共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
《养猪》2020,(3)
为建立检测母猪乳汁中猪流行性腹泻病毒(PEDV)IgA抗体的间接ELISA方法,研究以PEDV重组N蛋白和纯化全病毒作为包被抗原,方阵滴定法优化反应条件,建立了两种检测猪乳汁中PEDV IgA抗体的间接ELISA方法。结果显示,重组N蛋白和纯化全病毒的最佳包被抗原浓度均为2μg/mL,检测样品最佳检测稀释度分别为1∶10和1∶30,重复性试验的变异系数均小于10%,PEDV阳性乳汁的最低检测稀释倍数分别为1∶320和1∶960,对猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病病毒等阳性乳汁均无交叉反应性,两种方法对临床样品检测符合率为97.48%。表明两种方法均具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于检测和评价乳汁中特异性PEDV IgA抗体的水平。 相似文献
2.
猪乳汁中抗猪传染性胃肠炎病毒IgA抗体间接ELISA检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立检测猪乳汁中抗猪染性胃肠炎病毒(TGEV)Ig A抗体的间接ELISA方法,本研究以TGEV重组N蛋白为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记羊抗猪Ig A为检测抗体,并采用方阵法确定包被抗原和待检乳汁的最佳工作浓度,对各种反应条件进行优化,建立了猪乳汁中TGEV Ig A抗体的间接ELISA检测方法。该方法检测稀释160倍的阳性乳清仍呈阳性;与猪流行腹泻和猪轮状病毒感染阳性乳清无交叉反应;批内和批间变异系数均小于10%。利用建立的ELISA方法与间接免疫荧光方法分别对134份临床样品进行检测,阳性检出率分别为58.2%(78/134)和59.7%(80/134),总符合率为85.6%。本研究建立的检测方法能够有效评估乳汁中TGEV Ig A抗体的水平。 相似文献
3.
间接ELISA检测禽流感抗体方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的禽流感病毒 (AIV) ,经 triton X-1 0 0处理并反复冻融制备禽流感 EL ISA抗原。应用抗鸡 Ig轻链单抗 1 B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测禽流感抗体水平的 EL ISA方法。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 EL ISA效价(ET)的回归方程 y=0 .77452 x 0 .8793 5(r=0 .9466) ,可用于定量测定。血凝抑制 (HI)抗体与 EL ISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比血凝抑制试验敏感 1 .5倍以上 相似文献
4.
猪流感抗体间接ELISA检测方法的建立 总被引:12,自引:1,他引:12
猪流感病毒A/Swine/Fujian/668/2001(H3N2)株感染的鸡胚尿囊液,经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯、纯化的猪流感病毒经NP-40处理并反复冻融,作为猪流感间接ELISA抗原,确立了间接ELISA检测方法。对29份HI试验猪流感为阴性的血清进行了检测,经统计学分析,确定间接ELISA判定标准,被检血清OD490nm值≥0.20判定为阳性。该方法对猪瘟等11种猪疫病阳性血清无交叉反应,批内和批间重复试验的吸收变异系数分别在3.34%~8.12%和6.2%~9.04%之间。与HI的符合率达到92.8%,经卡方检验(P〈0.01)比HI试验敏感。为猪流感抗体检测提供了快速、准确、简便的方法。 相似文献
5.
6.
猪囊虫病是一种危害严重的人畜共患寄生虫病,妨害公共卫生和养猪生产,在我省城市和农区分布很广。我们于2000年6月用间接ELISA对我省平安县和大通县部分户养猪进行了血清中猪囊虫抗体的检查,现将结果报导如下。1材料与方法1.1材料1.1.1血样:采自平安县和大通县农村户养的359份2到5月龄的猪只,采血样后当即分离血清并冷冻,送实验室待检。1.1.2试剂:抗原,酶标记物,标准阳性血清和标准阴性血清稀释液和冲洗液由兰州兽医科学研究所提供,其它试剂均由市场购得,为化学纯有效试剂。1.1.3ELISA检… 相似文献
7.
牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
以纯化的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作为抗原免疫BALB/C系小鼠,通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞接种于BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水,腹水单抗与BVDV均呈阳性反应.将5A9、2G3和5C2(分别结合不同的抗原结合位点)诱生的BVDV单抗纯化后等量混合包被酶标板,与鸡抗BVDV IgY(检测抗体)联合应用,建立BVDV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法.采用方阵滴定法确定单抗、鸡抗BVDV IgY的最适工作浓度,用阴性组织样品作为判定检测结果的D490临界值,最后以建立的AC-ELISA检测临床粪样棉拭子27份,结果表明:该方法敏感性、特异性高,与全血病毒分离结果的符合率迭86.36%;与全血和粪样RT-PCR检测结果的符合率分别为89.47%和94.74%.阴性对照RT-PCR、病毒分离和AC-ELISA检测均为阴性. 相似文献
8.
9.
10.
为建立一种检测猪丹毒杆菌血清抗体的ELISA方法,本研究将猪丹毒杆菌(1a型)云南分离株ZY15074的超声裂解的全菌蛋白作为包被抗原,通过反应条件的优化,建立了猪丹毒杆菌抗体间接ELISA检测方法。特异性试验结果显示该方法与猪其它10种常见病原阳性血清均无交叉反应。该方法对阳性血清的敏感性为1/256。重复性试验结果显示批内、批间变异系数均小于10%。对160份临床血清样品比对试验结果显示该方法与国外间接ELISA方法的符合率为90.6%。本研究建立的间接ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,可以用于猪丹毒杆菌血清抗体检测和流行病学调查。 相似文献
11.
间接ELISA检测禽霍乱抗体方法的建立 总被引:9,自引:0,他引:9
用多杀性巴氏杆菌 TJ8菌株制备ELISA抗原 ,与抗鸡 Ig单抗 1 B7酶结合物建立了检测鸡血清抗体水平的间接 ELISA方法。交叉试验、阻断试验、重复性试验等表明该方法重复性好、特异性强 ,灵敏度高。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 ELISA效价(ET)的回归方程 y=1 .4981 + 0 .391 9x(P>0 .0 5 ) ,可用于定量测定。间接凝集试验与ELISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比间接血凝试验敏感性高 4倍以上 相似文献
12.
13.
检测牛轮状病毒抗体间接ELISA方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
利用CsCI密度梯度离心化的牛轮状病毒作为包被抗原,建立了检测牛轮状病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(EuSA).用牛病毒性腹泻病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌制备的对照包被抗原与牛轮状病毒阴性和阳性血清反应,其结果均无交叉反应,说明该方法具有良好的特异性,可用于牛轮状病毒抗体的检测. 相似文献
14.
15.
16.
以纯化的口蹄疫病毒作为包被抗原,建立了检测鹿口蹄疫抗体的间接酶联免疫吸附测定(ELISA)。最佳反应条件是:抗原包被质量浓度为40μg/mL,血清稀释度为1:100,检测的灵敏度为1:400。 相似文献
17.
本研究以副结核杆菌亲和层析抗原为检测抗原,检测以草分枝杆菌抗原吸收的待检鹿血清,建立检测鹿副结核病血清抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其抗原最佳包被浓度为40μg/mL,血清样品稀释度为1:80,兔抗鹿IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1:8000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。对不同地区4个鹿场的760头份鹿血清进行副结核病抗体检测,其中阳性61头份,阳性率为8%,获得副结核病在我国鹿群中的血清流行病学资料,从而为防制鹿副结核病提供一定的依据。 相似文献
18.
鸡痘是由鸡痘病毒(FPV)引起的鸡的一种接触性传染病,可引起鸡只大批死亡,尤其对雏鸡造成的损更严重失,使用疫苗进行免疫预防是控制本病的重要措施[1-2]。检测鸡血清中鸡痘抗体,可以了解疫苗免疫状况和机体感染情况。试验采用ELISA方法检测鸡痘病 相似文献
19.