饲料禁抗背景下规模化猪场胞内劳森菌的流行病学调查

为掌握在饲料禁抗和养殖端限抗背景下规模化猪场胞内劳森菌的流行情况,为猪增生性肠炎的精准防控提供依据。该研究运用巢式PCR和间接ELISA方法对饲料禁抗后不同来源的粪便样品和血清样品进行检测。饲料禁抗背景下,对采自不同猪场695份粪样的巢式PCR检测显示,猪群胞内劳森菌的总体感染率为23.88%,保育猪、肥育猪和种猪感染率分别为16.56%、29.58%和24.63%。对饲料禁抗和饲养期间限抗猪群的跟踪调查结果为,保育猪在30、44、58、72日龄的感染率分别是16.67%、20.00%、50.00%和70.00%;后备母猪的感染率44.44%—66.67%。对338份不同猪场送检血清样品的ELISA检测显示,胞内劳森菌的抗体阳性率为42.6%,不同猪场的阳性率10%—75.90%。上述结果表明,现阶段我国规模化猪场胞内劳森菌PCR检测阳性率和ELISA检测的阳性率均处于较高水平。饲料禁抗以及饲养期间限抗的保育猪和后备母猪群跟踪调查的最高感染率分别达70%和66.67%,保育猪随着饲养日龄的增加感染率呈明显地升高趋势。因此,在饲料禁抗背景下,规模化猪场应更加重视猪增生性肠炎的防控。     

宁夏部分地区猪场PRRSV流行情况调查

在宁夏3个地区14个规模养殖场开展流行病学调查,共采集700份血清,用ELISA方法检测抗原,用RT-PCR方法检测病毒核酸。结果显示,14个规模场中,未免疫PRRSV猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗疫苗的猪场抗原检测个体流行率为24.86%,群体流行率为57.14%,免疫猪场个体阳性率为15.14%,群体阳性率为42.86%;病毒核酸检测未免疫猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的猪场个体阳性率为6.00%,群体阳性率为14.29%,免疫猪场个体阳性率为2.57%,群体阳性率为14.29。表明宁夏部分地区存在猪繁殖与呼吸障碍综合征感染情况。     

胞内劳森氏菌lsaA基因克隆与序列分析

目的:克隆并分析胞内劳森氏菌(Lawsonia intracellularis,LI)lsa A基因,为研究该基因提供基础。方法:根据已发表的LI基因组序列,设计2条引物,提取猪回肠黏膜的LI基因组,并用PCR技术扩增lsa A基因,将其克隆、测序,进行序列同源性、蛋白抗原性预测等分析。结果:扩增出与702 bp引物相符的基因片段,与Gen Bank的序列同源性为98.4%,该基因编码的蛋白预计具有良好的抗原性。结论:胞内劳森菌las A基因的成功克隆为增生性肠炎的防控提供研究基础。     

哈尔滨地区部分规模猪场猪瘟流行情况调查

<正>猪瘟(CSF)一直是困扰哈尔滨市养猪生产的首要问题,虽然规模化、中小规模猪场对猪瘟的预防接种都极为重视,但免疫失败及隐性感染带毒现象仍十分严重。为了解本地区猪瘟流行病学动态,从而有针对性地开展防控工作,哈尔滨市动物卫生防疫站于2009年对本地区不同类型的72个商品猪场采取了以猪瘟病毒的检测及免疫抗体监测为主要内容的流行病学调查,现将调查情况报道如下。     

哈尔滨地区部分规模猪场猪瘟流行情况调查

<正>猪瘟(CSF)一直是困扰哈尔滨市养猪生产的首要问题,虽然规模化、中小规模猪场对猪瘟的预防接种都极为重视,但免疫失败及隐性感染带毒现象仍十分严重。为了解本地区猪瘟流行病学动态,从而有针对性地开展防控工作,哈尔滨市动物卫生防疫站于2009年对本地区不同类型的72个商品猪场采取了以猪瘟病毒的检测及免疫抗体监测为主要内容的流行病学调查,现将调查情况报道如下。     

胞内劳森菌检测方法研究进展

胞内劳森菌感染给畜牧业造成了巨大损失,其早期的检测与诊断显得尤为重要。本文对胞内劳森菌现有的检测方法组织病理学、血清免疫学和分子生物学等方法进行阐述,分析了各种方法的优势与不足,为临床胞内劳森菌感染的有效鉴定提供指导。     

胞内劳森氏菌PCR检测方法的建立与应用

为建立一种适用于临床检测胞内劳森氏茵(Lawsonia intracellularis,LI)的检测方法,本研究通过比较提取粪便样品基因组DNA的不同方法,结合PCR方法特异性扩增aspA基因检测临床样品中的LI.敏感性试验表明,阳性样本最低检出量为1.7×102 copie/μL;特异性试验表明,该方法对大肠杆菌、沙...     

云南省部分猪场猪瘟流行情况调查

为了解猪瘟在云南省不同区域、季节和不同生长阶段猪群中的流行分布情况,为制定科学合理的防制对策提供依据,用ELISA方法检测了秋季、冬季云南省不同地区16个规模养殖场552份抗凝全血样品中的猪瘟抗原。结果表明,受检地区的抗凝全血样品中均存在猪瘟抗原阳性样品,供检样品阳性率为9.4% (52／552) ,秋季阳性率为8.33%,冬季阳性率为10.5%。在不同生长阶段猪群中,秋季和冬季阳性率最高的为仔猪,其次为种母猪、种公猪、育肥猪。在不同区域猪群中,阳性率最高的为滇中15.5%,其次为滇东北10.8%,滇西9.4%,滇南6.4%,滇东6.1%,秋季与冬季相比,冬季滇中、滇东北、滇南阳性率明显上升,滇东和滇西阳性率明显下降。     

胞内劳森氏菌鞭毛蛋白Flic的可溶性表达与免疫原性分析

采用PCR扩增出猪回肠炎胞内劳森氏菌的鞭毛蛋白基因Flic(LI0710),再将目的基因和Msyb标签插入原核表达载体pET-28a,构建表达质粒pET28a-Msyb-Flic。然后将测序正确的质粒转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,0.5 mmol IPTG诱导阳性菌株进行蛋白表达,采用超声破碎仪破碎菌体收集蛋白。最后使用NI柱摸索纯化条件获得目的蛋白,采用Western blot检测蛋白特异性,免疫小鼠检测抗体水平。结果表明,获得了可溶性表达的胞内劳森氏菌鞭毛蛋白Flic(LI0710),用Flic(LI0710)蛋白免疫小鼠后能产生较高水平的特异性抗体,表达蛋白与小鼠胞内劳森氏菌抗血清可发生特异性反应。结果为胞内劳森氏菌亚单位疫苗的研究奠定了基础。     

猪胞内劳森氏菌lscN基因的克隆及序列分析

胞内劳森氏菌是猪增生性肠炎的病原,试验设计4条引物,采用半巢式PCR从目的 DNA中扩增出1317bp的胞内劳森氏菌lscN基因,并进行序列分析。结果表明,lscN与Gen Bank中PHE/MN1-00、N343同源性为99%,是劳森氏菌三型分泌系统组件的编码基因。     

吉林地区部分规模化猪场猪圆环病毒流行情况调查

为了解猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)在吉林部分规模化猪场的流行情况,对吉林部分地区的10家规模化猪场的704份样品进行PCR检测,分析猪场PCV流行情况、感染季节及感染地区情况.结果 表明,2017-2019年吉林地区部分规模化猪场PCV2的阳性率为42.0％(296/704),PCV3阳性...     

猪劳森氏胞内菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种快速有效的检测猪劳森氏胞内菌(LI)的方法,本研究根据该菌的天冬氨酸氨裂解酶基因保守序列设计合成一对特异性引物和一条TaqMan探针,建立了定量检测LI的荧光定量PCR方法,并对其进行敏感性、特异性、稳定性试验以及与套氏PCR方法的比较试验.结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,相关系数为0.998507;该方法对其他病原体的检测无特异性荧光信号;而且该方法灵敏度高于套式PCR方法.本研究为猪LI的检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法.     

胞内劳森菌人工感染猪的病理学观察

将猪源胞内劳森菌GXNN株在兔体传代,用感染兔肠道黏膜及内容物攻毒试验猪,成功复制出猪增生性肠炎,病猪表现为生长缓慢,腹泻,攻毒后12 d~17 d体温升高,肠系膜淋巴结肿大,回肠黏膜皱褶增厚等;病理组织学观察可见回肠有丰富的集合淋巴小结,回肠腺窝杯状细胞消失,部分腺窝上皮细胞增生,淋巴结内的淋巴小结数目增多。     

17个疑似PEP猪群中劳森氏胞内菌的检测结果

自从1993年从发生增生性肠炎(PPE)的病猪中成功地分离到劳森氏胞内菌,并复制出PPE以来,许多国家和地区都已证实存在PPE病例。但由于劳森氏胞内菌在体外培养较困难,需要特殊的细胞系,所以我国对该病的研究尚在起步阶段,目前仅有少数猪病诊断实验室能应用PCR方法来检测劳森氏胞内菌。现将我们在2004年1-10月间对17个疑似PPE猪群中劳森氏胞内菌的检测结果报告如下,供大家参考。一、材料与方法1.疑似PPE猪群的选择,应符合下列条件之一:(1)2￣4月龄猪散发性腹泻;(2)后备种猪或育肥猪急性死亡,皮肤苍白。2.检测样品的采集:腹泻粪便或回肠…     

一例猪肠道寄生虫和胞内劳森氏菌混合感染的诊治

笔者对四川德阳某发酵床猪场肥育猪发病情况、诊断、治疗进行了阐述,并对发酵床养猪存在的疫病防控方面的问题进行了讨论。     

胞内劳森菌及其所致的增殖性肠病

本综述介绍的胞内劳森菌 ,是一种弯曲状杆菌 ,无鞭毛 ,抗酸染色阳性 ,能为Warthin Starry或Lavaditti镀银法着色。该菌存在于病畜肠细胞原生质内 ,至今不能人工培养 ,但可在一些肠细胞培养中生长 ,引起猪增殖性肠病 ,还见于仓鼠、马、鹿、雪貂、大鼠、兔、狐、鸵鸟、鸸鹋等动物。可用病理学、血清学、细菌学、PCR等方法诊断 ,防治可用抗生素 ,如金霉素、tylosin、dimetridiazole、carbadax、timulin等治疗 ,至今无疫苗。     

近五年湖南省部分地区猪场主要病毒性疫病流行情况调查

对近5年湖南省部分地区猪场送检的临床病例进行统计,分析猪群病毒性疫病的发生流行情况。包括猪瘟(CSFV)、猪高致病性蓝耳病(HP-PRRSV)、猪伪狂犬(PRV)、猪口蹄疫(FMDV)、流行性腹泻(PEDV)、以及各种混合感染。结果显示近5年猪群感染PRV和PEDV的比例最高,病原阳性率分别为33.7%和34.2%;其次是HP-PRRSV,病原阳性率为33.0%;CSFV和FMDV的感染比例非常低,病原阳性率分别为0.04%和0.7%,甚至在2017年均未检测出阳性。HP-PR R SV和PR V阳性率在2014年到2017年逐年降低,但病原阳性率仍旧很高;PEDV感染率在2014年~2016年一直居高不下,2017年有所降低。根据各猪场监测情况,适时进行疫病净化,并严格执行生物安全措施,从源头控制疫病的发生。     

胞内劳森菌的纳米PCR检测方法的建立

为建立一种猪增生性肠炎(PPE)的快速诊断方法,本研究根据Gen Bank中已登录的胞内劳森菌(LI)基因组16S rDNA基因序列,设计1对引物,以疑似PPE的病料样品,通过PK-15细胞培养,分离到一株LI,建立了LI的纳米金PCR检测方法。结果表明该方法能够扩增得到与实验设计相符的202 bp(LI)的特异性片段;与大肠杆菌、沙门氏菌、流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒无交叉反应,特异性良好。与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高100倍。经临床检测,从50份病料样品中检出5份阳性样品,并且发现回肠粘膜和粪便中LI的检出率明显高于组织中LI的检出率。该方法可以用于LI的临床快速检测与流行病学调查。本研究为进一步研究LI的人工培养和实验室诊断PPE奠定了基础。     

新疆部分地区规模猪场PEDV、TGEV和RV的流行情况调查

猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（RV）是引起猪病毒性腹泻的3种主要病原,被感染的仔猪主要临床症状表现为腹泻、呕吐和脱水,因其传染性强、死亡率高,给生猪养殖业造成不可估量的经济损失,严重困扰养猪业的发展。研究调查2019年新疆维吾尔自治区部分地区规模化猪场PEDV、TGEV和RV的流行情况,为防控猪病毒性腹泻提供技术参考。     

江苏部分地区奶牛球虫病流行情况调查

为了解江苏省奶牛感染球虫的情况,笔者对6个规模化奶牛场和3个奶牛小区9个牧场的奶牛球虫感染状况进行了随机抽样调查,分别于2008年11月和2009年4月按不同年龄阶段共采集粪样2100份。调查结果显示:9个牧场都有球虫感染,1个奶牛小区牧场的感染率最高达50%,其中11月份调查的感染率为30.10%,4月份调查的感染率为36.95%,两者没有明显的差异;从不同年龄阶段奶牛的感染情况来看,发现感染率最高的2个阶段为1～6月龄和6～12月龄,感染率高达53.81%和49.52%,感染率最低的年龄阶段为1月龄以内的奶牛,感染率为12.86%;从感染强度来看,大部分牧场平均OPG低于1000,占55.56%,只有一个牧场的平均OPG比较高,为2410;从本次调查结果发现9个牧场感染有8种艾美耳球虫(E.imeria),分别是牛艾美耳球虫(E.bovis)、邱氏艾美耳球虫(E.zumii)、椭圆艾美耳球虫(E.ellipsoidallis)、阿拉巴艾美尔球虫(E.alabamensis)、亚球形艾美尔球虫(E.subspherica)、怀俄明艾美尔球虫(E.wyomigensis)、柱状艾美尔球虫(E.cylindrica)、奥博艾美尔球虫(E.auburnensis)。优势虫种为牛艾美耳球虫、邱氏艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫,其他5种球虫所占比例较少。