三黄连散预防罗非鱼链球菌病临床应用研究

在开展三黄连散对人工感染罗非鱼无乳链球菌病预防效果研究的基础上,进一步验证以每千克饲料中添加13.2 g的三黄连散为推荐剂量,在生产中大面积应用的临床效果及安全性。设立三黄连散试验组、中药对照组和空白对照组3个组,每组300尾罗非鱼,连续用药7 d后,每组随机取30尾,测定增重率、器官指数、血液生理生化指标和肝脏抗氧化指标。用药后第8天,采用同居感染的方法感染鱼群,于感染后第14天计算保护率。结果表明,给药7 d后,与空白对照组相比,三黄连散试验组罗非鱼的增重率明显提高,器官指数和多项肝脏抗氧化指标均明显升高,血液生理生化指标总体无明显异常,预防无乳链球菌感染的保护率为43.67%。综上提示,三黄连散能够提高罗非鱼机体抵抗力,降低无乳链球菌感染罗非鱼的死亡率。     

三黄连合剂对罗非鱼人工感染无乳链球菌的预防作用

为了研究三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病的预防作用,通过给罗非鱼投喂添加含中药复方提取物"三黄连合剂"的饲料,观察中药复方提取物对人工感染无乳链球菌罗非鱼保护作用,并以氟苯尼考作为抗生素药物对照。结果表明,给药组罗非鱼攻毒后死亡率明显小于感染不给药对照组。30 m L/kg、60 m L/kg、120 m L/kg"三黄连合剂"添加组、0.05 g/kg氟苯尼考添加组的罗非鱼死亡率分别为低于对照组的25(p0.05)、25(p0.05)、33.33(p0.01)和45.83(p0.01)个百分点;保护率分别为26.08%、34.78%、47.82%和26.08%。其中以120m L/kg添加剂量保护效果较好,30 m L/kg"三黄连合剂"保护效果与0.05 g/kg氟苯尼考相当。本试验结果说明,三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病具有较好的预防效果。     

三黄连散对罗非鱼人工感染无乳链球菌的保护作用

试验选用高剂量(26.40 g/kg)、中剂量(13.20 g/kg)和低剂量(6.60 g/kg)的三黄连散饲喂人工感染无乳链球菌的罗非鱼,观察并记录其临床症状和死亡率,旨在明确三黄连散对罗非鱼人工感染无乳链球菌的预防作用。结果显示,高剂量和中剂量的三黄连散保护率分别为77.77%和55.55%,且与市售三黄散相比,效果较稳定。研究表明,三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的预防作用较好。     

不同剂量三黄连散对罗非鱼感染无乳链球菌防治效果的试验研究

试验旨在从临床症状、疗效评价、死亡率和保护率等方面探索三黄连散对罗非鱼感染无乳链球菌预防效果的量效关系并据此进行剂量筛选。将210尾罗非鱼随机分为7组（即1.67 g/kg剂量组、3.30 g/kg剂量组、6.60 g/kg剂量组、13.20 g/kg剂量组、26.40 g/kg剂量组、无乳链球菌感染对照组和空白对照组）,每组30尾鱼。各剂量试验组饲喂含不同剂量三黄连散的饲料,无乳链球菌感染对照组和空白对照组投喂基础饲料,并于第8天,各剂量试验组和感染组腹腔注射浓度为5.40×107CFU/mL的无乳链球菌菌液,空白对照组腹腔注射灭菌生理盐水。结果表明：攻毒后12 h,感染对照组和剂量组都出现了明显的临床症状并伴随急性死亡。感染对照组的临床症状始终保持较高分值,不同剂量药物组评分均低于感染对照组,13.20 g/kg剂量组和26.40 g/kg剂量组评分呈现出平稳且下降的趋势。无乳链球菌感染对照组的罗非鱼死亡率为73.33%,1.67 g/kg剂量组、3.30 g/kg剂量组和6.60 g/kg剂量组死亡率与感染对照组比较差异不显著（P>0.05）;而13.20 g/kg和26....     

鱼腥草散预防罗非鱼链球菌病临床效果的初步研究

为探究鱼腥草散对罗非鱼链球菌病的预防作用。本试验选取罗非鱼540尾,随机分为6组,每组90尾。其中第1组为空白对照组,投喂基础饲料,第2组、第3组、第4组、第5组和第6组为试验组,分别在日粮中添加5 g/kg、10 g/kg、20 g/kg、30 g/kg、40 g/kg鱼腥草散进行投喂,连续喂养35天后,进行生长指标、血液生理生化指标、免疫指标和抗氧化指标的测定;第36天进行攻毒试验,从第1组中随机挑选60尾罗非鱼分为空白对照组30尾和感染对照组30尾,分别从第2组、第3组、第4组、第5组和第6组随机挑取30尾罗非鱼做为药物1组、药物2组、药物3组、药物4组和药物5组,除空白对照组腹腔注射0.2 mL生理盐水外,感染对照组和5个药物组罗非鱼腹腔注射菌液0.2 mL浓度为1.51×10⁸CFU/mL的无乳链球菌菌液,连续观察7天。结果：与空白对照组相比,饲料中添加鱼腥草散能够显著(P<0.05)提高罗非鱼增重率、特定生长率、肝脏指数及血清中酸性磷酸酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性;与感染对照组相比,药物5组的攻毒保护率最高。本研究结果发现...     

三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果观察

为开发三黄连散于水产养殖防治细菌性疾病的应用,通过常规检查和PCR技术对试验菌株进行罗非鱼无乳链球菌鉴定后,检测三黄连散对该菌的体外抑菌效果。结果试验菌株为罗非鱼无乳链球菌,血清型为Ia型、II型、dIts型。三黄连散对该菌的最小抑菌浓度(MIC)为15.625mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为31.25mg/mL;1/2×MIC和1×MIC能抑制对数生长期的菌体分裂,2×MIC能抑制细菌进入对数生长期。本研究表明:三黄连散对罗非鱼无乳链球菌有良好的体外抑菌效果,可为其临床应用提供依据。     

猪场常见问题解答(47～67)

其它常见疾病47.链球菌病怎样预防?怎样治疗?除了常规的环境卫生和消毒工作外,可采取以下措施。免疫在断奶前免疫接种链球菌弱毒活苗,注意接种前后各4天饲料中不能添加任何抗生素,以免影响免疫效果。欧洲一些国家采用自家灭活苗接种预防链球菌病,但有时同一猪体内可能感染不只一种链球菌菌株,而分离到的不一定是主要的致病菌株,接种后保护率不一定高。也可以采用自家组织灭活苗接种的方法预防,但这样抗原浓度不容易定量。药物预防断奶后补饲料中添加枝原淨100×10-6 金霉素300×10-6 阿莫西林250×10-6,连用10天,可有效预防支原体、链球菌以…     

三黄连合剂亚慢性毒性试验

为考察三黄连合剂对动物的安全性,采用大鼠进行长期毒性试验。设三黄连合剂20 g/kg、10 g/kg、5 g/kg剂量组及空白对照组。连续给药30 d,观察给药期间和停药后7 d大鼠的临床表现,于停药后第1天(试验第31天)和停药后7 d(试验第38天)分别进行腹主动脉采血,用于血常规指标和血清生化指标检测,同时剖检并采集大鼠实质性脏器计算脏器指数及制作石蜡组织切片。结果显示,三黄连合剂高、中、低剂量组与对照组相比除个别指标外,其余指标差异均无统计学差异(P0.05),且未见与药物有关的病理变化。结果表明三黄连合剂安全性好。     

裸花紫珠颗粒对罗非鱼源无乳链球菌体外抑菌活性研究

无乳链球菌是导致罗非鱼链球菌病的主要病原菌。为探讨裸花紫珠颗粒对无乳链球菌体外抑菌活性，采用肉汤二倍稀释法测定裸花紫珠颗粒对无乳链球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),同时进行标准无乳链球菌和临床分离无乳链球菌对常用抗菌药的敏感性试验。结果表明，裸花紫珠颗粒对罗非鱼源无乳链球菌的最低抑菌浓度(MIC)为10.000 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为20.000 mg/mL;药敏试验结果显示临床分离株无乳链球菌对四环素、环丙沙星、氟苯尼考的敏感性降低。该结果为下一步开展裸花紫珠对罗非鱼临床保护试验研究奠定了基础。     

罗非鱼无乳链球菌特异性IgM抗体ELISA检测方法的建立及对疫苗免疫效果的评估

为建立检测罗非鱼无乳链球菌特异性抗体的方法及评价疫苗的免疫效果,本研究首先制备纯化罗非鱼无乳链球菌特异性IgM和兔抗罗非鱼无乳链球菌IgM的IgG,利用原核表达纯化的无乳链球菌ScpB蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,建立检测无乳链球菌特异性IgM抗体的ELISA方法,并通过比较测定无乳链球菌疫苗免疫后血清抗体水平变化与攻毒后相对免疫保护率的关系来评估该方法的有效性。结果表明:该方法仅能够特异性的检测罗非鱼的血清抗体,而与其它鱼类的血清抗体无交叉反应,特异性良好,其敏感性为1∶800,批内、批间变异系数均小于10%,具有较好的重复性,并且抗体水平的变化与相对免疫保护率(RPS)变化具有平行相关性,变化趋势基本一致。本研究首次建立了检测罗非鱼无乳链球菌特异性IgM抗体的ELISA方法,该方法可以作为评估无乳链球菌疫苗免疫效果的有效手段,也为罗非鱼无乳链球菌病的检测提供技术支撑。     

三黄连散的亚慢性毒性试验研究

探讨大鼠长期口服三黄连散的亚慢性毒性作用。将80只大鼠随机分为空白对照组、三黄连散低(2.5 g/kg·BW)、中(5.0 g/kg·BW)和高剂量组(10.0 g/kg·BW),每组20只,雌雄各半,采用混饲给药的方式连续给药30 d,每日观察临床表现,记录体重和饲料消耗量,停药后继续观察7 d。分别于给药后30 d和停药后7 d进行血液常规指标、血液生化指标和脏器解剖学、病理学检查。结果显示,给药期间和停药后,各试验组大鼠未出现中毒和死亡情况,临床症状、解剖学检查等均无异常变化,脏器指数、组织病理学检查结果均无异常;血液常规指标、血液生化指标结果表明该药物无毒副作用,仅见高剂量组大鼠的体重和饲料消耗量显著低于空白对照组(P0.05)。结果表明,三黄连散给大鼠连续饲喂30 d未见明显毒性反应。     

三黄连散对靶动物（罗非鱼）的安全性试验

研究旨在评价三黄连散对罗非鱼的安全性,选择150尾健康的罗非鱼,随机分为5组,分别为对照组和1、3、5、10倍推荐剂量组,每组3个重复,每个重复10尾鱼。试验期14 d。三黄连散拌料连续给药7 d,分别于第8 d和第15 d检查各组器官指数、血液生理指标、血液生化指标和肝脾组织病理学的变化。结果显示,各组的器官指数均无显著差异（P>0.05）;三黄连散可显著降低罗非鱼的平均红细胞体积（P<0.05）;各剂量组肝脏、肾脏功能良好;三黄连散以推荐剂量的10倍亦未引起细胞毒性变化。研究表明,三黄连散在1～10倍推荐剂量下饲喂7 d安全可靠,无毒副作用。     

饲料中添加几丁聚糖对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、免疫调控与抗海豚链球菌感染的影响

本试验旨在探讨饲料中添加几丁聚糖对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、免疫调控与抗海豚链球菌感染的影响。选择健康、均重为(2.97±0.02)g的吉富罗非鱼375尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复25尾鱼。5组试验鱼分别饲喂在基础饲料中添加0(对照)、10、20、30和40 m L/kg几丁聚糖溶液(几丁聚糖的有效浓度为0.6%)的试验饲料。饲喂63 d后,测定各组试验鱼的生长性能指标、血常规指标、血清生化指标、头肾免疫相关基因的表达量以及海豚链球菌感染192 h后的累计死亡率。结果表明:与对照组相比,饲料中添加几丁聚糖对吉富罗非鱼幼鱼的特定生长率、存活率及血清总蛋白与甘油三酯含量无显著影响(P0.05),但是添加量为10和20 m L/kg时可显著降低肝体比和血清皮质醇含量,提高血液红细胞数目、白细胞数目和血红蛋白浓度、红细胞压积以及血清溶菌酶和超氧化物歧化酶活力,促进头肾白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α和干扰素基因的表达(P0.05);同时,添加量为20 m L/kg时还可显著增加饲料效率,降低血清葡萄糖、胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇含量,提高高密度脂蛋白胆固醇含量(P0.05)。海豚链球菌感染192 h后,10和20 m L/kg添加组的累计死亡率分别为30.06%和32.38%,显著低于对照组的51.19%与40 m L/kg添加组的77.55%(P0.05)。由此得出,饲料中添加10和20 m L/kg几丁聚糖溶液有助于降低吉富罗非鱼幼鱼的肝体比与肝脏应激,提高非特异性免疫功能。同时,20 m L/kg添加量可以有效地促进饲料利用,降低血清脂肪沉积。在实际生产中,建议在吉富罗非鱼饲料中添加10~20 m L/kg的几丁聚糖溶液(几丁聚糖的有效浓度为0.6%),以促进吉富罗非鱼健康养殖。     

那西肽对奥尼罗非鱼生长性能及饲料利用率的影响

试验通过设7个那西肽添加组(那西肽0.25~3mg/kg饲料),设1个空白对照组、1个黄霉素药物组(8mg/kg饲料),研究了饲料中添加那西肽或黄霉素后对奥尼罗非鱼生长性能、存活率、饲料利用率的影响。结果表明,与空白对照组相比,经过50d的养殖试验,饲料中添加那西肽和黄霉素均能显著提高奥尼罗非鱼的生长率达10.57%~47.78%(P0.05);降低饵料系数达4.60%~16.67%(P0.05)。     

中草药水提物对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果

研究中草药单药及复方联合用药对罗非鱼源无乳链球菌的体外抑菌效果。采用试管二倍稀释法分别测定10种中草药水提物对临床分离的罗非鱼源无乳链球菌的最小抑菌浓度(MIC),筛选出抑菌作用较好的7味中草药,并采用棋盘稀释法测定这7味中草药不同组合联用后对罗非鱼源无乳链球菌的部分抑菌浓度(FIC index)。结果表明,10味中草药水提物中,黄连和五倍子水提物抑菌效果最好,MIC值均为3.9 mg/mL,其次为石榴皮,MIC为15.6 mg/mL,连翘、诃子、鸡血藤及黄芩MIC均为62.5 mg/mL。金银花、板蓝根以及蒲公英抑菌效果较差。在复方联合用药试验中,黄连分别与诃子和黄芩联合,连翘分别与鸡血藤和黄芩联合,诃子分别与石榴皮、鸡血藤和黄芩联合均呈现协同作用;其余药物联用组合均呈现无关或拮抗作用。     

中草药水提物对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果

研究中草药单药及复方联合用药对罗非鱼源无乳链球菌的体外抑菌效果。采用试管二倍稀释法分别测定10种中草药水提物对临床分离的罗非鱼源无乳链球菌的最小抑菌浓度(MIC),筛选出抑菌作用较好的7味中草药,并采用棋盘稀释法测定这7味中草药不同组合联用后对罗非鱼源无乳链球菌的部分抑菌浓度(FIC index)。结果表明,10味中草药水提物中,黄连和五倍子水提物抑菌效果最好,MIC值均为3.9 mg/mL,其次为石榴皮,MIC为15.6 mg/mL,连翘、诃子、鸡血藤及黄芩MIC均为62.5 mg/mL。金银花、板蓝根以及蒲公英抑菌效果较差。在复方联合用药试验中,黄连分别与诃子和黄芩联合,连翘分别与鸡血藤和黄芩联合,诃子分别与石榴皮、鸡血藤和黄芩联合均呈现协同作用;其余药物联用组合均呈现无关或拮抗作用。     

海藻多糖可溶性粉增强猪免疫功能的临床应用研究

为进一步探讨海藻多糖可溶性粉作为饲料添加剂在猪的规模化生产中大面积应用的临床效果及安全性,选取35～50日龄临床自然感染猪圆环病毒2型(PCV2)仔猪150头,随机分为3组,每组50头,分别设供试药物组(在饲料中添加海藻多糖可溶性粉200 mg/kg,连用7 d)、药物对照组(在饲料中添加黄芪多糖粉200 mg/kg,连用7 d)和阳性对照组(不处理)。于用药前1 d、用药后第7天和第14天每组随机选择10头试验猪测定血清中猪白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子和免疫球蛋白G(IgG)水平。结果表明,在临床自然感染猪圆环病毒2型(PCV2)的仔猪日粮里添加200 mg/kg海藻多糖可溶性粉能升高猪血清中IL-2、 IL-6、TNF-α、IFN-γ和IgG水平;试验期间,在仔猪日粮中添加200 mg/kg海藻多糖可溶性粉连用7 d无不良反应出现。由该试验结果可以得出,海藻多糖可溶性粉能够提高猪的免疫功能,临床使用是安全的。     

中西药结合预防肉鸡腹水综合征的临床试及防治机理探讨

将一日龄艾维因肉仔鸡(雌雄各半)180只在同一舍内饲养,14日龄时将其随机分成4组,其中Ⅰ、Ⅱ组饲料按1％分别添加我们研制的方剂一和方剂二,连续用药15d,为药物预防组;Ⅲ组在饲料中按0.05％添加肾肿腹水消,连用7d(药品要求的预防剂量),为药物对照组;Ⅳ组饲料中不添加任何药物,为空白对照组。Ⅰ-Ⅳ组发病率分别为0、10％、3％和20％,42d时Ⅰ、Ⅳ组体重高于其它组,Ⅰ平均体重为1972.92g,Ⅳ组平均体重为1989.91g。试验表明方剂一为该试验条件下预防肉鸡腹水综合征最有效的方剂,其保护率可达100％,且不影响出栏重。对方剂一预防肉鸡腹水综合征的机理进行探讨。     

不同温度下无乳链球菌感染罗非鱼死亡率及各组织HSP70基因表达研究

以体质量为(100.0±10.0) g的尼罗罗非鱼为研究对象,设置生长最适宜组(28℃)和高温应激组(35℃)2个处理水平,暂养7 d后分别进行人工感染试验统计累计死亡率,并于细菌感染后24、48、72、96、120 h,采集组织检测HSP70基因表达水平,探讨高水温下无乳链球菌感染罗非鱼过程中HSP70的作用机制,为制定控制无乳链球菌病的合理策略提供数据支撑。试验结果表明,LD₅₀攻毒试验中,28℃组试验尼罗罗非鱼在感染后48 h内没有死亡,感染120 h的累计死亡率为20%;而35℃组试验罗非鱼在感染24 h后累计死亡率就达到13.3%,在感染120 h后累计死亡率达到53.3%。各组织中,HSP70基因的表达随时间的延长呈先升高后降低的趋势,鳃中24 h的表达量为最高,鱼脾、肠和肝中48 h的表达量为最高。说明水温35℃组无乳链球菌感染的罗非鱼累计死亡率显著高于28℃组,水温28℃组和35℃组的HSP70基因的表达变化趋势一致。     

添加山豆根多糖对吉富罗非鱼生长性能及生理生化指标的影响

在前期研究基础上,选取最佳药物剂量2 g/kg的山豆根多糖(Sophora subprosrate polysaccharide,SSP)添加到罗非鱼饲料中,验证该剂量山豆根多糖对罗非鱼的生长性能及生理生化指标的作用效果。将罗非鱼分为山豆根多糖组(在饲料中添加2 g/kg的山豆根多糖)、黄芪多糖对照组(在饲料中添加20 mg/kg的黄芪多糖)和空白对照组(投喂罗非鱼基础饲料)。每组3个生物学重复,每个重复100尾罗非鱼,连续养殖30 d后,对各试验组罗非鱼的生长性能、血液生理生化指标及血清和肝脏的抗氧化指标进行测定。结果显示,山豆根多糖组罗非鱼的增重率和特定生长率极显著高于空白对照组(P<0.01);山豆根多糖组罗非鱼血液中淋巴细胞比率(LYMPH)极显著高于空白对照组(P<0.01),且和黄芪多糖对照组相比差异不显著(P>0.05);山豆根多糖组罗非鱼血清中白蛋白(ALB)和碱性磷酸酶(ALP)水平显著低于其他试验组(P<0.05),且其谷丙转氨酶(ALT)水平与空白对照组相比差异不显著(P>0.05);与空白对照组相比,山豆根多糖组极显著提高了罗非鱼血...