白藜芦醇对山羊冷冻精子质膜、DNA完整性和温度耐受性的影响

试验旨在研究白藜芦醇对山羊冷冻精子质膜、DNA完整性和温度耐受性的影响。采用假阴道法采集8只云上黑山羊精液,用含不同浓度（0、0.1、1、10和20 μmol//L）白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装,对照组不添加白藜芦醇。在5 ℃平衡4 h后,将细管于液氮蒸气中预冻10 min,最后在液氮中保存30 d。37 ℃水浴解冻后,采用低渗耐受性试验检测质膜完整性和温度耐受性,精子染色质扩散法检测DNA碎片率等指标。结果显示,10 μmol/L白藜芦醇冷冻组精子弯尾率显著高于其他各处理组（P<0.05）,而其他各冷冻组之间无显著性差异（P>0.05）;10 μmol/L白藜芦醇冷冻组精子DNA碎片率极显著高于鲜精组（P<0.01）,极显著低于未添加白藜芦醇冷冻组（P<0.01）。温度耐受性试验结果表明,不同浓度白藜芦醇冷冻组精子37 ℃水浴1 h后的精子弯尾率以10 μmol/L冷冻组最高,与其他各冷冻组间差异极显著（P<0.01）;精子弯尾率随着孵育时间的延长而呈逐步下降的趋势,当孵育4 h时,10 μmol/L白藜芦醇冷冻组精子弯尾率与对照组无显著差异（P>0.05）。透射电镜结果表明,10 μmol/L白藜芦醇组精子质膜完整率显著高于不添加白藜芦醇对照组（P<0.05）。上述结果表明,在冷冻稀释液中添加白藜芦醇可显著改善山羊冻精质膜状态、DNA完整率和温度耐受性,其最佳作用浓度为10 μmol/L,但白藜芦醇是否能改善山羊冻精的人工授精效果还有待进一步研究。     

白藜芦醇对山羊冷冻精液质量的影响

本实验旨在研究白藜芦醇对山羊冻精质量的改善效果。用假阴道法采集8只云上黑山羊精液,用添加不同浓度(0、0.1、1、10、20μmol/L)白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装,其中不添加白藜芦醇组为对照组。在5℃平衡4 h后,将细管于液氮蒸气中预冻,最后在液氮中保存1周。37℃水浴解冻后测定精子活力、顶体完整性、膜完整性和磷脂酰丝氨酸分布等指标。结果表明:与对照组相比,10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子直线运动百分率和质膜完整性均提高(P<0.05);10μmol/L白藜芦醇抑制了冷冻解冻后精子ROS的产生(P<0.05);而20μmol/L白藜芦醇冷冻组精子解冻后直线运动百分率低于其他各处理组(P<0.05);白藜芦醇不能缓解冷冻解冻过程对精子总活力、顶体完整性和磷脂酰丝氨酸分布的不利影响。总之,冷冻稀释液中添加10μmol/L白藜芦醇可以改善山羊冻精质量,这可能与白藜芦醇的抗氧化特性有关;但过高浓度的白藜芦醇加重精子的冷冻损伤程度。白藜芦醇是否能提高山羊冻精的人工授精效果还有待进一步研究。     

白藜芦醇对绵羊冷冻精液质量的影响

试验旨在研究白藜芦醇对绵羊冷冻精液质量的改善效果。采用假阴道法采集6只云南半细毛羊精液，用含不同浓度（0、0.1、1、10、20 μmol/L）白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装，低温平衡和液氮气相预冻后，在液氮中保存30 d。解冻后测定精子活力、质膜完整性、磷脂酰丝氨酸（PS）分布、顶体完整性和活性氧等指标。结果表明，解冻后10 μmol/L白藜芦醇组精子总活力、直线运动百分率、精子弯尾率分别为76.14%±0.97%、43.56%±0.91%、43.24%±1.68%，均显著高于其他各组（P<0.05）；而20 μmol/L白藜芦醇组精子总活力、直线运动百分率、精子弯尾率分别为21.78%±0.79%、25.23%±1.34%、4.84%±0.68%，均显著低于其他各组（P<0.05）。10 μmol/L白藜芦醇组精子顶体完整性最高，为50.47%±0.91%，显著高于其他各处理组（P<0.05）。PS分布结果表明，10 μmol/L白藜芦醇组正常精子百分率为46.43%±2.95%，显著高于20 μmol/L组（31.14%±3.56%，P<0.05），与其他各组无显著性差异（P>0.05）。20 μmol/L白藜芦醇组PS标记率（39.82%±3.38%）显著高于其他处理组（P<0.05）。活性氧试验结果表明，10 μmol/L白藜芦醇组正常精子（63.57%±0.71%）显著高于其他各组（P<0.05）；而20 μmol/L白藜芦醇组正常精子（32.45%±1.42%）显著低于其他各组（P<0.05）。综上，在冷冻稀释液中添加白藜芦醇可以改善绵羊冷冻精液品质，这与白藜芦醇的抗氧化特性有关。但是，白藜芦醇的冷冻保护效果具有明显的浓度依赖性，其最佳作用浓度为10 μmol/L，过高浓度的白藜芦醇反而加重精子的冷冻损伤。此外，对于白藜芦醇对绵羊精子的抗冻保护效果仍然需要体外受精或人工授精验证。     

红景天多糖对藏猪精液冻后品质及精子基因组DNA甲基化的影响

在藏猪精液的冷冻液中添加不同质量浓度的红景天多糖(0,2,4,6,8,10mg/L),制成高密度细管冻精,以冷冻解冻后精子活率、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为精液品质的评价指标,筛选最适红景天多糖添加质量浓度;用甲基化荧光定量法检测3组(鲜精组、未添加组、最适添加组)精子基因组DNA甲基化的水平。结果显示:添加红景天多糖质量浓度为6mg/L组的精子活率显著高于其他组(P<0.05),该组精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率也显著好于未添加组(P<0.05);这3组精子基因组的DNA甲基化水平(0.610 5±0.080 0,0.945 7±0.043 7,0.680 2±0.051 0)中,最适添加组虽显著高于鲜精组(P<0.05),但却显著低于未添加组(P<0.05)。结果表明:在藏猪精液冷冻液中添加质量浓度6mg/L的红景天多糖不仅可以明显改善藏猪精液冻后品质,而且可以明显减少冷冻对藏猪精子基因组DNA甲基化水平的影响,这将为提高藏猪精液冷冻保存效果的进一步研究提供参考。     

白藜芦醇对山羊精液常温保存效果的影响

为研究白藜芦醇对山羊精液常温保存效果的影响，实验通过假阴道法采集健康黑头山羊精液，在基础稀释液中分别添加0、25、50、100、200μmol/L白藜芦醇溶液，常温保存过程中检测精子活力、质膜完整率、顶体完整率、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果表明：与0μmol/L组相比，在基础稀释液中添加白藜芦醇能提高黑头山羊常温保存精子的活力、质膜完整率和顶体完整率(P<0.05)，并提升精液T-AOC水平，降低ROS及MDA含量(P<0.05)；其中黑头山羊精液常温保存时白藜芦醇的适宜添加浓度为25μmol/L。本研究证实了在精液稀释液中添加白藜芦醇可改善黑头山羊常温保存的精液品质，保存3 d对母羊受胎率无显著影响。     

添加咖啡因、亚牛磺酸对牛精子功能的影响

为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因(0、2.5、5.0、7.5mmol/L)或亚牛磺酸(0、5、10、20、40μmol/L)的获能处理液中,且每个处理组加入约200μL的精液,在CO_2培养箱里经上游处理45min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组(P0.05),且2.5mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组(P0.05),且20μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5mmol/L咖啡因组和对照组(P0.05)。因此,20μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。     

白藜芦醇对奶牛性控冻精品质和体外受精能力的影响

本研究旨在探究不同浓度白藜芦醇处理对奶牛性控冻精品质和体外受精能力的影响。在解冻后的奶牛性控冻精中分别添加0、10~(-3)、10~(-4)、10~(-5) mol/L的白藜芦醇,各组精子在受精液中获能孵育1.5 h后,测定精子质量和体外受精能力。结果表明:添加白藜芦醇均可有效降低性控冻精中活性氧(ROS)含量、提高顶体完整活精子比例(P0.05),其中10~(-3)、10~(-4) mol/L的白藜芦醇处理对降低ROS含量最为显著;10-4 mol/L的白藜芦醇处理可显著降低丙二醛(MDA)含量并提高性控冻精的卵裂率和囊胚率(P0.05)。综上所述,白藜芦醇作为一种外源性天然抗氧化剂,通过降低性控精液中过量的ROS水平、抑制精子脂质过氧化反应、保护顶体完整性,从而提高性控精子质量和体外受精能力。     

大豆卵磷脂与卵黄在山羊精液冷冻过程中的联合作用研究

试验旨在探究在山羊精液冷冻保存过程中单独使用大豆卵磷脂(SL)、卵黄(EY)及其联合使用的效果。以20%EY(V/V)和2%SL(m/V)为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,冷冻解冻后分别对精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性进行检测,同时利用试剂盒检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量变化。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后该组的精子活力、精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组无显著性差异,较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显著提高;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量和SOD活性无显著性差异,但精子抗氧化能力较另外2个联合添加组显著提高。综上,山羊精液冷冻基础稀释液中添加SL可替代或者部分替代EY,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。     

精液稀释液中添加维生素C和E对陆川猪精液冷冻效果的影响

为了研究维生素C和E作为精液冷冻保护剂对陆川猪细管冷冻精液品质和精浆中抗氧化物酶活性影响的影响,在精液稀释液中分别添加0、300、600以及900μg/m L的维生素C或E,对陆川猪稀释精液进行冷冻-解冻处理后,检测精液冻后的精子活力、运动速率、线粒体活性、顶体和质膜完整性、存活时间等常规参数,采用试剂盒测定精浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱胺肽过氧化物酶(GSHPx)的活性。结果表明:精液稀释液中添加300μg/m L的维生素C可显著提高冻后精子的体外存活时间以及CAT酶活性(P0.05);同浓度的维生素E仅可提高精子的存活时间(P0.05);添加600μg/m L的维生素C或E可以显著提高解冻精子的活力、线粒体活性、质膜和顶体完整性、存活时间以及抗氧化物酶活性(P0.05),同时明显降低精子畸形率(P0.05);当维生素C或E添加量为900μg/m L时,虽可提高线粒体活性、质膜和顶体完整性、CAT酶活等部分指标参数(P0.05),但精子活力与对照组相比没有差异(P0.05)。提示:冷冻稀释液中添加600μg/m L的维生素C或E可以显著提高陆川猪精液冷冻保存效果。     

锰苯甲酸卟啉对猪精液冷冻保存效果的影响

本实验旨在探究锰苯甲酸卟啉（MnTBAP）对猪精液冷冻保存的影响,从而筛选出适用于猪精液冷冻的MnTBAP浓度。实验一共分为6组：新鲜组、冷冻对照组、不同浓度MnTBAP组（在冷冻液I中添加50、100、150、200μmol/LMnTBAP）,对冷冻后猪精子动力学参数以及活率进行检测,从而筛选出适用于猪精子冷冻的最佳MnTBAP浓度。实验二共分成3组：新鲜组、冷冻对照组、最佳MnTBAP浓度组,对冷冻后猪精子质膜完整率、顶体完整率、DNA碎片指数（DFI）、线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）进行检测。结果表明：与其他浓度的MnTBAP组相比,100μmol/L MnTBAP对动力学参数以及活力改善最显著;与冷冻对照组相比,100μmol/L MnTBAP组猪精子质膜完整率、顶体完整率、MMP和抗氧化酶显著升高,DFI、ROS显著降低。综上所述,在冷冻液稀释中添加MnTBAP可以改善猪精液冷冻后的质量,且最适添加浓度是100μmol/L。     

羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

白藜芦醇对牛精液冷冻保存的抗氧化作用研究

为了研究白藜芦醇对牛精液冷冻保存效果的影响,本试验在牛精液冷冻稀释液中添加白藜芦醇,测定冷冻-解冻后精子的总抗氧化能力、丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活力。结果表明,随着白藜芦醇浓度的升高(15~150μM),精子T-AOC和GSH-Px活力逐渐增强,MDA含量降低。稀释液中添加150μM白藜芦醇时,精子GSH-Px活力和MDA含量分别达到113.3μmol/L和96.14nmol/mL,显著高于对照组(P0.05);100μM组精子T-AOC最高,但与150μM组差异不显著(P0.05);白藜芦醇浓度为200μM时,T-AOC及MDA含量显著低于对照组(P0.05),但GSH-Px活力与对照组差异不显著(P0.05)。     

抗冻蛋白对山羊精子冷冻保护效果的分析

本实验系统评价了抗冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)对山羊精子的冷冻保护效果。采用假阴道法采集6只云南黑山羊精液,离心洗涤去除精浆后和冷冻稀释液(0、0.1、1、10、100μg/m L AFPⅢ)混合,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。解冻后检测精子活力、顶体、质膜以及早期凋亡等指标。同时采用透射电镜(TEM)观察冷冻对精子超微结构的影响。结果表明:与对照组相比,AFPⅢ并不能显著改善山羊解冻后精子活力、顶体完整性、质膜完整性和低渗耐受性(P0.05)。此外,AFPⅢ并不能抑制解冻后精子的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻。电镜实验结果进一步证实,AFPⅢ并不能有效保护冷冻精子质膜。总之,本实验证实,AFPⅢ并不能降低山羊精子的冷冻损伤,相反其可能加重冷冻对精子质膜的损伤,其损伤机制尚需要进一步研究。     

寡聚糖对云岭黑山羊精液的冷冻保护效果分析

本实验检验了在冷冻稀释液渗透压相同的条件下,主要的寡聚糖（海藻糖、蔗糖、麦芽糖以及乳糖）对云岭黑山羊精液的冷冻保护效果。实验分为5个处理组,分别是无糖冷冻组（NS）、海藻糖组（T）、蔗糖组（S）、麦芽糖组（M）和乳糖组（L）。结果表明：在渗透压相同条件下,寡聚糖冷冻组精子解冻后的活力和路径速度（约20%和15μm/s）明显低于NS组（45.21%±3.51%和28.66±13.57μm/s,P〈0.01）。而且寡聚糖冷冻组精子的磷脂酰丝氨酸（PS）标记率在35%以上,显著高于NS组（4.88%±3.41%,P〈0.01）。此外,寡聚糖并不能提高山羊冷冻精子对热耐受性和质膜完整性。然而,寡聚糖冷冻组精子的顶体完整性明显优于NS组（P〈0.05）。总之,在冷冻稀释液渗透压相同的条件下,添加寡聚糖并不能改善山羊冷冻精子的活力、运动速度、热耐受性和质膜完整性,然而寡聚糖对山羊精子的顶体具有一定的保护作用。另外,海藻糖对山羊精子的冷冻保护效果和其他寡聚糖类似。     

谷胱甘肽对蒙贝利亚种公牛性控精液冻后效果的影响

本研究通过两个试验探讨谷胱甘肽(GSH)对蒙贝利亚种公牛性控精液冻后效果的影响。试验一,在冷冻稀释液中添加GSH,最终浓度分别为0(对照)、0.5、0.75和1.0mmol/L,观察对性控精液冷冻效果的影响。结果表明,0.75mmol/L组的性控精液冻后精子活率(42.2%)极显著高于对照组(39.2%)(P0.01);0.5mmol/L组冻后活率(40.9%)与对照组相比没有显著差异(P﹥0.05);0.75mmol/L组冻后活率优于0.5mmol/L组,但二者差异不显著;1.0mmol/L组冻后活率(34.90%)极显著低于对照组和其他试验组(P0.01),说明GSH添加量过大对性控精液冷冻效果不利。试验二,在分离前、分离后和冷冻前分别添加GSH,研究对蒙贝利亚牛性控精液冷冻效果影响。即在原精液分离前,在染色液中添加GSH,使最终浓度达0.75mmol/L,然后进行分离;在分离后平衡前精子的缓冲液中添加GSH使其最终浓度达0.75mmol/L,然后平衡;离心后冷冻前在冷冻保护液中再次添加GSH使其最终浓度达0.75mmol/L。对照组不添加GHS,然后分别观察冻精解冻效果。结果表明,试验组性控精液冻后活率(43.5%)显著高于对照组(40.5%),此外,与对照组相比,添加GSH组的精子运动状态表现更加强劲,持续力强。两个试验结果都表明,GSH对性控精液细管剂量、前进运动精子数以及性别准确率等指标没有影响。     

波尔山羊除精浆冷冻精液的试验研究

以波尔山羊精液为试验材料,通过二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000 r/min离心处理,制作细管冻精,并进行活力、顶体完整率、存活时间以及超微结构的观察分析.结果表明,经离心处理的冻精精子活率显著优于对照组(P<0.05),精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),精子存活时间处理间差异不显著,除精浆可使精子所受冷冻损伤大为减轻,显著提高冻后精子品质.     

不同稀释方法对小型宠物犬精液冷冻效果影响

为了研究Tris-果糖稀释液在不同稀释方法下对小型宠物犬精液冷冻的效果,选取常见的3个小型宠物犬品种共计6只犬进行试验,精液稀释过程分别采用一步稀释法和两步稀释法。结果表明:冷冻精液解冻后各组犬精液的同一剂型间的精子活力差异均不显著(P0.05);一步稀释法中的颗粒冻精与0.25 mL细管冻精和0.50 mL细管冻精相比,解冻后精子活力差异均显著(P0.05),而0.25 mL细管冻精与0.50 mL细管冻精的解冻后精子活力差异极显著(P0.01);采用两步稀释法的颗粒冻精、0.25mL细管冻精及0.50 mL细管冻精的解冻后精子活力组间差异均不显著(P0.05)。用Tris-果糖稀释液稀释精液时,使用两步稀释法对不同冻精剂型的精子活力影响不明显。     

丁基羟基甲苯对山羊冷冻精子运动能力和细胞结构的影响分析

精液冷冻保存对畜禽遗传资源保护和人工授精技术推广具有十分重大的意义。但是,冷冻解冻过程严重损害精子结构功能的完整性。为了降低冷冻解冻过程对山羊精子的冷冻损伤,以新培育的云上黑山羊为实验对象,观察在冷冻稀释液中添加不同浓度[0 mM(对照组)、0.5 m M、1.0 m M、2.0 mM]的丁基羟基甲苯(BHT)对山羊精液的冷冻保存效果,评估BHT对冷冻精子运动能力、质膜和顶体完整性、ROS生成等参数的影响。采用假阴道法采集6只公羊精液,将每次采集的精液混合均匀以降低个体差异对实验结果的影响,按照BHT浓度分别加入稀释液进行精液稀释,稀释后的密度为2.0×10⁸个/mL。将稀释后的精液于5℃平衡3 h后,在液氮蒸汽中预冻7 min,最后投入液氮中保存。解冻时,将冷冻细管投入37℃水浴锅中30 s。结果表明,与对照组相比,向冷冻稀释液中添加0.5 mM BHT可显著改善山羊冻精的总活力(TM)、前项运动活力(PM)和快速前项运动活力(FPM),而且,0.5 m M BHT对冻精质膜和顶体完整性的冷冻保护效果极显著高于其他处理组(P<0.01)。另外,BHT也显著...     

白藜芦醇对松辽黑猪精液冷冻的影响

试验旨在评价白藜芦醇(resveratrol,Res)对松辽黑猪公猪精液冷冻的影响。试验分为5组,分别为对照组(不添加Res)和Res处理组(在冷冻基础液中分别加入25μM、50μM、100μM、200μM浓度的Res)。采用手握法采集松辽黑猪精液,用5种冷冻基础液稀释,在25℃平衡1 h,17℃平衡2 h,4℃平衡3 h后灌装于0.5 mL细管中,在液氮上方3 cm处熏蒸10 min,保存在液氮罐中30 d后进行检测。样本解冻后分别检测精子活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、质膜完整性、过氧化氢酶(CAT)活性、顶体完整性、线粒体活性、活性氧簇(ROS)水平、DNA完整性、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)水平。结果显示:与对照组相比,冷冻基础液中添加50μM Res可以显著提高冻融后精子的活力、SOD活性、质膜完整性、CAT活性、线粒体活性、GSH-Px活性、顶体完整性(P0.05);可以显著降低精子ROS水平和MDA水平(P0.05);添加Res对DNA完整性未表现出具有显著影响(P0.05)。结论:猪精液冷冻前添加Res可改善冻融后精子质量,添加量50μM效果最佳,但Res是否可以改善公猪冷冻精液的体外受精及人工授精能力,有待于进一步的研究。     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.