禽流感（H9亚型）油乳剂灭活疫苗的研究

将H9亚型禽流感病毒尿囊液，经甲醛灭活，以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗，疫苗物理性状良好，接种鸡无不良反应，接种疫苗后14d，食流感病毒HIGMT（Log2)为7.7-7.8，21d为8.9-9.3，于接种疫苗后14、21、30、60d，攻击同型禽流感病毒，接种疫苗鸡全部获得保护，现地实验取得了良好地免疫效果。证明制备的油乳剂灭活疫苗安全，免疫原性良好。     

禽流感H9亚型油乳剂灭活疫苗的改进

用新引进的6株禽流感病毒(AIV)H9亚型和现制苗用的AIV-H9毒株分别制备AIV-H9、AIV-H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗，免疫5日龄和10日龄雏鸡，于免疫当日直至80日龄鸡出栏期间定期采血，用HI法检测相应的AIV-H9、AIV-H5和NDV抗体。结果表明，10日龄免疫鸡的AIV-H9抗体效价最高，5日龄和10日龄免疫鸡的AIV-H5抗体效价差别不明显；用引进的3号AIV-H9毒株制备的联苗对10日龄雏鸡免疫后20d产生AIV-H9保护性抗体，一直持续到80日龄以上，期间的抗体平均效价为6．72(1b)，而现制苗用的AIV-H9毒株制备的联苗免疫力较差；现制苗用的A1V-H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好；分别接种0．25、0．30mL／只联苗的雏鸡AIV-H5抗体效价没有明显差别，而AIV-H9抗体效价以接种0．30mL／只剂量的为高；不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。     

新城疫与禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活苗免疫效力试验

用新城疫病毒（NDV）LaSota株与禽流感病毒（AIV）F株尿囊腔接种非免疫难胚，取72－120小时死亡鸡胚液。灭活后分别制成新城疫油乳剂灭活苗、禽流感（H9亚型）油乳剂灭活苗、新城疫与禽流感（H9亚型）二联油乳剂灭活苗，免疫7日龄非免疫雏鸡，一周后开始检测ND、AI血凝抑制（HI）抗体体，两周时各免疫组鸡的抗体效价都达到6log2以上，3周达到高峰，后维持在较高水平达45天以上，在65日龄进行攻毒，结果单苗和二联苗免疫鸡全部得到保护。     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

本品系用A型禽流感病毒A／Ostrich／Denmark／72420／96(LPAI-H5N2)株及A／Chicken／Shanghai／1／98(H9N2)株分别接种易感鸡胚、收获感染胚液、超滤浓缩后经甲醛溶液灭活，加油佐剂混合乳化制成的油乳剂灭活疫苗。疫苗用4周龄SPF鸡作安全试验，每只鸡肌肉注射2ml，结果表明试验鸡均无全身症状和局部病变，证明疫苗安全性良好。取疫苗一羽份免疫4周龄SPF鸡作效力检验，免疫鸡全部获得保护，对照鸡全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明一羽份疫苗中至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。     

禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗不同剂量的免疫效果比较

将47只28日龄SPF鸡分为4组，第1～3组为试验组，每组12只，分别肌肉注射禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗0．1、0．3、0．5mL／只，第4组11只为对照组。各组鸡在免疫后1、2、3周采血，测定H9抗体水平；在免疫后3周用1：10稀释的AIV H9N2攻毒，0．2mL／只。攻毒后第2、3、4周继续测定H9抗体水平，观察了疫苗对鸡的保护效果。结果显示，0．5mL／只剂量的免疫效果比0．1mL／只和0．3mL／只剂量的免疫效果好；攻毒用的AIV H9N2的致病力低，对所有试验鸡均不致死。     

HVJ-E作为禽流感H9亚型灭活苗免疫佐剂的展望

近年来,禽流感已经成为各国动物疾病防控的重中之重,其中H9N2亚型虽然是一类低致病性禽流感病毒,但其感染范围广,发病迅速,可造成重大损失。现阶段,使用灭活苗是预防H9亚型禽流感的主要方法,虽然该类疫苗可以使免疫鸡在临床上不表现发病症状,但并不能阻止其感染后的排毒和对肌肉品质造成一定的影响。研究发现,HVJ-E具有双重免疫调节作用,有希望作为H9亚型灭活苗免疫佐剂应用于临床。     

禽流感(H9亚型)油乳剂灭活疫苗的血凝抑制(HI)抗体动态变化的研究

从市场上随机购得不同厂家各两批次的商品化禽流感(H9)油乳剂灭活疫苗，按瓶签说明免疫禽流感母源抗体为阴性的蛋鸡。当疫苗抗体下降至5log2左右时部分鸡再二免，并做田间试验。结果表明，免疫1周出现血清抗体，并逐日上升，3周达高峰。首次免疫8周后抗体下降至5log2左右，二次免疫15周后抗体下降至5log2左右。这四批疫苗的免疫原性较高，安全可靠，两次免疫保护期可保护至开产后。     

禽流感病毒H9亚型灭活油乳剂疫苗的免疫试验

以低致病性禽流感病毒（AIV）H9N2亚型株的鸡胚适应毒经尿囊腔接种10日龄鸡胚，从24h后死亡胚及96h后4℃致冷死亡胚收集尿囊液，尿囊液的血凝价约7log2，每毫长约含10^8.6个ELD50的病毒。将尿囊液经0.1%福马林灭活后，用超滤器将尿囊液浓缩5倍后分别制成双联灭活疫苗。对4周龄SPF鸡肌肉注射0.5ml或0.3ml单联H9亚型AIV灭活苗，在接种后2、3、4、5周后，血清中对H9亚型AIV的血凝抑制（HI）抗体效价分别是5.1、7.2、8.3、10log2或3.8、6.5、6.3、8.31log2。注射0.5ml的H9亚型AIV和NDV二联油乳苗的鸡，在接种后2、3、4、5周对H9亚型AIV及Lasota株NDV的HI滴度分别是4.6、5.6、6.7、8log2及7、7.6、6.7、7log2。显然，二联苗对H9亚型AIV及NDV均产生了理想的免疫效果。     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一种禽急性、接触性、烈性传染病。病毒广泛存在于野生禽、鸟类和人工饲养的禽类中,国际兽医局(OIE)将其列为动物的A类传染病。1878年,该病首次在意大利暴发流行,当时称之为“鸡瘟”。禽流感引起的损失主要有：高致病力毒株致鸡大量死亡,非高致病力毒株引起产蛋量下降,免疫功能障碍而继发细菌或病毒的感染。1994年,我国广东首次报道了H9N2亚型禽流感的分离,自此之后中国大陆的禽流感日益受到世人的关注。     

禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究

用禽流感H5N2亚型毒株接种10日龄SPF鸡胚，收获尿囊液，经甲醛灭活后与优质矿物油佐荆混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。抽取其中三批，接种28日龄非免疫鸡100羽，4天后检测抗体，以后每隔1周或2周采血检测H5亚型HI抗体，并于抗体水平为2log2、4log2、6log2左右时攻毒。结果表明，免疫后4天即能检测出抗体，之后逐渐上升，至第5周抗体水平达到高峰且较稳定，然后缓慢下降，110天后抗体降至临界值以下。攻毒结果表明，能使鸡抵抗强毒攻击的抗体临界值为6log2。     

H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株灭活疫苗的研制

利用H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽H7N9亚型流感的防控提供科学数据及手段。将AIV-rGD76株用灭菌生理盐水作104倍稀释后,接种11日龄非免疫鸡胚,37℃孵育72h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加矿物油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显示,制备的3批重组禽流感病毒灭活疫苗(H7N9亚型,rGD76株)均为油包水型,黏度均在50cP以内,对3批疫苗取样,样品经3000r/min离心15min,管底无水相析出。安全性试验结果显示,将疫苗按1mL/只超剂量接种3周龄SPF鸡,试验鸡在观察期内全部健活,未出现局部或全身不良反应,表明疫苗对SPF鸡具有良好的安全性;免疫效力及攻毒保护试验结果显示,用疫苗按0.3mL/只的剂量免疫接种3周龄SPF鸡1次,免疫接种后21d试验鸡血清中rGD76株的HI抗体平均效价可达8log2以上,使用H7N9亚型高致病性禽流感病毒GD16株滴鼻接种0.2mL/只(含100LD50)对免疫鸡进行攻毒,疫苗对免疫鸡的保护率均为100%。在实验室条件下研制出重组禽流感病毒灭活疫苗(H7N9亚型,rGD76株),疫苗的各项指标均符合标准。     

H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫、免疫后攻毒及人工感染鸡抗体的监测

本研究采用ＡＧＰ、ＨＩ等试验方法，对经Ｈ９亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫、免疫后攻毒以及经Ｈ９Ｎ２活毒人工感染后的ＳＰＦ鸡抗体产生、消长规律进行了测定，结果表明人工感染ＳＰＦ鸡和免疫鸡一周后，ＡＧＰ的检出率即可达到１００％；Ｈ９亚型禽流感油乳剂灭活苗自免疫后一周内即可产生ＨＩ抗体，２１－２８天达到高峰，并能对相同亚型病毒感染引发良好的免疫反应。     

禽流感灭活油乳剂疫苗免疫监测的研究

通过HI试验,对雏鸡的禽流感灭活疫苗免疫效果进行监测,为更科学制定鸡免疫程序奠定基础。结果表明:(1)对照组鸡AI-H5与AI-H9两种母源抗体最高,达4log2,次日逐渐下降,于第10天降至较低水平。AI-H5、AI-H9两种母源抗体分别于22、32日龄降至为2log2以下。(2)试验组鸡于第5天进行首免,于第12天时,AI-H5、AI-H9的HI抗体水平开始上升,于32天AI-H5、AI-H9两种抗体水平呈缓慢下降趋势,但于第104天仍能检测到抗体,分     

H9亚型禽流感油乳剂灭活苗

H9亚型禽流感病毒的灭活疫苗忆经研制成功,即用H9N2亚型的禽流感病毒分别接种鸡胚,收获尿事囊液,经甲醛灭活,以矿物油乳剂灭活疫苗.     

细菌CpG DNA对鸡接种禽流感病毒H9亚型灭活苗的免疫增强作用

为了探讨细菌核酸对 H9亚型禽流感病毒灭活疫苗的免疫增强作用 ,将 1 5日龄蛋用公鸡 1 2 0只随机分为 4组 ,即空白组、抗原组、细菌核酸佐剂组及白油佐剂组 ,每组 30只。于 2 8日龄时 ,细菌核酸佐剂组以灭活 H 9亚型禽流感病毒作为抗原 ,大肠杆菌牦牛株核酸作为佐剂 ,免疫接种于试验鸡 ,用 XTT法检测 T、B淋巴细胞增殖反应 ,并用血凝与血凝抑制法检测血清抗体水平。结果显示 ,在细菌核酸佐剂组 ,鸡的血凝抑制抗体水平和 T、B淋巴细胞增殖反应均显著高于抗原单独免疫组 (P<0 .0 5 ) ,而免疫组均显著高于空白组 (P<0 .0 5 ) ;细菌核酸佐剂组的抗体滴度峰值略高于白油佐剂组 (P>0 .0 5 ) ,但 T、B淋巴细胞增殖指数峰值显著高于白油佐剂组 (P<0 .0 1 )。结论认为 ,大肠杆菌牦牛株核酸可显著增强免疫鸡对禽流感病毒 H9亚型灭活疫苗的免疫反应 ,其免疫增强效果略高于常规油佐剂     

禽流感病毒H5、H9亚型的多重RT-PCR鉴别诊断

根据禽流感病毒H5、H9亚型的HA基因序列,设计了两对RT-PCR引物,同时对H5、H9亚型进行了多重RT-PCR扩增,得到了两条清晰的目的带.将目的带回收并进行测序,同源性比较结果证明其为禽流感H5、H9亚型的HA基因序列,作者对多重RT-PCR进行反应条件优化以及敏感性与特异性测定,证明该方法的敏感性和特异性都比较好.初步应用于30份临床病料,其检测结果与病毒的分离培养一致,比电镜和琼扩的检出率高,与其他NDV、IBV的病料无交叉反应,可用于禽流感病毒H5、H9亚型的鉴别诊断.     

动物园野生禽类禽流感H5亚型灭活油乳剂疫苗的应用

自2003年12月以来，东南亚国家接连发生了高致病性禽流感，我国部分省、市也相继发生了高致病禽流感疫情。2004年1月23日深圳市野生动物园饲养的1～2岁黑天鹅突然死亡8只，24日又死亡12只；其后，成年的黑天鹅也相继出现病情，到2月5日，共死亡黑天鹅69只。经对死亡黑天鹅剖检及取样送检，被确诊感染禽流感H5亚型病毒。在黑天鹅出现不寻常死亡后，深圳市野生动物园对园     

鹌鹑H9亚型禽流感

某鹌鹑养殖场的成年产蛋鹑突然出现以产蛋下降、下痢、少数神经症状和大量死亡为特点的疑似新城疫的疾病，经血清学试验等初步诊断为H9亚型禽流感。报告如下。     

一起肉鸡H9亚型禽流感的诊断与防控

该文介绍一例H9亚型禽流感的发病经过、临床症状、病理变化、诊断及防治措施,并对该病的相关问题进行探讨。