草莓组培苗的病毒检测与其果实品质分析

以2种不同大小的草莓茎尖分生组织为试材,进行组织培养,分别获得再生小植株并进行病毒检测,利用上述脱毒母株和农家自留种苗分别繁育匍匐茎子苗,研究了2种子苗的病毒发生率与果实品质,以期通过草莓脱毒试验为脱毒苗的应用推广提供参考依据。结果表明：不同草莓品种的病毒含量有差异,并且病毒外壳蛋白表达量与其核酸转录量一致。切取草莓匍匐茎约5 mm茎尖分生组织进行第一次脱毒,其部分再生小植株仍然携带了低浓度病毒。与之相比,再切取试管苗约0.5 mm茎尖组织进行第二次脱毒,其再生率虽然仅为31%,但是二次脱毒株均为无毒苗。利用已鉴定的脱毒母株和农家自留种苗分别繁育匍匐茎子苗,经过定植后发现2种子苗的病毒病发生率差异极显著。二次脱毒母株繁育的子苗果实可滴定酸含量显著低于农家自留种苗(P<0.05),而可溶性总糖等品质参数差异不显著。综上所述,以0.5 mm茎尖分生组织为外植体进行草莓组织培养,可以获得优质的脱毒母株,相关研究成果有助于未来草莓良繁体系建设。     

红芽芋脱毒试管芋诱导及植株再生

为解决红芽芋脱毒苗移栽成活率低、种苗易分化等问题，以江西地方名优芋品种‘铅山红芽芋’为材料，开展茎尖脱毒、试管芋诱导及植株再生的研究。结果表明，芋芽剥取0.2 ~ 1.0 mm茎尖接种于MS + 2.0 mg • L-1 6-BA + 0.5 mg • L-1 NAA + 3%蔗糖培养基中可诱导成苗；通过RT-PCR分子检测，0.3 mm以下茎尖培养的试管苗中未发现芋花叶病毒（DsMV）；脱毒苗继代增殖最佳诱导培养基为MS + 3.0 mg • L-1 6-BA + 0.5 mg • L-1 NAA + 3%蔗糖，脱毒苗试管芋诱导的最佳培养基为MS + 1.0 mg • L-1 6-BA + 0.5 mg • L-1 NAA + 8%蔗糖，最佳培养条件为温度25 ℃，光照54 μmol • m-2 • s-1，光周期14 h • d-1；脱毒试管芋的最佳移栽驯化基质为草炭︰蛭石 = 2︰1；脱毒试管芋移栽后，成活率达97.71%，生长中未出现分化现象。脱毒芋相比未脱毒芋增产43.14%，营养品质指标存在显著差异。脱毒试管芋的诱导形成及植株再生体系的建立为红芽芋健康种苗的快速繁殖提供了一条新途径。     

龙眼茎尖培养研究初报

利用龙眼茎尖离体培养技术进行脱毒和快繁无病(鬼帚病)苗木,是目前发展龙眼生产行之有效的方法。周丽侬等以无菌实生苗和自然环境生长的刚抽出3—5厘米长的嫩枝为外植体,通过诱导愈伤组织或诱芽来繁殖试管苗,并进行了生根试验。但外植体过大,不利于外植体消毒,不能达到脱毒的目的。我们从1988年下半年开始,探索龙眼茎尖培养和脱除龙眼鬼帚病毒的可能性。经过2年多的试验,茎尖培养直接成苗获得成功,为今后进一步利用茎尖培养进行脱毒和培育无病苗提供了可能。现将研究结果初报如下:     

梨树苹果茎沟病毒的脱毒技术研究

１９９３—１９９６年,采用热处理材料茎尖培养及试管苗热处理方法,对１３个梨品种及矮化砧材料进行苹果茎沟病毒脱毒试验的结果表明,二者对茎沟病毒的脱除率分别较单纯茎尖培养高５７．０％和６２．４％。脱毒苗生根率和移栽成活率分别达７０％和８０％。     

球根鸢尾的病毒鉴定及试管脱毒成球技术

对上海地区球根鸢尾进行了病毒病害调查。经检测初步确定球根鸢尾普遍存在鸢尾重花叶病毒、鸢尾轻花叶病毒、水仙潜隐病毒３种病毒的复合侵染。对带毒种球进行茎尖组培脱毒,得出了茎尖诱导成芽、芽成球及小球生根的培养基配方。将组培苗在试管苗、成球苗、移栽苗等不同时期进行病毒检测,结果表明,小于１．０ｍｍ的茎尖诱导的幼苗可脱去上述３种病毒。     

葡萄试管苗热处理脱毒技术研究

为加快培育葡萄优良品种无病毒苗木,提高脱毒效率,开展了葡萄试管苗热处理脱毒技术研究。将携带葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄卷叶相关病毒-1(GLRaV-1)和葡萄卷叶相关病毒-2(GLRaV-2)的8个葡萄品种试管苗进行恒温热处理,对分离成活的62个茎尖进行RT-PCR和ELISA检测。结果显示,62个茎尖中,29个茎尖脱除了上述5种病毒,葡萄卷叶相关病毒-1、葡萄斑点病毒、葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶相关病毒-2和沙地葡萄茎痘病毒的脱毒率分别为81.8%、80.0%、78.1%、75.0%和61.5%。采用试管苗热处理结合茎尖培养方法可获得良好的脱毒效果,适用于葡萄无病毒原种母本树的培育。     

黄山贡菊茎尖脱毒快繁技术研究

以黄山贡菊茎段为外植体,研究了不同消毒方法和不同培养基对黄山贡菊茎尖组织培养的影响。结果表明:0.1%升汞消毒8min,外植体污染率及褐化率较低;诱导茎尖分化的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,芽诱导率可高达100%,且丛生芽生长较快;最适宜生根的培养基为MS+NAA 0.5mg/L,植株生根粗壮,根系发达,利于练苗及移栽。     

‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术研究

【目的】培育‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗木,初步建立‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系。【方法】采用MS为基本培养基,以植物生长调节剂6-BA、NAA和IBA为变量,接种后‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的生长状况为因变量;通过热处理结合茎尖培养技术,在32℃预热处理7 d,再逐渐升温至37℃热处理30 d后,剥取茎尖进行培养,待获得完整植株时,利用RT-PCR检测方法对‘阳光玫瑰’葡萄组培苗进行病毒检测。【结果】‘阳光玫瑰’葡萄嫩茎段外植体经75%乙醇30 s+0.1%氯化汞8 min处理,外植体的污染率和褐化率最低;经消毒灭菌的外植体接种到添加含有6-BA和NAA的MS培养基上诱导萌发,在1.5 mg·L~(-1)6-BA和0.2 mg·L~(-1)NAA的培养基上萌芽率最高;将启动培养获得的无菌新芽,接种到含有6-BA和NAA的MS培养基中进行继代培养,在1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA的培养基中单芽增殖效果最明显;把继代培养中生长健壮的单芽切下,转入添加IBA和NAA的1/2 MS培养基中进行生根培养,在添加0.4 mg·L~(-1)IBA和0.2 mg·L~(-1)NAA的1/2 MS培养基上生根效果最佳;采用热处理结合茎尖培养进行‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的脱毒处理,热处理植株的成活率为78%,茎尖成活率为60%,经检测,再生植株不带葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)、葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄斑点病毒(GFkV)、葡萄扇叶病毒(GFLV)。【结论】初步建立了‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系,为‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗的工厂化生产提供了技术支撑。     

大蒜脱毒

在捷克和新西兰,大蒜受到大蒜花叶病毒和大蒜黄条纹病毒的严重危害。研究证明,茎尖培养是获得无病毒大蒜的有效技术。本文着重报道利用当地选择的3个品种进行茎尖离体培养,得到无病毒植株和脱毒植株。将小鳞茎在乙醇中浸后再在火焰上炙烧以进行表面消毒,除去每个鳞茎的贮藏叶,切下0.4—0.9毫米长的茎尖,接种在含有     

芦笋组织培养研究进展与技术关键（上）

芦笋的花药、花粉、茎尖及原生质体经离体培养均可再生植株。本文着重对芦笋花药和茎尖培养中从培养配方的优化选择到植株再生的整个过程的关键技术，以及提高芦笋试管苗移栽存活率等方面的措施进行了综述。     

甘蔗茎尖胚状体脱毒苗快繁技术研究

以甘蔗新台糖22号为材料,比较茎尖胚状体、茎尖与腋芽3种分化成苗繁育方法在不同时期接种、不同激素水平下的组培苗增殖速度、苗素质及脱毒效果。试验结果表明：组培苗繁殖速度以茎尖胚状体分化苗最快,增殖5代后扩繁2589倍,茎尖297倍,腋芽104倍,培养基以6-BA 1.5mg/L＋NAA 0.01-0.1mg/L增殖效果最好;组培苗质量与繁殖速度相反;出现不正常生长的苗类型有白化苗、细弱小苗、玻璃化苗、疯长苗4种,茎尖胚状体苗发生率1.77%,茎尖苗1.56%,腋芽苗0.31%;不同处理间组培苗生根及移栽成活率差异不显著,生根率茎尖胚状体苗75.3%、茎尖苗76.9%、腋芽苗76.6%,移栽成活率茎尖胚状体苗94.8%、茎尖苗95.4%、腋芽苗95.1%,生根培养基以NAA7.5mg/L＋ABA 2.5mg/L最好;去除RSD、花叶病方面,以茎尖胚状体苗最好,RSD去除率95%、花叶病去除率100%,茎尖苗RSD去除率70%、花叶病75%,腋芽苗未能去除RSD、花叶病。应用茎尖胚性细胞再生植株,脱毒效果好,繁殖速度快,可克服目前脱毒苗生产中试管苗扩繁量小、成本高的难题。     

人参果茎尖脱毒与组培快繁技术研究

对人参果进行了组培脱毒快繁技术的研究,试验结果表明,以植株新发的枝条作为外植体,直接剥取生长点培养,脱毒率较低,而把枝条切成茎段培养成无菌苗后,再用无菌苗的茎尖来脱毒,脱毒率高。适宜的人参果茎尖生长点诱导成苗培养基为:MS+6-BA 0.05 mg/L+NAA0.01 mg/L+GA_30.1 mg/L;继代快繁的培养基为不加任何激素的MS培养基或MS+6-BA 0.05 mg/L+NAA 0.01 mg/L+GA_30.1 mg/L;人参果组培苗的生根较容易,继代和生根同步进行。人参果组培苗在草炭土或过筛的腐叶土中的移栽成活率可以达到94%以上。     

多倍体萱草的组织培养及其繁殖

本文报道了多倍体萱草花茎外植体愈伤组织的产生和器官分化,以及“试管植株”移栽的条件。发现花茎上部的花梗切段比下部花茎切段的愈伤组织诱导频率高。多倍体萱草品种间,产生愈伤组织的能力、诱导苗的频率以及再生植株数量等,均有不同程度的差异。再生小植株切下置于1/2MS,附加0.3毫克/升IBA的培养基内,一星期左右开始生根,20天后即可移栽土壤中。利用花梗外植体诱导产生的愈伤组织,经长期继代培养,仍保持一定的较高增殖系数和稳定的分化频率。经形态观察,已开花的再生植株,其叶及花形、花色等均无变异现象。     

多裂叶荆芥离体再生体系的建立

以多裂叶荆芥无菌幼苗根、茎段、叶片等为外植体,进行不定芽离体再生,建立了多裂叶荆芥离体快速繁殖体系,研究了不同外植体和附加不同外源激素配比对不定芽离体再生的影响。结果表明:多裂叶荆芥离体再生的最佳外植体为带有叶腋的茎段,诱导不定芽再生的适宜培养基为MS+0.2mg/L NAA+1.0mg/L TDZ,每个外植体产生不定芽数平均为18个;不定芽增殖培养每4周为1个周期,理论年繁殖系数可达1×1812;当不定芽生长至3~4cm时移入生根培养基诱导生根;适宜的生根培养基为MS+0.2mg/L NAA,移栽成活率为53.85%。     

香蕉的组织培养

探讨利用组织培养方法来无性繁殖香蕉的可能性,发现地下茎的离体茎尖是试管内诱导小植株的适宜材料。切下的带有嫩叶的茎尖仅能诱导出一个小植株。但是,带有几个环生着腋芽的、较成熟的具鞘叶的叶原基的茎尖可再生出簇状的小植株。当各个小植株被分离进行继代培养时,又能生出一批新的簇状小植株。由这二种外植体培养出的一些小植株已成功地移植到土中长大成苗。     

三十烷醇在楸子离体繁殖中的效应

三十烷醇在楸子离体繁殖各阶段的应用效果表明：它显著地促进茎尖外植体的分化、新梢的增殖和生长以及不定根的诱导。试管苗移栽后喷布三十烷醇可以提高移栽成活率。     

三十烷醇在楸子离体繁殖中的效应

三十烷醇在楸子离体繁殖各阶段的应用效果表明:它显著地促进茎尖外植体的分化、新梢的增殖和生长以及不定根的诱导.试管苗移栽后喷布三十烷醇可以提高移栽成活率.     

切花菊组织培养与栽培技术

切花菊分别取脚芽、茎尖、幼蕾作为外植体，在不同激素水平的培养基上诱导产生愈伤组织、丛生芽和根，完成植株再生。研究发现：3种外植体以茎尖最好，其愈伤组织产生的芽的分化速度较快。最后移入生根培养基上长成完整植株。同时，对栽培管理技术进行研究和探讨。     

朝天椒子叶离体培养与植株再生体系的建立

以贵州黎平朝天椒地方种为试材,取其无菌苗子叶作外植体,采用植物固体培养基组织培养法,研究了培养基激素配比、无菌苗生理年龄、子叶部位等对朝天椒子叶的离体接种、诱导愈伤、不定芽分化、芽茎伸长、诱导生根、驯化移栽、成苗等离体培养及植株再生阶段的影响。结果表明:朝天椒子叶适宜芽诱导分化的培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L,芽分化率达100%;适宜芽伸长的培养基为MS+KT 2mg/L,芽伸长率可达50%;适宜生根的培养基为MS无激素培养基,生根率可达44%。单个外植体平均分化含15~18个不定芽的芽丛(14~16个芽茎),出苗6~7株。从子叶外植体接种至再生苗出瓶需50~55d,再生苗移栽成活率达98%。该研究构建了贵州朝天椒的高效离体培养植株再生体系,为朝天椒的组织快繁和遗传转化奠定了重要的基础。     

草莓病毒脱除方法的比较与评价

以感染病毒的草莓品种宝交早生为试材,利用多重RT-PCR同时检测SMoV和SMYEV技术,对茎尖培养、热处理、抗病毒药剂处理3种脱毒方法进行了比较和评价,以期为草莓脱毒苗培育提供重要参考.结果表明,0.2mn茎尖和0.5 mm茎尖都能够有效地脱除SMoV和SMYEV;热处理能够脱除草莓试管苗中的SMoV,但不能脱除SMYEv,39℃恒温处理30 d,SMoV脱除率达到63.0%;利巴韦林不能清除草莓植株体内的SMov和SMYEV.综合脱毒率和茎尖分化成苗率2个指标,认为0.5 mm茎尖培养是适宜的草莓病毒脱除方法.