山慈菇提取液对小鼠4T1乳腺癌细胞抑制作用机制的研究

探索山慈菇提取液对小鼠4T1细胞抑制作用机制。采用水煎法制备山慈菇提取液,MTT比色法检测小鼠4T1细胞的增殖活性,Annexin V/PI双染流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果表明,山慈菇提取液对4T1细胞有明显的增殖抑制作用(P0.05),并呈剂量依赖关系。山慈菇提取液诱导小鼠4T1细胞凋亡效果明显,并有剂量依赖性。山慈菇提取液对小鼠乳腺癌细胞有明显的增殖抑制和诱导其细胞凋亡的作用。     

九香虫血淋巴三种生物分子对胃癌SGC-7901细胞增殖影响

现代医学证明九香虫具有良好的抑癌抗癌作用。为了明确九香虫抑癌抗癌活性组份大类,采用超滤技术分离九香虫血淋巴小分子物质、60%丙酮沉淀蛋白质、醇提法提取多糖成分,通过MTT法检测三种生物分子对SGC-7901细胞的增殖影响。结果表明,在较高的作用浓度条件下,蛋白质提取物的增殖抑制活性显著高于小分子物质(P0.05),多糖提取物各作用浓度与无药对照相比均无明显的抑制活性,说明九香虫蛋白质组份是其抑癌抗癌的主要功能分子。     

烟草内源提取物抗TMV活性筛选

【目的】探讨3种烟草提取物的抗TMV活性,为开发烟草内源性抗烟草花叶病物质提供依据。【方法】利用半叶枯斑法对心叶烟、云烟203和K326三种烟草的根、茎、叶、杈甲醇提取物进行抗烟草普通花叶病毒活性筛选,并用叶盘法对部分筛选结果进行验证。【结果】3种烟草根和茎的提取物对TMV具有较明显的抑制活性,其中根对TMV体外钝化、初侵染和复制增殖作用的抑制率范围分别为65.00%~79.75%、64.0 8%~74.31%、26.9%~42.40%,活性最强;茎的活性次之,对TMV体外钝化、初侵染和复制增殖作用的抑制率范围分别为33.33%~44.25%、42.82%~66.06%、10.96%~47.76%。3种烟草叶和杈的提取物对TMV虽有一定的抑制活性,但较全株提取物对TMV体外钝化、初侵染和复制增殖作用的抑制活性均降低,抑制活性不明显。【结论】3种烟草的根部粗提物具有较好的抗TMV活性,值得进一步研究。     

皱果苋提取物的抗炎及抗癌作用研究

为评价皱果苋提取物的抗炎活性及抗癌作用,采用脂多糖(LPS)构建RAW264.7巨噬细胞炎症模型,用Griess法测定细胞NO水平,并通过RT-PCR法测定细胞因子TNF-α、IL-6mRNA表达量;用MTT方法测定对HepG2细胞的增殖作用,并用RT-PCR法测定caspase-3mRNA表达量。结果表明:皱果苋乙酸乙酯提取物(EAA)可降低炎症细胞因子TNF-α和IL-6分泌量及NO释放量。乙醚提取物(EEA)对HepG2细胞具有浓度依赖性抑制细胞增殖作用。这一研究提示,皱果苋EAA具有很高的抗炎活性,EEA具有抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用。     

11种植物提取物抗烟草花叶病毒活性研究

为开发环境友好型的植物源抗病毒剂,以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒,采用半叶枯斑法,研究了11种植物不同溶剂提取物的抗TMV活性。结果表明:当浓度为1 mg/m L时,臭灵丹石油醚提取物、红花月见草乙酸乙酯提取物、臭灵丹水层提取物对TMV增殖有显著抑制(P0.05)活性抑制率分别为68.47%、80.19%、94.57%;臭灵丹石油醚提取物、钻叶紫菀乙酸乙酯提取物、臭灵丹水提取物对TMV有较强的钝化活性,抑制率分别为80.00%、76.38%、83.33%。TAS-ELISA检测表明,臭灵丹、风轮草、珊瑚樱、钻叶紫菀、益母草、拔毒散等植物提取物对普通烟K326内病毒增殖具有显著抑制作用(P0.05),并且明显好于阳性对照药剂宁南霉素。     

姜黄素修饰的纳米金棒抑制胃癌细胞SGC-7901的作用

恶性肿瘤严重威胁着人类的健康。合成了姜黄素修饰的纳米金棒(Cur@Au NRs),并考察其对胃癌细胞(SGC-7901)的作用,采用MTT法测试其对5种肿瘤细胞株的体外增殖活性的影响,同时观察其对SGC-7901形态学的影响;利用实时x CELLigence细胞分析系统(RTCA)检测不同浓度Cur@Au NRs对SGC-7901增殖能力及迁移能力的影响;利用划痕愈合实验及血管形成实验检测Cur@Au NRs对细胞的迁移及血管形成的抑制作用;采用腹腔注射Cur@Au NRs后与正常小鼠内脏组织切片的对比,对其进行毒理学研究。研究结果表明,Cur@Au NRs具有良好的抗肿瘤活性,尤其对SGC-7901,且其IC50值明显低于姜黄素,并且能够抑制SGC-7901的增殖和迁移。毒理学研究表明即使在高剂量下也不具有明显的毒性。     

茶叶提取物EGCG和GCG及ECG对B16细胞内黑色素生成的抑制作用

为研究茶叶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechingallate,GCG)和表儿茶素没食子酸酯(epicatechingallate,ECG)对体外培养B16小鼠黑色素瘤细胞黑色素生成及酪氨酸酶活性的影响,分别用不同浓度的EGCG、GCG、ECG和熊果苷(Arbutin,AR)处理细胞,观察效应物对细胞形态的影响,用溴化二苯四偶氮法(MTT法)测定茶叶提取物对细胞增殖率的影响,以左旋多巴(L–DOPA)为底物,测定细胞内酪氨酸酶的活性,采用氢氧化钠裂解法测定细胞内黑色素的含量。结果显示,EGCG、ECG、GCG能显著抑制B16细胞的黑色素生成和酪氨酸酶的活性,且呈剂量依赖关系;当浓度为60μg/mL时,细胞增殖率均低于50%,酪氨酸酶活性与对照组相比分别降低了26.67%、27.27%和32.71%,黑色素生成抑制率均在30%以上。结果表明,茶叶提取物能通过多种途径抑制黑色素生成,且GCG的作用效果最优,ECG的作用效果次之,三者的作用效果均优于熊果苷的作用效果。     

凤眼莲活性提取物的抑菌活性研究

以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、青霉、黑曲霉为试验菌种,对凤眼莲活性提取物进行了抑菌活性试验,结果表明:(1)凤眼莲活性提取物具有抑菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑制效果较好,MIC值分别为0.625%和5.000%;(2)凤眼莲活性提取物的抑菌活性具有较宽的pH值适用范围;(3)100 ℃以内加热20 min对凤眼莲活性提取物的抑菌活性无显著影响;(4)对菌种的作用时间相同时,活性提取物的浓度越高,抑菌率越高;提取物浓度相同时,作用时间越长,抑菌率越高.     

蒲黄黄酮对缺氧损伤血管内皮细胞的保护作用

目的研究蒲黄黄酮对缺氧损伤血管内皮细胞人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)活性、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)含量的影响。方法缺氧诱导血管内皮细胞损伤,MTT比色法观察蒲黄黄酮对血管内皮细胞的影响,酶联免疫法测定细胞培养液中内皮素-1(ET-1)、NO的含量。结果蒲黄黄酮可提高缺氧时HUVE-12细胞活性,减少NO降低程度(P<0.05),抑制ET-1的生成(P<0.05),蒲黄黄酮对HUVE-12细胞的这种保护作用与其浓度存在一定的量效关系。结论蒲黄黄酮对缺氧损伤的血管内皮细胞HUVE-12具有保护作用,其作用可能与NO和ET-1的生成有关。 更多还原     

泽漆水提取物对猪流行性腹泻病毒的体外抑制作用研究

为分析泽漆水提取物对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)的体外抑制作用，本研究使用CCK-8法检测泽漆水提取物对非洲绿猴肾细胞(Vero CCL-81)增殖活力的影响，通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR方法检测泽漆水提取物对PEDV的抑制作用和时间依赖关系。以广谱抗病毒药利巴韦林(Ribavirin)为阳性对照药物，探究泽漆水提取物对PEDV生命周期各个阶段的影响。结果表明:1)泽漆水提取物浓度≤500 μg/mL时在12、24 和36 h细胞无毒性。2)泽漆水提取物以剂量依赖方式显著降低PEDV-N mRNA的表达量及PEDV 病毒滴度。3)泽漆水提取物可长时间有效抑制PEDV-N蛋白的表达，预防给药对PEDV-N蛋白表达无明显抑制效果。4)泽漆水提取物在病毒复制周期的吸附及复制增殖阶段对PEDV-N蛋白的表达具有显著抑制作用，在入侵阶段对PEDV-N蛋白的表达无明显抑制效果。综上，泽漆水提取物在体外对PEDV具有显著抑制作用，主要作用于PEDV生命周期的吸附和复制增殖阶段。本研究为深入挖掘泽漆抗病毒优势奠定了基础。     

蕨麻提取物体外抑菌与抗癌细胞活性研究

[目的]研究蕨麻不同极性溶剂提取物的抑菌和体外抑制癌细胞的活性。[方法]采用石油醚、乙酸乙酯、乙醇和水4种不同极性的溶剂依次提取蕨麻块根,获得对应的4种提取物,用牛津杯双层平板法研究其对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌4种细菌的抑菌活性,并使用结晶紫染色法观察其对人肝癌细胞HepG2体外增殖的抑制活性。[结果]蕨麻乙醇提取物的抑菌活性最明显,并具明显的癌细胞体外增殖抑制活性,其IC50值为375μg/ml。[结论]蕨麻中存在抑菌和抑制癌细胞的活性成分,其中乙醇提取物活性最明显。     

牡丹种皮乙酸乙酯提取物抗癌活性研究

研究了牡丹种皮乙酸乙酯提取物对人源性乳腺癌细胞株(MCF-7)的增殖抑制率及细胞活性的影响。制备不同浓度梯度的牡丹种皮乙酸乙酯提物作用于MCF-7细胞,通过细胞形态学分析,AO/PI双染色,MTT法和线粒体膜电位法检测MCF-7细胞的生长活力,增殖抑制能力和线粒体膜电位变化。研究结果表明,当牡丹种皮乙酸乙酯提物质量浓度为5 mg/mL时,对MCF-7细胞的抑制效果最佳,细胞抑制率可达89.67%,并且在药物作用下,细胞活性和线粒体膜电位均明显下降。牡丹种皮乙酸乙酯提取物对乳腺癌细胞MCF-7的生长有抑制作用,能够降低细胞活性,促使MCF-7细胞线粒体膜电位降低,诱导细胞产生凋亡现象。     

FSH激活的ERK1/2信号通路在GC细胞增殖分化过程中的作用

为探明由促卵泡刺激素(FSH)激活的胞外信号调节蛋白激酶1/2 (ERKl/2)通路在颗粒细胞(GC)增殖分化过程中的作用,以分离培养的SD大鼠GC为材料,研究了FSH激活的ERK1/2通路对GC增殖和分化的影响.结果显示:FSH快速诱导了ERK1/2的磷酸化,这种诱导作用具有时间依赖性,FSH作用0.33h时其磷酸化水平达到最高,用磷酸蛋白激酶A(PKA)的特异性抑制剂H89抑制PKA活性,显著降低了FSH和腺苷酸环化酶激活剂(forskolin)对ERK1/2的激活作用.以增殖细胞核抗原(PCNA)为GC增殖指标,以甾体生成快速调节蛋白(StAR)和甾体生成为GC分化指标,检测发现50 ng/mL的FSH以时间依赖方式诱导了PCNA蛋白的表达,FSH处理2h,PCNA蛋白水平达到最高;用UO126(ERK1/2的特异性抑制剂)阻断ERK1/2通路发现,FSH对PCNA和甾体生成的促进作用明显减弱;激光共聚焦检测结果进一步显示,与对照组相比,FSH组StAR信号明显增强,抑制ERK1/2活性显著降低了StAR的荧光强度.可见,FSH激活的ERK1/2通路促进了PCNA和甾体的生成,诱导了GC的增殖和分化.     

26种植物提取物抗烟草花叶病毒的活性

对福建省常见的26种植物的乙醇提取物体外抑制烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)的活性进行测定,发现抑制率达50%以上的有17种植物.依次用氯仿、正丁醇对这17种植物的乙醇提取物进行萃取,并分别测定各萃取物的抗病毒活性,结果表明,正丁醇萃取物的抗病毒活性最高,但去除其中鞣质后,其抗病毒活性明显降低.蟛蜞菊(Wedeliachinen sis)、大蒜(Alliumsativum)和决明(Cassiatora)3种植物的乙醇提取物对烟草叶片中的TMV增殖有明显的抑制作用.     

30个灵芝菌株的抗炎活性筛选评价

利用炎症细胞模型,对30个灵芝菌株进行抗炎活性评价,筛选获得抗炎活性良好的菌株。采用热回流提取法制备灵芝子实体的乙醇、水提取物,分别获得30个灵芝子实体的总三萜和总多糖,利用脂多糖(LPS)诱导RAW246.7细胞产生NO的炎症模型,以梯度灵芝提取物(0,12.5,25,50,100μg/mL)作用于细胞炎症模型,以gress法测定NO释放量,MTT比色法测定细胞活力,综合NO释放量和细胞活力,评估灵芝有效成分提取物的抗炎活性。结果表明,30个灵芝总三萜提取物对Raw264.7细胞活力有不同程度的抑制作用,25个灵芝总三萜提取物均具有较好的抑制NO生成的作用,抑制率>60%。30个灵芝总多糖提取物具有促进Raw264.7炎症模型生成NO的作用,不具有抗炎活性。筛选获得编号GL219、GL 167灵芝菌株的总三萜提取物在浓度为12.5μg/mL下,抗炎活性良好(NO抑制率>60%)且无细胞毒性。     

重组蛋白F3-Restin生物学活性的初步研究

目的：表达有生物学活性的新型融合蛋白F3-Restin,并纯化、鉴定,探讨F3-Restin融合肽的生物学活性。方法：在20℃、10h的条件下,IPTG诱导融合表达载体PET32a（＋）-F3-Restin原核表达、纯化,得到分子量约为40kD的高纯度的可溶性蛋白F3-Restin,检测与HUVEC的亲和活性,CAM试验检测抗血管活性。结果：重组蛋白F3-Restin具有特异结合血管内皮细胞的能力,并能抑制新血管的生成。结论：初步表明新型融合蛋白F3-Restin仍具特异结合血管内皮细胞,抑制新血管生长的能力。     

肉果秤锤树叶提取物的抑菌作用研究

[目的]探讨秤锤树叶的逐级提取物的抑菌作用。[方法]采用试管稀释法测定秤锤树叶的各级提取物一总浸液、正丁醇萃取液、乙酸乙酯提取液对各试验菌的最小抑菌浓度(MIC)。[结果]各级提取物对试验菌分别有不同程度的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最为明显;各提取物的抑菌强度依次为:乙酸乙酯萃取液(对4种实验菌均明显抑制:MIC≤31 mg/ml)、正丁醇萃取液(金黄色葡萄球菌:MIC≤62 mg/ml、其余3种菌的MIC相似:MIC≤125)、总浸液(仅对金黄色葡萄球菌抑制明显:MIC=125 mg/ml)。[结论]秤锤树叶的乙酸乙酯提取物具有广谱抗茵作用,其逐级提取物富集的抑茵活性逐级增强。     

药桑提取物对猪链球菌溶血素活性的影响

猪链球菌的致病力与其合成或分泌的各种毒力因子密切相关,其中猪链球菌溶血素(SLY)发挥着重要的作用,如脑膜炎等感染。因此筛选SLY抑制剂对于猪链球菌感染具有一定的意义。试验通过溶血试验和生长曲线测定等研究发现,较低浓度药桑提取物对猪链球菌生长几乎无影响,但可显著抑制猪链球菌溶血素介导的溶血活性。在猪链球菌与宿主细胞共培养体系内加入药桑提取物可明显抑制细菌穿透上皮细胞屏障及其介导的细胞毒性作用。结果表明:药桑提取物通过抑制SLY活性可体外降低猪链球菌毒力,是一种潜在的抗猪链球菌感染的先导复合物。     

黑莓籽油提取工艺及功能应用研究

采用超声辅助溶剂萃取法制备了黑莓籽油，并采用MTT法研究了该黑莓籽油对宫颈癌细胞(Hela)、肝癌细胞(HepG2)、乳腺癌细胞(MCF-7)、非小细胞肺癌细胞(A549)和人脐静脉表皮细胞(HUVEC)的抑制增殖活性。该制备方法易操作，试验中所需物品无毒，并发现黑莓籽油对上述4种癌细胞的IC₅₀值分别为176.99、172.18、206.50和413.94μg/mL，而对正常细胞(HUVEC)的IC₅₀值>500μg/mL，表明该黑莓籽油抑制Hela细胞、HepG2细胞、MCF-7细胞和A549细胞增殖活性的作用较强，且无毒，为抗癌药的开发提供了新思路，拓宽了在绿色植物中挖掘新油脂原料的来源；并且该黑莓种籽油突破了传统食用油的局限性，是一类具有优良前景的高级保健食用油。     

灰树花提取物的体内抗肿瘤及免疫活性研究

【目的】研究灰树花不同极性溶剂提取物在小鼠体内的抗肿瘤和机体免疫活性。【方法】按极性从低到高依次采用石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇加热回流提取灰树花子实体,获得石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、丙酮提取物和甲醇提取物。70只SPF级昆明小鼠(雌雄各半)分为7组,每组10只,分别标记为空白组、模型组、CTX阳性组及灰树花子实体石油醚、乙酸乙酯、丙酮及甲醇提取物组,小鼠接瘤后第2天开始给药,空白组不给药及生理盐水,模型组给予生理盐水,CTX阳性组隔天腹腔注射CTX 20mg/kg,石油醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇提取物组每天灌胃相应的灰树花子实体提取物,抑瘤10d。通过检测肿瘤抑制率,脏器指数,血清中影响因子干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平等指标及肿瘤切片观察,研究灰树花子实体不同极性溶剂提取物对Hep-A-22荷瘤小鼠体内抗肿瘤、免疫活性及抗氧化作用。同时,通过小鼠耳肿胀试验和腹腔巨噬细胞吞噬试验进一步探究灰树花子实体提取物的免疫活性作用。【结果】各给药组均具有抑制肿瘤生长作用,其中灰树花子实体甲醇提取物组抑瘤效果最佳(52.31%),与模型组相比有极显著性差异(P0.01),该组血清中IL-2、INF-γ和SOD含量极显著增加(P0.01),CAT含量显著增加(P0.05),并与抑制肿瘤具有相关性。通过HE染色和荧光染色后的肿瘤细胞观察,发现肿瘤细胞出现大面积坏死、消融等现象;各给药组对小鼠二甲苯耳肿胀均有抑制效果,其中甲醇组和乙酸乙酯组效果较好,与空白组差异性极显著(P0.01)。【结论】灰树花甲醇提取物和乙酸乙酯提取物具有良好的抑制肿瘤生长效果。甲醇提取物组能够显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性,从而提高机体免疫活性,并与其抗肿瘤作用具有相关性。