猪肉及组织中β-受体激动剂UPLC-MS/M检测方法研究

超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测猪肉中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇3种β-受体激动剂残留方法.选用盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解,混合型阳离子交换固相萃取净化,以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液-甲醇为流动相,超高效液相色谱串联质谱法检测,在1.0、5.0、10μg/kg浓度添加水平,空白肌肉组织中3种药物添加平均回收率范围84~95%,标准偏差3.6~8.1%.该方法检测限为0.1μg/kg,定量限为0.3μg/kg,具有准确敏感特性.     

液相色谱/串联质谱法检测猪肉中三种化学物质的残留试验

本试验建立了高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测猪肉中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺残留的方法。样品中的药物残留采用0.2mol/L pH5.2的乙酸铵缓冲液提取,加入β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶进行酶解,提取液经混合型阳离子交换柱进行净化,液相色谱-串联质谱测定,内标法定量。克伦特罗0.05μg/kg;莱可多巴胺、沙丁胺醇0.2μg/kg。回收率均大于88%。     

多壁碳纳米管分散固相萃取结合LC-MS/MS测定饲料中11种β-受体激动剂

本研究建立了采用多壁碳纳米管(MWCNTs)为吸附剂的分散固相萃取(dSPE)净化、液相色谱串联质谱测定饲料中11种β-受体激动剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、苯乙醇胺A、氯丙那林、妥布特罗、西马特罗、特布他林、马布特罗、班布特罗和喷布特罗)的方法。饲料样品经甲酸水溶液提取后,调节pH值至10,加入50 mgMWCNTs进行分散固相萃取,被吸附的化合物经1.0%甲酸水甲醇(91)洗脱,洗脱液过滤膜后进行LC-MS/MS分析。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正电子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式监测,内标法校准进行定量。结果表明:11种β-受体激动剂在0.1～20μg/L浓度范围内呈良好的线性,线性相关系数均大于0.997,猪配合饲料样品中最低定量限为0.05～0.48μg/kg。猪配合饲料中添加0.5～500μg/kgβ-受体激动剂的回收率在89.6%～112.9%,相对标准偏差RSD均小于15%。     

高效液相色谱—串联质谱法测定畜肉组织中四环素及3种β-受体激动剂的研究

通过优化3种β-受体激动剂——莱克多巴胺、沙丁胺醇、盐酸克伦特罗及四环素的高效液相色谱—串联质谱条件,建立了一种可以同时测定畜肉中4种药物的高效液相色谱—串联质谱法的检验方法。该方法提高了检测效率,且重现性、回收率均可以满足定性及定量检测要求,具有较高的灵敏度和准确度,适用于畜肉中莱克多巴胺、沙丁胺醇、盐酸克伦特罗及四环素标准物质的同时测定。     

UPLC/MS/MS测定动物尿液中9种β-受体激动剂残留量

本研究建立了动物尿液中9种β-受体激动剂（苯乙醇胺A、沙丁胺醇、特布他林、莱克多巴胺、克伦特罗、溴布特罗、马布特罗、西布特罗、喷布特罗）的液相色谱-串联质谱法（UPLC- MS/MS）。样品经醋酸铵为提取溶剂,固相萃取柱净化,用UPLC- MS/MS检测和确证,内标法定量。质谱分析采用电喷雾电离、正离子扫描、多反应监测模式。试验结果表明,9种兴奋剂在0.5～100μg/L范围内具有良好的线性,相关系数在0.995～0.999,检测限为0.1μg/L,定量限为0.2μg/L,9种兴奋剂的方法平均回收率为60.63%～94.12%,相对标准偏差在1.26%～14.74%。试验结果表明,该方法提取效果好,具有良好的灵敏度、回收率和重复性,能满足动物尿液中兴奋剂等兽药残留分析要求。     

3种β_2-受体激动剂荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究

本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数(CV)均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。     

液相色谱-串联质谱法测定猪肉中3种β-受体激动剂类药物残留

试验建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测猪肉中的克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺残留的方法,并对方法进行了优化。样品经0.2 mol/L的乙酸铵缓冲液提取,加入β-葡萄糖醛苷酶进行酶解,提取液经PCX柱进行净化,液相色谱-串联质谱进行测定,内标法定量。结果显示,猪肉中3种β-受体激动剂残留浓度在0.2~10 μg/kg范围线性关系良好,线性相关系数分别为0.9997、0.9999和0.9993,定量检出限均为0.5 μg/kg,回收率分别为93.57%~96.63%、92.35%~96.01%和91.66%~96.54%,该方法灵敏度高、重现性强,适用于猪肉组织样品中克仑特罗、沙丁胺醇及莱克多巴胺的确证检测。     

氘代同位素内标液相色谱串联质谱测定肠衣肉类肝脏中5种β受体激动剂类药物残留

建立了肠衣、肉类、肝脏中克伦特罗、莱克多巴胺、氯丙那林、妥布特罗、苯乙醇胺A的液相色谱-串联质谱方法.样品经乙酸铵溶液提取酶解,MCX固相萃取柱净化,流动相溶解后进行检测.5种β受体激动剂标准曲线线性关系良好(r均＞0.99);回收率80.0％～98.5％,相对标准偏差为3.4％～8.1％;检出限0.2μg/kg,定量限0.25 μg/kg.     

气相色谱－质谱法测定猪尿中莱克多巴胺

建立了猪尿中莱克多巴胺的气相色谱-质谱（GC-MS）检测方法。样品经β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解,乙酸乙酯提取、盐酸溶液萃取,SCX固相萃取柱净化,N,O-双三甲基硅基-三氟乙酰胺（BSTFA）衍生化后进行气相色谱-质谱测定。结果表明,方法检出限为0.3μg/L,定量限为0.5μg/L,线性范围为10-500μg/L。在2、4、8μg/L三个添加浓度水平上,莱克多巴胺的平均回收率为85%-115%,批内、批间相对标准偏差均小于10%。     

反相高效液相色谱法测定猪尿中的莱克多巴胺

本文对猪尿中莱克多巴胺的高效液相色谱检测方法进行了优化,猪尿碱化后用叔丁基甲基醚提取莱克多巴胺,用硅胶柱净化;以乙腈-水-冰乙酸-辛烷磺酸钠为流动相,反相高效液相色谱荧光检测法进行测定,激发波长226nm,发射波长305nm,方法的检测限为10μg/L,定量限为50μg/L,回收率大于70%,变异系数小于10%。     

高效液相色谱-串联质谱法测定莱芜香肠中3种β-受体激动剂残留

为建立一种快速测定莱芜香肠中盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等3种β-受体激动剂残留量的液质联用检测方法,将样品加入乙酸铵溶液,经β-葡糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶水解以及固相萃取柱净化后,以甲醇-0.1％甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行采集,外标法定量.结果显示,3种β-受体激...     

高效液相色谱-四极杆质谱联用测定猪尿液中莱克多巴胺残留

采用自动固相萃取装置和Agilent HP1100高效液相色谱-四极杆质谱联用仪,优化质谱分析条件,建立猪尿中莱克多巴胺残留检测方法.方法的线性范围为0.010～0.200μg/mL,相对标准偏差在3.4%～5.8%之间,回收率在74.5%～94.2%之间,具有较好的准确度和精密度.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪尿中7中α2-受体激动剂残留

建立了检测猪尿中7种α2-受体激动剂的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。试样经调节pH,乙酸乙酯提取并浓缩、净化后,经液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。结果表明,7种α2-受体激动剂在1~80μg /L浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数均大于0.99。7种目标化合物检测限为0.1 μg /L,定量限为0.3 μg /L。在1～20 μg /kg添加浓度范围内回收率为60%～110%,相对标准偏差小于15%。该方法方便快捷,定性准确,可为猪尿中该类兽药残留的日常监控提供方便、快捷的检测方法支持。     

高效液相色谱-串联质谱法研究猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺的残留及代谢规律

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测猪毛发中克仑特罗和莱克多巴胺残留的方法。猪毛发经1 mol/L氢氧化钠溶液水解、乙酸乙酯萃取、MCX固相萃取柱净化,流动相溶解后用HPLC-MS/MS进行检测。克仑特罗在1.9～463.2 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 0);回收率为83.3%～86.6%,相对标准偏差为6.7%～9.2%;检出限为0.3μg/kg,定量限为0.8μg/kg。莱克多巴胺在2.8～562.9 ng/mL浓度范围内线性关系良好(R2=0.999 2);回收率为83.4%～88.4%,相对标准偏差为7.2%～9.6%;检出限为0.4μg/kg,定量限为1.2μg/kg。应用该方法研究了克仑特罗、莱克多巴胺在猪毛发中的代谢规律并进行了猪毛发样品检测。结果喂药7 d至停药21 d猪毛发中均检出克仑特罗、莱克多巴胺残留;检测猪毛发样品25份,1份样品检出克仑特罗,残留量为58.68μg/kg。     

3种β2-受体激动剂荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究

本研究旨在制备性能优异的克伦特罗（clenbuterol,CLB）、莱克多巴胺（ractopamine,RAC）和沙丁胺醇（salbutamol,SAL）荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0 μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5 μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数（CV）均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。     

固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法快速测定猪尿中的赛庚啶

建立了猪尿中赛庚啶的固相萃取-超高效液相色谱串联质谱的测定方法。猪尿样品经酸化,混合型阳离子交换固相柱萃取后,以超高效液相色谱串联质谱测定,外标法定量。本方法的测定线性范围为0.2～5.0μg/L,在0.2、0.4、2.0μg/L低、中、高三个浓度的回收率为80%～120%,批内、批间精密度小于20%。本方法简便、快速、灵敏,经实际样品分析,适用于猪尿中赛庚啶的定量测定和确证。     

ELISA检测猪尿中β-受体激动剂类药物影响因素研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪尿中β-受体激动剂类药物(俗称"瘦肉精")时有假阳性出现。为摸清干扰因素,获得准确的检测结果,提高工作效率,选取生猪饲养中常用的替米考星预混剂(100g/kg)、复方磺胺氯哒嗪钠粉、氟苯尼考粉(100g/kg)、蛋氨酸铬、ZnSO4·H2O等3种兽药和2种饲料添加剂饲喂体重50kg~60kg的健康生长育肥猪。3d后采集尿样分别进行克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇检测。发现上述3种兽药对克伦特罗、莱克多巴胺检测无假阳性结果出现;对检测沙丁胺醇有不同程度的假阳性结果出现。上述2种饲料添加剂对检测克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇均无假阳性结果出现。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测动物肌肉组织中19种β-受体激动剂残留

建立了猪、牛和羊肌肉组织中吡布特罗、西马特罗、特步他林、齐帕特罗、沙丁胺醇、西布特罗、克伦塞罗、克伦丙罗、羟甲基克伦特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克伦特罗、妥布特罗、福莫特罗、溴布特罗、克伦潘特、班布特罗、马布特罗和马喷特罗等19种β-受体激动剂残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法.猪、牛和羊肌肉组织样品用乙腈和异丙醇（8：2,V/V）提取,加入NaC1、Na2SO4和MgSO4盐析去杂质.待测药物经BEH C18色谱柱分离,以0.1％甲酸乙腈溶液和0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱.同位素内标法和基质匹配标准溶液外标法定量.19种β-受体激动剂在系列浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数r2均大于0.99;19种药物在肌肉组织中的检测限为0.25 μg/kg,定量限为0.5μg/kg.从0.5、1和5μg/kg三个添加浓度检测结果可以看出,19种药物的回收率为73.7％ ～ 114.1％,批内批间相对标准偏差均小于20％.结果表明,该方法简便快捷、灵敏度高、定性准确,适用于该类药物残留的检测.     

“瘦肉精”现场快速检测的应用及分析

使用"瘦肉精"快速检测卡,对深圳市某定点屠宰场待宰猪、牛、羊进行"瘦肉精"现场快速检测,用盐酸克伦特罗检测卡检测猪尿82258份、用莱克多巴胺检测卡检测猪尿82258份、用沙丁胺醇检测卡检测猪尿82258份,用盐酸克伦特罗检测卡检测牛尿20561份、用莱克多巴胺检测卡检测牛尿20561份、用沙丁胺醇检测卡检测20561份,用盐酸克伦特罗检测卡检测羊尿6443份、用莱克多巴胺检测卡检测羊尿6443份、用沙丁胺醇检测卡检测羊尿6443份。检测结果:盐酸克伦特罗快速检测为阳性的猪尿有3份、牛尿96份;莱克多巴胺快速检测为阳性的猪尿有2份;沙丁胺醇快速检测为阳性的牛尿12份。对现场快速检测结果为阳性的尿样送第三方检测机构使用液相色谱-串联质谱法进行复检确证,确证结果:盐酸克伦特罗检测卡假阳性率为6%,莱克多巴胺检测卡假阳性率为0,沙丁胺醇检测卡假阳性率为8%。     

高效液相色谱-串联质谱法测定牛尿液中14种β-兴奋剂残留

建立了牛尿样品中莱克多巴胺、克伦特罗、沙丁胺醇和马布特罗等14种β-兴奋剂类药物多残留的液质联用确证方法。牛尿液样品经β-葡萄糖醛苷酶水解、pH 5.2的乙酸钠溶液提取、固相萃取柱净化富集后,在正离子模式下,采用多反应监测模式对β-兴奋剂进行定性和定量分析。该方法的定量限为0.5μg/L,在3个浓度水平进行验证试验,结果平均回收率为78.3%～117.3%,相对标准偏差为2.04%～13.70%。该方法简便、准确,各项技术指标满足国内外法规的要求,可用于牛尿液中β-受体激动剂类药物残留的确证检测。