基于均匀设计法优化长白瑞香离体培养及种质试管保存体系

以长白瑞香嫩茎为外植体,应用均匀设计法筛选其离体培养和种质试管保存最适合的培养基.结果表明,长白瑞香组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适合的嫩茎基部直接再生芽苗培养基为:N-68+2ip 3.56 mg/L +NAA 0.03 mg/L,诱导率为93.5%;生根培养基为:1/2MS+6-BA 0-04 mg/L+IAA 0.08 mg/L,生根率达99%以上;试管保存培养基为:N-68+KT0.02 mg/L+根皮苷2.00 mg/L,保存时间可达30个月以上,常温条件下,宜采取"延缓生长"的方法在试管内保存长白瑞香种质.成功建立了长白瑞香的离体培养和种质试管保存体系.     

毛毡杜鹃离体培养及种质试管保存体系的建立

【目的】建立毛毡杜鹃离体培养及种质试管保存的适宜体系。【方法】以毛毡杜鹃新生嫩芽为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的基部直接再生芽苗培养基、生根培养基及种质试管保存培养基。【结果】毛毡杜鹃最适合的基部直接再生芽苗诱导培养基为:DR+ZT 3.00 mg/L+IAA 0.03 mg/L,分化率达100%;生根培养基为:MS(改良)+IAA0.10 mg/L+IBA0.10 mg/L+NAA0.05 mg/L+KT 0.10 mg/L,生根率达97%以上;试管保存培养基为:1/10 MS+B93.50 mg/L+根皮苷2.60 mg/L,保存时间可达38个月以上。以再生植株茎节为材料进行快繁的试验结果表明,在30 d培养周期内,每段增殖倍数平均达6倍以上。在常温条件下,采取"低营养矮化延缓生长"的方法在试管内保存毛毡杜鹃种质,成功地建立了毛毡杜鹃的离体培养和种质试管保存体系。【结论】所建立的离体培养体系及种质试管保存体系可以满足毛毡杜鹃离体繁殖和种质保存的需要。     

细叶杜香高效快繁体系建立及种质试管保存研究

以细叶杜香新生嫩芽为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基,结果表明:最适合基部直接再生芽苗的诱导培养基为:MS+TDZ2.25 mg/L,诱导率为100%;生根培养基:MS(改良)+IAAO.15 mg/L+IBA0.02 mg/L+KT0.05 mg/L,生根率达98%以上;试管保存培养基:1/4MS+B91.5 mg/L+根皮苷3.1 mg/L,保存时间可达40个月以上.以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在30 d的一个培养周期内,增殖倍数平均达80以上.常温条件下,采取"低营养矮化延缓生长"的方法在试管内保存种质资源.建立了细叶杜香的离体培养和种质试管保存体系.     

刺楸组培快繁及试管苗保存培养基的筛选

    以刺楸嫩叶柄为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基.结果表明,刺楸组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适的愈伤组织诱导培养基为C2D+6-BA(6-苄氨基腺嘌呤) 0.50 mg·L-1+NAA(萘乙酸)1.00 mg·L-1;愈伤组织增殖培养基为C2D+6-BA 0.50 mg·L-1+NAA 0.50～1.00 mg·L-1;愈伤组织诱导再分化培养基为C2D+6-BA 2.50 mg·L-1+KT(激动素) 4.50 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1;生根培养基为1/2 MS + IBA(吲哚丁酸) 0.10 mg·L-1+IAA(吲哚乙酸) 0.10 mg·L-1;试管苗保存培养基为1/5 MS+ABA(脱落酸) 2.50 mg·L-1.常温条件下,利用低营养促成休眠的方法在试管内保存刺楸种质可达44个月.     

小叶杜鹃的离体快繁体系建立及种质试管的保存

以小叶杜鹃新生嫩芽为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的嫩芽基部直接再生芽苗、生根及种质试管保存的培养基,研究结果表明,最适合的基部直接再生芽苗诱导培养基为:DR+反式ZT3.00mg·L-1,诱导率达96%以上;生根培养基:MS(改良)+IAA0.50mg·L-1+IBA0.10mg·L-1+KT0.10mg·L-1,生根率达98.5%以上;试管保存培养基:N-68+B92.30mg·L-1+根皮苷1.50mg·L-1,保存时间可达32个月以上.以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在40d的1个培养周期内,增殖倍数平均达70以上.常温条件下,采取"矮化延缓生长"的方法在试管内保存种质资源.成功建立了小叶杜鹃的离体培养和种质试管保存体系.     

濒危植物紫背天葵种质离体保存技术研究

以濒危植物紫背天葵试管苗为材料,研究其种质离体保存的最佳途径。结果表明:常规培养基6-BA与NAA组合并不利于紫背天葵离体种质的保存,保存90 d后存活率仅有5%。PP333抑制紫背天葵试管苗芽丛的分化,显著促进不定根的生成,保存180 d后,仅3.0 mg/L PP333存活率达到55%,种质在恢复生长时有变异现象。低浓度ABA(0.5~2.0 mg/L)具有抑制紫背天葵试管苗生长的作用,保存180 d后,试管苗存活率均为100%,且恢复培养时组培苗长势较好。1/2 MS培养基对紫背天葵试管苗保存效果最好,保存240 d后存活率仍高达85%,经恢复生长后,试管苗的增殖及其长势均优于其他处理,可确定为紫背天葵种质离体保存的最佳方法。     

东北刺人参愈伤组织诱导和继代的研究

[目的]研究东北刺人参愈伤组织的诱导和继代方法。[方法]以取自长白山的刺人参植株为材料,研究不同外植体、培养基、激素对刺人参愈伤组织诱导的影响。[结果]叶片为刺人参组织培养的最适宜外植体;5月为外植体的最佳取材时期;以MS为基本培养基,并添加1.0 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L 6-BA的培养基中愈伤组织诱导率最高;最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L。[结论]东北刺人参的最适愈伤诱导培养基和继代培养基分别是:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。     

木薯种质资源离体保存技术研究

为探讨木薯(Manihot esculenta Crantz)种质资源的离体保存方法,以GR891木薯品种试管苗为试材,研究了植物生长抑制剂(PP333、B9、S3307、ABA)对试管苗在常温(25℃)条件下的保存效果。结果表明,在培养室温度(25±2)℃、光照度1500~2 000 lx、光照时间12 h/d的条件下,培养基中加入PP333、B9和S3307均可提高木薯试管苗的存活率。在MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L培养基上,木薯常温保存的适宜PP333质量浓度为1.0~1.5 mg/L或B9和S3307质量浓度均为0.5~1.0 mg/L,保存240 d时存活率超过90%,试管苗根系发达、叶色浓绿、生长健壮,0.2~2.0 mg/L ABA培养基上试管苗长势和存活率都明显低于CK(对照)。     

东北刺人参组培快繁及种质保存技术

以东北刺人参带叶柄的叶片为外植体,对愈伤组织诱导、增殖、分化、生根及种质保存的最适培养基进行了筛选。最适宜的愈伤组织诱导培养基为1/2B5 6-BA1.0mg/L NAA0.1mg/L IBA0.2mg/L KT0.1mg/L VC50mg/L;愈伤组织增殖培养基为2/3MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5mg/L VC100mg/L;愈伤组织再分化培养基为MS 6-BA1.0～2.0mg/L NAA0.05mg/L VC100mg/L;生根培养基为1/5MS IBA0.01mg/L;种质保存最适宜的培养基为1/10MS(大量元素) 1/3MS(微量元素) 1/2MS(铁盐) 1/4MS(有机物质)。     

外源激素对观赏五彩椒试管内开花的影响

试验探讨外源激素6-BA、KT、ABA、PP333对观赏五彩椒试管内开花的影响。结果表明：单独添加6-BA不能诱导五彩椒形成花蕾;KT在浓度为1.0mg/L的时候可以诱导少量五彩椒形成花蕾;ABA和PP333都能诱导五彩椒形成花蕾,但形成的花蕾都不开花。用ABA预处理后再在附加有6-BA、KT的培养基中诱导培养,当ABA浓度为0.1mg/L、KT浓度为1.0mg/L时,形成花蕾株率为80.0%;用PP333预处理后再在附加有6-BA、KT的诱导培养基中诱导培养,当PP333浓度为0.3mg/L、KT浓度为1.0mg/L时,形成花蕾株率最高达到93.3%。     

植物生长调节剂对苹果组培苗延缓生长保存的效应

以富士、乔纳金、金矮生、嘎拉组培苗为试材,在继代培养基中加入不同浓度的比久、矮壮素、多效唑及脱落酸.研究了植物生长延缓剂和生长抑制剂对苹果组培苗种质延缓生长保存的效应.结果表明:比久、矮壮素均有明显抑制苹果组培苗生长的作用,且茎尖存活率高,试管苗生长状况较好,转入常规继代培养基当代即可恢复生长,可用于苹果种质资源的离体保存,比久适宜的浓度为80 mg/L,矮壮素为75 mg/L左右:多效唑处理虽能明显抑制苹果试管苗生长,但易使有些品种试管苗玻璃化,可选择性应用;脱落酸作用过于剧烈,绝大部分处理苗死亡,不宜在苹果种质保存中使用.     

影响东北刺人参试管苗增殖和生根的因素研究

[目的]探明濒危植物东北刺人参（Oplopanax elatus Nakai）组培的可行性,为快速繁殖其种苗提供依据。[方法]以东北刺人参无菌播种苗为材料,研究了BA与NAA的组合浓度和接种方法对不定苗增殖的影响及NAA、活性炭和WPM培养基浓度对生根的影响。[结果]WPM培养基中加入1.0mg/LBA和0.2mg/LNAA,将试管苗顶端去除后进行培养可促进不定苗的形成。3/4WPM培养基中加入0.1mg/LNAA,1.0g/L活性炭时,试管苗生根率达到100%。[结论]利用组培方法扩繁东北刺人参具有可行性,该方法是保护和利用东北刺人参资源的有效途径。     

水稻种胚愈伤组织诱导培养基的优化选择

应用模糊数学方法。研究了不同浓度的2,4-D、KT、BA、ABA、NAA和IAA以及2,4-D+KT,2,4-D+BA,2,4-D+ABA+LH和NAA+IAA等多种附加物组合对水稻种胚离体培养的影响,目的在于对水稻种胚离体培养诱导培养基进行优化选择.结果表明,一种附加物的作用效果明显不如2种或3种附加物配合使用的效果好。以添加2,4-D 2.0mg/L+ABA 5.0mg/L+LH 300.0mg/L(U49)的改良MS培养基效果最好.研究还采用不同类型的水稻品种加以验证,表明大多数水稻品种的种胚离体培养于U_(49)组合的改良MS培养基上,可获得较高的愈伤组织诱导率,且有利于愈伤组织的再分化.     

东北刺人参体细胞胚状体的诱导及体细胞胚胎发生的扫描电镜观察

分别以东北刺人参叶芽和带有叶柄的幼叶为外植体,研究6-BA浓度对东北刺人参体细胞胚状体诱导的影响,并利用扫描电镜对体细胞胚胎发生的形态学进行了观察.结果表明:以带有叶柄的东北刺人参幼叶为外植体,在MS培养基上附加4.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA,可获得健状的胚状体,并且胚状体经过球形胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚的胚胎发育时期,最终形成可发育成完整小植株的成熟胚.     

PP333、B9和ABA对黄独种质离体保存的影响

以黄独试管苗为试材,研究了PP333、B9和ABA对黄独试管苗离体保存的影响.结果表明:PP333、B9和ABA可抑制黄独试管苗的生长,提高其成活率,其中黄独种质离体保存最佳的PP333、B9和ABA浓度分别为2、4、4 mg·L-1.     

新疆苜蓿愈伤组织再生体系建立的研究

以新牧1号、新疆大叶苜蓿和新疆野生黄花苜蓿无菌苗下胚轴为外植体,研究了两种诱导培养基对愈伤组织诱导、生长的影响,以及增殖培养基中附加GSH和ABA对愈伤组织增殖、分化及再生的影响.结果表明,MS+2,4-D 2mg/L+NAA 2mg/L+KT 1mg/L为较佳诱导培养基;增殖培养基中附加GSH 15mg/L有利于分化及植株再生;增殖培养基中附加GSH 15mg/L+ABA 3 mg/L有利于提高新牧1号和新疆大叶苜蓿体胚分化能力,附加GSH 15mg/L+ABA 6mg/L有利于新疆野生黄花苜蓿体胚分化频率;实验共筛选出新牧1号、新疆大叶苜蓿、新疆野生黄花苜蓿高分化能力基因型分别为5、6和5个.     

Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration from Leaflets of Fritillaria ussuriensis M.

A method for the production of somatic embryos and subsequent plant regeneration for fritillaria ussuriensis M.is described.Whole leaflet explants,derived from plantlets grown in vitro,formed light yellowith embryogenic calli within one month of culture in the dark.Somatic embryogenesis was obtained after a 28d incubation on MS induction medium supplemented with 2mg/L 2,4-D 0.5mg/L BA,0.5mg/L KT and 500mg/L CH followed by transfer to a second N medium containing 0.5mg/L KT and 100mg/L CH.Somatic embryos were transferred to MS medium with 0.1mg/L NAA placed in the light for regeneration ,After two weeks,mature somatic embryo developed into whole phantlet.     

金银忍冬腋芽离体培养技术研究

为了提高金银忍冬苗木的繁殖速度,采用了不同培养基的配方,对其腋芽进行离体培养技术研究,尝试寻求一种最佳的离体培养方式.结果表明把消毒后的金银忍冬腋芽在超净台下切割成0.2～0.3 mm大小后转入MS＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋GA3 1.0mg/L诱导培养基中培养,萌发率可达到92％;萌发后转入MS＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.04 mg/L增殖培养基上培养,会具有较高的增殖系数;生根培养基采用1/2 MS＋IBA 0.8 mg/L＋活性炭3 g/L配方,生根效果最好,生根率可达到100％.