中性蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备花生短肽的研究

【目的】为了充分利用花生榨油之后的副产物,提高产品附加值,建立花生短肽制备工艺,研发功能性花生短肽产品。【方法】通过比较酶种类、底物浓度、酶解温度、酶解时间对水解度与短肽得率的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶解制备花生短肽的最佳工艺。【结果】中性蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备短肽的最佳工艺参数为：Neutrase水解花生分离蛋白2.04 h后加入Protamex继续酶解1.96 h,Neutrase添加量为5 200 U•g-1底物,Protamex添加量为422.32 U•g-1 底物,水解温度44.83℃,底物浓度8%,在此条件下,短肽得率为83.93%,水解度为38.25%,花生短肽纯度为93.85%±0.44%。经高效液相色谱测定,分子量小于1 000 D的水解产物占98.88%。【结论】采用Neutrase与Protamex分步酶解花生分离蛋白制备花生短肽,与现有碱性蛋白酶酶解制备花生短肽方法相比,避免了后续脱盐步骤,简化了工艺,且具有制备条件温和,DH和TCA-NSI高,纯度高,分子量集中分布于1 000 D以下等特点。     

鲢鱼蛋白质酶水解最佳工艺条件的研究

以酸法提取的鲢鱼蛋白为原料,采用复合蛋白酶进行酶解,研究了底物浓度、酶解时间、酶解温度及反应pH对蛋白酶水解鲢鱼蛋白的影响,通过正交试验确定最佳酶解条件优化水解工艺。结果表明:复合蛋白酶水解鲢鱼蛋白的最适条件为:底物浓度2%,温度55℃,pH值7.5,酶解时间55 min,优化后的水解液蛋白质回收率约为50.88%。     

花生蛋白酶解特性研究

采用中性蛋白酶对花生蛋白进行酶解,利用单因素及正交试验对各种酶的最佳酶解条件进行了研究.结果表明,酶浓度、温度、底物浓度、时间4个因素对酶水解的影响顺序为:酶浓度＞温度＞时间＞底物浓度;最佳水解条件为:酶浓度6%,pH值7.0,温度55℃,底物浓度1%,时间3 h.在此条件下进行酶解,花生蛋白的水解度最高,产生的酶解液苦味最小.     

微波辅助酶解辣木粕清蛋白制备抗氧化肽及工艺优化

【目的】筛选酶解辣木粕清蛋白的最佳蛋白酶,采用微波辅助酶解制备辣木粕抗氧化肽。 【方法】以辣木粕清蛋白水解度作为考察指标,采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、菠萝 蛋白酶以及木瓜蛋白酶进行初筛和复筛,筛选最佳的蛋白酶。通过单因素试验以及响应面试验,筛选最佳酶解 条件,采用微波辅助进一步优化酶解工艺。通过测定 DPPH·清除率、O2-·清除率、ABTS+ ·清除率和还原能 力评价辣木粕清蛋白抗氧化活性。【结果】辣木粕清蛋白为酶解的最佳蛋白质,风味蛋白酶为最佳蛋白酶。通 过单因素试验以及响应面试验得到最优酶解工艺：加酶量 7 491.44 U/g、底物浓度 9.36%、pH 7.50、酶解温度 45 ℃,水解时间 3.88 h,在此酶解条件下,抗氧化肽得率为 19.09%,水解度为 69.80%。采用低功率微波仪器 （0~100 W）进一步将酶解时间缩短到 1 h,同时可提高酶解物的抗氧化活性。检测出辣木粕酶解物具有较好的 抗氧化活性,清除 DPPH·的最佳质量浓度为 10 mg/mL;清除 ABTS+ ·、O2-·的最佳质量浓度为 50 mg/mL;还 原 Fe3+ 的最佳质量浓度为 50 mg/mL,与阳性对照 Vc 相当。【结论】低功率微波能够提高辣木粕清蛋白酶解效 率和抗氧化活性,辣木粕具有制备天然抗氧化肽的潜力。     

双酶水解黄粉虫蛋白制备生物活性肽的工艺优化

【目的】对胰蛋白酶与碱性蛋白酶Alcalase双酶组合水解黄粉虫蛋白制备生物活性肽的工艺进行优化,为获得高活性黄粉虫蛋白多肽及有效利用黄粉虫蛋白提供科学依据。【方法】以水解度和酸溶性肽得率为指标,研究了酶解时间、酶活比、料液比、加酶量、pH和酶解温度6种因素对酶解反应的影响。在此基础上设计了3因素(加酶量、pH和酶解温度)3水平的响应面试验。【结果】胰蛋白酶与碱性蛋白酶Alcalase双酶水解黄粉虫蛋白的最佳酶解条件为:酶解时间120 min,酶活比1∶1,料液比1∶3,加酶量23.41 mg/g,pH 8.77,酶解温度53.41℃。【结论】利用优化双酶水解条件制得的低分子多肽的水解度高达21.61%,酸溶性肽得率为92.09%。     

风味蛋白酶水解鸭骨工艺优化

为了实现鸭骨副产物的综合利用,以鸭骨为原料,通过测定酶解产物的抗氧化能力及水解度,确定最适用酶为风味蛋白酶。研究底物浓度、风味蛋白酶用量、酶解温度、pH、酶解时间5个因素对鸭骨蛋白水解度的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验确定鸭骨风味蛋白酶酶解的最佳工艺条件为:底物浓度2%,风味蛋白酶用量7 000 U·g~(-1),酶解温度45℃,pH值6.0,酶解时间5 h。在此条件下鸭骨蛋白的水解度为17.10%。     

花生粕蛋白酶解条件的优化

采用Alcalase碱性蛋白酶水解花生粕,设计单因素试验和正交试验考察水解时间、花生粕质量分数、酶用量、温度、pH等因素对水解度的影响,优化提取工艺.结果表明,最佳的水解条件为酶解温度60℃、pH 8.5,反应体系中花生粕和酶的质量分数分别为5％和7％,酶解时间4h.在此条件下花生粕蛋白的水解度可达29.18％.     

Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

试验研究了以Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺,分析了温度、pH值、底物浓度、酶与底物浓度比和时间对酶水解的影响。通过均匀设计和统计分析建立了酶水解的数学模型,并以此模型得到了Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解工艺。工艺参数为温度60℃、pH8．0、底物浓度8．38％、酶与底物浓度比4．5％、水解时间150min,水解度0．220 221。     

胰蛋白酶对核桃蛋白水解条件的优化研究

【目的】确定蛋白酶水解核桃蛋白的最佳工艺条件。【方法】在单因素分析的基础上,采用响应面分析方法对核桃蛋白的水解条件进行了优化。【结果】胰蛋白酶水解核桃蛋白的最佳反应条件为:反应时间4.0 h,底物质量浓度27 g/L,温度53.4℃,pH8.0,加酶量(E/S)8.3 g/kg,各因素对核桃蛋白水解的影响顺序为温度>加酶量>底物质量浓度。【结论】实际验证表明,利用优化的水解条件可取得较好的水解效果,水解度可达14.497%。     

响应曲面法研究白果蛋白的酶解工艺

[目的]确定白果蛋白的最佳酶解条件。[方法]分别采用木瓜蛋白酶,2709碱性蛋白酶,中性蛋白酶对白果蛋白进行酶解,并对酶解效果较好的碱性蛋白酶进行单因素试验,考察各因素对酶解效果的影响;采用Designexpert软件设计试验、创建模型,采用响应曲面法分析试验结果。[结果]碱性蛋白酶对白果蛋白的水解度最大（50.50%）;酶解温度为50℃时蛋白水解度最大,酶用量为3g和酶解时间为6h时蛋白水解度达到稳定点;据模型分析,各因素对酶解效果的影响依次为：pH值〉温度〉底物浓度,最佳酶解条件为：时间6h,酶用量2g,pH值9.0,温度47℃,底物浓度2.17%。[结论]最佳酶解条件下白果蛋白的水解度可达67.75%,水解液过膜后干燥可得粗多肽1.3g（占干燥白果粉的6.51%）。     

蚕豆根尖细胞微核技术监测实验室有机废水的污染研究

[目的]对生物及化学类实验室的有机废水进行遗传毒性和污染效应的研究。[方法]将实验室条件下制备环己酮时所排有机废水逐级稀释成8个梯度浓度,采用蚕豆（Viciafaba）根尖细胞微核技术进行检测。[结果]不同浓度梯度的实验室有机废水对蚕豆根尖细胞有遗传毒性,在一定浓度范围内,随着废水处理浓度增大,蚕豆根尖细胞微核率、污染指数和有丝分裂指数逐渐增加;但浓度过高,反而会抑制蚕豆根尖细胞微核的形成和有丝分裂的进行。[结论]实验室有机废水有明显的遗传毒性和环境污染效应,可以利用蚕豆根尖细胞微核技术对其污染效应进行监测和评价,实验室废水必须进行合理的处理（稀释或吸附消除重金属）方能排出。     

Fenton法处理有机杀菌剂生产废水研究(英文)

[目的]利用Fenton氧化法对高浓度有机杀菌剂生产废水处理工艺进行了研究。[方法]采用碱析预处理方法,考察了NaOH添加量、H2O2和Fe2+的摩尔浓度比和H2O2用量等因素对废水化学需氧量(COD)去除率及脱色率的影响。[结果]确定了生产运行时各影响因子的最佳操作条件为:pH=3.0,NaOH添加量为15 g/L,n[H2O2]:n[Fe2+]=4.20,反应时间t=30 min。[结论]该研究为高浓度有机废水的处理提供了理论依据。     

硫酰氟在仓储害虫防治中的应用研究

[目的]研究硫酰氟对贮烟害虫的熏杀效果。[方法]设置4个试验仓间,每个仓间均设置上中下3个浓度检测点。熏蒸过程前期每2h检查一次,共检查11次。[结果]硫酰氟熏蒸防治烟草害虫的研究表明,硫酰氟整仓熏蒸22h后,仓问设置的3个浓度监测点的浓度基本一致;均能达到对烟草甲成虫100％的杀灭效果。[结论]为进一步推广应用提供相关依据。     

不同镉浓度对寒地水稻根系活力和籽粒品质的影响

[目的]研究不同镉浓度对寒地水稻根系活力和籽粒品质的影响。[方法]采用盆栽试验方法,研究不同镉浓度对水稻不同生育期根系活力、成熟期水稻植株和籽粒中镉含量、籽粒品质的影响。[结果]随着镉浓度的增加,水稻根系明显下降,植株中镉含量增加,糙米中蛋白质含量降低。[结论]土壤镉污染降低水稻根系活力和稻米营养品质。     

超声波萃取-气相色谱法对甘蔗中有机磷残留量的测定

[目的]为建立一套快速、简单、准确的有机磷残留量检测方法。[方法]建立了使用超声波强化萃取-氢火焰离子化检测器气相色谱法（FID／GC）检测甘蔗中甲拌磷、特丁硫磷残留量的方法。[结果]当甲拌磷的浓度为0．80～3．20μg／ml，特丁硫磷的浓度为0．96～3．20μg／ml时，它们的浓度与峰面积呈良好的线性关系；样品加标平均回收率为81．58％～84．77％，相对标准偏差（RSD）为4．69％～6．68％。[结论]FID／GC方法操作简便，能满足农药残留量的分析要求：     

KGM/XG复合凝胶的降解性能影响因素研究

[目的]研究魔芋葡甘聚糖含量、酶浓度对KGM／XG复合凝胶降解性能的影响,为魔芋葡甘聚糖（KGM）水溶胶的应用奠定基础。[方法]首先制备了KGM／XG复合凝胶,进行了水凝胶体外降解试验,并研究了不同KGM用量、酶浓度对水凝胶降解性能的影响。[结果]KGM／XG水凝胶可被含β葡聚糖苷酶的纤维素酶降解,而不能被不含β-葡聚糖苷酶的胰酶等降解。水凝胶的平均降解速率随着KGM用量的增加而逐渐增加;随着酶浓度的增加,凝胶的降解速率逐渐升高。[结论]该水凝胶保持了KGM的生物可降解性;降低XG含量能增加凝胶的降解速率;酶浓度的增加能有效地提高凝胶的降解速率。     

橡实粉性质及酶解条件研究

[目的]分析橡实粉的性质及其乳液的液化条件。[方法]对橡实粉的性质、橡实粉料液浓度、pH进行了考察,研究橡实粉乳液的液化条件及对后续糖化生成葡萄糖的影响。[结果]确定了橡实粉较优的液化条件:料液浓度为32%,pH为5.8,在此条件下可获得14.4%的水解葡萄糖。[结论]研究可为橡实粉的综合利用提供参考依据。     

高效氯氰菊酯对草履虫的毒性研究

[目的]探究高效氯氰菊酯对草履虫的急慢性毒性影响,为了解拟除虫菊酯类农药的毒性机理提供参考。[方法]用不同浓度梯度的高效氯氰菊酯培养草履虫,观察草履虫的死亡状况及种群增长情况。[结果]高效氯氰菊酯对草履虫的1 h急性毒性作用(LC50)为27.536 mg/L,95%置信区间为26.290~28.841 mg/L。慢性毒性试验表明,低浓度的高效氯氰菊酯促进草履虫种群增长,高浓度又抑制其增长。[结论]低浓度的高效氯氰菊酯对草履虫可能具有环境类内分泌干扰物的作用。     

异常汉逊酵母和植物乳杆菌菌液浓度与光密度值的关系研究

[目的]探索一种快速测定异常汉逊酵母和植物乳杆菌菌液浓度的方法。[方法]采用分光光度法测定菌液的光密度值(OD值),平板菌落计数法测定异常汉逊酵母和植物乳杆菌的菌液浓度,并研究两者的相关关系。[结果]异常汉逊酵母在YEPD培养基中指数期的菌液浓度与光密度值呈现极显著的线性相关关系,菌液浓度(y)与光密度值(x)线性回归方程:y=2.246x-0.030(R2=0.998 6)。植物乳杆菌在MRS肉汤培养基中指数期菌液浓度的对数值与光密度值呈现极显著的线性相关关系,菌液浓度的对数值(y)与光密度值(x)线性回归方程:y=0.172 4x+8.432 1(R~2=0.996 6)。[结论]分光光度法可用于快速测定异常汉逊酵母和植物乳杆菌菌液浓度。     

不同盐浓度对香菜光合色素含量的影响

[目的]明确不同盐浓度对香菜光合色素的生理效应.[方法]以自行培养的香菜作为试验材料,采用紫外分光光度法研究了不同浓度的盐胁迫对香菜叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总含量、类胡萝卜素及色素含量的影响.[结果]试验表明,Na＋低浓度（50 mmol/L）胁迫时,香菜中叶绿素等有机物有所积累,100 mmol/L盐浓度处理的香菜中叶绿素含量最高,营养物质积累最多,当盐浓度超过200mmol/L后香菜的生长受到明显的抑制作用.[结论]研究可为香菜生产的盐浓度调节提供参考依据.