‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

激素水平对紫叶酢浆草分化增殖的影响

研究了不同外植体和激素水平对紫叶酢浆草组织培养的影响。结果表明:紫叶酢浆草的叶片比叶柄更容易分化出不定芽,是最适宜的外植体;诱导不定芽分化的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L,不定芽增殖的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,试管苗在MS+2,4-D0.5mg/L培养基上生根较好。     

绿萝组织培养和遗传转化条件优化

为优化绿萝离体再生条件，建立更高效的遗传转化体系，分别以绿萝叶片和叶柄为外植体，比较不同植物生长物质对绿萝不定芽诱导和植株离体再生的影响。并通过PCR技术克隆拟南芥AtFALDH基因，利用农杆菌介导法对绿萝愈伤组织进行遗传转化，比较不同转化条件下绿萝愈伤组织抗性不定芽诱导率。结果表明，绿萝叶柄愈伤组织和不定芽诱导效果均优于叶片。绿萝叶片愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D，该培养基下诱导率大约为61.5%；叶柄愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA，该培养基下诱导率达到97.8%。绿萝叶片不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，该培养基下诱导率接近100%；叶柄不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA，该培养基下诱导率约为100%，但叶柄来源的愈伤组织诱导产生的不定芽数量较多，而且生长更旺盛。生根最适培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA，该培养基下生根...     

八仙花叶柄离体培养和植株再生技术研究

以八仙花中部和上部叶柄(包括叶片)为繁殖材料,比较不同浓度激素配比情况下,不同部位叶柄愈伤组织的诱导、分化及不定芽的快速繁殖,并筛选适宜的愈伤组织诱导培养基、不定芽增殖培养基及生根培养基。结果表明,八仙花叶柄可作为离体培养的繁殖材料,其中,中部叶柄比上部叶柄愈伤组织诱导率高;较适宜的愈伤组织诱导培养基为:MS+6-BA 2.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;较适宜的不定芽诱导培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L;较适宜的增殖培养基为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;较适宜的生根培养基为:MS+NAA 0.8 mg/L或MS+IBA 0.6 mg/L+NAA 0.3 mg/L。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

秦岭野生宜昌百合的组织培养研究

为了有效地保存、扩繁秦岭野生宜昌百合资源,以秦岭野生宜昌百合为材料,研究了鳞片和叶片不同部位,以及不同激素配比对不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明,鳞片诱导不定芽的适宜培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,鳞片分化不定芽的能力为基部>中部>上部,三者之间差异极显著;叶片诱导不定芽的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 2,4-D,叶片不定芽的诱导率为基部高,中部和尖部低,且基部与中部和尖部差异极显著;不定芽增殖的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;适宜生根的培养基为1/2MS+0.4 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭(AC)。以上结果表明,鳞片和叶片分化不定芽存在明显的位置效应,6-BA和NAA配合对不定芽增殖有良好的效果,NAA和AC配合适宜生根。     

非洲菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的研究

以非洲菊3个品种叶片为材料,研究了不同基因型、叶片叶龄和叶片不同部位以及激素对非洲菊愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明:诱导愈伤组织较为适宜的外植体为嫩叶,以MS+6-BA 1.0~5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为培养基,愈伤组织诱导率均98%;诱导分化不定芽较为适宜的外植体为叶柄,最适培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,但不定芽分化率较低,仅为4.2%。     

西番莲离体快繁研究

[目的]建立西番莲快速高效的离体再生系统。[方法]采用西番莲一年生茎段、叶片及叶柄为离体培养材料,对诱导部位的选择、不同取材时间、愈伤组织诱导与分化、不定芽继代增殖、生根诱导等方面进行研究。[结果]MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0.05 mg/L组合较优,其嫩茎尖诱导率为96.6%,嫩叶柄为88.4%,嫩叶片为83.5%;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+TDZ 0.05 mg/L组合为最优组合,分化丛生芽率为92.8%;MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0.05 mg/L组合不定芽诱导率达90.9%;MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L组合芽增殖倍数为2.91;1/2MS+NAA 2 mg/L+PP3330.5 mg/L组合平均生根数为1.3条;1/2MS+NAA 2 mg/L+ABT 0.5 mg/L组合生根率为95.4%;1/2MS+NAA 2 mg/L+IBA 0.5 mg/L组合平均根长为1.23 cm。[结论]该研究为今后西番莲的选育及综合利用奠定基础。     

农大5号钙果叶片芽诱导及其植株再生研究

采集定植于温室中苗木上的叶片和组培瓶中农大5号钙果分化苗、壮苗叶片,进行离体叶片再生芽诱导及其植株再生体系研究。结果表明,温室叶片诱导不定芽的最佳培养基为1/2MS+IAA 0.1 mg/L+NAA0.05 mg/L+6-BA 0.8 mg/L,培养基中全部元素减半;组培分化苗叶片和壮苗叶片诱导不定芽的最佳培养基为1/2MS+IAA 0.05 mg/L+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.8 mg/L,培养基中大量元素减半;辅助因子以培养基中添加AgNO_3 0.2 mg/L、全光照、叶片反放和带叶柄的叶基部等措施配合取得了最高的芽诱导率。     

单叶铁线莲Clematis henryi愈伤组织诱导与植株再生

以单叶铁线莲老枝、嫩茎、叶片和叶柄为外植体,在附加各种激素的MS培养基上进行诱导培养,以探讨愈伤组织诱导和植株再生的条件。结果表明,嫩茎为最佳外植体,适用于愈伤组织的诱导,在MS+1.2 mg·L -1 6-BA+0.35 mg·L -1 NAA培养基中,嫩茎的出愈率为88.6%;MS+4.0 mg·L -1 KT+0.4 mg·L -1 NAA为最佳不定芽诱导培养基,不定芽发生率为90.0%;MS+0.04 mg·L -1 NAA为最佳生根培养基,生根率达95.0%。     

彩色马铃薯叶片再生体系的研究

以云南省农科院马铃薯研究中心选育的4个彩色马铃薯品系为试验材料,进行了叶片离体再生的研究.结果表明,DE02-24-24的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;DE02-24-39的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-1的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-2的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L.愈伤组织的诱导率均可达到100%.愈伤组织诱导不定芽分化的最佳培养基分别为DE02-24-24为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 3.0 mg/L;DE02-24-39为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+GA3 2.0 mg/L;JC02-27-1为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 2.5 mg/L;JC02-27-2为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA32.0 mg/L.其不定芽分化率分别为83.3%、100%、93.3%、100%.     

黄樟高频愈伤组织诱导及植株再生

以黄樟嫩茎腋芽萌发的新枝为外植体，以MS培养基为基本培养基，研究不同植物生长调节物质对诱导愈伤组织、分化不定芽、壮苗培养和生根培养的影响。结果表明：诱导产生愈伤组织的最适培养基为“MS培养基1 L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.2 mg”,诱导率可达90.00%;6-BA和噻苯隆(TDZ)在黄樟不定芽诱导中起着关键作用，诱导产生不定芽的最佳培养基为“MS培养基1 L+6-BA1.0 mg+TDZ0.8 mg+萘乙酸(NAA)0.05 mg”,分化率可达89.17%,不定芽数量达49.27个；不定芽继代培养基中添加维生素C(V_C)和维生素B₂(V_B2)可有效抑制褐化，最适培养基为“MS培养基1 L+6-BA0.5 mg+NAA0.05 mg+V_C15 mg+V_B220 mg”;“MS培养基1 L+6-BA0.2 mg+NAA0.05 mg+V_C15 mg+V_B220 mg+香蕉泥(BH)1...     

利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究

【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0 mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4 mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA-3(0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】 在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L中,不定芽再生频率最高,为64.29%,分化系数4.03;添加6-BA、NAA和 GA-3 3种激素,对不定芽再生频率促进作用更大,其中MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA-3 1.5 mg/L诱导效率最高,不定芽再生频率达到了80.36%,分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25 d时,不定芽再生频率相对最大,达到68.76%,分化系数为3.62,35 d后诱导效果下降。【结论】 甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+GA-3 1.5 mg/L;以生长日龄为25 d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。     

利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究

【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA3(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L中,不定芽再生频率最高,为64.29%,分化系数4.03;添加6-BA、NAA和GA33种激素,对不定芽再生频率促进作用更大,其中MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L诱导效率最高,不定芽再生频率达到了80.36%,分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25d时,不定芽再生频率相对最大,达到68.76%,分化系数为3.62,35d后诱导效果下降。【结论】甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA31.5mg/L;以生长日龄为25d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。     

不同品种软枣猕猴桃愈伤组织诱导及植株再生

以软枣猕猴桃(Actinidia arguta)品种"魁绿"和"佳绿"的无芽茎段、叶片、叶柄为外植体,研究外植体及生长调节剂组合对软枣猕猴桃愈伤组织诱导及植株再生的影响,从而建立"魁绿"和"佳绿"的离体再生体系。结果表明:6-BA对软枣猕猴桃愈伤组织的诱导效果好于KT,"魁绿"和"佳绿"叶片分别在MS+2,4-D0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L和MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1 mg/L的培养基上愈伤诱导率最高,分别为93.3%和96.2%。在不定芽再生培养过程中,6-BA和TDZ不能诱导不定芽发生,而ZT对不定芽的分化具有较好的诱导作用;"魁绿""佳绿"均在培养基MS+NAA 0.05 mg/L+ZT 3 mg/L上不定芽分化率最高,分别为72.0%、37.8%。不同品种及不同外植体的愈伤组织诱导率和不定芽再生率均存在差异,"魁绿"的不定芽分化率明显高于"佳绿";无芽茎段和叶片的愈伤组织诱导率均90%;叶片的不定芽分化率最高,显著高于茎段和叶柄。再生苗在培养基1/2 MS+IBA 0.1 mg/L上的生根率为97%。     

应用均匀设计法优化钻天柳嫩叶柄植株再生体系

应用均匀设计法筛选钻天柳最适合的培养基.结果表明,钻天柳组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适合的嫩叶柄愈伤组织诱导培养基为:MS+KT 2.00mg/L+NAA 0.05mg/L,诱导率为95.5%;嫩叶柄愈伤组织不定芽的分化培养基为:MS+6-BA 3.90mg/L+NAA 0.01mg/L,分化率为98%;生根培养基为:1/2MS+IBA 0.07mg/L,生根率达99%以上.成功建立了钻天柳嫩叶柄再生体系.     

明日叶快速繁殖体系的优化

研究以明日叶幼苗叶片与叶柄为外植体进行组织培养,在MS基本培养基中添加不同浓度的萘乙酸(NAA)与玉米素(ZT)、NAA与6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)联合处理,比较不同处理下叶片、叶柄的愈伤组织诱导率与不定芽分化率。结果表明NAA与ZT联合添加的培养基比较适合明日叶愈伤组织的诱导与不定芽分化,效果优于NAA与6-BA联合处理。最适合叶片培养的培养基是MS+1mg/L NAA+3mg/L ZT,最适合叶柄培养的是MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L ZT。本研究建立的明日叶快速繁殖体系,获得再生植株周期只需30~40d,大大缩短了明日叶繁殖周期。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

泰半夏小块茎的诱导及工厂化育苗研究

以泰半夏的无菌叶片、叶柄为材料,通过愈伤组织分化不定芽途径,建立泰半夏工厂化育苗植株再生体系。结果表明,以叶片、叶柄为外植体,愈伤组织最适诱导培养基分别为:MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 3.0 mg/L、MS+0.5 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA;愈伤组织在相同培养基中增殖后诱导小块茎分化的最适培养基为:MS+2 mg/L6-BA。1/2MS+0.1%活性炭+0.5 mg/L NAA培养基产生的根较粗壮、浓密。