长寿花嫩叶片的组织培养研究

以长寿花嫩叶片为外植体,进行了不同灭菌时间对长寿花嫩叶片再生能力的影响实验,不同培养基对长寿花嫩叶片愈伤组织诱导及不定芽生根的影响实验。实验结果表明,长寿花嫩叶片的最佳消毒方法为,75%酒精灭菌30 s,无菌水冲洗4次,再用0.1%升汞消毒12 m in,最后无菌水冲洗7次;长寿花嫩叶片的最佳分化培养基为MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.2 mg/L;长寿花不定芽在1/2MS+IBA 0.15 mg/L+6-BA 0.15 mg/L上生根效果最好。通过实验获得了长寿花嫩叶片的组培技术,为大规模生产长寿花提供了相关技术支撑。     

枣叶片离体再生体系研究进展

枣树高效、稳定离体叶片再生体系的建立是有关枣树细胞工程学和基因工程学研究的基础.枣叶片离体再生困难,再生频率低,这制约了枣树细胞工程学和基因工程学的发展.为建立高效离体叶片再生体系提供参考,对影响枣离体叶片再生植株的主要因素(如外植体、培养基、培养条件等因素)进行了分析,综述了已取得的研究成果,指出了今后研究的重点.     

华富苹果离体叶片再生的主要影响因素研究

以花药培养选育的富士品种"华富"组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间等因素对不定芽再生率的影响。结果表明:试管苗继代培养3～4代,取顶部嫩叶3～4片,剪除叶片边缘,叶片以近轴面接种到最佳诱导再生培养基MS+TDZ 2.0mg/L+IAA 0.75mg/L+蔗糖30g/L,pH值5.8,黑暗培养10～15d后,转入光照培养条件下,再生率达83.3%～86.7%。再生不定芽分化15～20d后转接到增殖培养基MS+BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到生根培养基1/2MS+IAA 1.0mg/L+蔗糖2%,15d后,生根率可达95.0%以上。     

橙花长寿花叶柄组织培养技术研究

以橙花长寿花叶柄作为外植体,对其进行不定芽诱导及增殖培养研究,结果表明:最适宜叶柄分化的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA2.0mg/L,最适合芽增殖的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.4mg/L,生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L,试管苗移栽基质中成活率达98%。     

葡萄柚品种哈路比叶片离体再生体系的优化

为给葡萄柚的大规模育苗提供方法,以葡萄柚品种哈路比的叶片为外植体,在MS培养基中添加不同浓度配比的激素,探索其离体再生的优化体系。试验结果如下:培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D愈伤组织诱导率最高为78.57%,愈伤组织呈黄绿色,结构疏松,长势良好;MS+3.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基激素浓度配比,分化率最高为48%,不定芽分化快,长势良好;培养基MS+2.0 mg/L IBA有利于诱导生根,生根率达60.74%。初步建立了葡萄柚哈路比的离体再生体系。     

悬铃木叶片再生体系的建立

以悬铃木为试验材料 ,系统地研究了激素浓度、叶片生理状态、光照条件等诸多因素对叶片再生的影响 ,建立了悬铃木叶片外植体的不定芽高频再生体系。研究结果表明 ,以顶部充分伸展的 4 0d叶龄的无菌苗叶片为外植体 ,再生效果最好 ,将此类叶片放在含 1 5mg·L- 1 6 -BA ,0 5mg·L- 1 IBA和 0 5mg·L- 1 KT的MS分化培养基上 ,暗培养 7d后转到光下培养 ,15d后便可见到不定芽不经过或经过很少的愈伤组织阶段 ,直接从叶片上分化产生 ,出现的高峰期在接种后的 2 0～ 30d ,芽分化率高达 98%以上。待小芽长至 1～ 2cm ,将其从叶片上切下 ,转到芽伸长培养基 (MS 0 3mg·L- 1 6 -BA 0 0 5mg·L- 1 NAA 30mg·L- 1 Ad)上使小芽长大成苗 ,最后移到生根培养基(1 2MS 0 1mg·L - 1NAA)上 ,最终得到完整的植株。该再生体系可作为基因转化的受体系统。     

白鹃梅叶片芽再生体系的构建

对白鹃梅叶片芽再生的适宜培养基和适宜条件进行研究的结果表明,2,4-D、NAA、IBA与6-BA组合均可诱导叶片愈伤,但以MS+1 mg/L 2,4-D +0.5mg/L6-BA为愈伤诱导培养基,MS+0.3 mg/L IBA+2mg/L 6-BA+0.1 mg/L TDZ为芽分化培养基,1/2MS+0.3 mg/L IBA为生根培养基最佳.     

枇杷成熟子叶及叶片不定芽再生研究

枇杷(Eriobotrya japonica)是原产我国的特色树种,我国南方主要果树之一,栽培面积已达10万hm2以上,产量已达30万t以上(林顺权等,2004),超过世界总产量的70%(刘国强等,2000),因此有关枇杷的研究主要集中在我国.研究分别采用茎尖(杨永清等,1983;万志刚等,2000)、胚(王家福等,2000)、胚乳(彭晓军等,2002)、原生质体(林顺权等,1994;1996;1997;Lin et al.,1995)等类型,其中茎尖培养较为成功,胚乳培养最高再生率为18.04%(彭晓军等,2002),胚培养多用于种质资源保存(王家福等,2000).枇杷离体再生目前存在外植体类型单一且再生率低下、培养难度较大等问题,国内外可供参考的研究也较少,建立枇杷离体再生体系难度较大,已成为限制枇杷现代生物技术育种的因素之一,现今未见任何有关枇杷基因转化的报导与此是分不开的.因此有必要进一步拓宽外植体类型,进行其再生系统研究.本研究利用成熟种子子叶及种子苗叶片,试图建立其再生体系.作者在枇杷组织培养中做了大量尝试,多数研究毫无进展,本文所报道的试验结果,实现了成熟子叶和叶片(即使是种子苗叶片)再生报告零的突破,为今后枇杷种子诱变育种获得再生植株以及遗传转化工作打下基础.     

中涡1号杨树叶片再生体系的建立

以中涡1号杨树叶片为材料,对其再生体系建立进行研究。结果表明:叶片的最佳消毒方法为使用75%的酒精消毒15s,0.1%的HgCl2消毒4min;适宜的诱导愈伤培养基为MS+6-BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L;适宜的诱导分化培养基为MS+KT0.1mg/L+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖25g/L;生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.6mg/L;无菌苗叶片最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L。     

中红杨离体叶片植株再生体系建立

以中红杨组培苗的叶片为试验材料,研究了基本培养基、植物生长调节物质浓度、外源添加物和光照条件对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:1)最适基本培养基为MS,最佳植物生长调节剂和外源添加物的组合为0.5 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖;2)暗培养有利于愈伤组织诱导,光照16 h·d^-1有利于不定芽的诱导,不定芽形成率可达83.3%;3)将叶片再生植株转接到MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA培养基中壮苗培养,在1/2 MS+0.2 mg·L^-1 IBA+20 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂培养基诱导生根,生根率96.4%,生根苗大田移栽成活率86.8%。     

水培条件对长寿花的影响

本试验以黄色重瓣长寿花(kalanchoe blossfeldiana)为材料,研究了花肥种类、换液时间、杀菌剂及它们共同作用对水培长寿花生长的影响,旨在研究出简易便于推广的长寿花水培方式方法。     

墨西哥落羽杉离体培养及再生体系的建立

以墨西哥落羽杉的幼苗为起始外植体,研究其离体培养及再生体系的建立.结果表明:幼苗在DCR BA0.5 mg·L-1 IBA 0.2 mg·L-1培养基上诱导分化效果最好,分化频率80%以上,平均每个外植体产芽2～5个;诱导的丛生芽转入DCR Gln 500 mg·L-1培养基中伸长效果最佳;生根培养基为3/4DCR 0.05?,生根率在75%以上.     

三倍体毛白杨组织培养再生系统的建立

通过对三倍体毛白杨组织培养技术的研究试验，采用增殖与生根同步进行的方法快繁，其年增殖次数可达8次，繁殖系数为5，培养出的组培苗质量好，移栽成活率高，而且可以降低苗木的生产成本，同时达到工作化生产指标要求。     

利用辣木茎段建立植株再生体系的研究

选择印度改良辣木的幼苗茎段,经外植体消毒后,进行了不定芽初代诱导、继代培养、生根诱导和生根苗移植试验,结果表明:最适不定芽初代诱导培养基为MS 6BA1mg/L 卡拉胶5g/L, 糖30g/L,继代培养基为MS 6BA0.4mg/L NAA0.2mg/L 卡拉胶5g/L 糖30g/L,生根培养基为1/2MS IBA0.4mg/L NAA0.2mg/L 卡拉胶7g/L 糖20g/L,最适的生根瓶苗移栽基质为黄心土40% 泥炭60%,并对微繁体系建立过程中继代苗的玻璃化、生根苗黄化及愈伤头过大、移栽过程中的管理等问题进行了讨论.     

重瓣大岩桐叶片离体培养高频植株再生体系的建立

以重瓣大岩桐叶片为外植体进行离体培养再生体系研究.结果表明:以新展开的嫩叶为外植体最好,芽分化率达96.67%;叶片通过脱分化和再分化直接产生不定芽.6-BA和NAA适宜的配比均可促进芽的诱导和增殖,IBA有利于根的生长;MS 6-BA 2.0mg/L NAA 0.2 mg/L培养基最适合芽的诱导,诱导率达96.55%;增殖培养以带芽愈伤团效果较好,在MS 6-BA 2.0mg/L NAA 0.2 mg/L LH 500 mg/L培养基中,增殖系数达18.在1/4MS IBA 0.5mg/L培养基中生根率高达100%.炼苗移栽成活率达92%.     

双色茉莉茎段离体培养再生植株的研究

以双色茉莉茎段为外植体,探讨外植体取材季节和部位、基本培养基种类、植物生长调节剂组合、活性炭等对茎段器官发生和植株再生的影响.结果表明:在4月和10月取材最好,其诱导率分别达到了92.780/和84%,污染率最低;1/2MS 0.01 mg/L NAA 3.0 mg/L BA 2.0 mg/L KT培养基最适合不定芽的诱导分化,不定芽分化率达到了88.34%;在继代增殖培养中,继代次数最好在6代以内,否则增殖率下降,MS 0.5mg/L IBA 3.0mg/LBA 0.2%活性炭培养基最适合不定芽的增殖(5.92)和大于2cm芽的分化(47.16%).不定芽可在1/2MS培养基中有效伸长,适宜的生根培养基为1/2MS 1.0 mg/L IBA 0.2 mg/L BA,生根率达到100%.     

核桃茎段器官离体再生培养

以核桃(Juglans regia)茎段为外植体,对核桃茎段器官离体再生培养技术进行研究。结果表明:4—5月采集的核桃茎段,通过系列表面消毒后,0.1%升汞灭菌10min,效果最佳。在附加1.0mg/L6-BA的DKW诱导培养基中,萌芽率为60%以上。通过SH+0.5mg/LBA+0.1mg/L IBA进行增殖培养,芽增值系数为4.32。以1/2SH+8.0mg/LIBA进行不定根诱导,生根率为63.18%,根数2~3条。