牛泰勒虫病的防治

<正>牛泰勒虫病俗称焦虫病,是由环形泰勒虫引起的通过蜱类传播的一种寄生虫病,对养牛业危害极大。此病在莎车县阿不来提汗牧场发生后使养牛业遭受巨大损失。此牧场170头牛,平均发病率为     

牛泰勒焦虫病的诊断与防治

牛泰勒焦虫病是一种季节性很强的地方性流行性疾病，发病率高。如果预防措施不到位，会导致发病牛大量死亡。牛泰勒焦虫病在我县多年来未曾发生．在坪沟乡镇罗山村更是第一次，根据发病情况，临床症状，剖检变化，实验室诊断等确诊为牛泰勒焦虫病。报告如下：     

乳牛环形泰勒虫病的诊断与防治

依据流行病学、临床症状、剖检变化可以初步诊断乳牛环形泰勒虫病。采用实验室检查,制作血液涂片,以姬姆萨氏或瑞特氏染色后进行显微观察,在红细胞内发现虫体即可确诊该病。     

牛环形泰勒虫巢式PCR诊断方法的建立

根据GenBank上发表的环形泰勒虫Tams1基因序列设计2对巢式引物,成功建立了环形泰勒虫病的巢式PCR快速检测方法.验证试验结果表明,PCR扩增产物测序结果与GenBank收录的Tams1序列同源性在92%～99%,对环形泰勒虫检测具有良好的特异性、重复性以及灵敏度.对新疆焦虫病疫区牛群血样检测发现,巢式PCR检出率为62.2%(61/98),高于常规PCR检出率(58.2%,57/98)和血涂片镜检检出率(35.7%,35/98),提示该巢式PCR方法可用于大规模的环形泰勒虫病的流行病学调查.     

牛泰勒焦虫血源细胞的生长与代谢

探讨了含致弱的牛环形泰勒焦虫裂殖体的血源白细胞 (简称牛泰勒焦虫血源细胞 )在方瓶中的生长与代谢特性。结果表明 ,牛环形泰勒焦虫血源细胞在小方瓶中接种 7.5× 10 4cells/ml,经 84h达最高值 11.6× 10 4cells/ml,接种后在 4 8h内 ,细胞基本处于生长的适应期 ;4 8～ 84h ,细胞快速增殖 ,处于对数生长期 ;在 84～ 12 0h ,细胞基本处于稳定期状态 ;当细胞培养到 12 0h以后 ,活性开始急速下降 ,细胞进入衰亡期 ,到 14 4h ,活细胞只有8.5 6 %。在细胞培养 10 8h以内 ,葡萄糖基本处于缓慢的直线消耗状态 ,由起始浓度 2 .2 91g/l降至 0 .0 3g/l。葡萄糖耗竭 12h后 ,细胞开始快速死亡     

牛环形泰勒焦虫病的诊断与治疗

<正>6月我团某养殖户的55头黄牛,突发以高热稽留、精神萎顿、食欲废绝、淋巴结肿大、便秘、腹泻、粪便带血、贫血、眼帘尾根等薄嫩皮肤出现溢血斑点等症状,先后有22头牛死亡。经临床诊断、病理解剖、实验室检测,诊断为牛环形泰勒焦虫病,经采取相应治疗和预防措施,疫情得以控制,早期病牛全部康复。     

牛环形泰勒虫病PCR诊断方法的建立及其应用研究

[目的]建立快速检测牛环形泰勒病的PCR诊断方法.[方法]根据牛环形泰勒虫裂殖子的表面抗原(Tams1)基因,设计一对特异性引物,以地方阳性病例提取的DNA为模板,用PCR扩增出目的条带,经克隆、测序分析后,通过优化反应体系,建立牛环形泰勒虫病的PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性进行验证试验.[结果]测序结果表明,扩增的目的片段与已知基因序列相似性为99;;该方法检测与牛的其他血液原虫无交叉反应,其最低检出限量为1.6×102 copies/μL.应用所建立的PCR检测方法对新疆吐鲁番市周边疑似地区419份牛全血进行了检测,结果阳性率为52.3; (219/419),而血液涂片检出率为43.7;(183/419).[结论]建立的牛环形泰勒虫PCR快速诊断方法具有有一定的特异性和敏感性,可用于牛环形泰勒虫病的分子诊断和流行病学调查.     

新疆牛环形泰勒虫Tamsl基因的克隆与序列分析

采用PCR技术,从新疆焦虫病疫区感染牛的全血中扩增到Tamsl基因,该基因长度为846bp,编码281个氨基酸。同源性分析表明,该基因与其他9个国际流行虫株的核苷酸同源性为93．6％～99．8％,氨基酸同源性为88．6％～99．6％。系统发育进化树分析表明,新疆分离株同印度株、毛利塔尼亚株、土耳其株、北非共和国株进化途径一致,与苏丹株和巴林株进化途径相差较远。氨基酸抗原决定簇分析发现新疆分离株编码的氨基酸有13个抗原决定簇。     

新疆牛环形泰勒虫Tams1基因的克隆与序列分析

采用PCR技术,从新疆焦虫病疫区感染牛的全血中扩增到Tams1基因,该基因长度为846 bp,编码281个氨基酸.同源性分析表明,该基因与其他9个国际流行虫株的核苷酸同源性为93.6%～99.8%,氨基酸同源性为88.6%～99.6%.系统发育进化树分析表明,新疆分离株同印度株、毛利塔尼亚株、土耳其株、北非共和国株进化途径一致,与苏丹株和巴林株进化途径相差较远.氨基酸抗原决定簇分析发现新疆分离株编码的氨基酸有13个抗原决定簇.     

新疆牛环形泰勒虫TamsⅠ基因原核表达条件的优化及蛋白纯化

为了提高新疆牛环形泰勒虫TamsⅠ基因在大肠杆菌中的表达量,研究了温度、诱导时间以及诱导剂（IPTG）浓度等不同条件对TamsⅠ融合蛋白表达量的影响。试验结果表明,大肠杆菌菌株BL21（DE3）在37℃培养2．5h后,使用终浓度为2mmol／L的IPTG在25℃振荡诱导培养8h时,GST—TamsⅠ融合蛋白表达量最高,达到2．5rmg／mL。用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST—TamsⅠ融合蛋白进行纯化,SDS-PAGE检测表明GST-TamsⅠ融合蛋白大小约为56kl）,与预计的分子量大小一致。TamsⅠ基因的优化表达为牛环形泰勒虫病的分子免疫学诊断和哑单位疫苗的研制奠定了基础。     

浅析牛环形泰勒焦虫病的诊断与防治

1流行病学牛环形泰勒焦虫病传播者主要是残缘玻眼蜱。残缘玻眼蜱是一种二宿主蜱,主要寄生于牛。幼虫和若虫期在带虫牛或痊愈牛体上吸入病原体,成虫期将病原传给易感牛,使其发病。病原不能在蜱内经卵传递。残缘玻眼蜱幼虫11月上旬出现于牛体,饱血后,在11月下旬至12末全部蜕皮变为若蜱,在牛体上过冬。     

牛环形泰勒虫GST-Tams1融合蛋白间接ELISA检测方法的建立

[目的与方法]以纯化的牛环形泰勒虫GST-Tams1融合蛋白作为检测抗原,通过优化ELISA反应条件,建立检测牛环形泰勒虫血清特异性抗体的间接ELISA方法.[结果]方阵试验确定的GST-Tams1抗原的最适包被浓度为10 μg/mL,血清最佳稀释倍数为80倍,ELISA阳性反应的临界值为OD<,450>≥0.282,批内和批间重复试验的变异系数均小于15;.Tams1间接ELISA方法能排除GST的干扰,与其它梨形虫病无交叉反应,与环形泰勒虫病巢式PCR检测方法的阳性符合率为96;.[结论]建立的Tams1间接ELSIA检测法重复性好、特异性强、灵敏度高.这是国内首次利用重组蛋白建立的牛环形泰勒虫病血清学诊断方法,为大规模地进行牛环形泰勒虫病的流行病学调查和血清学诊断提供有效的技术手段.     

新疆牛环形泰勒虫虫病的流行病学调查

[目的]2006～2008年全疆14个地州的牛环形泰勒虫病流行病学调查.[方法]使用已建立的牛环形泰勒虫病间接ELISA检测方法,以纯化的重组蛋白GST - Tams1作为抗原.[结果](1)牛环形泰勒虫病仍是新疆牛梨形病的主要病原.在2006年采集的278份牛血清样品中,阳性血清31份,感染率为11.15;.2007年,在532份牛血清样品中检出阳性血清61份,感染率为11.47;.在2008年的530份牛血清中检出阳性血清61份,感染率为11.51;.(2)2008年,在地方流行性疫病区牛环形泰勒虫感染率高达24;.[结论]新疆牛环形泰勒虫病的特点是疫区分布广,感染率居高不下,保持在11;以上,对动物和人类构成一定的威胁.这是新疆首次利用血清学方法对全疆牛环形泰勒虫病进行大规模的流行病学调查.     

牛泰勒虫病的诊断及防治办法

梅河口市位于吉林省南部山区,每年4～8月份牛泰勒虫病呈散发状态流行,但是2012年天气转暖,再加上买卖牛只的频频交易,本病发生较早,而终止晚,给养牛业带来一定的损失。2012年收治12头病例,均用三氮脒粉治疗,治愈10例,死亡2例,疗效理想。现将环形勒病的诊断、防治重点介绍如下:     

牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因真核表达载体的构建及免疫反应性研究

研究采用PCR 方法从焦虫病患牛的全血基因组中扩增得到846 bp 的Tams1 基因片段,将其克隆至真核表达载pcDNA3.1(+),构建Tams1基因的真核表达质粒.经测序验证后, 将Tams1基因的真核表达质粒尾静脉注射小白鼠进行Tams1 基因的瞬时表达.取接种小鼠的肝脏提取总RNA,采用RT-PCR 扩增目的条带;用重组质粒pcDNA3.1(+)-Tams1 皮下注射免疫小白鼠4 次后,进行免疫抗体检测.试验结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1含有完整的Tmas1基因片段.用该重组质粒免疫小鼠56 d后,小鼠血清中抗重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1的抗体效价可达1∶12 000以上,说明该重组质粒具有很强的抗原性.经Western-blot检验可得到抗原-抗体复合物产生的特异性条带,说明该重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1具有免疫原性.     

绵羊巴贝斯虫单一种的分离及其繁殖特性观察

甘肃陇东地区自然发病羊,混合感染有小型和大型两种巴贝斯虫,一种小型虫体被鉴定为绵羊巴贝斯虫(Babesia ovis),另一种大型巴贝斯虫(B.sp.)尚难确定其分类地位.本文报告绵羊巴贝斯虫单一种的分离及其繁殖特性观察.用自然感染小尾寒羊混合种(以大型虫体为主)含虫血,由颈部皮下接种702号除脾山羊,在接种后第11天的血液涂片中查到了典型的大型双梨籽形虫体,第14天的血片中也见到了绵羊巴贝斯虫.这两种虫