显著提高血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05);硫酸铜源可显著降低肌肉铜含量(P<0.01),氨基酸铜源可显著提高血清铜兰蛋白活性(P<0.01)。 相似文献
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ZHANG Zheng ZHANG Qi-wei YANG Jing-jing GAO Min HU HONG-Lian LIU Da-cheng 《中国畜牧兽医》2017,44(9):2629-2637
This study was aimed to investigate the effect of active yeast and yeast fermented feeds on rumen fermentation parameters in vitro.13 strains active yeasts and their fermented feeds (7 strains of Saccharomyces cerevisiae,namely XR4,YL5,YN7,XL8,BC,SL and AQ;5 strains of Candida utilis,namely SC18,SR12,YJ2,YD6 and BY,and 1 strains of Candida tropicalis,namely BR) were chosen and rumen fermentation parameters were measured by in vitro gas production technique.The results showed that:There was no significant effects of active yeasts on gas production (P>0.05),however,the gas production of SC18,XR4,BY,AQ and BC groups was significantly increased by the fermented feeds (P<0.05).Meanwhile,the gas production rate of those fermented feeds was significantly higher than the corresponding active yeasts (P<0.05).10 yeast strains and their fermented feeds significantly increased the bacterial crude protein production (P<0.05),and the protein growth rate of most of these active yeasts was higher than that of fermented feeds (P<0.05).The activie yeasts and fermented feeds showed no significant effect on ammoniacal nitrogen content (P>0.05).Active yeast (YD6,BR,SC18,YL5,XR4,SR12,BY and BC) and yeasts fermented feeds (YD6,BR,YJ2,SC18,SR12,SL,YL5 and XR4) could significantly increase the total VFAs comapred to control group (P<0.05).In conclusion,active yeast could significantly increase the contents of bacterial crude protein and total VFAs,especially the BY,XR4 and BC. Gas production,bacterial crude protein and VFAs were significantly increased by fermented feeds,especially SC18,BY and BC. Fermented feeds had shown better effect on the increament of the gas production and VFAs compared to active yeasts. 相似文献
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本试验旨在探讨饲粮中添加酵母壁多糖对断奶仔猪外周血免疫和肠道免疫的影响。采用单因素试验设计方法,选取21日龄遗传胎次、体重接近的断奶仔猪180头,随机分为4个组,每组5个重复,每个重复9头猪。4组分别饲喂饲粮中添加0(对照组)、0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖的试验饲粮。试验期21 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪血清免疫球蛋白A(IgA)含量(P0.05),饲粮中添加0.30%和0.45%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪血清免疫球蛋白G(IgG)含量(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮中添加0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖显著降低了断奶仔猪血清干扰素-γ(IFN-γ)含量(P0.05),饲粮中添加0.30%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪血清白细胞介素-10(IL-10)的含量(P0.05)。饲粮中添加酵母壁多糖对断奶仔猪血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加0.30%和0.45%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪回肠CD4~+淋巴细胞含量(P0.05),饲粮中添加酵母壁多糖能一定程度提高断奶仔猪回肠CD8~+和CD20~+淋巴细胞含量,但差异不显著(P0.05)。由此可知,酵母壁多糖能一定程度提高断奶仔猪外周血免疫和肠道免疫,缓解断奶应激。 相似文献
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试验旨在选择获得最大酵母多糖提取率的酵母菌破壁方法。以酵母多糖提取率与细胞破壁率为综合评定指标,首先对超声波破碎、超声波清洗、反复冻融、蛋白酶处理4种方法进行条件优化,选择最适破壁条件;然后将此4种单一的破壁方法与超声波破碎和蛋白酶处理协同方法相比较,确定获得最大多糖提取率的破壁方法。结果表明,当超声波清洗时间达到40 min、超声波破碎时间达到50 min时,酵母多糖提取率达到最大值;当菌泥加水量和冻融次数分别为15%与3次时,多糖提取率最大;当蛋白酶用量300 IU/g、酶解时间15 h、pH 5.0、处理温度40℃时,蛋白酶处理的多糖提取率最高。4种破壁方法中蛋白酶处理的效果最佳,对应的多糖提取率为149.81 mg/g,破壁率为53.49%。协同破壁处理的提取效果要优于单一的破壁方法,但考虑到协同作用对多糖结构的完整性构成威胁,将蛋白酶处理确定为最佳的酵母菌破壁方法。 相似文献
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本研究选择7株酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae,编号为XR4、YL5、YN7、XL8、BC、SL、AQ)、5株产朊假丝酵母菌(Candida utilis,编号为SC18、SR12、YJ2、YD6、BY)及1株热带假丝酵母(Candida tropicalis,编号为BR),采用体外产气法研究其对体外瘤胃发酵参数的影响。结果显示,与对照组相比,活性酵母菌株对产气量均未产生显著影响(P>0.05);酵母发酵饲料SC18、XR4、BY、AQ和BC组产气量显著升高(P<0.05),且这5组产气量增长率均优于其对应的活性酵母组(P<0.05)。13株酵母菌中的10株活性酵母及其发酵饲料均能使菌体蛋白含量显著增加(P<0.05),且大部分活性酵母菌蛋白增长率均高于其对应的发酵饲料(P<0.05)。活性酵母及其发酵饲料对氨态氮含量均未产生明显影响(P>0.05)。活性酵母YD6、BR、SC18、YL5、XR4、SR12、BY、BC组总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组(P<0.05),酵母发酵饲料YD6、BR、YJ2、SC18、SR12、SL、YL5、XR4组总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,活性酵母可显著提高菌体蛋白含量及挥发性脂肪酸含量,其中BY、XR4、BC效果更佳;酵母发酵饲料可显著提高产气量、菌体蛋白含量、挥发性脂肪酸含量,其中SC18、BY、BC效果更佳;酵母发酵饲料在增加产气量、总挥发性脂肪酸含量上效果要优于其活性酵母。 相似文献