内毒素对山羊乳腺组织中与乳腺炎相关的酶和细胞因子的影响

8只泌乳期的健康睢宁白山羊,产后72 h分别用内毒素和灭菌生理盐水经乳头管灌注左右侧乳房.灌注前及灌注后0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、24 h观察山羊整体及乳房局部变化.灌注24 h后,处死动物,取乳腺组织,部分用Bou in氏液固定,部分用液氮保存.临床症状及病理切片观察均显示,山羊表现典型的急性乳腺炎症状.检测两侧乳腺组织中部分与乳腺炎症相关因子的含量及其基因表达水平的结果表明:与灌注生理盐水对照相比,灌注内毒素侧乳腺组织中N-乙酰-β-D氨-基葡萄糖苷酶(NAGase)、髓过氧化物酶(MPO)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性及IL-1β、IL-6的含量极显著升高(P<0.01),TNFα-含量显著升高(P<0.05);相同条件下对2种处理组织样中3种细胞因子mRNA表达水平进行PCR扩增,灌注内毒素侧能检到明显的目的条带,对照侧未见明显的目的条带.     

实验性乳腺炎山羊乳和血液中相关酶与细胞因子的变化

8只泌乳期的健康睢宁白山羊,产后72 h分别用内毒素(LPS)和灭菌生理盐水经乳头管灌注左右侧乳房。于灌注后0、3、6、9、24 h分别采集颈静脉血和左右两侧乳房的乳汁,分析相关酶活性和细胞因子含量。结果表明:在实验乳腺(灌注LPS)的乳中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG ase)、碱性磷酸酶(ALP)活性在24 h内持续上升,髓过氧化物酶(M PO)活性先上升后下降;而在血清中NAG ase、M PO活性先下降后上升,ALP活性在24 h内持续下降。TNFα-、IL-1、IL-6细胞因子水平在实验乳腺的乳中先上升后下降,S IgA水平在24 h内持续上升;血清中这些细胞因子也是先上升后下降;而灌注生理盐水的对照乳腺的乳中酶和细胞因子水平均无显著变化。     

黄芪多糖对实验性乳腺炎山羊血清及乳中生化指标的影响

选择同处于泌乳初期的6头睢宁白山羊为试验动物,于左、右乳区分别灌注黄芪多糖和生理盐水5 mL,连续灌注5 d,第6天注入大肠杆菌内毒素诱导产生山羊实验性乳腺炎。于注入内毒素前1 h及灌注后3、6、9、24 h取颈静脉血和采集乳样,测定乳液及血清中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛含量(MDA)等指标。结果表明:与灌注内毒素前相比,灌注生理盐水的对照乳区乳中的NAGase活力在注入内毒素后9 h时达到峰值(23.95 U/mg),而灌注黄芪多糖的试验乳区乳中的NAGase活力6 h时达到峰值(28.29 U/mg),24 h时乳中NAGase活力已下降到灌注内毒素以前的水平。山羊乳导管注入内毒素后,2种处理的乳区乳中的总抗氧化能力显著下降,乳中MDA的含量显著升高,SOD活力显著下降;2种处理的乳区乳之间比较无显著差异。     

卡介菌多糖核酸对内毒素诱发的实验性山羊乳腺炎乳腺组织的保护研究

【目的】本试验通过卡介菌多糖核酸对内毒素诱发的实验性山羊乳腺炎乳腺组织的保护研究，探讨灌注免疫增强剂BCG-PSN对乳腺组织的影响，研究调动乳腺自身的防御功能，以防治乳腺炎的发生。【方法】选取泌乳初期健康睢宁白山羊6只，左乳区经过乳头管灌注卡介菌多糖核酸5 ml，右乳区灌入5 ml注射用生理盐水作为对照，连灌6 d。第7天按50 µg•kg-1体重分别向左、右乳区灌注大肠杆菌内毒素。灌注前及灌注后0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、24 h观察山羊整体及乳房局部变化。灌注24 h后，处死动物，取乳腺组织，部分Bouin氏液固定、部分液氮保存。【结果】临床症状及病理切片观察均显示，山羊表现典型的急性乳腺炎症状。与灌注生理盐水对照相比，乳腺灌注卡介菌多糖核酸能显著降低乳腺组织中部分炎症相关因子的含量及其基因表达水平。其中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）、髓过氧化物酶（MPO）、碱性磷酸酶（AKP）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）活性显著降低（P<0.05）；IL-1β、TNF-α的含量及其mRNA表达水平均显著降低（P<0.05），IL-6的含量显著降低（P<0.05），其mRNA表达水平有所降低但差异不显著（P>0.05）。【结论】灌注卡介菌多糖核酸可以抑制乳腺组织内IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子及和炎症相关酶的过度释放、减轻炎症因子对乳腺上皮细胞的损伤，对内毒素诱发的山羊实验性乳腺炎有较强的保护作用。     

视黄醇对内毒素诱发的乳腺炎大鼠抗氧化能力的影响

为研究视黄醇对内毒素诱发乳腺炎大鼠的抗氧化能力的影响,将40只孕鼠随机分为正常对照组(Con,n=8)、阳性对照组(P,n=8)和试验组(T,n=24).自怀孕第10天起,试验组分别灌喂视黄醇(溶解于大豆油)4000 IU/(kg·d)(L,n=8)、8000 IU/(kg·d)(M,n=8)、16000 IU/(kg·d)(H,n=8),对照组灌喂等量的大豆油,连续10 d.产后72 h分别灌注灭菌生理盐水(Con组)和10 μg大肠杆菌内毒素(Escherichia coli endotoxin,LPS)(P和T组)到大鼠第4对乳腺内,12 h处死大鼠,收集血清及乳腺组织.试验结果显示,视黄醇灌喂降低了LPS诱发的乳腺组织中炎性细胞的浸润及组织的损伤;LPS灌注乳腺组织后乳腺组织抗氧化能力降低,灌喂低剂量、中剂量的视黄醇能显著提高乳腺组织和血清总抗氧化能力(P<0.05).研究表明,视黄醇可以通过改善机体的抗氧化机制,对LPS诱发的试验性大鼠乳腺炎发挥一定的预防作用.     

黄芪多糖对内毒素诱发大鼠实验性乳腺炎的影响

选取40只SD雌性大鼠使之交配受孕。在确定其怀孕后,30只孕鼠随机分成正常对照组、阳性对照组和试验组,每组10只。试验组大鼠每天按100 mg/kg体重灌喂黄芪多糖(APS),直至试验结束,而对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水(PSS)。孕鼠于产后72 h分别用灭菌PSS和50μg大肠杆菌内毒素经乳头管灌注到大鼠第4对乳腺内。灌注后24 h处死大鼠,取乳腺组织和颈静脉血进行指标测定。结果显示,阳性对照组大鼠乳腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活性,与正常对照组相比显著升高(P<0.05);试验组大鼠乳腺组织中TNF-α浓度、NAGase活性与阳性对照组相比,显著降低(P<0.05)。结果表明,灌喂APS可以抑制乳腺组织内炎性细胞因子TNF-α的过度释放,对内毒素诱发的大鼠实验性乳腺炎有一定的保护作用。     

山羊内毒素休克时山莨菪碱对肾脏自由基代谢的影响

３６头杂交山羊随机分成３组,每１组静脉注射生理盐水作为对照;第Ⅱ组静脉注射大肠力（Ｏ１１１Ｂ４）内毒素,１８００Ｕ／ｋｇ,注射两次,间隔２４ｈ;第Ⅲ组处理同第Ⅱ组,但于第２次注射内毒素１０ｍｉｎ静脉注射山莨菪碱２．５ｍｇ／ｋｇ。分别于试验后第５和１２ｈ各组剖杀６头,检测肾组织中丙二醛（ＭＤＡ）含量和抗氧化参数。结果表明：第Ⅱ组肾组织ＭＤＡ含量明显升高,谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、谷胱甘肽还     

细胞因子与激素对山羊卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响

研究了在培养液中添加细胞因子和不同激素对山羊卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育的影响.结果表明: 添加不同浓度激素组合能促进早期胚胎的发育(P<0.05),1 μg/ml雌二醇(E2)、200 μg/ml 促黄体素(LH)和10 μg/ml 垂体促卵泡素(FSH)的浓度组合效果最好(P<0.05);胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、白血病抑制因子(LIF)、干细胞因子(SCF)对山羊卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育有极显著影响(P<0.01),但不同浓度间无显著影响(P>0.05),添加10 IU/ml LIF、15 IU/ml GDNF和15 IU/ml SCF对山羊胚胎体外发育最好;GDNF LIF SCF组和GDNF LIF组卵母细胞成熟率极显著高于LIF SCF和GDNF SCF组(P<0.01),GDNF SCF和LIF SCF组间对卵母细胞体外成熟无差异(P>0.05),早期胚胎发育上GDNF LIF SCF组高于GDNF LIF和LIF SCF组,也高于GDNF SCF组,均能提高桑椹胚率,但试验组间差异不显著(P>0.05).可见GDNF、LIF和SCF能提高卵母细胞的成熟率和桑椹胚率,LIF和GDNF对卵母细胞体外成熟有协同作用.     

CpG-ODN对山羊实验性乳腺炎乳中NAGase、MPO及乳铁蛋白的影响

选择同处于泌乳初期的睢宁白山羊6头,产后第5、8灭分别向左、右乳区灌注等体积的灭菌PBS和10 μg·kg-1CpG-ODN(cytosine-phosphate-guanosine dinucleotides) ,第9天于左、右乳区经乳导管灌注大肠杆菌(2 × 109CFU·mL-1) 和金黄色葡萄球菌(2 × 109CFU·mL-1) 混合菌液3 mL.分别于灌注细菌前0 h,灌注后8、16、24、48和72 h采集乳样,动态监测乳中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase) 和髓过氧化物酶(MPO) 的活力及乳铁蛋白含量变化.灌注72 h后处死动物,取乳腺组织进行组织学观察.结果显示:灌注细菌后72 h,灌注PBS的乳腺腺泡内仍有大量嗜中性粒细胞浸润,但灌注CpG-ODN的乳区已无明显细胞浸润.灌注CpG-ODN侧乳中NAGase、MPO活性均随时间变化先上升后下降,在24 h达到最大值,乳铁蛋白含量则在16 h达到最高.灌注PBS的侧乳中NAGase、MPO活性随时间变化表现出相同的规律,但NAGase峰值高于灌注CpG-ODN的一侧,MPO峰值低于灌注CpG-ODN的一侧;乳铁蛋白含量在24 h达到最大,峰值也有所升高.上述结果表明,CpG-ODN可以增强乳腺对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合感染诱导的山羊实验性乳腺炎的非特异性防御能力,减轻乳腺L皮细胞的损伤.     

氨基胍对山羊内毒素血症心肌抗氧化能力的影响

为探讨自由基在山羊内毒素血症发病机理中的作用,将48只山羊随机分为4组,每组12只,分别为生理盐水对照组(SL)、内毒素组(LPS)、氨基胍保护组(LPS+AG)和氨基胍组(AG).分别在处理后第3和6 h每组各宰杀6只,制备心肌组织匀浆,检测心肌中总超氧化物岐化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物岐化酶(Gu-Zn-SOD)、锰超氧化物岐化酶(Mn-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量的变化.结果显示,内毒素血症时山羊心肌中超氧化物岐化酶(SOD)、CAT活性和T-AOC降低,MDA含量明显升高,而氨基胍保护组超氧化物岐化酶、CAT活性和T-AOC以及MDA含量与内毒素组差异显著(P0.05).该试验表明由于自由基的增多而引起的脂质过氧化损伤在山羊内毒素血症发病机理中起着重要的作用,氨基胍可有效拮抗脂质过氧化造成的损伤.     

三种炎症因子在致炎大鼠乳腺组织中的表达

为探明在酯多糖（LPS）致炎的大鼠乳腺中,黏附因子-1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）表达分布的变化。取产后5 d乳房注射LPS致炎大鼠的乳腺组织,及LPS致伤的体外培养大鼠乳腺MVECs（Microvascular Endothelial Cells）,采用免疫组化方法检测ICAM-1、TNF-α和IL-1β的表达。结果表明：LPS处理大鼠乳腺后4~24 h内,乳腺组织切片试验和体外培养大鼠乳腺微血管内皮细胞（Rat MammaryMicrovascular Enclothelial Cells,RMMVECs）试验中ICAM-1和IL-1β的表达逐渐增强,TNF-α在乳腺组织切片试验中6 h表达显著增强,之后则逐渐减弱。在体外培养RMMVECs中-α表达逐渐增强。表达部位主要在乳腺上皮细胞和血管内皮细胞,IL-1β在腺泡腔中的白细胞中也有表达。由此可见,LPS处理大鼠乳腺后ICAM-1、TNF-α和IL-1β这三种细胞因子均参与了乳腺炎症过程中的免疫反应。     

宫炎净对奶牛乳房炎的治疗效果研究

应用宫炎净对奶牛临床型乳房炎、隐性乳房炎进行了治疗研究．结果表明，宫炎净治疗临床型乳房炎具有明显的效果，治愈率高达８４．６％，高于青、链霉素的治疗效果（７５．０％）．通过对病原菌的分离、鉴定表明，宫炎净对乳房炎病原菌有显著的抑杀作用，对链球菌类病原菌效果更佳．对宫炎净治疗后的隐性乳房炎乳汁在停药后１ｄ、３ｄ进行分析，发现宫炎净可明显降低乳汁内的体细胞数、乳酸脱氢酶、谷氨酸丙酮酸转氨酶的活性和血清白蛋白的含量，提示了宫炎净治疗后乳腺损伤组织的修复过程     

不同凝乳酶对羊奶干酪成熟期间蛋白质降解和感官品质的影响

以西农萨能山羊鲜奶为原料,采用Colby羊奶干酪加工工艺,研究了羔羊皱胃酶、微生物凝乳酶和猪胃蛋白酶对羊奶干酪成熟期中蛋白质降解和感官品质的影响。蛋白质降解测定结果表明,在干酪成熟过程中残留微生物凝乳酶对酪蛋白分解能力最强,猪胃蛋白酶最低,羔羊皱胃酶居中。感官品质评定三种酶处理在滋气味和组织状态上存在明显差异,以羔羊皱胃酶处理组打分最高,猪胃蛋白酶处理组打分最低。在纹理图案、外形、色泽三方面三种酶间无显著差异。综合评定认为羔羊皱胃酶对干酪蛋白质分解速度适中,容易控制成熟,产品感官品质良好,在三种酶中应用效果最佳,可广泛使用。     

Cytokines level changes in goats infected with Fasciola hepatica

To study the changes of IL-2 and TNF-α in serum and the IL-2 secreted by peripheral blood lymphocytes of goats infected with Fasciola hepatica, thirty six clinically healthy white goats were randomly divided into groups coded as I, II, III, every 12 goats. Goats in group I and II were inoculated with a single oral dose of 200 and 500 encysted Fasciola hepatica metacercaria, respectively, while those in group III were untreated controls. Blood samples were collected from the jugular vein once a week for 11 weeks. Changes in the serum levels of IL-2 and TNF-α and the ability of peripheral blood lymphocytes to secrete IL-2 were detected. Serum IL-2 levels decreased in group I, but increased in group II. The levels of TNF-α and secreted IL-2 were elevated by varying degrees in both groups I and II. Lymphocytes displayed reactivity during the first week after infection with a significantly increased response to both specific and non-specific challenges. TNF-α may be involved in the hepatic injury process caused by Fasciola hepatica. The infective dose of Fasciola hepatica greatly influenced IL-2 levels in the host playing a vital role in the initiation of host defense.     

隐性乳房炎乳汁中体细胞和病原菌及酶间的相关性

对奶牛隐性乳房炎乳汁中体细胞、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、谷氨酸草酰乙酸转氨酶（ＧＯＴ）、谷氨酸丙酮酸转氨酶（ＧＦＴ）和血清白蛋白（ＳＡ）及病原微生物的相关性进行了研究。结果发现ＬＤＨ，ＡＣＰ，ＧＯＴ，ＧＰＴ的活性和ｓＡ的含量变化与白细胞数之间存在极显著的相关关系（Ｐ＜０．０１），尤以ＬＤＨ的相关性最强（ｒ＝０．８５８）；ＡＬＰ与体细胞数之间无相关关系（Ｐ＞０．０５）．不同的乳房炎病原微生物感染乳腺呈现不同的酶象变化，与阴性感染的乳腺相比，各酶的活性均出现增加，尤以金黄色葡萄球菌感染的乳腺有关酶的增加幅度最为显著（Ｐ＜０．０１）。     

不同山羊品种促黄体素分泌状况对繁殖性能的影响

为了解促黄体素(LH)分泌状况对不同品种山羊繁殖性能的影响,选择河北中部地方山羊(冀中山羊)发情正常、健康的经产羊和青年羊为试验组,太行山羊为对照组。放射免疫法跟踪测定发情周期内血液LH含量。比较不同群体和繁殖状况山羊的LH含量的相对波动周期、振幅变化,并对LH含量变化与排卵数进行相关分析。在发情周期内,冀中山羊LH含量的波动振幅显著高于太行山羊,经产冀中山羊LH含量的相对波动周期显著长于其他群体,LH的波动频率与排卵数呈负相关。结果表明:(1)在繁殖周期内LH含量波动振幅和相对波长是影响山羊排卵数的主要因素;(2)经产冀中山羊长的LH作用时间和高的LH浓度振幅,可使优势卵泡数目增多,也保证了LH等促性腺激素启动卵泡成熟排卵的足够时间;(3)繁殖性能发育成熟过程和LH对繁殖性能的作用机制存在种群差异。