玉米细菌性枯萎病菌的保存

菌种的保存和使用,在日常的检验工作中有重要作用。特别是玉米细菌性枯萎病检验工作中植株的病原菌接种鉴定,用标准菌种做对照就更为重要。如何使该菌种保存的时间长而不丧失活力是非常重要的。1.不同的温度试验结果表明,以室温条件保存的菌种效果最好。1978年10月用橡皮塞保存两支菌种(1号,2号)在10—30℃的室温条件下,已经有5年零3个月的时间,转接后其长势非常旺盛。(10—30℃     

培养条件对西瓜枯萎病菌镰刀菌酸产生的影响

 尖孢镰刀菌西瓜专化型[Fusarium oxysporum Sch l.f.sp.niveum(E.F.Smith) Snyder et Hansen]菌株在4种培养基(理查德培养基,Armstrong镰刀菌培养基,MS无机盐+蔗糖培养基,PDB培养液)中均能产生镰刀菌酸(Fusaric acid),理查德培养基中镰刀菌酸最高时的浓度是其它3种培养基的6~22倍。理查德培养基以C/N为5:1,葡萄糖为C源,NO-3为N源的营养条件较有利于镰刀菌酸产生。培养基初始pH值为4,通气和连续光照的培养条件最有利于菌株产生镰刀菌酸,烟酸的加入可终止镰刀菌酸产生。各培养基中孢子浓度与镰刀菌酸浓度之间呈负相关的变化趋势,培养基的pH值呈趋中(pH6~8)变化,与镰刀菌酸产生无相关性。在理查德培养基中,菌丝生长与镰刀菌酸产生之间存在平行关系。     

西瓜枯萎病菌酶酯同工酶研究

 西瓜枯萎病(Fusarium oxysporum Schl.f.sp.niveum (E.F.Smith) Snyder&Hansen)在陕西关中日趋严重,连茬瓜田死苗率达80%以上。     

烟草赤星病菌菌种保存及致病性研究

在烟草赤星病抗性鉴定和生防菌剂筛选工作中,常因菌种在室内连续多代移植培养导致菌株的致病力衰弱,而影响测定结果的准确性和一致性。对此,本研究尝试将赤星病菌种经Richards培养液制备成菌层,置于4℃低温环境条件下长期保存,连续5年测定其培养性状和致病力,与连续转代培养方法保存的菌种进行比较,结果表明在连续5年的试验过程中,Richards法保存的菌种在培养性状和致病性上没有发生衰退,该菌种保存方法制作简单、经济、可靠,适用于烟草品种抗赤星病鉴定和生防菌剂的筛选工作。     

西瓜枯萎病菌侵染西瓜根茎部的组织病理学观察

为探明西瓜枯萎病菌侵染西瓜根系及茎的过程,本研究选取一株致病力较强的西瓜枯萎病菌FO1022,利用绿色荧光蛋白基因（GFP）标记该菌株,观察病原菌侵染西瓜根茎部的组织学过程。结果表明,用GFP标记的病菌接种感病西瓜品种‘苏蜜1号’,接种后2 d,显微观察显示病原菌的分生孢子附着于西瓜根系表皮细胞并萌发,沿细胞间层定殖生长;接种后5 d,在西瓜根部维管束导管中观察到大量菌丝和大型分生孢子,在根部表皮细胞上观察到大量厚垣孢子,在茎部部分维管束导管中也观察到少量的菌丝,此时48.6%的幼苗表现萎蔫症状;接种后9 d,茎部所有维管束导管都充斥着密集的菌丝体,此时91.7%的幼苗表现枯萎和死亡。与侵染感病品种相比,该菌株在侵染中抗品种和高抗品种时,在侵染时间上要明显滞后。本研究从组织病理学的角度观察并分析了GFP标记的西瓜枯萎病菌侵染西瓜根茎部的过程,为研究西瓜枯萎病菌的致病机理提供参考。     

农杆菌介导的西瓜枯萎病菌遗传转化

为获得带GFP标记的西瓜枯萎病菌转化株,用于后期观察病原菌侵染过程,采用农杆菌介导的方法,对西瓜枯萎病菌1号生理小种进行了遗传转化。结果表明:共培养时间为36h,枯萎病菌孢子和农杆菌AGL1比例为1∶1时该菌株的遗传转化效率最高,可以达到117.33个转化子/107个孢子。转化株的孢子、菌丝体及萌发的孢子均能发出稳定而强的绿色荧光。转化株的致病力检测显示其致病力与转化前的野生菌株致病力无明显差异。结果表明本研究获得的带GFP标记的西瓜枯萎病菌转化株可用于观察病菌在西瓜根系的侵染过程。     

西瓜枯萎病菌对西瓜种子发芽和幼苗生长发育的影响

分别采用滤纸法和浸胚根法测定了西瓜枯萎病菌对西瓜种子发芽和幼苗生长发育的影响。结果表明,枯萎病菌孢子悬浮液浓度为106～107个/ml时,种子的发芽势和发芽率均显著低于对照,并且对京欣1号品种和航兴1号品种种子发芽的影响大于黄小帅;枯萎病菌孢子悬浮液处理种子后,幼苗的茎长、子叶长度、子叶宽度、第3叶长度、第3叶宽度、百株鲜重等指标均有所降低,当浓度为106～107个/ml时,除百株鲜重和航兴1号品种幼苗的第3叶长度外,与对照相比,其他指标均显著降低。     

山东西瓜枯萎病菌致病性分化及品种抗性的初步研究

1989—1991年在自然病圃中观察了25个西瓜品种对西瓜枯萎病的抗病性。结果表明,国内只中8602F₁,是唯一保持高抗,中8601F₁,新澄1号和中育号等表现出中度抗性外,其他均属轻抗或感病;而来自国外的抗性品种显示出与原来一致的或更高的抗性。根据在国外鉴别寄主上的反应,致病性可分为2个不同的类型,类型Ⅰ占总分离物的74.4％,致病力中等;类型Ⅱ致病力较强,但仅分布于少数老瓜区。     

主要环境及营养因素对西瓜枯萎病菌生长的影响

采用菌丝生长速率法和产孢量测定研究了不同温度、光照、pH及碳氮源对来源于海南、河北和上海的3株西瓜枯萎病菌Fo-HN-46、Fo-HB-12和Fo-SH-1生长速率和产孢量的影响。结果表明:西瓜枯萎病菌菌株的适宜生长温度为20~30℃,Fo-HN-46最适生长温度为28℃,Fo-HB-12和Fo-SH-1最适生长温度为25℃,产孢的最适温度为28~30℃;光照对西瓜枯萎病菌生长速率无显著影响,对产孢影响显著,Fo-HN-46在黑暗条件下单位面积产孢量最高,Fo-HB-12和Fo-SH-1在半光照条件下产孢量最高;pH对西瓜枯萎病菌菌株的生长速率和产孢量有显著影响,pH 7~9时菌丝生长速率快,pH 8~11时产孢量高;葡萄糖、淀粉和乳糖作为碳源能够显著增加西瓜枯萎病菌的产孢量;蛋白胨作为氮源能显著促进菌丝生长,硝酸钠、酵母粉和蛋白胨均能显著增加西瓜枯萎病菌的产孢量。用最适碳源、氮源培养,Fo-HN-46生长速率大于Fo-HB-12和Fo-SH-1。Fo-SH-1产孢量高于Fo-HN-46和Fo-HB-12。     

芥菜乙醇提取物对西瓜枯萎病菌的抑菌机制

为探究芥菜乙醇提取物对植物病原菌的抑制机理,以西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp. niveum为指示菌,以最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)0.5 g/mL为基准,设置0、0.25、0.5和1.0 g/mL共4种处理浓度,通过测定菌丝形态结构、菌液电导率、菌体丙二醛含量、细胞壁相关水解酶活性、呼吸代谢途径酶活性、可溶性蛋白含量及还原糖含量等指标的变化分析其抑菌机理。结果显示,1.0 g/mL芥菜乙醇提取物对西瓜枯萎病菌的处理效果最好,其中,处理后病菌菌液的电导率明显增大,最大可达1.45 ms/cm,是对照组的1.57倍;丙二醛含量达3.16 mmol/g,为对照组的2.24倍;几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性最高,分别为10.57 U/g和14.16 U/g,较对照组分别显著升高了48.04%和17.80%,同时细胞壁降解,使细胞完整性受损;琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性最低,分别为7.33 U/mg和0.28 U/mg,较对照组分别显著下降了73.02%和47.17%;可溶性蛋白和还原糖的含量显著降低,分别为0.44 mg/g和5.34 mg/g,较对照组分别下降了60.71%和56.30%,呼吸能量代谢受阻,抑制菌体生长。表明芥菜乙醇提取物可有效防治西瓜枯萎病。     

农抗120防治西瓜枯萎病菌的室内药效实验

实验室内观察农抗120(500ppm)不能完全抑制西瓜枯萎病菌孢子萌发,但萌发的菌丝出现变形现象(菌体原生质凝集,内含物清晰可见),直接抑病效果比双效灵(2000ppm)差(25℃培养7天抑菌半径差8毫米),但两者都能使西瓜枯萎病菌变形生长。农抗120(100ppm)对土壤中的西瓜枯萎病菌的抑制作用比双效灵(500ppm)强。其预防作用大于治疗作用。     

西瓜枯萎病菌镰刀菌酸对西瓜苗作用机制的初步探讨

 镰刀菌酸是由镰刀菌属中那些能引起多种植物萎蔫的病原菌所产生的一种非特异性毒素,从发现至今已有60多年了,但关于它在病程中作用问题的研究还不多,而且意见也不一致。     

西瓜枯萎病菌遗传多样性的相关序列扩增多态性分析

对30个西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.niveum菌株基因组DNA进行相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记分析,以探究其遗传多样性与地理来源的关系。采用尖孢镰刀菌西瓜专化型Fusarium oxysporumf.sp.niveum0、1、2号生理小种的基因组DNA为模板,对225对SRAP引物进行筛选,筛选出20对多态性、重复性较好且条带清晰的引物,对30个菌株进行PCR扩增,共扩增出386条带,其中多态性条带有371条,多态性比率为96.11%,平均每对引物扩增出19.3个位点和18.55个多态性位点。UPGMA法聚类分析结果显示,供试菌株两两之间的遗传相似系数范围为0.69~0.90,平均为0.79,说明尖孢镰刀菌西瓜专化型的遗传多样性较为丰富。基于SRAP标记聚类分析表明,30个菌株在遗传相似系数为0.70处被划分为3个类群,I类群包含24个菌株,其中18个来自湖南省,Ⅱ类群只包含1个来自黑龙江省哈尔滨市的菌株,它和另一个来自黑龙江地区的菌株被划分到不同的类群,且遗传距离相对较远;Ⅲ类群包含了5个菌株,其中3个来自海南三亚,其余两个来自湖南省。根据菌株的分布情况来看,菌株的聚集与地理来源没有明显的相关性。     

真菌菌种的简易邮寄法

莠去津对冬小麦生长的影响袁会珠，王立东（中国北京农科院植保所１０００９４）（北京农业大学）莠去津（阿特拉津）是我国玉米田除草剂的主要品种。我国华北地区普遍实行冬小麦～夏玉米一年两熟种植制度，莠去津在玉米田使用不当会影响后茬小麦的生长。本文研究了莠去津...     

真菌菌种的简易邮寄法

真菌菌种的简易邮寄法李明远（北京市农林科学院植保环保所１０００８１）真菌菌种一般是通过试管斜面邮寄，寄时必需按一定规格包装，操作费事，寄费也较高。笔者新近试用消毒塑料袋邮寄，十分经济而方便，其操作方法：１消毒塑料袋的准备　取厚度为０．５～０．６ｍｍ的...     

实时荧光定量PCR检测土壤西瓜枯萎病菌体系的建立

正西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)引起的一种土传维管束病害,在各个时期均可发生,对西瓜产业构成严重威胁。该病具有传播途径多样、暴发快速、应急防治难等特点,因此及时准确监控土壤中的病原菌是防治西瓜枯萎病的关键。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)技术能进行定量     

采用西瓜汁蔗糖琼脂培养基有效筛选西瓜枯萎病菌拮抗细菌

 在从摩洛哥引进的脐血橙田间植株的新梢嫩叶上观察到褪绿环斑和污斑,褪绿斑驳,叶背有边缘凹刻的圆形或近圆形环,以及脉明和叶脉环阻等症状。通过向Madam Vinous甜橙、邓肯葡萄柚等柑桔类指示植物的嫁接接种;用钝刀醮取汁液切割指示植物墨西哥来檬和埃特洛香的茎部进行机械传播;以及汁液磨擦接种草本指示植物昆诺藜等方法,鉴定到柑桔环斑病毒(citrus ringspot virus,CRSV)。嫁接接种的柑桔类指示植物上的症状包括新梢休克、新叶脱落,新叶表现褪绿环斑和污斑以及斑驳,脉明和叶脉环阻等;机械接种的柑桔类指示植物表现新叶的褪绿环斑症状;昆诺藜在接种后4~6d于接种叶上产生褪绿至坏死的局部枯斑,但无系统感染的症状出现。取表现症状的柑桔类指示植物和昆诺藜的叶片作接种源,汁液磨擦接种回接至昆诺藜,再现了同样的症状。     

小麦白粉病菌无性世代菌种保存方法的进一步研究

将小麦白粉菌(Erysiphe graminis f.sp.tritici)的分生孢子接种在含有50ppm 的苯并咪唑琼脂培养基培养的试管幼苗上,放在1～5℃,不加光照的冰箱中保存,通常可以保存150天左右,最高保存时间达180天。随着保存温度的提高,保存时间相应缩短。增加培养基中苯并咪唑的浓度,保存时间略有增加。培养基灭菌与否,与保存时间的长短关系不大,但种子表面消毒处理的比不消毒处理的保存时间显著延长。砂培试管幼苗、土培试管幼苗,在同样条件下,保存时间仅30天左右。在100ppm 苯并咪唑、琼脂培养基中,加入营养液,并不能使保存时间延长。     

万寿菊根提取物对西瓜枯萎病菌的抑菌活性成分及作用机理研究

本文研究了万寿菊根提取物中西瓜枯萎病菌的抑菌活性成分及其抑菌作用机理。结果表明,在4类主要化学物质中,精油类含量最高(59.8%),且抑菌效果最佳;10mg/mL精油提取物的抑制率在24、36和48h分别为62.83%,58.31%和56.30%。在西瓜枯萎病的3个主要发病期(苗期、伸蔓开花期和座果期)施用精油提取液,能有效抑制西瓜枯萎病菌,促进植株生长,同时提高西瓜植株的POD和SOD酶活性,并维持CAT活性,有效减轻了西瓜枯萎病菌对植株的毒害作用。