软骨组织切片不同制作方法的比较

采用正丁醇脱水及脱钙处理制作软骨石蜡切片和冰冻切片,并用阿利辛蓝、甲苯胺蓝和Masson三色法对软骨细胞进行特异性染色,对软骨切片制作方法进行了比较研究.结果表明,软骨组织改良石蜡切片优于普通石蜡切片;冰冻切片较石蜡切片快速、简便,但保存时间短;石蜡切片操作复杂、时间长,但切片保存效果较好.3种染色方法对软骨细胞均能特异性着色.由此证明,使用冰冻切片和阿利辛蓝、甲苯胺蓝和Masson三色染色法可以制作良好的软骨组织切片.     

四倍体刺槐茎段组织石蜡切片的制作方法

以传统石蜡切片方法为基础,针对林木茎段木质化程度高、硬度和脆性大的特点对固定、软化、脱水、透明、染色等具体步骤进行了改进,并成功应用于四倍体刺槐生根过程插穗基部解剖学研究。结果表明:较传统方法切片时组织不易碎,切片结构完整,减少了脱水时间,缩短了制片周期;获得了厚度为8 μm且染色清晰、细胞结构完整的林木茎段横切面切片;四倍体刺槐插穗石蜡切片可清晰的观察大量能够反映生根各时期发育特征。该方法为进一步从解剖学上研究林木茎段组织生长机制提供基础,为探究其组织形态变化提供了新的技术方法。     

石榴花芽石蜡切片制作方法的改良

[目的]摸索适合石榴花芽及胚珠结构观察的石蜡切片方法。[方法]以"突尼斯软籽"石榴花芽及胚珠为试材,在传统石蜡切片方法的基础上,结合石榴花芽鳞片厚、子房多室的特点,对样品处理、软化、透明、浸蜡、染色等重要制片环节进行研究。[结果]不同样品处理方式对比发现,将子房纵切4瓣进行固定,切片效果较好。软化结果表明,纱布包裹花芽浸入水中加热至沸腾30 min,有助于提高制片效果。不同染色方式对比发现,爱氏苏木精染色法更适合石榴胚珠切片观察。[结论]通过优化常规石蜡切片方法,得到了适合石榴花芽及胚珠结构观察的石蜡切片方法,该方法同样适用于与石榴花芽及胚珠结构类似的其他结构。     

浅析影响石蜡切片质量的关键因素

摘要：石蜡切片技术是组织学、发育生物学研究的主要实验方法,同时也是病理学中观察病理变化的重要手段,广泛地应用于临床病理诊断、教学和科研工作中。但是许多实验人员未经过严格而系统的培训,操作中由于经验不足,操作不当,常出现切片碎裂、切片脱落、染色不均、模糊不清及细胞结构染色对比不明显等现象而影响观察。笔者在阅读了大量的石蜡切片相关文献的基础上,结合自身体会,将影响石蜡切片质量的关键因素分为了实验试剂、时间和温度的选择三方面,分析了其对石蜡切片过程各环节的影响和可能出现的问题,并详述了如何控制这三方面以提高切片质量。     

石蜡切片制作方法的改良

创立了一种时间短、质量高的石蜡切片制作方法。针对动植物材料结构特点不同,在脱水、透明、透蜡、包埋、染色和封固等环节进行了一系列改良,获得了染色清晰、组织结构完整的切片。该文以小蜡树为例,详细介绍了改良后的石蜡切片制作方法。实验结果表明,相比传统制作方法,改良后的制作方法减少了切片制作时间,缩短了实验周期。同时,有效地提高了批量制备石蜡切片标本的整体质量,有利于实验教学和组织学、病理学等领域的研究工作。     

家兔卵巢石蜡切片HE染色影响因素的研究

在石蜡切片HE染色过程中影响因素诸多,会出现许多常见问题,控制好这些因素是石蜡切片制作成功的关键。用家兔的卵巢制作石蜡切片进行HE染色,改变条件,进行比较试验,重点分析了影响HE染色的温度、时间、切片厚度等主要因素,可供其他实验室借鉴。     

樟子松松针石蜡切片制备

[目的]以樟子松松针为材料,探索一套适合樟子松松针制备石蜡切片的条件。[方法]在传统植物石蜡切片技术的基础上,结合松针的结构特点,对固定、脱水、粘片、染色等环节进行了系列摸索。[结果]FAA固定剂配比中采用70%乙醇;粘片时材料置于40℃水浴锅中展开,用防脱载玻片捞取,置35℃烘箱24 h;松针切8μm厚度,染色条件为伊红5 min,苏木精1 min。[结论]获得的条件可强化固定和脱水效果,粘片操作简便,不易脱片,染色效果较好。     

水稻叶片徒手切片的荧光显微镜观察

徒手切片常用于植物细胞结构的研究,但传统徒手切片方法对操作技术要求较高,且需要经历复杂的脱色和染色.利用双面剃须刀将新鲜水稻叶片切成薄片,分别在可见光和紫外光下观察显微结构.结果显示,叶片横切面在蓝色荧光下,可以获得清晰的表皮细胞、维管束、泡状细胞大小和数目的图像.该图像满足计量分析.采用改进的徒手切片方法操作简便、快速,适合水稻叶片维管束和泡状细胞变异的快速筛选.     

常规植物石蜡制片技术的改进及应用

石蜡切片技术在植物科学技术研究领域扮演着十分重要的角色,并为植物组织结构的研究做出了巨大贡献,现代植物分子生物学研究中仍需石蜡切片技术支持。以凹叶木兰的雌、雄蕊群及花被片作为实验材料,通过改良脱水、包埋、染色、分色等制片环节,设计了一种优良、易操作的植物组织石蜡制片方法,并对实验操作中常见的问题和注意事项进行了讨论。实验结果表明该方法简化了实验步骤,节约了实验药品,减少了实验中有毒试剂的使用和接触,提高了制片质量并使同一批制片染色效果统一。     

含羞草石蜡切片的制作

通过对含羞草进行取材、固定、脱水、透明、浸蜡、切片、脱蜡、染色、透明等一系列过程的试验研究,掌握了含羞草石蜡切片的制作方法,总结出了含羞草石蜡切片制作过程中的关键技术,并通过显微观察分析,从解剖学上为研究含羞草的运动机理提供了理论基础。     

微波快速石蜡制片的实例运用

以美洲商陆为试验材料,借鉴传统石蜡制片技术流程,应用微波技术,对固定、脱水、透明、浸蜡等步骤进行改进,使试验周期缩短为两天以内。结果表明:采用微波快速石蜡制片法获得了染色清晰、组织完整的解剖结构,与传统石蜡制片法的效果相同。     

番茄叶片厚度变化规律的比较解剖分析

使用自行研制的叶片厚度测试仪,获得所监测番茄叶片厚度午间减小,早晨与傍晚增大的规律;从微观结构入手,分时段连续采集样品,制作石蜡切片进行比较解剖分析,寻找叶厚变化的原因。结果表明：从早到晚栅栏组织排列出现松散、紧密、松散的现象;海绵组织无明显的排列变化,但叶片厚度与海绵组织比例变化一致,即海绵组织体积直接影响了叶片厚度值。     

一种新的快速石蜡制片法——电热恒温石蜡制片法

为缩短传统石蜡制片法的制片时间,将电热恒温干燥箱应用于石蜡制片过程中,观察电热恒温石蜡制片法制片效果。结果表明:此法试验周期缩短为1 d内,获得了染色清晰,组织完整的解剖结构,与传统石蜡制片法的效果相同。     

石蜡切片制片技术的探讨

石蜡切片的制作是组织学和病理学中常用的一种方法。常规制作切片的方法,往往达不到满意的效果。本文根据作者十年的制片经验,摸索其药品的配制,对实验步骤和操作方法等细节方面进行了改良,大大的提高了切片的染色效果和整体质量,明显降低脱片率(低于5%)。     

绵羊卵丘-卵母细胞复合体石蜡切片技术的改良

【目的】在绵羊有腔卵泡发育过程中,多层卵丘细胞紧密包绕着卵母细胞形成卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complex,COCs)特殊结构,存在于卵泡腔内。卵泡成熟后,绵羊COC从卵泡内排出,进入输卵管,等待受精。现有的卵丘-卵母细胞复合体蛋白鉴定技术,或者将包含各级卵泡的卵巢组织直接进行切片处理,或者将COCs从卵泡内分离,在完整卵丘-卵母细胞复合体水平上进行免疫染色。但这两种方法在检测绵羊有腔卵泡COCs中目的蛋白表达时,存在显著缺陷。研究旨在对常规石蜡组织切片技术进行改进,以期满足绵羊COCs蛋白鉴定需求。【方法】首先采用抽吸法从绵羊有腔卵泡内获得COCs,以石蜡包埋方式人为构建了一种可以进行切片处理的"包含多枚绵羊卵丘-卵母细胞复合体的仿组织结构"。然后以该特殊结构与健康绵羊卵巢组织为研究对象,分别采用改良与传统的石蜡组织免疫化学技术流程,检测了目的蛋白,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)与其受体(urokinase-type plasminogen activator recepter,uPAR),在绵羊COCs中的表达情况,比较了两种技术的免疫染色效果与染色流程差异。【结果】将所构建的绵羊COCs仿组织结构与正常绵羊卵泡组织,进行石蜡组织切片处理,经切片、贴片与脱蜡等步骤,分别形成了散在分布于载玻片上的COCs薄片与包含卵泡的卵巢组织薄层(厚度5μm)。经间接免疫染色处理后,结果显示:①目的蛋白在两种结构COCs中的表达是一致的,即uPAR在绵羊卵丘与卵母细胞上都有表达,而uPA只存在于绵羊卵丘细胞中;②在绵羊COCs薄片结构中,COCs整体形态完好,卵母细胞与外围卵丘细胞层次清晰,蛋白定位清楚,染色效果良好;在卵巢薄层结构中,绵羊卵泡内壁颗粒细胞与COCs等形态结构相对完整,卵母细胞蛋白定位清楚,但是卵丘细胞层次与蛋白表达较不清晰;③与绵羊卵巢组织石蜡切片技术相比较,绵羊COCs仿组织结构石蜡切片技术,在固定、脱水、透明、浸蜡以及脱蜡等步骤的处理时间都大大缩短,例如固定处理由24h缩短为2h;由逐级脱水的10h缩短为两级脱水的1h;透明由30min缩短为10min;软蜡与硬腊浸入由原来的6h缩短为1h;由逐级脱蜡的25min缩短为两级脱蜡的10min等。【结论】改进后的COCs仿组织石蜡切片染色技术,显示更优质的免疫定位与染色效果,不仅具有COCs获得率高、卵母与卵丘细胞形态层次清晰等优点,而且显著缩短了操作时间,简化了操作流程。该技术在保留COCs结构完整的基础上,有效检测了目的蛋白在绵羊卵丘-卵母细胞复合体中的表达模式,对于探明绵羊卵泡发育与卵母细胞成熟机制,具有重要意义。     

有机土壤对烟草叶片结构的影响

以烟草为试验材料,研究有机土壤与普通土壤培养条件下烟草叶片的结构变化。结果表明,有机土壤条件培育的烟草与无机土壤条件下培育的烟草叶脉厚度相当,有机土壤条件下培育的烟草叶片厚度和海绵组织总量较低,而栅栏组织总量较高。     

石蜡切片方法的改良

[目的]快速且安全高效制作石蜡切片。[方法]采用不同的方法,对植物材料进行透明和脱蜡以及包埋处理,把材料制成透明的玻片标本,利用正丁醇代替二甲苯作为透明剂和脱蜡剂,其他和传统的石蜡切片方法相同。[结果]正丁醇既能与乙醇混合,又能与中性树胶相融合;正丁醇作用相对较缓和,透明后的组织平整,没有明显的收缩、变形现象,并且不存在透明时间过长的问题,还减少了对实验人员的伤害。[结论]该方法可以快速地制作石蜡切片,且安全有效。     

韭菜根再生不定芽的组织学观察

以胚根诱导的愈伤组织为材料,研究了韭菜石蜡切片的染色方法及根诱导愈伤组织并分化不定芽的组织学发生过程。结果表明,单独用番红染色,染色4,8 h后染色效果最佳;而单独采用固绿染色,10~20 s后就能够明显观察到组织细胞;若采用番红染色8 h与固绿20 s对染,组织结构清晰且立体效果明显,是韭菜组织的最佳染色方法。观察韭菜愈伤组织不定芽的发生过程,胚根尖首先脱分化形成愈伤组织,愈伤分化增长形成突起,成为胚性愈伤,然后分化形成叶片和不定芽。     

无核雪柑与普通雪柑自交或杂交后种胚发育的解剖学观察

通过设置3个授粉组合(无核雪柑×无核雪柑、无核雪柑×普通雪柑、普通雪柑×普通雪柑),对无核雪柑与普通雪柑自交或异交后种胚的石蜡切片分别进行观察.结果表明,不同组合无核雪柑珠被、珠心、胚囊及珠心胚等组织在不同发育阶段存在不同程度的崩溃、瓦解现象并最终消失是导致其无核、少核的一个重要原因.自交不亲和是无核雪柑无核的另一个原因,栽培上不能与其他品种混栽.     

蜜蜂卵3种组织切片制作方法比较

本试验分别采用常规石蜡切片、脂肪包卵石蜡切片和冰冻切片3种方法对意大利蜜蜂卵进行切片HE染色和显微镜观察。结果发现:(1)常规石蜡切片法难以制作出蜜蜂卵切片。(2)冰冻切片法可以制作出清晰完好的蜜蜂卵组织切片,对样本中的蛋白质和核酸保存较好,但也有切片较厚,难以连续切片,保存时间短等固有缺陷。(3)脂肪包卵石蜡切片制作法能制作出完整而清晰的蜜蜂卵组织切片,且切片较薄,卵切片组织的清晰度和完整度要优于冷冻切片,该方法制作出的卵切片也利于切片的长期保存,但卵的整体外观形态存在一定程度缢缩。