家兔胚源性特异蛋白—1的分离纯化及其理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＰＡＧＥ从家兔早孕期子宫液中分离纯化了一种胚源性特异蛋白质。分析表明，该蛋白质分子量为５３８００，ＰＩ为５．８，Ｎ－末端为赖氨酸，分子中不含糖、脂成分，但富含异高氨酸、亮氨酸，缺乏半胱氨酸。     

家兔胚源性特异蛋白－1的分泌特征及生物活性

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＰＡＧＥ分离，以双波长薄层自动扫描仪扫描测定了家兔胚源性特异蛋白－１（ｒＥＳＰ－１）的分泌特性；离体组织培养分析了ｒＥＳＰ－１对子宫蛋白质合成的影响。结果表明，早孕期ｒＥＳＰ－１的分泌呈二次曲线，第３天分泌出现，第４天出现第一峰值，第５天下降，然后迅速增加，最大分泌在第７天，第８天迅速回降。其分泌量随胚胎数（或黄体数）的增加而升高，且受ＦＳＨ－ＬＨ和ＰＭＳＧ－ＬＨ的影响。ｒＥＳＰ－１使子宫细胞ＲＮＡ增加，促进子宫蛋白质合成     

8301多糖的纯化及其理化性质

经对８３０１多糖的发酵产品进行了分离纯化和单糖组成的测定，结果表明：其单糖组分有５种，甘露糖、岩藻糖、葡萄糖和两种未知单糖。单糖组成的摩尔比为甘露糖：岩藻糖：葡萄糖为３．９３：１．００：１．７７，并测定了温度、ｐＨ值等对８３０１多糖的溶解度和粘度的影响。     

乳清蛋白抗菌肽的分离纯化及活性

以乳清蛋白为原料,酶解制备具有抗菌能力的生物活性肽。采用超滤、葡聚糖凝胶层析色谱、反相高效液相色谱法对酶解液进行分离纯化,并对分离产物的氨基酸组成进行分析。结果表明:葡聚糖凝胶色谱纯化最佳流速2 mL/min,最佳样品质量浓度15 mg/mL;再由反相高效液相色谱分离的高活性抗菌肽,抑菌圈直径达到31.33 mm。氨基酸分析结果显示,高活性抗菌肽碱性氨基酸和疏水性氨基酸含量最多,分别为42.69%和37.39%。     

乳铁蛋白的理化性质及其生物学功能

乳铁蛋白（Lactoferrin,Lf）,又称乳运铁蛋白,因其晶体呈红色,故也有学者称之为“红蛋白”.Lf由乳腺合成,分娩后乳腺合成能力逐渐减弱.血液中Lf来自于嗜中性白细胞,主要在动物炎症反应时合成乳铁蛋白.Lf在动物乳汁中的含量随动物种类、泌乳期、胎次、个体等而有所不同.牛常乳Lf含量（0.02～0.35）g/L,初乳（1.5～5.0）g/L,同一个体常乳含量约为初乳的20%.山羊、猪乳中Lf含量（0.02～0.2）g/L,而人乳中Lf含量达2.0g/L.Lf是一种具有多种生物学功能的蛋白质,它不仅参与铁的转运,而且具有抗微生物、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等功能,被认为是一种新型的抗菌抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂.     

大麦芽阿魏酸酯酶的分离纯化及其部分酶学性质的测定

本试验采用硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-52离子交换层析对大麦芽中的阿魏酸酯酶(FAE)进行了分离纯化,并测定了其部分酶学性质。结果显示,分离纯化后获得了阿魏酸酯酶纯品,纯化倍数达34倍;经SDS-PAGE电泳显示为单一条带,并测定其相对分子质量约为29.3 ku;最适反应温度为50℃;最适pH为5.5,但阿魏酸酯酶在60℃以下,pH 4.5~7.5之间有较好的稳定性;Zn2+、Cu2+、Fe3+对酶活有很强的抑制作用,Na+和EDTA对酶有一定的激活作用。     

陕西省鸡胚源性大肠杆菌的分离鉴定

从陕西关中六个种鸡场的１９８只死胚及出壳弱雏中分离出９８株大肠杆菌,平均分离率为４９．５％。通过小鸡致病力试验,筛选出６３株具有致病力的菌株,占分离菌的６４．３％。生化鉴定表明,这些致病菌均符合大肠埃希氏菌的生化特性。血清型鉴定可确定６种,其中以Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８为主,分别占鉴定菌的４４．４％（２８／６３）、３３．３％（２１／６３）和９．５％（６／６３）,另三种为Ｏ２２、Ｏ７５、Ｏ８９共占８．０％（５／６３）。有３株未定型,占４．８％（３／６３）。用１６种抗生素进行药敏试验,对先锋霉素Ｖ和恩诺沙星高度敏感,对羧苄青霉素、氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、磺胺嘧啶、新霉素、链霉素中度敏感。     

聚合乳清蛋白对低脂切达干酪理化性质的影响

以聚合乳清蛋白（polymerized whey protein,PWP）为脂肪替代物,瑞士乳杆菌为附属发酵剂,制作低脂切达干酪,研究PWP对低脂切达干酪理化性质及感官特性的影响。结果表明：PWP协同瑞士乳杆菌发酵能够提高低脂切达干酪水分、蛋白质、游离氨基酸、挥发性风味物质含量及乳酸菌总数,并显著提高低脂切达干酪的感官特性及可接受性;PWP的添加缩短了脂肪成熟期,低脂切达干酪成熟期pH 4.6-可溶性氮（soluble nitrogen,SN）含量增加9.45%,12 g/100 mL三氯乙酸-SN含量增加11.74%;添加PWP和附属发酵剂对低脂切达干酪成品率无显著影响。PWP可作为一种脂肪替代物用于生产质构、口感特性良好的低脂切达干酪。     

圆孢芽孢杆菌A95抗菌蛋白的分离纯化及性质研究

对圆孢芽孢杆菌(Bacillus globisporus)A95产生的抗菌蛋白进行了分离纯化,并研究了其部分性质。菌株摇瓶发酵液离心后的上清液经硫酸铵40%~60%分级盐析获得粗提物。粗提物溶液经Sephadex G-100柱层析、DEAE-Sepharose Fast F low离子交换层析、Sephadex G-50脱盐纯化获得的抗菌蛋白,通过性质检测、电泳及MALDL-TOF-MS质谱检测,表明为分子量1.464~1.529 kD的一组环肽类抗菌蛋白。该抗菌蛋白对多种家蚕病原真菌具有较好的抗菌活性,参照美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)提出的标准,用微量液基稀释法分别测定了对绿僵菌、白僵菌和黄曲霉的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)。该抗菌蛋白对热稳定,对胰蛋白酶、蛋白酶K、氯仿有一定的耐受性,对酸部分敏感,对碱稳定。     

捻转血矛线虫虫卵的大量分离纯化

笔者采用虫体取卵和孵化后感染性幼虫直接在培养瓶瓶盖内收集的方法,获得了大量纯净单一的感染性幼虫,并且感染绵羊成功。再对感染绵羊直肠采粪收集虫卵,就可收集到大量纯种单一虫卵,进行三期幼虫的大量孵化。该试验解决了在寄生性线虫分子生物学研究中需要大量单一虫种的纯化分离问题。     

多黏类芽孢杆菌抗菌肽的分离纯化及特性研究

试验旨在分离纯化多黏类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）BLCC1-0402代谢产物中的抗菌肽,为抗菌肽制备及其制品检测提供参考。采用离心、不同分子质量卷式膜超滤浓缩、Superdex peptide 10/300GL凝胶过滤层析对多黏类芽孢杆菌发酵上清液进行逐级分离纯化,对不同时段的收集液做抑菌试验,以大肠杆菌O78标准菌株为指示菌,采用打孔法进行抑菌活性检测,比较评价分步层析效果,以Tricine-SDS-PAGE进行分子质量检测。结果显示,通过5和3 ku卷式膜超滤获得的3~5 ku组分蛋白质样品抗菌活性较强;对于3~5 ku组分经凝胶过滤层析分离纯化,纯化后的抗菌肽A3抑菌活性最强,经Tricine-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测,已达到电泳纯,分子质量为4 ku;抑菌活性检测结果显示,该抗菌肽A3对大肠杆菌O78标准菌株具有较强的抑菌作用。同时,抗菌肽A3表现出较好的耐热性,90~100 ℃处理15 min,抑菌活性可保持在96%左右;具有较好的酸碱稳定性,在pH 2.0~9.0下,抑菌活性保持在90%以上;经胃蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低20%,胰蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低18%,蛋白酶K对抗菌肽A3的抑菌活性几乎无影响。本研究结果表明,分离得到的抗菌肽A3是一种对大肠杆菌O78具有抑菌活性的新型抗菌肽,具有一定的开发潜力,可为下一步抗菌肽的结构分析、理化特性分析等深入研究提供一定参考依据。     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及临床作用研究进展

蚯蚓纤溶酶是从蚯蚓中分离的一种丝氨酸蛋白水解酶,有抗凝溶血栓、抗癌抗肿瘤、抗炎、神经修复等作用,在临床上是预防和治疗血栓疾病的有效药物。本文对蚯蚓纤溶酶的分离纯化与药理作用加以概述,为临床蚯蚓溶栓药物的研究提供依据。     

兔病毒性出血症病毒的提纯及部分特性鉴定

应用建立的SDS—蔗糖密度梯度超速离心法,纯化了从兔肝组织中粗提的兔病毒性出血症病毒。通过血凝、电镜观察、SDS-PAGE、琼脂双向免疫扩散、免疫印迹等试验,证明SDS—蔗糖梯度柱分离的病毒纯度高,具有4种结构多肽。     

Purification and Characterization of IgM-like Immunoglobulin from Turbot (Scophthalmus maximus L.)

A total of 40 turbot (Scophthalmus maximus) were immunized 3 times during a 3 months period using DNP-HSA whereafter serum samples were collected and pooled. Specific immunoglobulins (Ig) were affinity purified on an agarose column with immobilized DNP-BSA and further purified by gel filtration whereafter monospecific rabbit anti Ig serum was generated. Size exclusion chromatography and non-reduced SDS-PAGE indicated a MW of 8-900 kDa of the dominant antigen binding proteins from turbot serum. Reduced SDS-PAGE showed this fraction to be composed of disulphide linked heavy and light chains with MWs of 79 and 27–29 kDa, respectively, indicating a tetrameric structure. Isoelectric focusing of the 800–900 kDa Ig showed several bands between pH 5.5 and pH 5.8. Mean Ig concentration in serum of 10 turbot was measured to 6.48 mg/ml (SD 5.4) using rocket immunoelectrophoresis. Low molecular weight antigen binding molecules were copurified with the dominating immunoglobulins with an estimated MW of 500 kDa. Reducing SDS-PAGE of this fraction revealed molecules with MWs of 97,79,57,29,and 27 kDa.     

肠出血性大肠杆菌O157：H7噬菌体的分离纯化

分离纯化了抑制肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic E coli,EHEC）0157：H7的噬菌体,并对其进行效价测定。将宿主菌EHEC0157：H7培养制成悬液后与污水样品37℃共培养16h,将培养物离心、过滤除菌后得到该菌的噬菌体原液。噬菌体原液采用双层琼脂平板法进行5次纯化,得到直径相同的噬菌斑。纯化后噬菌体的效价达到12×10^pfu。电镜观察表明,该噬菌体呈蝌蚪状。根据ICTV对病毒的分类标准,该噬菌体属长尾噬菌体科,为烈性噬菌体。     

不同年限草原撂荒地土壤理化特性研究

对内蒙古锡林郭勒盟典型草原不同撂荒年限草原撂荒地土壤理化特性进行了研究。结果表明,随撂荒年限的增加,土壤有机质、全氮、碱解氮等主要养分均表现出先降低后增加的趋势,撂荒地有机碳的损失平均达到59.4%;在撂荒地表面0～20cm土层范围内,0.25～0.05mm粒径的砂粒含量逐渐增加,各撂荒地砂粒平均含量达76.84%,粉粒和粘粒含量逐渐降低,土壤机械组成出现粗化现象,保水能力降低,表层土壤容重增加而含水量低于天然草地。     

神经生长因子的提取,纯化及鉴定

经凝胶过滤层析－离子交换层析－凝胶过滤层析分离方法将蛇毒中的神经生长因子提取并纯化。得到的神经生长因子经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为１７０００，由２３１个氨基酸组成。在２２０．６ｎｍ处有１个特征吸收峰。最低活性单位为１０ｎｇ／ｍＬ。