豆粕植酸降解菌的筛选及发酵优化

为研究红树林中的菌株对豆粕中抗营养因子植酸的降解效果,本试验从红树林根系土壤中分离筛选到一株可降解植酸的菌株,编号为a A8,经形态、生理生化和16S rDNA基因序列检测分析确定该菌株为右旋乳酸芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus laevolacticus)。对菌株a A8的产酶能力进行探讨,并将aA8接种于以豆粕为唯一氮源培养基中,采用L₁₆(4⁵)正交试验,对a A8植酸降解率进行优化。结果表明：植酸降解率由15.3%提高到89.1%;其最佳发酵条件为发酵碳源蔗糖,37℃发酵24 h,接种量10%(V/m),料水比1:1.2。结果显示,aA8可高效降解豆粕中的植酸,有利于提高豆粕的营养效价及饲用价值,为活体养殖中以豆粕为原料进行饲喂提供了理论基础。     

氨氮降解菌的分离、筛选及鉴定

家禽的规模化、集约化养殖产生了大量排泄物,这成为鸡舍内氨气的主要来源。氨气挥发前在粪便中的主要存在形式是NH4+-N,试验以硫酸铵为唯一氮源,从鸡粪便中筛选对氨氮具有高效降解性能的菌株,对其进行相关氨氮降解特性和体外抑制氨气试验。结果发现,C-2菌株能够高效降解氨氮,72 h时,C-2氨氮降解率为45.3%,且能够高效抑制鸡粪便氨气的释放。通过对其菌落形态、菌体特征、16S rDNA序列分析及生理生化试验结果,鉴定C-2菌株为枯草芽孢杆菌。本研究为以后在家禽粪便减排中的应用提供参考。     

呕吐毒素降解菌的筛选、鉴定及应用

为了筛选出对呕吐毒素(DON)具有降解能力的菌株,试验从土壤、发霉秸秆和动物粪便、肠道内容物等不同环境中采集样品10份,分别在LB、NA和MRS培养基中添加DON,制成改良固体培养基进行菌种初筛,将初筛得到的菌株在改良液体培养基中培养,用ELISA方法测定改良培养基中DON的降解率并对菌种进行复筛,对降解率高的呕吐毒素分解菌进行形态学和16S rDNA保守序列分析鉴定,组合所筛选和鉴定的菌种对麸皮中的天然DON进行降解试验。结果表明:通过初筛和复筛,筛选到DON降解率分别为19.1%、51.3%、66.7%的菌种3株;通过菌落特征、菌体特征等形态学观察和16SrDNA保守序列比对的分子鉴定,最终确定3株呕吐毒素降解菌分别为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌;枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合对麸皮发酵处理,DON降解率最高,可达71%。     

BP神经网络耦合遗传算法优化呕吐毒素降解菌发酵培养基

为了获得一株可高效降解呕吐毒素(DON)的德沃斯氏菌(Devosia sp.)D-8的最佳发酵培养基。采用单因素试验和部分因子试验确定了发酵培养基的主要组分及浓度范围,并根据其进行正交试验设计,以正交试验及结果作为数据样本建立BP神经网络模型,并通过遗传算法(Genetic algorithm,GA)对该模型进行优化并全局寻优。结果表明：确定了最佳培养基配比：糖蜜30 g/L,酵母浸粉20 g/L,KH₂PO₄ 4.4 g/L,Na₂HPO₄·12H₂O 7 g/L;利用该培养基发酵验证,D-8菌的生物量(OD_{600 nm})为14.68,与模型预测值相差1.01%,是优化前生物量的6.87倍,较正交试验后生物量显著提高了6.55%(P<0.05)。BP网络模型可较好地应用于DON降解菌的发酵培养基优化,培养基配方为该菌后续工业化发酵生产及应用提供了数据支撑。     

羊粪中纤维素降解菌的筛选、鉴定及评价

为发掘优良纤维素降解菌株,筛选羊粪堆肥发酵菌剂菌种资源,本研究以滤纸条为唯一碳源,从新鲜羊粪中分离出26株具有纤维素降解能力的菌株。通过测定其纤维素酶活力与秸秆降解率,筛选出7株优良纤维素降解菌株,并对7株菌进行16S rDNA序列比对,确定其分类学地位。利用线性拟合和多元回归解析菌株产酶活力与秸秆降解率之间的关系。结果表明,7株菌的全酶活性为1.03～2.83 U·mL^-1、外切酶为3.42～5.78 U·mL^-1、内切酶为1.24～3.25 U·mL^-1和β-葡萄糖苷酶为1.09～2.259 U·mL^-1。经鉴定分别为山原申氏菌(Shinella yambaruensis)、鸡眼草申氏菌(Shinella kummerowiae)、土地鞘氨醇盒菌(Sphingopyxis terrae subsp)、植物内生成对杆菌(Dyadobacter endophyticus)、潮湿纤维单胞菌(Cellulomonas uda)、水原假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas suwonensis)等...     

纤维素降解菌的筛选、鉴定与产酶条件优化试验

为了筛选高效降解纤维素菌株,试验以朽木及其下面土壤为样本,筛选获得28株具有纤维素降解能力的菌株,采用刚果红染色和酶活性测定筛选出一株纤维素降解菌(LD03),通过形态观察、生理生化以及16S rDNA序列测定,初步鉴定该菌株属于Rhizobacter属细菌,对该菌株培养条件和产酶条件进行了优化。结果表明:菌株LD03最适产酶条件,碳源为30 g/L淀粉、氮源为3 g/L牛肉膏、初始p H值为7、培养温度为37℃、装液量为50 mL、接种量为4%、培养时间为36 h,酶反应p H值为7,酶反应温度为60℃。     

双黄连药渣发酵菌筛选及发酵条件优化

正中药渣是经溶媒或其他方式提取后剩下的残渣~([1])。随着中国中药的发展,我国每年产生3 000万t的药渣~([2])。中药有效成分的提取率为30%~70%,药渣中不仅存留粗蛋白、粗多糖、淀粉等营养成分,还含有多种有效成分~([3])。药渣传统的处理方法是焚烧或掩埋处理,不仅造成资源浪费,还污染环境。因此,如何充分利用药渣资源并避免其对环境的污染,是亟待解决的问题。     

纤维素降解菌的筛选与鉴定

为了筛选出分解纤维素能力强的菌种,试验取延边大学农学院牧场内腐烂的稻草,经过羧甲基纤维素琼脂培养基、滤纸条培养基初筛,得到具有不同分解纤维素能力的菌种,根据水解圈直径与菌落直径比值筛选出高效分解纤维素菌,观察其群体形态、个体形态,并从生理生化特性方面对其进行鉴定(鉴定为康氏木霉),对其最适生长pH值、温度、天数进行测定。结果表明:其最适pH值为5.5,最适温度30℃,最佳生长天数是6 d。     

根霉脂肪酶产生菌筛选及发酵培养基研究

从实验室保藏菌种中筛选得到一株产脂肪酶能力较强的根霉菌种MHL4.07,对MHL4.07菌摇瓶发酵产酶培养基组成进行了试验,结果表明,种子培养时间为84h,最佳发酵培养基(g/l):玉米浆40.0、橄榄油12.5、豆饼粉20.0、NH4Cl20.0、MgSO4·7H2O0.5、K2HPO41.0、KCl0.5。用最佳培养基发酵产生的脂肪酶活力为41.91U/ml,该产量比初始菌株的酶活提高了408%。     

植物角质降解菌的种属鉴定、发酵条件优化及酶学性质研究

本试验旨在通过角质降解菌株X8P的种属鉴定、发酵条件优化和酶学性质研究,探讨降解植物表面角质层,进一步改善动物对植物纤维利用的可能新方案。试验通过形态观察和16 S r DNA测序鉴定菌株X8 P种属,并对其产酶所需碳源、氮源、发酵温度与时间进行优化,其发酵液经硫酸铵盐析沉淀获得其胞外蛋白粗酶,并对其粗酶催化的适宜p H和p H稳定性、温度和温度稳定性,以及有机溶剂、表面活性剂和金属离子对其活性的影响进行研究。结果表明:1)菌株X8P经形态观察和分子鉴定为东方醋杆菌(Acetobacter orientalis)。2)菌株X8P适宜产酶发酵条件为溶菌肉汤(LB)培养基中37℃发酵4 d,1%橄榄油和1%葡萄糖明显促进菌株产酶,而1%可溶性淀粉明显抑制菌株产酶。3)该菌株胞外粗酶催化适宜p H和温度分别为6.5和45℃,且表现出一定p H稳定性,但在有机溶剂中不稳定,仅甘油中可保留全部活性,在二甲基亚砜(50%)中活性可保留66%。吐温(Tween)-20(1 mmol/L)、Tween-80(1 mmol/L)和聚乙二醇辛基苯基醚(1和10 mmol/L)可使菌株X8P粗酶活性提高3%~35%。金属离子钾离子(K+)、锰离子(Mn2+)(1和10 mmol/L)可使菌株X8P粗酶活性提高2%~20%。由此可见,菌株X8P具有一定的产角质酶潜力和应用前景,可进一步深入研究。     

多西环素人工抗原的合成与鉴定

将多西环素（doxycycline,DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团,然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA,并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（SDS—PAGE）和EUSA方法对人工抗原进行鉴定;将合成的人工抗原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA分别免疫BALB／C小鼠,用间接ELISA方法测定多抗（pAb）效价,用竞争ELISA方法鉴定其敏感性,用交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,二个免疫组6只小鼠血清抗体效价均在1：6400以上,DOXpAb对DOX的50％抑制浓度（IC50）在39．79～53．13μg/L,抗血清与四环素类药物交叉反应很低。本实验为建立多西环素ELISA残留免疫学检测方法和并制备多西环素试剂盒奠定了基础。     

多西环素人工抗原的合成与鉴定

建立多西环素人工抗原(Doxycycline,DOX)的合成及鉴定方法。采用戊二醛偶联法将DOX分别与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原(DOX-BSA)和包被抗原(DOX-OVA)。经SDS-PAGE电泳法、紫外可见吸收光谱鉴定,证实人工抗原成功合成,偶联比分别为8.6∶1和3.8∶1。结果表明建立了一种新的DOX抗原合成方法,为进一步制备特异性DOX抗体和建立检测食品中DOX的酶联免疫方法奠定了基础。     

多西环素研究进展

多西环素是一种高效广谱的四环素类抗生素,在兽医临床上有着广泛的应用.本文概述了多西环素的理化性质、抗菌活性、作用机制及耐药机制、药动学特点、不良反应及临床上的应用方面的最新研究进展.     

多西环素研究进展

多西环素作为半合成类抗菌药,其抗菌活性和组织穿透力表现强,并具有体内分布广、临床上使用无明显肾毒性副作用、半衰期较长、较高的生物利用度等诸多优点,广泛应用于兽医临床.对其理化性质、抗菌原理及活性、药动学特征、生物转化和临床应用等方面研究进展进行了概述.     

多西环素研究进展

多西环素是一种高效广谱的四环素类抗生素,在兽医临床上有着广泛的应用。本文概述了多西环素的理化性质、抗菌活性、作用机制及耐药机制、药动学特点、不良反应及临床上的应用方面的最新研究进展。     

甜樱桃根际IAA产生菌的筛选、鉴定及最佳产素条件优化

摘要：为了给甜樱桃微生物肥料的研制和生产提供优良菌株资源。本文从马哈利樱桃根际土壤中分离获得52株细菌,通过保绿法和萝卜子叶增重法进行IAA产生菌的筛选,并经形态观察、生理生化特征及16S rDNA序列分析明确分类地位,利用分光光度法测定产IAA的能力,并对最佳碳氮源、产素条件进行了筛选。结果表明52株菌中B20产IAA能力最强,经鉴定为阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai）,其最佳产素的培养条件为：采用10%的装液量在温度为30℃、转速为150 r? min-1的条件下培养40h,最佳碳、氮源分别为果糖和酵母粉。首次研究发现阿氏芽孢杆菌具有IAA产生能力,菌株B20具有作为功能微生物肥料研发的潜力,可进一步对其进行开发研究。     

单宁降解菌的筛选及降解研究

从自然界中分离、筛选降解单宁的微生物,并研究对单宁降解的影响。在含有梯度浓度单宁的无糖察氏培养基上划线分离,分离出的菌株在250 ml锥形瓶中液体发酵,测定单宁的降解率。对分离出的3株菌表型观察,发现有2株青色霉菌,命名为SL-2和SL-4,1株黑色曲霉菌,命名为SL-5,分别接种含单宁0.5 g/l的无糖察氏培养基,28℃条件下振荡培养72 h,降解率分别达到58.6%、63.9%和49.4%。因此可知,我们成功分离出了3株具有单宁降解能力的微生物菌株。     

一株纤维素降解菌的筛选、鉴定及对饲料粗纤维降解效果的研究

通过筛选高活性纤维素酶产生菌,为微生物纤维素酶制剂的开发提供理论依据。采用刚果红染色法从绵羊粪便中分离筛选纤维素降解菌,用DNS法测定酶活力,根据酶活力复筛后,分离得到一株能够产生高活力纤维素酶和β-葡萄糖苷酶的目的菌B5。通过形态学观察和16S rDNA序列测定,对B5菌株进行种属鉴定;应用B5菌株对四种纤维性饲料进行消化降解实验,探究菌株B5降解饲料粗纤维的特性。形态学观察确定B5菌落符合放线菌的特征;分子学鉴定其16S rDNA序列全长1 585 bp,在进化关系上与链霉菌属(Streptomyces sp.)聚成一簇,同源性高达99%。鉴定B5菌株属于链霉菌属成员。B5菌株对饲料粗纤维降解效率与酶活力显著相关,对饲料粗纤维降解效率与饲料中纤维素含量相关性不明显。