大豆胰蛋白酶抑制因子(STI)的研究进展

大豆胰蛋白酶抑制因子（STI）是大豆中的主要抗营养因子之一。据报道,STI能引起各种动物生长抑制作用如引起老鼠、小鸡的胰腺肿大和增生．还导致仔猪对日粮能量和氮的利用率降低,刺激胰脏蛋白酶和糜胰蛋白酶的合成,增加体液因子（如胆囊激素）的形成和释放。因此,钝化大豆胰蛋白酶抑制因子对改善和提高大豆食品与饲料的营养价值和食用安全有重要意义。     

大豆胰蛋白酶抑制因子的危害及其检测研究进展

大豆胰蛋白酶抑制因子是大豆中一类主要的抗营养因子,其主要危害表现在致使胰腺增生、肿大以及抑制动物生长等方面。近年来,针对大豆胰蛋白酶抑制因子的检测方法已成为研究热点。文章通过对大豆胰蛋白酶抑制因子的危害和现有的检测方法进行综述,旨在为大豆及其制品中胰蛋白酶抑制因子的监控以及建立大豆胰蛋白酶抑制因子快速、高效的检测方法提供参考。     

大豆胰蛋白酶抑制因子检测方法的研究

1脲酶检测法生大豆中含有不等量的脲酶,脲酶本身无营养意义,但它与胰蛋白酶抑制因子含量相近,变性失活的程度也与胰蛋白酶抑制因子相似,故可用脲酶活性作为大豆加工适宜程度的检测指标。脲酶的测定方法比较简单,其原理是生豆粕中的脲酶使试剂中的尿素释放氨气,从而使溶液的pH值     

大豆胰蛋白酶抑制因子（TIs）及其钝化

大豆胰蛋白酶抑制因子（ＴＩｓ）及其钝化河南洛阳市农牧局王向阳南京农业大学动科系吴迪，陆治年大豆饼粕是畜禽最重要的蛋白质饲料资源，但是其营养价值受许多抗营养因子的影响。例如：胰蛋白酶抑制因子（ＴｒｙｐｓｉｎＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓ——简ＴＩｓ）、低聚糖、植...     

大豆胰蛋白酶抑制因子酶联免疫吸附测定方法的研究

本研究以纯化的大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子（KTI）为抗原，对兔子进行35天免疫得到了兔抗KTI血清。分别用辣根过氧化物酶（HRP）标记纯化的抗原与抗体，制备了标记适度的酶标抗原与酶标抗体。建立了3种检测KTI含量的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，即酶标抗原竞争、酶标抗体直接抑制和问接抑制法。结果表明，抑制率在20％～70％范围之内，3种方法得到的标准曲线均呈现良好的线性关系（r＞0．96），且检测下限均低于20ng／ml。根据得到的标准曲线，用酶标抗原竞争ELISA法测定了不同温度热处理的KTI中剩余活性部分的含量。结果表明，ELISA法与酶化学分析法的测定结果高度相关（r＝0．99），同时样品添加的回收率试验误差小于10％。酶标抗原竞争法还被用来测定了不同温度热处理的大豆和熟豆粕、全价饲料等几种大豆产品中KTI的含量。以上结果说明，用ELISA法检测生大豆和不同热加工形式的大豆产品中的剩余KTI含量是可行的。     

挤压膨化对全脂大豆中的胰蛋白酶抑制因子和凝集素的影响

长期或短期喂给畜禽生大豆产生不利影响,归于大豆中的主要抗营养因子蛋白酶抑制因子和凝集素所致（Ｌｉｅｎｅｒ,１９８９）。蛋白酶抑制因子包括Ｋｕｎｉｔｚ胰蛋白酶抑制因子和ＢｏｗｍａｎＢｉｒｋ糜蛋白酶抑制因子,前者仅抑制胰蛋白酶的活性,后者既抑制胰蛋白酶又...     

大豆胰蛋白酶抑制因子对獭兔胰腺组织学结构的影响

选择(42±4)日龄、平均体重为(711.4±108.8)g的健康美系獭兔断奶幼兔30只,公母比例为1∶1,根据性别、体重,将30只兔随机分为3组,每组10只,公母各半,单笼饲养。3个组日粮为等能等蛋白质设计,日粮中分别含有25%生大豆、25%化学钝化大豆、25%豆粕。胰蛋白酶抑制因子含量(实测值)分别为6.55、1.99和0.81 mg/g。试验6周后,从每一个组中随机选出3只公兔进行屠宰((91±4)日龄、平均体重为1544.2 g±114.8 g),宰前空腹4~6 h,取胰腺样品在10%中性甲醛液中固定,常规石蜡切片,HE染色,用于光学显微镜组织学观察。电子显微镜观察样品用2.5%戊二醛固定,常规树脂包埋,超薄切片,铀—铅染色。光学显微镜对胰腺组织结构观察结果表明,25%生大豆组幼兔胰腺间纤维性结缔组织增生,叶间水肿,局部腺组织消失,细胞水肿,边界模糊。电子显微镜对胰腺细胞观察结果表明,生大豆组幼兔的胰腺细胞核不规则,线粒体水肿,嵴消失,局部膜破裂,内质网减少,分泌颗粒极少或消失。25%生大豆组獭兔胰腺组织结构发生异常变化,而豆粕组和化学钝化大豆组正常。     

大豆胰蛋白酶抑制因子对力克斯兔消化酶活性的影响

选择42±4日龄、平均体重为711.4±108.8 g健康美系力克斯断奶幼兔50只,公母比例为1∶1,根据性别、体重将50只兔随机分为5组,每组10只,5只公兔,5只母兔,单笼饲养。预试期1周。5个组日粮为等能等蛋白设计,日粮中分别含有25%生大豆、25%化学钝化大豆、25%热处理大豆、25%豆粕和13%生大豆+12%豆粕。胰蛋白酶抑制因子含量(实测值)分别为6.55、1.99、1.73、0.81和3.97 m g/g。试验6周末,从每1个组中随机选出3只公兔进行屠宰(91±4日龄,平均体重为1544.2±114.8 g),用于测消化酶活性的胰腺样和十二指肠内容物在液氮中速冻,然后转移至-20℃低温冰箱中保存。结果表明:家兔采食25%生大豆后,胰腺和十二指肠内容物胰蛋白酶活性被显著抑制(P<0.05),胰腺中脂肪酶活性降低,但未达显著水平(P>0.05)。胰腺和十二指肠淀粉酶活性,各组间无显著差异。     

维生素C对大豆胰蛋白酶抑制因子诱导氧化应激的干预

旨在研究不同剂量的维生素C(Vc)对大豆胰蛋白酶抑制因子(STI)诱导的小鼠胰腺氧化应激的干预作用。试验分为4个处理组,每组12只清洁级雄性小鼠,第1组为正常对照组,饲喂基础日粮;第2组为模型组(STI组),饲喂添加STI的日粮;第3组为Vc1组,饲喂添加STI和低剂量Vc的日粮;第4组为Vc2组,饲喂添加STI和高剂量Vc的日粮。3周后处死小鼠,测定其氧化及抗氧化指标的变化。试验结果所示,STI组胰腺和血清中的MDA含量与对照组相比显著升高(P0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)等酶活性与对照组相比显著降低(P0.05)。低剂量Vc组胰腺和血清中的MDA含量与STI组相比显著降低(P0.05),CAT、T-SOD等活性与STI组相比显著升高(P0.05)。高剂量Vc组胰腺和血清中MDA含量与低剂量组相比显著升高(P0.05),CAT、T-SOD等活性与低剂量组相比显著降低(P0.05)。本研究表明,适当剂量的Vc可以降低STI诱导的小鼠胰腺氧化应激程度,起到抗氧化作用,但其抗氧化能力与添加剂量密切相关,过量摄入Vc反而会促进氧化。     

大豆胰蛋白酶抑制因子对小鼠胰腺氧自由基水平的影响

为研究大豆胰蛋白酶抑制因子对小鼠胰腺氧自由基水平的影响,试验选用36只昆明种雄性小鼠,按体质量随机分为3组。第一组为对照纽,饲喂基础日粮;第二组为试验组,饲喂含有大豆胰蛋白酶抑制因子的基础日粮,第三组为抗氧化剂组,饲喂舍大豆胰蛋白酶抑制因子＋维生素C的日粮。试验期3周,空腹屠宰,眼球采血制备血清,迅速取出胰腺进行氧化和抗氧化指标检测。结果表明,大豆胰蛋白酶抑制因子能显著增加氧自由基水平。与对照组比较,试验组小鼠血清和胰腺的MDA（malondialdehyde,MDA）含量分别显著地增加了98．17％,185．58％,抗超氧阴离子自由基和抑制羟自由基能力被显著降低,TAOC、S013（superoxidedismutase）、CAT和GSH—Px活性被显著减少（P〈0．05）。添加维生素C后,氧化应激被减轻,但氧化指标仍高于对照组。上述结果表明,大豆胰蛋白酶抑制因子能够导致氧化和抗氧化不平衡,从而使其处于氧化应激状态。     

大豆胰蛋白酶抑制剂及其钝化技术的研究进展

大豆是重要的蛋白质资源之一,但其舍有大量的抗营养因子阻碍机体的消化,尤其是胰蛋白酶抑制剂能抑制生长、造成胰腺肥大.本文综述了大豆胰蛋白酶抑制剂的分类及其特性、作用机理、测定和处理方法.     

黑龙江省主要大豆品种中胰蛋酶抑制因子含量研究

大豆含有妨碍营养物质消化、吸收和利用的抗营养因子 ,会导致动物胰腺肿大、生长受阻及氮利用率降低 (Ｌｉｅｎｅｒ等 ,1 980 ) ,其中危害最大的是胰蛋白酶抑制因子。因此降低大豆中胰蛋白酶抑制因子含量是提高大豆营养价值的重要途径。美国培育出的低胰蛋白酶抑制因子大豆中胰蛋白酶抑制因子含量仅为 9 9ｍｇ/ｇ (Ｈｅｒｋｅｌｍａｎ等 ,1 992 )。我国关于大豆中胰蛋白酶抑制因子含量的研究材料很少 ,仅傅翠真等 ( 1 992 )对我国部分大豆中胰蛋白酶抑制因子含量进行了分析。黑龙江省是我国的主要大豆产地 ,因此本研究针对黑龙江省大豆种植…     

米曲霉中性蛋白酶钝化大豆胰蛋白酶抑制剂

为了消除大豆饼粕中胰蛋白酶抑制剂的抗营养作用,提高大豆蛋白的利用效率,本文主要从中性蛋白酶加重、酶解温度、Na2SO3加量、不同金属离子和酶解时间等方面考察了米曲霉ZW-06所产中性蛋白酶对豆粕中胰蛋白酶抑制剂的钝化作用.研究结果表明,在豆粕中添加1∶500(质量比)的蛋白酶就能钝化豆粕中40%的胰蛋白酶抑制剂.温度对蛋白酶钝化胰蛋白酶抑制荆的影响很小,金属离子的加入普遍抑制蛋白酶对胰蛋白酶抑制荆的降解,酶解时间在30 min就能达到最大抑制效果.     

Kunitz型胰蛋白酶抑制剂缺失大豆新品系培育及其饲草价值分析

大豆作为饲料蛋白质的重要来源,既含有丰富的营养成分,也有影响蛋白质消化吸收的胰蛋白酶抑制剂等抗营养因子。本研究以合丰50为母本,中黄16为父本,通过常规杂交育种及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子辅助育种技术,经过多年选育,获得适合黑龙江省栽培的Kunitz型胰蛋白酶抑制剂缺失稳定遗传的大豆新品系“HZ8009”。该品系生育期120 d,植株高大茎叶繁茂,无限结荚习性,籽粒蛋白质含量42%,脂肪含量20%。利用饲草质量检测技术对高代品系“HZ7009”植株饲草营养价值分析表明,与牡丹江秣食豆相比,“HZ7009”干草产量高21.39%,干物质中粗蛋白质含量高3.92%,且最佳刈割时期为花期至结荚期。大豆新品系“HZ8009”具有高蛋白、高生物量的特性,可作饲草资源品种加以广泛利用。     

豆粕中胰蛋白酶抑制剂间接竞争酶联免疫吸附检测方法的研究

研究以胰蛋白酶抑制剂(TI)的多克隆抗体为核心试剂,建立间接竞争ELISA检测方法,检测饲料及豆制品中TI的含量。建立的标准曲线方程为:y=16.18x+57.183,R2=0.9986,IC50为0.36μg/ml,最低检出限IC15为2ng/ml。选择0.05M、pH值8.2Tris-HCl缓冲液为样品浸提液,以0.8、1.6、2.4μg/ml的浓度添加到豆粕中时,其回收率为93.7%～104.9%,变异系数为2.8%～5.1%。本研究成功建立了检测TI的间接竞争ELISA方法,可以代替酶化学方法来检测TI,从而解决了酶化学方法检测发酵豆粕过程中因出现白色絮状物而不能检测TI这一问题。     

Effect of addition of soybean trypsin inhibitor to colostrum on immunological status in goat kids

The aim of the study was to evaluate the influence of soybean trypsin inhibitor (TI) on immunoglobulin G (IgG) serum levels and growth in neonatal goat kids. Twenty‐four newborn kids were fed with natural colostrum (group A), and 24 kids received the same colostrum with 1 g of TI per litre (group B). Blood samples were obtained at birth and on days 1, 2 and 4 of life to analyze serum proteins, IgG and haematological parameters. There were no clinical signs of disease and no significant differences in body weight between the groups. Haematological parameters were not affected by treatment. The peak of serum IgG was reached at 24 h of life, but no effects of soybean TI was observed on serum IgG levels. The apparent efficiency of absorption of IgG was similar in both groups (group A 24.5% vs. group B 25.2%, p > 0.05). The addition of TI to colostrum did not change the concentration of serum proteins and their fractions in goat kids. The correlation between serum IgG and γ‐globulin was positive and significant (p < 0.01, r = 0.64) in group A, but not in group B (p > 0.05, r = 0.08), suggesting a negative influence of soybean TI on γ‐globulin absorption. These results show that addition of soybean TI to colostrum did not improve the performance or immunological status in goat kids.