荆豆凝集素-1受体在兔子宫内的分布与激素调节

采用组织化学方法对荆豆凝集素-1(ulex europaeus agglutinin-1,UEA-1)受体在兔发情周期及早期妊娠子宫内的分布以及激素调节进行了研究.结果显示,UEA-1受体主要存在于兔子宫内膜腔上皮,其表达量随妊娠阶段的不同而发生动态性变化.UEA-1受体在休情期兔子宫内未见表达,而在发情期兔子宫内的表达量较高.在早期妊娠兔子宫内,在妊娠第1天子宫内膜腔上皮表面UEA-1受体的表达量较高,妊娠第2天和第3天时在子宫内膜腔上皮表面仅见有少量UEA-1受体的表达,妊娠第4天时,子宫内膜腔上皮表面UEA-1受体的表达量很高,此后其表达量又迅速下降,在妊娠第5至第7天时未见表达.在假孕兔子宫内UEA-1受体的表达方式与正常妊娠时相似.注射雌激素可明显促进卵巢切除后兔子宫内膜UEA-1受体的表达,而注射孕酮对其表达有明显抑制作用.结果表明,兔子宫内UEA-1受体的分布与着床前胚胎与子宫内膜之间的黏附和植入有关,UEA-1受体在兔子宫内的表达受母体分泌的激素所调控.     

花生凝集素受体在兔子宫内的分布与激素调节

采用组织化学方法对花生凝集素(peanut aggutinin,PNA)受体在兔发情周期和早期妊娠子宫内的分布以及雌、孕激素对其表达的影响进行了研究.结果显示,PNA受体主要存在于兔子宫内膜腔上皮和腺上皮,其表达量随妊娠阶段的不同而发生变化,PNA受体在休情期、发情期及妊娠第1天的兔子宫内未见表达,在妊娠第2至第4天时表达量逐渐增加,且在妊娠第3至4天时表达量最高,此后,在妊娠第5至7天时表达量逐渐减少,妊娠第7天时,着床区子宫内PNA受体的表达量略高于非着床区.假孕兔子宫内PNA受体的表达与正常妊娠时相似.注射孕酮可促进卵巢切除后兔子宫内膜PNA受体的表达,而注射雌激素对其表达有明显抑制作用.结果表明,PNA受体在兔子宫内的分布与着床前胚胎与子宫内膜之间的黏附有关,PNA受体在兔子宫内的表达受母体分泌的孕酮和雌激素所调节.     

Smad2在附植后早期绵羊子宫内膜和滋养层的分布

Smad2是TGFβ超家族蛋白的胞质内信号转导分子,以往的研究证实Smad2的mRNA表达和定位于大鼠、小鼠子宫。本项研究的目的是用免疫组织化学方法检测Smad2蛋白在附植早期（妊娠32天）绵羊子宫内膜的分布。选山西省太谷县本地绵羊,于秋季交配后32天（32 day post coitus, dpc）,解剖取材子宫和胎衣组织,制作石蜡切片,用免疫组织化学方法检测了Smad2蛋白在子宫内膜的分布。结果显示Smad2蛋白定位于子宫腔上皮、腺上皮和上皮下方的基质中;胚胎附植处Smad2高表达,胎衣滋养层组织也呈现Smad2强阳性表达。结论：Smad2表达于附植早期绵羊子宫内膜和滋养层,可能参与子宫内膜和附植后胚胎发育的调节。     

白血病抑制因子（LIF）及其受体在月经 周期猕猴卵巢内的表达

应用免疫细胞化学方法对白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor, LIF）、白血病抑制因子受体（leukemia inhibitory factor receptor, LIFR）和gp130在月经周期猕猴卵巢内的表达进行了研究。结果表明：LIF、LIFR和gp130在猕猴卵巢内的表达量随月经周期的不同而变化，LIF及其受体在增殖期卵巢内的表达量高于分泌期的卵巢。LIF及其受体在原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡的卵细胞内表达量均较高，在颗粒细胞、卵泡膜、卵巢生殖上皮和卵巢基质中有少量表达，而在闭锁卵泡、退化的黄体和卵巢髓质中未见表达。LIF及其受体在猕猴卵巢内的表达可能受卵巢分泌的类固醇激素所调控，LIF可能通过自分泌或旁分泌的方式在猕猴卵泡发育及排卵等过程中起重要作用。     

GlyCAM-1在自然发情绵羊子宫中的表达研究

旨在研究GlyCAM-1 在绵羊自然发情子宫组织中的表达变化,以期为周期发情绵羊子宫中GlyCAM-1 的表达受孕酮诱导调控的推测提供支持。运用实时荧光定量PCR和免疫印迹法对绵羊自然 发情后子宫第10、12、14、16 和18 天GlyCAM-1 mRNA和蛋白表达变化进行检测。实时荧光定量PCR结果显示：在绵羊发情后的第10~18 天之间,子宫组织中GlyCAM-1 的表达呈现先下降再上升的趋势,发情后的第10 天GlyCAM-1 在转录水平表达出现峰值,并且显著的高于另外4 个时段(P<0.05),第12 天GlyCAM-1 mRNA水平显著下降(P<0.05),第14~16 天的表达量保持相对恒定,第18 天GlyCAM-1 mRNA水平再次显著升高(P<0.05),但仍低于第10 天水平(P<0.05)。Western Blotting 检测结果显示：绵羊在自然发情后的第10~18 天,子宫内膜上的GlyCAM-1 蛋白表达量的变化亦呈现出先下降后上升的趋势,与其他4 个时间点相比第10 天的蛋白表达量达到峰值(P<0.05),第12~16 天GlyCAM-1 的蛋白表达量没有显著变化(P>0.05),GlyCAM-1 的蛋白表达量在第18 天显著升高(P<0.05)。GlyCAM-1 在转录与翻译水平的表达变化一致,呈现先下降后上升的趋势。该结果为周期发情绵羊子宫中GlyCAM-1 的表达可能受 孕酮诱导调控的推测提供支持。     

不同来源牛体外胚胎与牛子宫内膜细胞共培养体系的建立

为了初步建立有效的牛胚胎与子宫内膜细胞的体外共培养体系。本实验分别将体外受精第7天后的胚胎和孤雌激活,与培养7天的胚胎与子宫内膜细胞共培养,在48 h和72 h后分别统计体外受精实验组和孤雌激活实验组的孵化率。实验结果表明：在本实验室培养条件下,在与子宫内膜细胞共培养48 h后,体外受精胚胎和孤雌发育胚胎在孵化率上存在显著差异(40±5)%、(25±5)%,(P＜0.05);与子宫内膜共培养72 h后,孵化率无显著差异(70±8.66)%,(65±5)%,(P＞0.05)。本实验证明了在体外环境下,牛体外胚胎与子宫内膜细胞共培养后能够正常孵化,可以初步建立起牛体外胚胎与子宫内膜细胞的体外共培养体系,并为进一步研究该体系对牛体外胚胎培养质量的影响奠定一些基础。     

GlyCAM-1在人工诱导发情绵羊子宫的表达研究

为探讨GlyCAM-1在人工诱导发情绵羊子宫组织中的表达变化,应用荧光实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测在绵羊发情后第10、12、14、16、18天子宫组织中GlyCAM-1的表达情况。荧光实时定量PCR结果显示：GlyCAM-1 mRNA表达量在第10~18天呈现先减少后增加的趋势,其中绵羊发情后第10天GlyCAM-1 mRNA的相对表达量最大,显著高于其他4个时间点(P<0.05),第12天显著降低 (P<0.05),之后相对保持恒定,到第18天又显著升高(P<0.05)。Western blot检测结果证实,GlyCAM-1蛋白约34 kD,子宫组织中GlyCAM-1蛋白表达量在第10~18天亦呈现先逐渐减少然后又逐渐增加的波动趋势,其中发情第10天蛋白表达量最多,显著高于其他4个时间点(P<0.05),第12、14、16天GlyCAM-1的表达量降低但变化不明显(P>0.05),第18天表达量显著升高(P<0.05)。在绵羊发情后第10~18天,GlyCAM-1在子宫的转录、表达呈现先减少后增加的波动变化趋势。     

Wnt7a和孕酮受体在人工受精奶牛受孕前后表达规律研究

旨在筛选奶牛早期妊娠诊断标志因子,将奶牛早期妊娠检测时间窗口提前提供理论基础,从而提高奶牛养殖经济效益。北京某牛场选10头荷斯坦奶牛,在输精后第1、4、7、10、13、16、19天取血,通过荧光定量PCR和western blotting方法分析Wnt7a和PR的表达趋势和变化规律。通过直检对10头荷斯坦奶牛的怀孕检测,其中有7头受孕3头未受孕。通过检测受孕和未孕的奶牛血液中Wnt7a基因和PR基因的表达量,发现Wnt7a基因在受孕奶牛血液中的表达量均高于未孕奶牛,特别是输精后第7天受孕奶牛的表达量显著增高,Wnt7a的蛋白质水平表达呈现出类似趋势;PR基因在全部10头奶牛中呈现出从输精后第一天表达开始降低,并一直维持一个很低的表达状态。Wnt7a具有作为奶牛早期妊娠诊断标志因子的潜质,其优势在于将检测窗口提前到输精后的第7天;PR不具有作为标志因子的优势。通过探究影响早期妊娠的相关因子变化规律,可以为孕检的时间窗口提前到早期妊娠阶段提供理论依据。     

E2通过p38MAPK及PI3K/Akt信号通路调控奶牛子宫内膜上皮细胞中COX-2的表达

为了探究p38 MAPK及PI3K/Akt信号通路是否参与雌二醇(E2)对奶牛子宫内膜上皮细胞中COX-2的表达及PGF2α分泌的调节,通过体外培养妊娠早期奶牛子宫内膜上皮细胞,并添加E2单独或联合p38 MAPK抑制剂SB203580和PI3K抑制剂LY294002处理奶牛子宫内膜上皮细胞.通过Western Blo...     

碳酸酐酶4基因在母鸡输卵管不同部位的差异表达分析

母鸡贮精腺位于输卵管的子宫阴道交接部和伞部,为探究鸡碳酸酐酶4基因在输卵管不同部位的表达情况,以探明该基因是否在母鸡贮精腺部位高表达,为进一步研究禽类贮精腺的贮精机理奠定基础。参考鸡CA IV基因序列,在其保守区设计特异性引物,并以鸡β-actin基因为内参基因建立荧光定量方法,基于荧光定量分析CA IV基因在鸡输卵管伞部、膨大部、峡部、子宫部、子宫阴道交接部和阴道部的表达。结果表明,子宫阴道交接部的CA IV基因表达量最高,伞部次之,在膨大部、峡部、子宫部和阴道部表达量较低。CA IV基因在子宫阴道交接部的表达量显著高于在伞部、膨大部、峡部、子宫部和阴道部的表达(P0.05),在伞部的表达量显著高于膨大部、峡部、子宫部和阴道部的表达(P0.05)。CA IV基因在母鸡输卵管子宫阴道交接部和伞部位的高表达预示着其参与贮精腺内的精子储存。     

猪性别畸形的发病机理

对一例雄性假两性畸形家猪进行了细胞遗传学、病理学和性激素及其受体的研究,应用放射免疫分析法测定了患猪60—80日龄时血浆睾酮和孕酮水平,以及静脉注射LH(200iu)后血浆睾酮浓度变化,还测定了性皮肤及子宫内膜的胞浆和胞核的二氢睾酮受体(DHTR)和雌二醇受体(ER),结果表明:在90日龄时性别畸形猪血浆中睾酮水平比雄猪低约50%,但在180日龄时接近雄猪水平,达92%,性畸形猪血中未测到孕酮,性皮肤组织的胞浆和胞核内DHTR含量均比雌雄对照猪低.胞浆中DHTR浓度为雄性对照动物的22.2%,为雌性对照的64%,胞核内分别为65%和56%,性畸形猪子宫组织中雌二醇受体(ER)较正常雌猪显著为低.本文讨论了该性别畸形猪的雌性性染色体与其睾丸发育的关系.其性皮肤中DHTR的浓度明显低下,是本病例具有雄性性腺,但未有雄性性器官发育的根本原因.     

XX／XY真两性畸形猪发病机理探讨

供试真两性畸形猪表型雌性,有不规则的雌性情期.该猪为38,XX/XY嵌合体.X染色质阳性率30.66%.左侧阴囊内为卵睾,卵巢表面有发育成熟的滤泡,睾九曲细精管内无精子,Leydig细胞被结缔组织替代;右侧卵睾隐于腹腔内,睾丸曲细精管缺如,Leydig细胞增多,卵巢发育良好.在发情周期中雌激素(E)和睾酮(T)呈规律性波动.在连续5周的血样分析中,血浆T含量高出雌性对照一倍,与雄性对照差异不显著(P>0.05);血浆E含量与雌雄对照差异均极显著(P<0.01).给予LH负荷后,血浆T2小时达峰值,是注射前的近5倍;第3小时降至基础值.本研究通过对真两性畸形猪卵巢的发生和性染色体嵌合型以及性激素和副性器官分化的分析,探讨了性别畸形发病机理的部分问题.     

奶牛冷冻胚胎规模化移植效果研究

为了提高奶牛良种化程度,对奶牛冷冻胚胎的规模化移植效果进行了研究。结果表明:PG二次肌注法的发情率显著高于(P<0.05)PG一次肌注法,两种方法的发情同期率均超过85%,受体牛发情时间多集中在肌注PG后48～72h;胚胎解冻后的复苏率达到82.58%,且早期囊胚与囊胚的复苏率要高于桑椹胚(P>0.05);共移植受体牛218头,受胎97头,受胎率为44.5%,且春、秋季的移植效果差异不显著(P>0.05)。为奶牛冻胚的规模化移植研究提供了参考依据。     

嗜银细胞在300日龄中国黄羽鹌鹑消化道中的形态与分布

为消化系统的生理和病理学研究提供形态学依据,研究300日龄中国黄羽鹌鹑(Coturnix aponica)消化道嗜银细胞的分布和形态。取消化道各段,应用Grimelius银染法处理,观察嗜银细胞的分布、形态,并统计消化道各段嗜银细胞的分布密度,采用独立样本T检验法对雌雄进行了比较。结果表明：在黄羽鹌鹑的口腔、食管、嗉囊、肌胃和泄殖腔未发现嗜银细胞,在消化道其他部位均有嗜银细胞,其分布曲线大体呈现波浪形,2个高峰分别出现在腺胃和结直肠,空肠的分布密度最低。嗜银细胞主要分布在腺胃腺叶内细胞、肠黏膜上皮细胞、肠固有层和肠腺泡上皮细胞之间。其形态多样,包括锥形、梭形、圆形、椭圆形等等,其中锥形嗜银细胞的突起伸向肠腔,梭形嗜银细胞两端均有突起,分别指向固有层和肠腔。说明黄羽鹌鹑消化道嗜银细胞的分布可能与其种属有关,结合黄羽鹌鹑消化道嗜银细胞分布与形态可以推测其有内分泌、外分泌和旁分泌3种功能。     

烤烟腺毛的形态学观察和密度研究

为了开展烤烟品种间的腺毛形态和腺毛密度的规律性研究,以7个烤烟品种为试验材料,在扫描电子显微镜和光学显微镜下对烤烟腺毛的形态进行了观察,并对腺毛的数量和分布进行了统计、分析和研究。结果表明,烤烟腺毛根据柄细胞的数量分为长柄腺毛和短柄腺毛,长柄腺毛是烤烟叶片表面的优势腺毛,短柄腺毛的发生较晚、数量稳定,其头部分泌细胞体积小、数量较多。7个烤烟品种中除‘龙江911’以外均表现为下表面的腺毛密度大于上表面的腺毛密度,烤烟叶片下表面的腺毛密度更能反映出品种的腺毛密度特征。长柄腺毛在烤烟叶片腺毛总体中所占的比例远大于短柄腺毛,对叶片腺毛总体密度的影响最大;短柄腺毛虽然所占的比例相对较小,但是其对烟叶香气的贡献是不可忽视的。腺毛密度在不同的烤烟品种间具有一定的特征性,按照叶片上、下表面的腺毛密度平均值排列顺序是：‘吉烟7号’>‘龙江915’>‘龙江851’>‘K346’ >‘NC89 ’>‘龙江911’>‘CF978’。     

雌二醇对哺乳动物子宫内膜血管生成调控的研究进展

随着畜牧养殖业的发展,雌性动物的妊娠问题已经越来越突出。值得关注的是,在畜牧兽医产科临床上,妊娠过程中动物子宫血管的生成不足会导致胚胎着床困难增加、流产和胎儿停止发育等问题。近年来临床及实验室对肿瘤血管生成的作用及生成机制的研究颇多,因肿瘤血管的生长机制与子宫内血管的生长机制存在一定的类似性。所以,借鉴肿瘤血管生成的相关研究,了解血管生成的作用及血管生成的机制,为后期进一步研究雌二醇对反刍动物子宫内膜血管形成的机制奠定基础。     

小鼠输卵管中标记滞留细胞的定位研究

本研究旨在探讨小鼠输卵管中标记滞留细胞的存在与分布情况。C57乳鼠从出生后第3天开始,每隔1天分别在9:00和16:00皮下注射BrdU（5-溴-2-脱氧脲苷）,8周后对输卵管取材进行冰冻切片和免疫荧光染色,用以检测BrdU标记滞留细胞的定位情况。结果显示：经过长周期的定位示踪,输卵管中有标记滞留细胞的存在,这些细胞自输卵管远端（壶腹部方向）至近端（峡部方向）呈现明显的梯度分布,并且其主要位于上皮组织中。以上结果表明,成年小鼠的远端输卵管上皮中很可能存在相应的前体细胞或干细胞。     

建池农户对沼气后续管理有偿服务的采用意愿及影响因素分析

本研究从服务受体农户的角度,采用问卷调查和个案访谈相结合的方法,以全国7个样本村为对象,对农户对沼气后续管理有偿服务的采用意愿及影响因素进行了研究与分析。研究表明：建池农户对沼气后续管理有偿服务有了一定的认知和了解。影响农户对沼气后续管理有偿服务采用意愿的农户个体因素为,户主年龄与采用意愿呈显著负相关、户主的教育水平与采用意愿呈显著正相关,农户经济收入水平与采用意愿呈显著正相关,农户耕地面积与采用意愿呈正相关,农户不同的种植结构对采用意愿的影响差异显著;农户不同的养殖结构对采用意愿的影响差异显著,养殖猪牛羊的农户更愿意采用有偿服务。环境因素为农户对沼气改善环境功能的认知程度与采用意愿差异显著,农户对服务网点的评价与采用意愿差异显著。