不同脱钙工艺对昆明小鼠骨组织石蜡切片效果的影响

为了获得最佳的昆明小鼠骨组织脱钙效果,以便进一步制得最佳的骨组织石蜡切片,采用四种脱钙工艺,即5%硝酸溶液脱钙22 h、8%硝酸溶液脱钙18 h、20%甲酸溶液脱钙26 h、Schmorls液脱钙16 h进行试验。结果表明:Schmorls液脱钙制得的切片H.E.染色效果最好,骨组织结构保留最完整;20%甲酸溶液脱钙的切片骨组织结构不完整,着色较弱;8%硝酸溶液脱钙的切片骨组织结构不清晰,对比度差;5%硝酸溶液脱钙的切片骨组织有皱褶,核浆对比不明显。说明用Schmorls液对昆明小鼠骨组织进行脱钙制得的切片质量最好。     

不同脱钙液对大鼠骨髓切片染色的影响

[目的]探讨不同脱钙液对Wistar大鼠胸骨骨髓切片染色效果的影响。[方法]取正常Wistar大鼠胸骨,采用10%中性福尔马林溶液充分固定,经流水冲洗后,分别浸入甲酸氯化铝脱钙液(A组)、5%甲酸脱钙液(B组)、5%硝酸脱钙液(C组)中进行充分脱钙后,再经流水冲洗,制作石蜡切片,HE染色,显微镜观察并评价其效果。[结果]①制片时间:5%甲酸组>甲酸氯化铝脱钙液>5%硝酸组;②HE染色效果:甲酸氯化铝脱钙液与5%甲酸组无显著差异,优于5%硝酸组。[结论]采用甲酸氯化铝脱钙液方法制作的大鼠胸骨骨髓切片,骨髓组织结构完整,细胞形态清晰,耗时较短,能够满足组织学评价的要求。     

适合北方地区冬季快速制备大鼠踝关节石蜡切片的脱钙方法

该研究旨在提供一种在较低室温下快速制作大鼠踝关节石蜡切片的方法,以期为大鼠关节炎的病理组织学评价提供重要技术支持。取类风湿关节炎模型(CIA)大鼠踝关节,经10%中性缓冲福尔马林溶液固定2 d,流水冲洗后,分为室温脱钙组和恒温脱钙组,两组均采用8%硝酸脱钙液脱钙,制作石蜡切片,采用HE染色法染色后,光镜下观察并评价其效果。结果表明,不同温度脱钙组制片后均能获得平整、染色良好的石蜡切片,可实现对关节的组织学评估,但恒温脱钙组脱钙完成时间明显短于室温脱钙组,可作为冬季较低室温条件下快速制备切片的脱钙方法。     

不同脱钙液对兔膝关节组织切片染色的影响

探讨不同脱钙液对新西兰大白兔膝关节切片染色效果的影响,为膝关节关节软骨及基质多糖的观察奠定试验基础。取正常新西兰大白兔膝关节,10%中性福尔马林溶液充分固定,流水冲洗后,分别浸入10%硝酸脱钙液、3%硝酸脱钙液、改良AF硝酸脱钙液及改良30%盐酸脱钙液中进行充分脱钙后,流水冲洗,制作石蜡切片,苏木精—伊红(HE)、奥尔辛蓝及沙红O染色,显微镜检观察并评价其效果。结果表明:①HE染色效果,3%硝酸组＞30%盐酸组＞10%硝酸组及改良AF硝酸组;②奥尔辛蓝及沙红O染色效果,3%硝酸组及改良AF硝酸组优于其他各组。     

兔股骨头组织大切片实验标本脱钙技术

我们在探讨激素诱发兔股骨头坏死的机理研究 [1] 中 ,为获得范围大、整体性强、组织结构完整准确的骨组织标本 ,通过摸索对比 ,筛选出了骨组织大切片的混合脱钙技术 ,经实际应用效果良好。1　材料与方法1 .1　选 6月龄以上新西兰成兔 ,剖取完整股骨 ,用1 0 %甲醛固定 48h后 ,纵     

H.E.染色切片质量影响因素分析

H.E.切片染色是生物学和医学领域中组织学和细胞学等学科中最常见的切片染色方法。染色质量的好坏直接影响到细胞观察的科学性和病理学诊断的准确性。经过长时间的组织胚胎学 H.E.染色切片的制作实践 ,对影响石蜡切片 H.E.染色质量的因素进行了如下分析。1　取材固定　取材要新鲜、迅速、避免机械损伤、大小适宜、厚薄均匀。固定要及时、充分。固定液一般采用10 %中性缓冲福尔马林溶液和 Bonin氏液 ,但是检查糖元、黏液、尿酸结晶类物质最好用无水乙醇固定 ,固定 2 4～ 4 8h,最短不短于 30～ 6 0 min。固定时间应根据取材大小、性质以及…     

陈旧褪色病理H.E.染色组织切片重新利用技术的探讨

在家畜病理学教学中和一些病理诊断中,常规H.E.染色切片质量的好坏直接影响病理评判结果。一些切片由于保存时间长久会逐渐褪色,使得显微镜下结构模糊、失真,影响病理疾病诊断的准确性。为了有效利用陈旧褪色病理H.E.染色组织切片,探讨陈旧褪色病理H.E.染色组织切片重新利用技术,采用4种方法(酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法、盐酸乙醇脱色法、氨水脱色法和常规H.E.染色法)对塔里木大学动物科学学院基础兽医实验室陈旧褪色的病理组织切片进行复染。结果表明:酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法复染的组织切片显微镜下细胞核呈蓝紫色,细胞质呈粉红色,复染效果最好;复染过程中酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法的掉片数最少,显著低于其他3种方法(P0.05);4种复染方法间组织完整率差异不显著(P0.05)。说明4种复染方法中酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法的复染效果最好。     

意大利蜜蜂蜂王卵巢组织观察方法的探究

采用石蜡切片技术配合以光学显微镜观察,通过设置不同试验条件对适合意大利蜜蜂蜂王卵巢组织的石蜡切片制作及染色方法进行了探究。结果显示:用甲醛固定液常温固定8 h、水浸洗30 min的卵巢组织在58℃恒温箱条件下浸蜡,苏木精和伊红处理时间均为8 min时的切片效果最好,说明卵巢组织对固定剂以及浸蜡时的温度和染色时间是有选择的,只有在最佳的试验条件下制得的石蜡切片才能避免组织破碎,保证其染色效果良好从而更好的观察其组织结构。     

Masson三色染色与HE染色在豚鼠牙齿组织石蜡切片中的比较研究及应用

针对牙齿组织形态学研究的难点,选择适宜固定液,用EDTA-2Na进行脱钙,完成了牙齿组织石蜡切片的制作。通过确定染色程序及各种染料的最佳作用时间,分别利用Masson三色染色法、传统的苏木精和伊红（HE）染色法对牙齿组织切片进行了染色观察。染色结果表明,与HE染色法相比,Masson三色染色更能使牙齿的各主要成分以不同颜色显现出来,色彩对比鲜明,亮丽润眼,为牙齿组织生理及病理组织形态学研究奠定了基础。针对机体中硬组织的相似特性,该试验方法可以在骨骼、软骨等硬组织的形态学研究中参考、改进并推广使用。     

鹿角盘水提物对大鼠乳腺增生的作用效果及其机制研究

为了探索鹿角盘(DHAB)水提物对大鼠乳腺增生的治疗作用,初步探讨其作用机理和用药剂量,试验利用苯甲酸雌二醇(0.5mg/(kg·d))联合黄体酮(5.0mg/(kg·d))对SD大鼠进行肌内注射建立乳腺增生模型。试验共分7个组,每组10只大鼠,分别为空白组、乳腺增生症(HMG)模型组、阳性药三苯氧胺组(0.036mg/(kg·d))、鹿角盘水提物4个剂量组(高剂量,2.625g/(kg·d);中高剂量,1.575g/(kg·d);中低剂量,1.05g/(kg·d);低剂量,0.63g/(kg·d))。按组别连续灌胃45d,每周固定时间测定大鼠乳头直径、高度及体重。试验结束后采血取样,称量大鼠胸腺、脾脏、子宫和卵巢质量,取乳腺组织做病理学切片、HE染色,用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇(E2)及孕酮(P)的含量。结果表明,使用不同剂量鹿角盘水提物均能减小乳腺增生大鼠乳头直径、高度,提高胸腺、脾脏指数,降低子宫指数,减轻乳腺小叶数、腺泡数和分泌物,降低血清E2含量,升高血清P的含量,与模型组相比有统计学差异(P0.01;P0.05))。综合试验结果,鹿角盘水提物对乳腺增生大鼠有治疗作用,效果显著,且以中高剂量组变化最为明显。其作用机制可能通过增强机体免疫力、调节血清中E2、P水平实现。     

基因Ⅶ型和Ⅳ型新城疫病毒诱导鸡脾脏细胞外基质组织病理学变化的比较

为系统比较基因Ⅶ型和Ⅳ型新城疫病毒(NDV)引起的细胞外基质(ECM)组织病理学变化,采用ECM特异性染色,包括Masson三色法染色和天狼星红染色,对基因Ⅶ型NDV JS5/05株与基因Ⅳ型NDV Herts/33株感染的鸡脾脏进行了ECM组织病理学分析。此外,通过免疫组化检测了ECM关键组分Ⅰ型胶原蛋白在感染鸡脾脏中的分布。结果显示:与Ⅳ型Herts/33株相比,Ⅶ型JS5/05株能引起以脾脏广泛坏死为特征的更严重的病理变化;ECM特异性染色以及免疫组化结果表明,与Herts/33相比,JS5/05显著降低脾脏ECM蛋白丰度,严重破坏胶原纤维的走向、排列与网络结构。结果表明:鸡脾脏ECM的严重降解是基因Ⅶ型NDV感染过程中特征性的病理事件,且ECM的病理变化在促进Ⅶ型NDV诱导免疫病理损伤方面可能发挥重要作用。     

低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响

为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色与否分为4种类型进行统计。结果表明:低温保存后,绵羊精子头膜、尾膜均完整的Ⅳ型精子发生率和头膜、尾膜均损伤的Ⅰ型精子发生率与鲜精相比分别极显著减少和增多(P<0.01),说明低温保存过程对精子质膜完整性有极显著影响;在低温保存过程中头膜损伤-尾膜完整的Ⅱ型精子发生率极显著增多(P<0.01),而头膜完整-尾膜损伤的Ⅲ型精子发生率显著减少(P<0.05),说明精子头膜或尾膜的损伤是独立发生的,且头膜比尾膜更易损伤。5种低渗液中,150 mOsm染液检测效果最好。     

冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响

研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响,为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液(Ⅰ组)稀释后于17℃过夜保存(Ⅱ组),然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1.5h(Ⅲ组),再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min(Ⅳ组)。通过精子形态正常率及活力检测,吖啶橙(AO)染色检测精子DNA完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子头部质膜完整性,低渗肿胀试验(HOS)检测精子尾部质膜完整性,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,并用扫描电镜(SEM)观察精子结构,评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明,与新鲜精液相比,Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义(P0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响(P0.05),但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异(P0.05)。扫描电镜检测结果表明,17℃过夜保存精子未见异常,头、颈、尾结构完整,顶体完整、光滑;Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤;Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。     

猪分离卵泡石蜡切片制作的改进

猪完整分离有腔卵泡内的卵泡液含量丰富,采用常规石蜡切片制作方法往往很难制作出结构自然完整的卵泡切片。本试验用Bouin氏固定液固定猪分离卵泡72 h,脱水程序采取二甲苯∶乙醇(1∶1)过渡的方法,并适当加长透蜡时间。通过改进卵泡固定、脱水和透明等程序后,成功制成效果优良的猪分离卵泡组织切片。     

两种不同脱霉剂的解毒效果对比研究

本研究旨在对比两种不同脱霉剂的解毒效果。试验采用霉变玉米,以黄曲霉毒素(AFB1)构建了中度污染模型,选用320只1日龄樱桃谷商品代肉鸭,随机分为5个组(每组4个重复):A组饲喂基础日粮,B组饲喂基础日粮+2 kg/t脱霉剂Ⅰ,C组饲喂霉菌毒素中度污染日粮,D组饲喂霉菌毒素中度污染日粮+2 kg/t脱霉剂Ⅰ,E组饲喂霉菌毒素中度污染日粮+2 kg/t脱霉剂Ⅱ。试验期35 d。结果表明:(1)C组1~14日龄采食量较B组降低了12.3%(P0.05),与A组不存在显著性差异(P≥0.05),D、E两组的采食量与C组不存在显著性差异(P≥0.05),B组的采食量与A组也不存在显著性差异(P≥0.05);(2)B组21、28、35日龄肉鸭的平均体重较对照组A显著提高了7.2%、13.2%、9.0%(P0.05),C组7、14日龄肉鸭的体重较对照组A降低了9.4%、8.7%(P0.05),D组35日龄肉鸭体重较C组提高了5.7%(P0.05),E组各阶段肉鸭的体重与C组差异不显著(P≥0.05);(3)B组14~35日龄肉鸭血清球蛋白含量明显高于A组(27.30 g/L比24.16 g/L),而C、D、E组处于同一水平;(4)21、35日龄肉鸭血清肝酶谷丙转氨酶(ALT)活性的比较中发现,B、D两组ALT活性与A组无显著差异(P0.05),而C、E两组的肝酶活性均显著高于A组(P0.05)。由此得出,在非霉变日粮中,添加脱霉剂Ⅰ改善了肉鸭的增重和血液免疫;而在霉菌毒素中毒状态下,肉鸭的采食量降低,增重减少,并且肝脏受到损伤,添加脱霉剂Ⅰ改善了中毒状态下肉鸭增重和肝脏损伤,而脱霉剂Ⅱ效果不明显。     

基于盐酸脱钙法的兔神经解剖标本制作方法

目的：探究家兔神经系统解剖标本的制作的解剖学方法以及不同浓度盐酸(5%、10%、15%、20%、25%)的骨骼脱钙效果差异。方法：选用15例体重以及月龄相仿的家兔,以3只为一组,共分成5组,以水合氯醛麻醉后空气栓塞处死。分别用37%甲醛溶液固定处理,采用手术器械剥离皮肤毛发,沿腹正中线切开腹壁,取出可能会对盐酸处理液造成污染的内脏等,处理完毕后备用。分别配置5%、10%、15%、20%、25%的盐酸处理液,将以上制备的家兔分别完全浸没其中,并分别编号为A、B、C、D、E组。采用夹具将推拉测力计与l=2.25cm,r=0.5mm的钢针相连接,以家兔颅骨最厚的顶骨为采样区域,每4h针刺一次,并记录针刺透采样区域时的峰值力度,直至力度小于5N时停止,将5组数据导入SPSS进行对照分析与回归分析。取出并清洗残留盐酸处理液,对处理完毕的家兔进行解剖。结果：A～E的处理组分别耗时44h、40h、32h、28h、24h。通过解剖操作得到的标本清楚的展示了兔的中枢神经,包括大脑、小脑、延髓、脊髓;周围神经系统包括三叉神经、眼神经、面神经、8对颈神经、13对胸神经、7对腰神经、臂丛、腰丛。结论：利用基于...     

12种方法对鸡沙氏住白细胞虫血液涂片的染色效果

目的为了筛选出比较理想的鸡沙氏住白细胞虫血液涂片染色方法。方法分另1采用12种染色方法对鸡沙氏住白细胞虫血液涂片进行染色,根据染色时间长短、层次对比、结构完整性、结构清晰度、分辨难易来判定染色方法的优缺点。结果瑞-姬混合染色法、梅-姬染色法、伊红-亚甲基兰染色法效果最好;其次为革兰氏染色法、美蓝染色法、瑞特氏染色法、姬姆萨染色法、梅古氏染色法、立克次氏体染色法等染色方法;抗酸染色法、复红染色法、阿伯特染色法染色效果较差。美蓝染色法由于其染色时间短、操作简单、层次对比明显、结构完整性好,虽然高倍镜下清晰度不高,但低倍镜下检出率高。瑞-姬混合染色法、梅-姬染色法、伊红-亚甲基兰染色法为复染色法,虽然染色时间长,但层次对比明显、结构最完整、最清晰。结论瑞-姬混合染色法、梅-姬染色法、伊红-亚甲基兰染色法在鸡沙氏住白细胞虫血液涂片的染色效果最好;美蓝染色法适应于大规模流行病学调查,伊红-亚甲基兰染色法可以代替瑞特氏染色法、姬姆萨染色法、瑞-姬混合染色法在基层推广。     

苹果树根外喷钙防治果实缺钙病试验

在苹果生产中,不少地区盲目追求大果和高产,大量使用氮肥及采用不当的管理技术,致使果实生理病害发生,尤其是缺钙病（如苦痘病等）更为严重,造成果实质量降低,损失较大。 从喷钙两个试点试验结果看出,红富士苹果喷施氨钙宝３次（５月上旬、下旬浓度为８００倍液,６月上旬为６００倍液）效果最好,病果率只有１．７４％～５．７４％,只有对照病果率（８．４３％～１９．１９％）的２０．６％～２８．５％;喷３次氨基酸钙４００倍液（喷施时间与氨钙宝相同）也有较好的防治效果,其病果率为４．０８％和１１．５２％。喷钙后,对果…     

鸡枞菌多糖抗环磷酰胺对小鼠免疫器官损伤的作用

通过观察鸡枞菌多糖(TAP)抗环磷酰胺对小鼠脾脏和胸腺组织损伤的影响,探讨TAP对免疫功能的调节作用。每天对小鼠腹腔注射不同剂量的TAP,连续7d,于给药第5天起同时每天注射环磷酰胺(CTX)制作免疫抑制模型,于第8天处死小鼠检测其脾脏和胸腺指数,并制作脾脏和胸腺组织切片,HE染色后观察组织结构变化。结果表明,TAP能显著提高免疫抑制小鼠的免疫器官指数,增加其脾脏和胸腺中淋巴细胞、巨噬细胞的数量,可保护其脾脏及胸腺组织结构的完整性,其中以高剂量TAP效果最好。TAP可减少CTX引起的小鼠脾脏和胸腺萎缩,提高免疫抑制小鼠的免疫功能。     

不同保存条件对猪精子质膜、顶体及线粒体损伤的研究

探明体外保存过程中精子的损伤机制对精液体外保存效果的提高具有重要意义。因此,通过研究旨在探讨不同温度及稀释液对保存过程中精子结构及功能的影响。采用联合荧光染色方法,用流式细胞仪分别对Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)(17℃和4℃)和Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖)(17℃)保存条件下的猪精子的质膜、顶体及线粒体的功能进行检测。结果表明,Ⅰ液保存条件下,17℃保存组的精子质膜完整率[5 d,(83.07±1.64)%]、活精子质膜磷脂酰丝氨酸(PS)未外翻比率[5 d,(84.00±2.64)%]、活精子顶体完整率[5 d,(76.72±1.07)%]和活精子高能线粒体比率[5 d,(52.01±0.37)%]显著高于4℃保存组[5 d,(21.84±0.49)%;5 d,(16.53±1.67)%;5 d,(15.44±1.25)%;5 d,(12.02±0.36)%](P0.01);17℃保存条件下,Ⅱ液保存的精子质膜完整率[5 d,(85.24±2.66)%]、活精子高能线粒体比率[(5 d,(58.93±0.65)%]和活精子PS未外翻的比率[5 d,(87.86±0.88)%]显著优于Ⅰ液[5 d,(83.07±1.64)%;5 d,(52.01±0.37)%;5 d,(84.00±2.64)%],但在活精子顶体完整率方面[Ⅱ液,5 d,(80.57±0.52)%;Ⅰ液,5 d,(76.72±1.07)%]两者差异不显著(P﹥0.05)。可得出结论:精液体外保存过程中,精子的质膜、顶体和线粒体功能随保存时间的增加而降低;4℃比17℃保存对精子质膜、顶体和线粒体结构损伤更大;在精子质膜、顶体和线粒体方面,Ⅱ液比Ⅰ液具有更好的体外保护效果。