犬瘟热病毒在不同组织细胞上增殖特性的研究

将犬瘟热病毒(CDV)分别接种于长满单层的鸡胚成纤维细胞(CEF)、非洲绿猴肾细胞系(Ve-ro)、犬肾细胞系(MDCK),观察其病变时间、病变特征,并对其进行RT-PCR鉴定和TCID50测定。结果表明,CDV在这3种细胞上均能增殖,并产生明显的细胞病变(CPE),但在Vero细胞上产生病变的时间短,病变明显,且TCID50最高;RT-PCR检测CDV在不同细胞上的病毒培养液,均能扩增出337bp的片段;CDV在Vero细胞上的增殖滴度明显高于在CEF、MDCK细胞上的增殖滴度。表明本试验所选用的3种细胞中,Vero细胞最适宜培养CDV,所获得的CDV的毒价最高,病变最明显。     

新城疫病毒在鸡胚中增殖特性的研究

本研究将接种到9～10日龄鸡胚中的鸡新城疫病毒(NDV)La Sota或V4株弱毒培养24h,病毒滴度可增加106以上,培养108 h,病毒滴度则增加至10 10倍以上.NDV在有NDV母源抗体的普通鸡胚与无抗体的SPF鸡胚中的增殖无显著差异;盲传对于检验NDV没有意义.La Sota或V4株病毒悬液在理论上稀释至每胚接种量只有数个或1个病毒时,仍可引起鸡胚感染.低毒量条件下固定病毒的数量,随着接种胚数的增加,感染率随之下降,但感染数在一定范围内波动,没有减少趋势.以上结果证实数个甚至1个活的NDV粒子即可引起鸡胚感染,这对现地检测NDV具有重要意义.     

鸽新城疫病毒在鸡胚上的增殖动态

采用红细胞凝集试验（HA），通过对鸽新城疫病毒（NDV）在鸡胚上增殖动态的研究表明，ND－gs01病毒经尿囊腔接种9－10日龄鸡胚、24h内病毒处于“掩蔽期”，24h后开始增殖，72h左右鸡胚死亡。新城疫病毒在尿囊膜、羊膜、尿囊液、羊水中含量较高，增殖动态趋于一致。卵黄、胚体中含量较低。上述结果，为该病毒的进一步研究和应用提供了科学依据。     

新城疫病毒在鸡胚不同组织增殖的研究

不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、Ｌａ Ｓｏｔａ和分离株Ｘ以１：１００００稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚,每胚０．２ｍｌ,结果发现,Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力较强,可在５０小时左右致死鸡胚,Ｌａ Ｓｏｔａ和Ｎ－７９较弱,Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉,肝脏,脑和尿囊液均有大量病毒存在,而Ｎ－７９和Ｌａ Ｓｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。     

新城疫病毒在鸡胚不同组织增殖的研究

不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、ＬａＳｏｔａ和分离株Ｘ以１∶１００００稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚,每胚０．２ｍｌ,结果发现,Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力较强,可在５０小时左右致死鸡胚,ＬａＳｏｔａ和Ｎ－７９较弱。Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉、肝脏、脑和尿囊液均有大量病毒存在,而Ｎ－７９和ＬａＳｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。     

新城疫病毒的分子生物学及应用研究进展

新城疫是当今全球范围内最严重的家禽传染病,特别是对养鸡业可造成重大经济损失。新城疫病毒是一种负链RNA病毒,含有六个主要蛋白,按顺序3′-NP-P-M-F-HN-L-5′排列,其中最主要的糖蛋白是F和HN蛋白,这两个蛋白不仅与病毒的毒力和致病性有关,也是诱导产生保护性抗体的蛋白。许多分子生物学技术已经应用于新城疫的诊断。利用分子生物技术也研究出了很多基因工程疫苗比如基因工程活载体疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等。近年来反向遗传操作技术的发展,新城疫病毒已经被开发成病毒载体,可以携带外源基因研制新城疫病毒活载体疫苗,表达IBDV和IBV的新城疫活载体疫苗已经研制。     

不同动物源新城疫病毒感染不同种属细胞的病变观察

用10株不同动物源的新城疫病毒F48E8,La Sota、La Sota-GFP、ZJ1、ZJ1-GFP、JS-4-05-Go、Gx-1-05-Ch,JS-1-07-Os、Js-1-07-Du、JS-1-07-Pi等毒株分剐感染鸡胚、鹅胚、鸭胚成纤维细胞、PK-15、Dulac、FK81、MDCK、Vero、Hela多种不同动物来源的传代细胞系,通过对病毒感染细胞后病变的观察、ZJ-GFP及La Sota-GFP两个病毒感染细胞后细胞中绿色荧光蛋白指示的病变,了解不同的毒株对不同细胞感染性的差别.结果表明,不同毒力、不同动物源的新城疫病毒致不同种属细胞病变的作用不同,产生病变的时间有差异,强毒F48E8等毒株感染细胞后48～72 h可以引起几种禽源成纤维细胞全部裂解,而哺乳动物来源的细胞在60～120 h细胞发生病变,且病变也不如禽源成纤维细胞严重,出现了细胞的圆缩.弱毒株在胰酶处理后感染细胞,72 h以后出现明显细胞病变,引起的哺乳动物细胞病变不明显.受试毒株的动物种属来源与细胞的致病性没有明显相关性.     

鸡新城疫活疫苗种毒HB1株和F株保存期试验

对不同保存年代的鸡新城疫活疫苗种毒HB1株（Ⅱ系）和F株（Ⅲ系）各3批进行了病毒含量测定和免疫原性试验。3批不同保存年代的鸡新城疫病毒HB1株和F株病毒含量均≥108.4EID50/0.1 mL,最小免疫量均≤2500 EID50。结果表明,鸡新城疫病毒HB1株和F株毒种在-70℃分别保存16年和19年,病毒含量和免疫原性仍符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》（二〇〇〇年版）规定。     

抗传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的特性研究

应用杂交瘤技术获得了１３ 株抗传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ） 的单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） ,经过检测其中有９ 株ＭｃＡｂｓ 为ＩｇＧ 类, ４ 株为Ｉｇ Ｍ , 这些ＭｃＡｂｓ 与新城疫病毒（ＮＤＶ） 、传染性支气管炎病毒 （ＩＢＶ） 和马立克氏病病毒（ ＭＤＶ） 均无交叉反应, 病毒中和试验表明, 有５株ＭｃＡｂｓ 具有中和活性,Ｗｅｓｔｅｒｎ － ｂｌｏｔｔｉｎｇ 试验表明, 这５ 株有中和活性的ＭｃＡｂｓ 识别的抗原位点在ＶＰ２ 。传染性法氏囊病最早于１９５７ 年发现于美国东部特拉华州的甘博罗（Ｇｕ ｍ ｂｏｒｏ） 地区,１９６２ 年由Ｃｏｓｇｒｏｖｅ 首次报道, 此后该病相继在全世界许多国家和地区广泛流行。本试验对通过淋巴细胞杂交瘤获得的１３ 株单克隆抗体进行了生物学特性鉴定, 以期应用于对ＩＢＤ 的研究, 现将试验情况报告如下。     

杀毒霸对禽流感病毒、新城疫病毒的杀灭作用

采用悬浮杀灭试验，以鸡胚鸡染法，研究杀毒霸在1：3000、1：4500、1：6000、1：7500的系列浓度下，与禽流感病毒、新城疫病毒分别作用5、10分钟，对AIV、NDV的杀灭作用。1：3000、1：4500、1：600、1：7500的杀毒霸与AIV作用5分钟，其杀灭率为；100％、100％、99．99％、99．97％；1：3000、1：4500、1：6000、1：7500的杀毒霸与NDV作用5分钟，其杀灭率为：100％、99．99％、99．995％、9．9％；以上浓度的杀毒霸与AIV作用10分钟，其杀灭率为：100％、99．99％、99．98％、99．994％、99．997％。     

家兔病毒性出血症病毒(RHDV)的研究进展

兔病毒性出血症(RHD)是一种导致家兔急性、烈性、高度致死性的传染病,发病率和死亡率较高,是严重威胁家兔产业发展的传染病之一。本文综述RHDV的病原学、检测方法、遗传变异等方面的研究进展,同时对RHDV未来研究方面做一展望,旨在为深入研究RHDV提供一定参考和信息。     

徐州地区9株新城疫病毒的分离鉴定

为了解徐州地区鸡新城疫流行现状及防治效果,采集该地区鸡新城疫疑似病料,通过血凝试验和血凝抑制试验,对病料进行病毒分离与鉴定,为鸡新城疫病防治提供参考。结果表明,疑似病料经分离培养、血凝试验和血凝抑制试验,获9株鸡新城疫病毒;1日龄雏鸡脑内接种致病指数表明．其中6株病毒为强毒株（SN03—2012、SN12—2012、SN05—2012、SN012012、LB05—2012、SN04—2010）。     

赤羽病病毒的纯化及其单克隆抗体的制备

将人工繁殖、纯化的赤羽病病毒作为免疫原,通过常规杂交瘤技术,制备亲和性强、特异性好的小鼠抗赤羽病病毒单克隆抗体,并进行相应的纯化和标记工作。以澳大利亚进口的试剂盒进行验证,结果证明:进口单抗与我们制备的AAK纯品及AAK-HRP显示同样结果;且质控结果表明,AAK纯品及其衍生物AAK-HRP的特异性和亲和性均基本满足进行封闭ELISA检测方法的要求,为制备国产化ELISA试剂盒提供了基础。     

抗传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

应用杂交瘤技术获得了１３株抗传染性法氏囊病病毒的单克隆抗体,其中有９株ＭｃＡｂｓ为ＩｇＧ类,４株为ＩｇＭ类,这些ＭｃＡｂｓ与新城疫病毒,传染性支气管炎病毒和马立克氏病病均无交驻反应病毒中和试验表明,有５株ＭｃＡｂｓ具有中和活性,Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｉｏｔｔｉｎｇ试验表明,这５株有中和性的ＭｃＡｂｓ识别的抗原位在ＶＰ２上。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究

ＩＢＶ毒株Ｈ１２０、Ｈ５２、ＭＡ５对ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ的干扰实验证明ＩＢＶ特异性干扰ＮＤＶ增殖。１）采取不同顺序的同胚接种法：ＩＢＶ接种之后再接种ＮＤＶ;或ＮＤＶ接种之后再接种ＩＢＶ,及ＩＢＶ,ＮＤＶ同时接种,ＩＢＶ均干扰ＮＤＶ的增殖。２）ＮＤＶ接种３６小时之内,干扰现象最为明显,Ｈ１２０,Ｈ５２的干扰能力稍强于ＭＡ５。３）ＮＤＶ血清中和实验结果显示,不同顺序同胚接种ＮＤＶ、ＩＢＶ时,ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ不影响ＩＢＶ的增殖能力。同胚增殖ＩＢＶ,ＮＤＶ的关键是控制ＮＤＶ、ＩＢＶ的接毒量及选择合适的收毒时间。     

甘草酸二钾抗鸡传染性法氏囊病毒机制初步研究

建立体外CEF培养模型,分为空白细胞对照组、甘草酸二钾（DG）组（药物组）、IBDV组（阴性对照组）和利巴韦林组（阳性药物对照组）,利用间接免疫荧光技术和荧光定量PCR技术以及蛋白质免疫印迹技术检测DG对IBDV VP1基因和蛋白表达的影响.结果表明,在IBDV复制过程的分子机制中,DG对IBDV VP1基因、蛋白表达有显的抑制作用,是DG发挥抗IBDV功效的主要机制之一.     

新城疫血凝抑制浓缩抗原的研制与应用

采用甲醛对新城疫LaSota株病毒进行灭活,利用蔗糖透析法进行浓缩,抗原效价由浓缩前的log26上升至浓缩后的log210,在浓缩液中加入25％的丙三醇制成了新城疫血凝抑制抗原.同时对加入稳定剂——丙三醇的自制抗原进行了定质研究.结果表明：加丙三醇自制抗原,温度越低时稳定性越好、保存期最长.将自制抗原、标准抗原与标准血清、待检血清进行血凝抑制试验对比,表明自制抗原准确性、重复性较好,可用于临床监测.