基因芯片技术在动物疫病诊断中的应用

基因芯片技术是20世纪90年代发展起来的一门高新技术,具有高通量、灵敏度高,特异性好等特点.它是通过微阵列技术,将高密度DNA片段阵列,通过点样或原位合成法的形式,以一定的顺序或者排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面,借助碱基互补杂交原理,进行大量病原基因表达系谱分析、检测、基因分型等.本文简要介绍了基因芯片技术在动物疫病诊断中的应用及其发展前景.     

基因芯片及其研究进展

基因芯片(genechip)又称DNA芯片,是指将大量探针分子固定于支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过杂交信号的强弱判断靶分子的数量。用该技术可将大量的探针同时固定于支持物上,所以一次可对大量核酸分子进行检测分析,从而解决了传统核酸印迹杂交技术操作复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、效率低等不足。它能在同一时间内分析大量的基因,使人们准确高效地破译遗传密码。这将是继大规模集成电路后又一次意义深远的科技革命。1基因芯片的特点1.1并行性高度的并行性不仅大大提高实验的进程,并且有利于DNA芯片技术所展示图谱的快速…     

动物疫病基因芯片诊断技术的研究进展

基因芯片(Gene Chip)又称DNA芯片或DNA微阵列(DNAmicroarray),是将大量的DNA片段按预先设计的排列方式固化在载体表面,并以此作为探针,在一定的条件下,与样品中待检测的靶基因片段杂交,通过检测杂交信号,实现对靶基因的存在、含量及变异等信息的快速检测。它是分子生物学和微细加工技术(micro fabrication technology)相结合的产物。自从1996年美国Affymetrix公司成功地制作出世界上首批用于药物筛选和实验室试验用的生物芯片,并制作出芯片系统,此后世界各国在芯片研究方面快速前进,不断有新的突破。它是生物芯片(Biochip)中发展最成…     

基因芯片技术在药物研究中的应用

生物芯片是由现代分子生物学技术结合微加工技术制成的具有一定生物学分析检测功能的微型器件，以DNA芯片和PCR、毛细管电泳及介电电泳为代表。九十年代以来，在人类基因组实施计划的推动下，DNA芯片技术得到了迅猛的发展，具在生命科学的研究中开始发挥作用。DNA芯片技术能够同时分析成千上万个基因或基因组，研究与疾病诊断相关的基因序列，可用于药理基因组学研究与基因重复测序工作，它在药学领域将对于药物靶标的发现、多靶位同步超高通量药物工筛选、药物作用的分子机理研究、中医药基础理论的现代化、药物活性和毒性评价等领域具有其它方法无可比拟的优势。美国Affymetrix公司已开始与Merck公司、Hoffmanlaroche公司等合作，将基因芯片技术用于新药筛选；Incyte Pharmaceuticals,Synteni,Nanogen等公司也采用基因芯片技术进行新筛选，以期从天然药物或合成物中筛选出基因相关药物。     

基因芯片技术的应用前景

基因芯片技术是当今生命科学领域一项新兴的尖端应用型技术 ,是融微电子学、生物学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新科技 ,并已成为国际上的前沿和热点。基因芯片技术虽然仅有几年的发展历史 ,但在生命科学诸多领域中已显示出巨大的潜力和诱人的前景。1　概述基因芯片技术是随着“人类基因组计划”研究的发展和大规模测序的需要应运而生的。 1 994年 ,美国Affrymetrix公司首先发明了基因芯片技术。基因芯片 ( genechip)又称DNA芯片 ,是指将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针 ,利用原位合成与合成点样技术 ,密集、规律地排…     

DNA多态性与奶牛泌乳性状相关基因的研究进展

DNA多态性研究是对动物分子育种学研究非常有效并且得到广泛应用的方法。本文介绍了RFLP、RAPD、SSCP、HMA及基因芯片5种DNA多态性分析的方法，并概括了这些方法的原理及其优缺点。在此分析基础上，笔者对DNA多态性在乳蛋白基因、催乳素基因、核外基因、weaver基因与奶牛产乳性状的关系做了综述。     

基因芯片技术检测细菌耐药性

1　基本概念生物芯片 (Biochip)是指将大量的生物分子探针以大规模阵列形式排布在很小的载玻片、尼龙网等载体上 ,通过与标记的样品进行杂交 ,检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量。依据生物分子探针的不同 ,生物芯片可分为很多种类 ,包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片。目前研究最成功的且形成一定商业市场的是 DNA芯片 (DNAchip或DNA Microarry) ,又称为基因芯片 (Gene chip) ,即将无数预先设计好的寡核苷酸、c DNA、基因组 (Ge-nomic) DNA在芯片上做成点阵 ,与样品中同源核酸分子杂交。包括两种模式 :一是…     

基因芯片技术及其在微生物检测中的应用

基因芯片技术是20世纪90年代发展起来的一门高新技术。应用该技术可以对大量的遗传信息进行快速、高通量、并行检测,解决了传统检测方法中遇到的难题,已广泛应用于基因表达分析、突变检测、核酸多态性分析、基因测序和药物筛选等几乎所有的生物学研究领域。作为一种高通量的基因检测方法,基因芯片技术在微生物检测和鉴定方面的应用越来越多,具有巨大的应用潜力。文章简要介绍了基因芯片技术的基本概念和技术流程,综述其在微生物检测和鉴定中的应用。     

抑制性消减杂交技术在动物疫病防控中的应用

抑制性消减杂交技术(SSH)是一种高效分离差异表达基因的方法,可以在转录水平研究机体在不同生理时期、环境变化、疾病等条件下的基因表达差异,因其具有灵敏度高,重复性好的特点,已被广泛用于寻找差异基因的研究。为筛选与病原体致病相关基因,了解病原体与感染细胞之间的分子响应机制,从分子水平探讨某病原体的致病机制;为研究不同强弱毒株之间的毒力差异,寻找新的毒力基因。应用SSH技术,可以同时从病原体和宿主细胞两个层面进行基因表达差异研究。通过构建病原体表达的差减文库或宿主细胞的表达差异文库,分别寻找病原体或宿主细胞的差异表达基因,为进一步研究病原体在机体内引起的各种病变的分子机制,以及今后动物疫病的基因治疗及基因疫苗的研制奠定基础。     

基因组学在肠炎沙门菌和禽流感病毒感染家禽研究上的应用

以基因芯片和miRNA深度测序技术相关的基因组学方法对肠炎沙门菌感染家禽中性粒子细胞差异表达基因,以及禽流感病毒感染miRNA表达谱进行了研究,为进一步研究宿主-病原体的互作机制奠定了基础.     

蓝孔雀消化系统的解剖观察

解剖观察了成年雌性蓝孔雀的消化系统。结果表明,蓝孔雀的消化系统食管内有纵行皱褶,其扩张性极大;肌胃坚实.内含较多砂砾,肌层特别发达,肫皮厚而坚韧,角质化租度高.易与肌胃壁剥离;肠管短,仅为体长的2.3倍,盲肠特别发达;胰腺特别发达,由3个大的腺叶构成。蓝孔雀的解剖学结构与其生活习性和生理功能相适应。     

中国禽群高致病性禽流感发生状况及其风险预测

本研究旨在探讨中国高致病性禽流感的发生状况,并对其风险态势进行尝试性的预测。作者在流行病学数据挖掘和模型分析基础上,基于OIE风险评估理论,结合昆虫生态学格局分析和Bernoulli统计模型,对中国2004年以来高致病性禽流感的发生状况及其风险态势进行了分析和预测。结果显示:(1)中国家禽养殖数量大,养殖模式复杂,种类繁多,养殖的区域特征显著,给中国HPAI的防控带来了挑战;(2)中国自2004年发生HPAI以来,疫情发生的时-空连续性强,突出表现在疫情发生的季节、区域和宿主特征明显,提示科学的区域化管理和协作的重要性;(3)在发展态势上,由于区域周边疫情特点和中国禽群养殖及风险管理状况,使得中国局部地区禽群在相当长的一段时间内存在较大的暴露和感染的风险;(4)风险预测上,利用Bernoulli统计模型和信息技术,预测2008年中国禽群在90%的置信区间内最有可能会有2～10起HPAI疫情发生,发生6起左右的高致病性禽流感疫情可能性较大,其中在中国东南部分地区局部区域禽群具有较高的疫情暴露和发生风险。本研究表明中国禽群持续发生HPAI疫情的可能性大,开展基于风险的区划和管理对疫情发生和控制具有积极意义。     

一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株的基因组特征

为了监测我国近年来流行的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况,采用RT-PCR分段扩增,对2009年从山东发病猪场分离到的1株PRRSV SD0901的全基因组进行了序列测定和分析.结果表明,不包括Poly(A)尾,该毒株的基因组全长为15 320 nt;与高致病性PRRSV毒株间的全基因组核苷酸相似性为98.6％～98.7％;该毒株基因组的Nsp2编码区除存在与高致病性毒株相同的30个氨基酸的不连续缺失外,还存在468位的氨基酸缺失和在585-586位间插入1个氨基酸,同时,该毒株的结构蛋白GP2、GP3、GP4和M编码区分别存在1个氨基酸的突变.演化分析表明,该毒株尽管与高致病性毒株属于同一亚群,但形成一个独立的小分支.由此表明,该毒株为高致病性PRRSV的变异毒株,说明我国的高致病性PRRSV在流行过程中已出现变异.笔者的研究结果为监测和分析我国的高致病性PRRSV的变异与演化提供了有价值的基因组信息数据.     

入侵植物银胶菊对山东不同性状土壤的适应性

银胶菊(Parthenium hysterophorus)是一种重要的危险性外来入侵植物,为明确其潜在的扩散蔓延区域,在山东省不同区域采集31份土壤,并在盆栽条件下研究了银胶菊对采自山东省31份土壤的适应性。结果表明,银胶菊的生长对土壤依赖性不强,在23份土壤中生长正常,占总土壤份数的74.19%。从8个土壤性状指标来看,土壤水解性氮含量、有效磷含量、速效钾含量、有机质含量以及土壤类型5个指标的高低不影响银胶菊正常生长,而土壤pH、土壤质地和土壤盐分含量3个指标是影响银胶菊生长的主要指标,其中银胶菊不适合在强酸性土壤、粘壤土或砂性土、盐分含量高的土壤生长。从区域来看,山东省鲁中山区和鲁西北平原区的土壤最适合银胶菊生长,另外胶东丘陵区、胶潍河谷平原区和鲁南山区也比较适合其生长,但鲁北滨海区和鲁西南平洼区不适合银胶菊生长。     

In vitro studies of intestinal absorption and biotransformation of furazolidone]

The intestinal biotransformation and absorption of the nitrofuran furazolidone were investigated in isolated gut cells and in the isolated perfused gut. In case of inhibiting furazolidone metabolism by high oxygen tension almost equal concentrations of the parent compound were measured on the mucosal and serosal side of the perfused gut segments. Lowering oxygen supply in order to adjust it to physiological conditions caused a complete degradation of furazolidone in isolated gut cells. Accordingly, hardly any unchanged furazolidone was detected on the serosal side of the isolated perfused gut. An open-chain cyanometabolite was formed in both systems indicating a reductive metabolic process which induces highly reactive intermediates. This metabolite also reached the serosal side of the gut representing the systemic circuit. Thus, the low systemic bioavailability is due to the considerable intestinal metabolism rather than a limited absorption. Unknown metabolites will reach the systemic circuit, the toxic potential of which is still obscure. Independent of its metabolic degradation, thus probably due to its redox cycle furazolidone inhibited intestinal functions as e. g. the flow of water and the transport of sodium.     

盐生植物小花碱茅CYP86A基因的RNAi载体构建

拒盐型盐生植物小花碱茅根系具有高度木栓化的内皮层可能是其抵御盐胁迫的重要策略之一。本研究以盐胁迫下小花碱茅幼苗的根为材料,采用RT-PCR方法扩增到木栓质生物合成关键基因CYP86A的RNAi靶片段,以中间载体pHANNIBAL和植物表达载体pART27为基础,采用酶切连接结合In-Fusion的克隆方法成功构建了以35S启动子驱动,含PtCYP86A基因片段反向重复序列的RNAi植物表达载体pARC,为利用RNAi技术深入探究根系木栓化在小花碱茅拒盐中的功能奠定基础。     

牛蛙源达卡气单胞菌的分离鉴定及毒力特性分析

采用细菌形态与生化鉴定方法并结合16SrRNA及gyrA基因测序分析,对海南省文昌市某养殖场死亡牛蛙病变组织中分离获得的1株优势菌株WC0803进行鉴定,并对其进行致病性试验、药物敏感性试验及耐药基因和毒力基因检测.结果显示,该菌株为革兰阴性短杆菌,培养特性、生化反应与达卡气单胞菌(Aeromonas dhakensi...     

鹿角的化学成分及药理活性研究进展

鹿角是一种传统中药,具有广泛的药理活性和医疗保健功能,被历代医药学家所推崇,具有巨大开发利用及经济价值,本文对多种鹿角化学及药理活性方面的研究进展进行了综述,并对其开发前景提出展望,为合理开发鹿角资源,提供科学的理论依据。     

禽传染性喉气管炎病毒TK基因狄高辛探针的研制及应用

应用狄高辛标记禽传染性喉气管炎病毒（ＡＩＬＴＶ）ＴＫ基因制备探针,经斑点杂交显色后,探针同以ＡＩＬＴＶ北京株为模板的ＴＫ基因ＰＣＲ产物及北京株核酸均呈阳性紫色斑点,而与正常尿囊液、新城疫病毒和火鸡疱疹病毒、禽传染性支气管炎病毒无反应,２株确诊为ＡＩＬＴＶ的野外分离毒也呈阳性。本研究结果表明,该ＴＫ基因探针是敏感和特异的,可用于禽传染性喉气管炎和其它呼吸道疾病的鉴别诊断。