H5N2亚型禽流感病毒中药佐剂灭活苗对公雏鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响

将200只海兰褐公雏鸡分为4组,每组50只。A组注射H5N2亚型禽流感病毒黄芪多糖油乳剂灭活苗;B组注射H5N2亚型禽流感病毒人参皂苷油乳剂灭活苗;C组注射H5N2亚型禽流感病毒普通油乳剂灭活苗;D组注射生理盐水油乳剂（空白对照）。分别在免疫前随机选取5只鸡心脏采血,EDTA抗凝。于免疫后5、12、19 d每组每次分别随机选取5只鸡心脏采血,EDTA抗凝,检查各阶段各组鸡外周血T淋巴细胞亚群变化情况。结果表明,免疫后第12天,黄芪多糖和人参皂苷可提高CD4+/CD8+淋巴细胞的比值,与普通疫苗和对照组相比,差异极显著（P<0.01）;黄芪多糖和人参皂苷可提高CD4+淋巴细胞亚群的百分率,与免疫前相比,差异极显著或显著（P<0.01或P<0.05）。     

H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫产生期内T淋巴细胞表型亚类的检测与研究

采用免疫荧光法、使用流式细胞检测仪对经H9亚型禽流感病毒人工感染SPF鸡、H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫SPF鸡以及经免疫后使用H9亚型禽流感病毒攻毒后的SPF鸡外周血、脾脏、胸腺中T细胞表型亚类(CD4+、CD8+、TCR1+)的变化规律进行了监测,结果表明,H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫后抗原的缓慢释放可在一定程度上激发机体的细胞免疫应答,使免疫活性T淋巴细胞得到活化,免疫后鸡体外周血中CD4+、CD8+和TCR1+T细胞的数量呈现出一明显升高的过程;同时,人工感染免疫鸡后,脾脏和胸腺TCR1+T细胞的数量上升,外周血CD4+、CD8+和TCR1+T细胞的数量少量降低或维持不变,随后短期即恢复正常;而人工感染SPF对照鸡后,外周血CD4+、CD8+和TCR1+T细胞的数量呈现下降趋势.     

重组禽流感二价灭活疫苗（H5+H7）有效抑制H7N9亚型禽流感病毒在鸡肺脏中的复制

从2013年至2017年上半年,H7N9亚型流感病毒已经引发五波疫情,且出现高致病性变异毒株。禽流感为高度接触性传染病,通过气溶胶进行传播的风险性较高。为探究H7N9亚型禽流感病毒能否在经H5+H7二价灭活苗免疫鸡的肺脏中有效进行复制,本研究选取H5+H7二价灭活苗对2周龄SPF鸡以0.3m L/只的剂量进行免疫,并在免疫14 d测定抗体滴度后以H7N9亚型禽流感病毒对免疫组与空白组SPF鸡点眼滴鼻方式攻毒,3d后剖杀采集肺脏进行病毒分离鉴定,结果显示免疫鸡肺脏中不含H7N9亚型禽流感病毒,而空白组SPF鸡能分离鉴定出H7N9亚型禽流感病毒。重组禽流感二价灭活苗(H5+H7)能有效抑制H7N9亚型禽流感病毒在鸡肺脏中的复制。     

重组鸡白细胞介素-2对禽流感灭活疫苗免疫增强作用的研究

为研究重组鸡白细胞介素-2(IL-2)对H5N1亚型禽流感灭活苗的免疫效果,将重组IL-2蛋白和禽流感灭活疫苗联合免疫14日龄SPF鸡,免疫后每周测定一次血清抗体效价﹑脾脏T淋巴细胞亚群,最后计算攻毒保护率。试验结果表明:重组IL-2蛋白具有增强禽流感疫苗免疫效果的作用,提高了血清中的抗体水平﹑增加了脾脏T淋巴细胞CD4+﹑CD8+亚群数量。     

H9N2亚型禽流感病毒灭活苗最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究

H9N2亚型禽流感疫苗在我国普遍使用,在强大免疫压力下,H9N2亚型禽流感病毒变异加快,现有商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。为此,本研究以从近期流行毒株中筛选出的一株H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/441/2009(H9N2)(简称为SH441)为种毒,制备灭活苗,进行了最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究。将制备的H9N2亚型禽流感灭活苗以0.01、0.02、0.04、0.05、0.08 mL/只的不同剂量,胸部肌肉途径免疫3周龄SPF鸡只,并于免疫后21天静脉感染SH441病毒,结果显示该疫苗最小免疫剂量为0.02 mL/只。以0.05 mL/只剂量免疫SPF鸡只,该疫苗能刺激SPF鸡只产生较高的HI抗体滴度,且在免疫后第5周达到峰值(12 Log2以上),随后稍有下降但保持相对稳定,且在免疫后29周时依然保持在7 Log2以上。这些结果为为该疫苗的进一步开发奠定了良好的基础。     

禽流感疫苗免疫应注意的问题

禽流感免疫是防控禽流感的主要措施。目前,国内禽流感疫苗有三类:全病毒灭活疫苗、重组禽流感病毒灭活疫苗、基因工程疫苗。莆田市荔城区使用国家规定可用于禽流感强制免疫的疫苗即禽流感灭活疫苗(H5N2亚型N28株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型.Re-1株),这两种均为油乳剂灭     

戊二醛苯扎溴铵溶液对H9N2亚型禽流感病毒的灭活效果分析

采用悬浮杀灭试验,考察戊二醛苯扎溴铵溶液对H9N2亚型禽流感病毒的灭活效果。将戊二醛苯扎溴铵溶液通过不同稀释倍数(1 250、2 500、5 000、10 000、20 000)、在不同作用时间(5、10 min)观察其对H9N2亚型禽流感病毒的灭活效果。结果显示,戊二醛苯扎溴铵溶液在10000倍稀释,与H9N2亚型禽流感病毒作用5 min或10 min,灭活率达99.90%以上;在20 000倍稀释,作用5 min或10 min,灭活率均小于99.90%。表明戊二醛苯扎溴铵溶液在10 000倍稀释与H9N2亚型禽流感病毒(20±1)℃水浴作用5 min,即可对H9N2亚型禽流感病毒达到很好的灭活效果。     

不同高致病性禽流感疫苗的免疫效果试验

应用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）对三组肉鸡进行禽流感免疫效果观察,首免用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）。结果表明：接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）的免疫效果比接种禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）的效果好;首免用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）的效果比仅接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）的效果好。     

H9亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护研究

为评价H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护效果,将禽流感病毒HF株灭活疫苗和商品化鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗分别以0.3 mL/只接种21日龄SPF鸡,3周后采血测定HI抗体效价,并用2018年-2019年分离的4株H9亚型禽流感病毒分别进行攻毒.结果显示,免疫后21 d,HF株灭活疫...     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对禽流感H9亚型流行株攻毒的保护作用

为了监测鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(LaSota株+M41株+SS/94株)对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,采用H9亚型禽流感病毒SS/94株及2009—2010年现地分离的3株H9亚型禽流感病毒对已免疫上述三联灭活苗的SPF鸡进行攻毒试验。结果显示,试验鸡以0.3 mL/只的剂量免疫三联灭活苗后21 d,其H9亚型禽流感病毒的HI抗体效价可达8～11log2,此抗体水平可抵抗2×106EID50的H9亚型禽流感病毒SS/94株、BLCN09株、WDZ09株、YT10株的攻击,攻毒保护率均达90%(9/10)以上。可见,以SS/94株作为禽流感疫苗抗原制备的三联灭活苗具有良好的免疫原性,能使免疫鸡抵抗2009—2010年期间现地分离的多株H9亚型禽流感病毒的攻击。     

H9N2亚型禽流感流行现状

低致病性禽流感主要是由H9N2亚型禽流感病毒所引起,近几年在世界上许多国家都暴发了H9N2亚型禽流感疫情.研究表明,H9N2亚型禽流感病毒在陆禽中至少可分为北美和欧亚两个种系,该病毒在自然环境中很容易发生变异,通过混合基因组分而形成不同的病毒亚型.H9N2亚型禽流感病毒已经能传播至哺乳动物,包括猪和人类,从而引发对其是...     

H9亚型禽流感油乳剂灭活苗

H9亚型禽流感病毒的灭活疫苗忆经研制成功,即用H9N2亚型的禽流感病毒分别接种鸡胚,收获尿事囊液,经甲醛灭活,以矿物油乳剂灭活疫苗.     

4种浒苔多糖的体外抗禽流感病毒活性研究

为了检测不同提取方法获得的浒苔提取物浒苔多糖1、浒苔多糖2、浒苔多糖3和浒苔多糖硒的体外抗禽流感病毒活性,试验将4种浒苔多糖用细胞维持液倍比稀释,以金刚烷胺、病毒灵、黄芪多糖和紫锥菊提取物为对照,以犬肾细胞(MDCK)为细胞模型,观察细胞病变效应(CPE),并采用MTT法研究4种浒苔多糖对H9N2禽流感病毒的直接杀灭、抑制病毒复制和阻断病毒吸附的治疗指数。结果表明:浒苔多糖1和浒苔多糖2直接杀灭H9N2禽流感病毒作用治疗指数分别为7.33和7.29,该指数低于金刚烷胺(33.56)、病毒灵(36.00)和黄芪多糖(15.78),高于紫锥菊提取物(6.92);浒苔多糖1和浒苔多糖2抑制H9N2禽流感病毒复制作用的治疗指数分别为5.78和6.13,该指数低于金刚烷胺(22.68)、病毒灵(26.71)和黄芪多糖(10.18),高于紫锥菊提取物(5.41);浒苔多糖1和浒苔多糖2阻断H9N2禽流感病毒吸附作用的治疗指数分别为13.83和12.75,该指数低于金刚烷胺(46.61)、病毒灵(55.20)和黄芪多糖(16.25),高于紫锥菊提取物(11.22);浒苔多糖3和浒苔多糖硒不具有直接杀灭病毒、抑制病毒复制和阻断病毒吸附的作用。说明浒苔多糖1和浒苔多糖2具有体外抗禽流感病毒活性,表现为对H9N2禽流感病毒具有直接杀灭、抑制病毒复制和阻断吸附的作用,浒苔多糖3和浒苔多糖硒无体外抗禽流感病毒活性。     

科研

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功
　　9月30日，农业部公布国家禽流感参考实验室成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型，H7N9/PR8株），并通过了新兽药评价，作为应急技术储备。为进一步做好H7N9流感疫情应对工作，及时发现、剔除家禽H7N9流感病毒，保障动物产品质量安全和公共卫生安全，农业部制定并实施《全国家禽H7N9流感剔除计划》。在实施剔除计划的同时，农业部积极组织国家禽流感参考实验室研制H7N9禽流感疫苗，以备急需。在科研人员的辛苦努力下，成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗（H7亚型，H7N9/PR8株）。试验结果显示，该疫苗安全，免疫效果良好，可对H7N9禽流感病毒攻击提供有效保护，能够100%阻止病毒复制和排泄，对有效阻断病毒传播、降低病毒高致病力突变风险具有重要意义，一旦疫病防控需要，即可马上使用该疫苗对家禽实施免疫，确保H7N9禽流感可防可控。     

不同禽流感疫苗对蛋鸭免疫效果比对试验

2007-2008年,通过对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)与禽流感(H5-H9)二价灭活疫苗(H5N1Re-1+H9N2Re-2株)免疫效果比对试验,结果显示:禽流感(H5-H9)二价灭活疫苗的H5亚型免疫效果优于重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)的效果,H9亚型达到免疫保护。     

新型抗原亚群H9病毒的血凝素蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗原变异迅速,相继于2009年及2013年分别出现新的抗原亚群病毒,对该病毒的防控带来了极大的挑战。目前,关于H9N2禽流感病毒形成不同抗原亚群机制,尚不清楚。流感病毒血凝素蛋白(HA)的单克隆抗体是研究该机制的基础工具。为此,本研究通过血凝抑制(HI)实验筛选到1株新型的抗原亚群H9N2病毒H514。通过杂交瘤细胞融合技术以及间接免疫荧光的方法,筛选到5株抗H514病毒HA蛋白的单抗,均属于Ig G亚型。Western blot结果表明5株单克隆抗体中只有5E9作用的是线性表位,其余4株皆是针对构象表位。进一步地研究发现,这5株单克隆抗体对H514株皆有HI活性,最高达到2⁸。这些结果为H9N2亚型禽流感病毒的抗原性分子研究提供了重要材料。     

重组鸡γ-干扰素联合鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫效果的研究

为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ, ChIFN-γ)对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)的免疫增强效果,取重组鸡γ-干扰素作为免疫增强剂,联合鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫SPF鸡,在免疫后24h和48h采集全血进行细胞因子检测,结果显示免疫后联合免疫组的IFN-γ和IL-4细胞因子水平要高于单独免疫疫苗组;免疫后7、14、21、28和35d分别采集血清测定抗体效价,通过检测血清中针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的HI抗体水平可知,联合免疫组产生的针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的抗体均高于单独免疫疫苗组。试验结果表明,重组鸡γ-干扰素对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)具有免疫增强作用。     

禽流感H5N1亚型不同株抗原抗体相互检测相关性试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,在禽流感疫苗免疫效力的评价过程中,监测免疫鸡血清抗体是最常用、最可行的方法。2009年农业部批准重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株＋Re-4株）制造,2012年重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）及重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-6株＋Re-4株）取代以上两个产品,2014年,北方出现了新的7．2分支毒株,而禽流感Re-4株疫苗和Re-6株疫苗对这种新型流行株的保护效力并不佳。2014年4月11日,农业部发布“中华人民共和国农业部公告第2093号”,制定了重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-7株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株＋Re-7株）2种兽药产品制造及检验规程,全国将主要以Re-6与Re-7两种疫苗联合免疫为新的趋势。本试验分别用不同毒株的禽流感试验抗原与不同毒株禽流感疫苗免疫鸡的血清通过HI试验相互检测,对抗体效价进行分析,从而得出不同毒株的相关性。     

H9N2亚型禽流感流行趋势与预防概述

H9N2亚型禽流感是目前在我国处于长期流行的一种危害禽养殖业的疾病,而且对养禽业带来的危害是严重的,我国H9N2亚型禽流感病毒(AIVS)近些年流行分支出现了改变,这给我们在预防H9N2禽流感发生带来了一定的困难。本文通过对H9N2亚型禽流感病毒目前流行趋势介绍,临床病理变化以及会出现与其他疫病混合感染的情况,综合阐述了H9N2亚型禽流感在临床上如何预防,为今后养禽业在预防H9N2亚型禽流感病毒发生时提供理论基础。     

禽流感H5N1亚型不同株抗原抗体相互检测相关性试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,在禽流感疫苗免疫效力的评价过程中,监测免疫鸡血清抗体是最常用、最可行的方法。2009年农业部批准重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株+Re-4株）制造,2012年重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）及重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-6株+Re-4株）取代以上两个产品,2014年,北方出现了新的7.2分支毒株,而禽流感Re-4株疫苗和Re-6株疫苗对这种新型流行株的保护效力并不佳。2014年4月11日,农业部发布“中华人民共和国农业部公告第2093号”,制定了重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型, Re-7株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）2种兽药产品制造及检验规程,全国将主要以Re-6与Re-7两种疫苗联合免疫为新的趋势。本试验分别用不同毒株的禽流感试验抗原与不同毒株禽流感疫苗免疫鸡的血清通过HI试验相互检测,对抗体效价进行分析,从而得出不同毒株的相关性。