白芥子诱导的鸡内源性芥子碱降解菌的筛选、鉴定及酶活测定

本试验旨在通过分离鉴定白芥子诱导的芥子碱降解菌,并对其核心功能酶漆酶进行酶活测定,建立芥子碱的生物降解方法,为探寻白芥子等十字花科类非粮饲料资源的高效利用提供技术支撑。本试验以藏香鸡为模型,在基础日粮中添加20%白芥子饲喂28 d进行芥子碱降解菌体内诱导。分别采集鸡空肠、回肠、盲肠内容物在不同培养基中分离筛选芥子碱降解菌,对筛选出的优势菌进行形态学和分子生物学鉴定,测定该菌株的芥子碱降解效果和漆酶活性。结果表明：（1）在鸡盲肠中筛选出9株目标菌,筛出率明显高于空肠和回肠,并进一步选出1株芥子碱降解优势菌SDB2(Sinapine-degrading bacteria 2)。（2）经鉴定,SDB2菌株属于变形菌门;γ-变形菌纲;肠杆菌目;肠杆菌科;大肠埃希菌。（3）芥子碱浓度与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系（P <0.01）,芥子碱浓度随培养时间增加而降低,培养72 h的芥子碱降解率可达50%。（4）漆酶活力与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系（P <0.01）,漆酶活力随培养时间增加而降低。（5）漆酶活力与芥子碱浓度存在极显著的线性回归关系（P &l...     

吴茱萸总生物碱的提取纯化及HPLC含量测定

目的:对吴茱萸生物碱进行提取纯化,并测定其含量,为中药外用制剂提供天然透皮促进剂。方法:利用吴茱萸碱和吴茱萸次碱的溶解性,采用浓度为70%乙醇提取吴茱萸生物碱,用中性氧化铝柱层析进行纯化,采用高效液相色谱法测定其含量。结果:吴茱萸碱的回归方程:y=5501x+35.37(r=0.999 5),线性范围为0.027-1.350μg,线性关系良好;吴茱萸次碱回归方程:y=1970x-4.018(r=0.999 5),线性范围为0.021 4-1.070 0μg,线性关系良好。吴茱萸总生物碱含量可达到86.6%。结论:该提取纯化方法所得样品纯度高,达到了提取有效部位要求,可为中药外用制剂选择天然透皮促进剂提供参考。     

大黄总蒽醌的提取纯化及含量测定

目的:提取纯化大黄药材中的总蒽醌类成分,使其纯度达到有效部位的要求。方法:参考《中国药典》(2010年版)方法,先用75%乙醇提取,将所得干膏用8%盐酸水解-氯仿萃取后,用D301大孔树脂纯化处理,用紫外-可见分光光度法测定含量。结果:大黄总蒽醌以大黄素计,在0.000 8-0.020 0 mg/m L范围内线性关系良好,回归方程为:A=42.039 C-0.010 4(r=0.999 2)。经提取纯化,大黄总蒽醌纯度达80%以上。结论:用此方法得到的大黄蒽醌纯度较高,达到有效部位的要求。     

槟榔碱提取分离工艺的研究及其含量测定

用稀盐酸从槟榔生药中提取槟榔碱（Arecoline）,将提取物依次用乙醚、高浓度酒精溶解过滤,然后和适量的氢溴酸反应制成氢溴酸盐,用薄层层析鉴定氢溴酸槟榔碱,用高效液相测定其含量,熔点熔程法鉴定纯度。结果稀盐酸提取法提取槟榔碱在成本和提取率方面均明显优于高浓度酒精提取法。     

HPLC同时测定翻黄合剂中芍药苷和盐酸小檗碱含量

为了测定翻黄合剂中芍药苷和盐酸小檗碱的含量。采用中性氧化铝柱对供试品溶液进行处理,使目标峰不被杂质峰干扰。采用YMC-PackProC18色谱柱(250×4.6mm),流动相为乙腈-0.15%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL/min,柱温为26℃,检测波长为245nm,建立了高效液相色谱测定方法。芍药苷和盐酸小檗碱的进样量分别在0.307~4.920μg(r=0.9996)和0.064~1.025μg(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为91.10%(RSD=1.75%,n=6)和92.06%(RSD=1.69%,n=6)。该方法简单、可靠,可以同时检测翻黄合剂中芍药苷和盐酸小檗碱的含量,为翻黄合剂的质量控制提供了依据。     

神经生长因子的提取,纯化及鉴定

经凝胶过滤层析－离子交换层析－凝胶过滤层析分离方法将蛇毒中的神经生长因子提取并纯化。得到的神经生长因子经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为１７０００，由２３１个氨基酸组成。在２２０．６ｎｍ处有１个特征吸收峰。最低活性单位为１０ｎｇ／ｍＬ。     

HPLC测定狼牙刺不同组织器官中氧化槐果碱含量

建立了采用高效液相色谱法测定狼牙刺Sophra viciifolia中氧化槐果碱含量的方法：色谱柱为ZORBAX C18柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相0.04 mol/L磷酸溶液（pH值1.8）-甲醇（体积比90∶10）;流速1.0 mL/min;检测波长220 nm;柱温20 ℃。测定了狼牙刺不同组织器官中氧化槐果碱含量,结果表明：狼牙刺植物花蕾中氧化槐果碱含量最高,达2.114%,其次是幼果、种子、花、叶、当年生幼茎,氧化槐果碱含量分别为1.735%、1.651%、1.615%、0.540%和0.244%,多年生茎含量最低,只有0.045%。该结果对狼牙刺资源的开发利用及生态保护具有积极意义。     

屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定

为提取纯化屎肠球菌（E.faecium）荚膜多糖（CPS）并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶（25 μg/mL）、脱氧核糖核酸酶（0.5 mg/mL）、溶菌酶（0.25 mg/mL）及蛋白酶K （1.25 mg/mL）等去除核酸和蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30 ku和100 ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。     

蜜蜂线粒体DNA碱变性提取法

一、前言线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）已被广泛应用于动植物群体遗传学和进化生物学的研究中，并为分子系统学提供了有价值的比较生物学的数据，取得了许多非常有意义的结果。有效的ｍｔＤＮＡ提取方法，无疑是开展这方面研究的前提。而ｍｔＤＮＡ提取实验成功的标志是把染色体ＤＮＡ（即核ＤＮＡ）、蛋白质与ＲＮＡ尽量去除干净，从而获得一定得率和纯度的ｍｔＤＮＡ，以满足ｍｔＤＮＡ用于限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析中的酶切及聚合酶链式反应（ＰＣＲ）中酶切、拷贝和连接的需要。本试验用碱变性提取法，ＣｓＣｌ超速离心法和蛋…     

天然牛磺酸提取及分离纯化研究

牛磺酸作为营养强化剂已在食品中,尤其是婴幼儿食品、保健品中得到广泛的应用.综述了天然牛磺酸提取及分离纯化方法研究的最新进展,以期为牛磺酸的深入研究提供参考.     

应用辛酸硫酸铵法提取纯化兔IgG

血清中IgG的提取和纯化方法很多,但是各有其优点与不足。单一辛酸法和硫酸铵法操作简单但提取的IgG纯度不高,柱层析可获得高纯的抗体,但成本很高,而且回收率低。本试验应用辛酸硫酸铵法提取和纯化兔抗粪肠球菌血清中的IgG,取得比较理想的结果,现报告如下:1材料与方法1.1材料1.1.1血清:兔抗肠球菌血清(自制)。1.1.2主要药品及仪器:正辛酸(天津市化学试剂一厂),硫酸铵(西安化学试剂厂),凝胶成像系统SYDR2/1779,DYY-6B型稳压稳流电泳仪,透析袋(购自华美公司),UV-754型紫外分光光度计。1.1.3试验动物:健康家兔4只(由石河子大学实验动物中…     

双峰驼精清诱导排卵活性因子的HPLC分离纯化及生物活性测定

利用C8柱经HPLC对QHyper D柱分离的驼精清活性组分F3和F5进行分离纯化，大鼠垂体组织培养，RIA测定培养液中LH和FSH的浓度。实验结果表明，F3和F5经过HPLC纯化后，各得到4个组分，分别以F3－1－F3－4和F5－1－F5－4表示。其中F3-3和F5－3可引起体外培养的大鼠垂体LH的释放显著增加，但均未引起FSH发生明显变化。用C18柱经HPLC或毛细管电泳对F3－3进一步纯化，无论在HPLC或毛细管电泳仪中，F3－3均呈现两个波峰，而且间隔非常靠近，说明F3－3至少是由两种分子特征非常相似的物质组成。     

白三叶叶蛋白提取及纯化工艺

以白三叶（Trifolium repens）为材料探讨了叶蛋白的提取工艺和纯化方法。对白三叶叶蛋白提取中加热时间、温度、pH值、料液比、酸的种类等单因素以及纯化试剂甲醇、乙醇、丙酮、四氯化碳、水等进行了研究。结果表明,各单因素最佳参数为加热时间9 min,温度90 ℃,pH值 4.0,料液比1∶2,沉淀的酸为硝酸。对加热时间、加热温度、pH值和料液比进行4因素3水平正交试验,发现影响叶蛋白提取因素为pH值>温度>时间>料液比,最佳提取工艺为加热时间9 min,温度80 ℃,pH值4.0,料液比1∶2。对叶蛋白纯化结果表明,纯化剂对叶蛋白纯度的影响依次为甲醇>乙醇>丙酮>四氯化碳>水,但各种纯化剂之间差异不显著（P>0.05）。     

油茶粕中茶皂素的提取及纯化研究

油茶(Camellia oleifera)是我国南方丘陵地区的一种重要油料植物。我国是世界上油茶籽产量最高、分布最广、品种最多的国家。年产油茶籽约54．98万吨，油茶籽副产品——油茶饼粕的年平均产量约为39．71万吨。经检测分析。油茶饼粕中富含蛋白质、脂肪、淀粉、茶皂素、粗纤维和灰分等。茶籽蛋白质含有17种氨基酸成分．其中7种是人体必需的氨基酸。因此，     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h。采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为1．0g生药／mL时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9～11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、可行,可用于苦参碱的工业化提取。     

苦参碱的提取纯化工艺研究

为了优化苦参碱的提取工艺,以浸膏收率、苦参总碱含量为评价指标,选择用水量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L9（3^4）正交试验法优选出水煎煮法提取苦参总碱的最佳工艺条件为用8倍量水提取3次,每次提取2h,并采用乙醇沉淀及三氯甲烷萃取相结合的方法对苦参粗提物进行纯化,浓缩药液浓度为每毫升1．0g生药时进行醇沉,醇沉后调节药液的pH值至9-11用三氯甲烷萃取3次。优选出的提取工艺稳定、合理、可行。     

玉米芯色素成分的提取纯化研究

随着我国养殖业的不断发展壮大,畜牧业消耗的粮食也日益增多,为了减少食用粮食用量、降低饲料成本,蛋白质含量比较高的玉米芯可用来替代部分粮食饲料。为了提取玉米芯色素并对提取方法进行验证,采用称取干燥后粉碎的紫色玉米芯粉末25 g,乙醇浓度50%,料液比1:20（体积比计算）,依据不同萃取方法,不同萃取时间、萃取温度等进行对比研究,从而选出最佳提取方法。结果表明,采用微波法进行提取并利用XAD-4树脂在一定条件下进行纯化,能够获得较高纯度和浓度的玉米芯色素。     

牛蒡苷元的提取及纯化

探索了一种从牛蒡子中提取、纯化牛蒡苷元的方法。将脱脂牛蒡子粗粉用含5%盐酸的50%乙醇溶液回流5 h,过滤后,药渣用50%乙醇溶液重复提取1 h,合并滤液后用5 mol/LNaOH溶液调节至中性,氯仿萃取2次,减压旋转蒸干后得牛蒡苷元粗品。粗品用硅胶柱层析纯化2次,获得类白色粉末,HPLC法进行分析。结果表明,牛蒡苷元样品保留时间与对照品保留时间一致,约为12.1 min,其相对百分含量为99.3%。牛蒡苷元总提取率为1.1%。该方法是一种有效的、简便的、能满足常规实验室设备要求的牛蒡苷元制备方法。     

桑葚花青素的提取与纯化研究进展

药食两用资源的桑葚,富含花青素,具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、保肝、抗衰老和抗炎等多种生物活性,被广泛应用于食品、药品和保健品行业。本文梳理了花青素提取、纯化工艺最新研究进展,为桑葚花青素的研究和工业利用提供借鉴。     

鹿茸多肽提取分离纯化及药理作用研究进展

鹿茸多肽具有抗炎、抗氧化、增强免疫并能促进细胞分化、伤口愈合、抑制肿瘤细胞、促进神经系统、周围神经系统组织的再生等药理作用,是鹿茸中最有效的成分之一。文中对鹿茸多肽的提取,分离纯化及药理作用研究进展进行了综述,希望为鹿茸多肽的研究和开发提供参考。