银杏组织培养与黄酮生产的研究：Ⅰ.银杏愈伤组织的诱导与褐变调…

以叶片为试材，对银杏愈伤组织的诱导，继代培养及褐变调控进行了研究。结果表明：１．银杏愈伤组织的诱导及继代培养均以ＭＴ附加ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ３．０ｍｇ／Ｌ的培养基效果最好；２．０．１％的植酸具有明显地促进愈伤组织生长，抑制褐变和，而活性炭和硫代硫酸钠效果最差；３．蔗糖浓度为５％的培养在，愈伤组织增长倍数最高，达１３．７７；４．继代培养４０－４５ｄ愈伤组织增长倍数达到最大值。     

银杏愈伤组织诱导与继代培养的研究

以银杏种子子叶,幼叶片,茎段为外植体,对银杏进行秀导及继代培育结果表明：不同外植体的愈组织的诱导能力有差异,其诱导率高 顺序依次是子叶,叶片,茎段愈伤组织质地,颜色,生长速度与基本培养基、外源激素及培养条件有很大关系。     

抗氧化剂对银杏愈伤组织褐变的影响

[目的]研究抗氧化剂对银杏愈伤组织褐变的影响。[方法]以银杏的子叶为外植体,以MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 1.5mg/L为基本培养基,对外植体进行愈伤组织的诱导培养,研究银杏愈伤组织继代过程中,不同浓度Vc、柠檬酸、PA 3种抗氧化剂对愈伤组织培养褐变的影响。抗氧化剂对褐变的抑制效果以愈伤组织中叶绿素的含量来表示。[结果]3种抗氧化剂对抑制褐变的效果为:Vc>柠檬酸>PA;筛选出最佳抗氧化剂及其浓度为Vc 15 mg/L。[结论]抗氧化剂的类型及浓度在抑制银杏愈伤组织褐化过程中起关键作用。     

椰子愈伤组织诱导与防褐变技术研究

利用椰子成熟胚和幼花序研究了愈伤组织诱导和控制褐变的方法。结果表明:椰子幼花序比成熟胚诱导愈伤组织的速度快且效果好。在幼花序愈伤组织的诱导中,以佛焰苞长度为16.5 cm的幼花序诱导效果最好。在Y3培养基中添加浓度为25 mg/L的2,4-D时,愈伤组织的诱导率最高。加入2.5 g/L活性炭和5 g/L的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对于培养物褐变有良好的抑制作用。     

鱼腥草愈伤组织诱导及褐化抑制的研究

以鱼腥草叶片为外植体,比较不同植物生长调节剂、抗褐化剂和光照条件对愈伤诱导率及褐化率的影响.结果表明,MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1有利于鱼腥草愈伤组织的诱导;抗坏血酸(Vc)、聚乙烯吡哆烷酮(PVP)对抑制外植体褐变均有作用,其中,PVP效果最佳,最适浓度为2 g·L-1.光照条件对鱼腥草褐变的影响较大,培养初期暗培养,能显著地抑制外植体的褐变.     

乌头愈伤组织诱导中抗褐化剂的筛选

以乌头的叶片为外植体,在愈伤组织的诱导阶段,以低无机盐浓度1/2MS为基本培养基,加入KT 1mg/L、2,4-D 1mg/L、NAA0.1mg/L,考察了不同浓度配比的PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、AC(活性碳)、Vc(维生素C)对乌头愈伤组织诱导的作用效果及褐化率。结果表明,0.04%的PVP在乌头愈伤组织诱导阶段为最佳抗褐化剂。     

萝卜花药愈伤组织诱导及褐变因素初探

花药培养愈伤组织的培养一直是萝卜组织培养中的难点,在加上花药组织容易发生褐变,萝卜的花药培养比较难以成功.因此为了解决上述问题,该文以萝卜为试材,研究了不同激素配比、供体基因型、光照与温度以及蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导的影响,同时比较研究了花药愈伤组织褐变过程中几种抗氧化酶活性变化.结果如下:P403在2.0mg/L 2,4-D 1.0mg/L 6-BA 2.0mg/L KT的MS培养基中愈伤组织的诱导率最高,愈伤组织开始褐化的时间晚.抗氧化酶的活性较高;同时进行低温预处理、高温预培养和初期暗培养的协同效果较任何一种单独处理好;6%的蔗糖浓度有利于愈伤组织的诱导.     

秋茄叶片愈伤组织褐变研究

[目的]建立红树秋茄的愈伤组织体系,为实现秋茄种质资源离体保存及其多样性研究提供科学依据.[方法]以红树林秋茄幼嫩叶片作为外植体,研究2,4-D和6-BA不同浓度配比下秋茄叶片愈伤组织的诱导率,以及不同激素水平对秋茄叶片和愈伤组织褐变情况的影响.[结果]2,4-D对秋茄叶片愈伤组织形成是必需的,添加一定量的6-BA有助于提高愈伤组织诱导率,最佳激素配比为MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA,诱导率最高,达35.0％;秋茄叶片和愈伤组织均有褐变现象发生,21 d内,褐变率达33.3％～45.0％.[结论]初步明确了秋茄叶片愈伤组织的诱导条件及褐变影响因素.     

福建柏愈伤组织诱导与抗褐化研究

【目的】比较不同抗褐化剂减轻福建柏组织培养过程中褐化现象的效果,以提高福建柏愈伤组织培养的增殖分化能力。【方法】以福建柏鳞叶和茎段为外植体,通过单因素试验,研究0.0～2.5 mg/L NAA和2,4 D及0.0～3.0 mg/L IBA对愈伤组织诱导率与生长状态的影响;以福建柏茎段为外植体,采用单因素和多因素组合试验,研究100～2 000 mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、100～1 000 mg/L活性炭（AC）和V_C以及不同质量浓度VC与AC组合,对愈伤组织污染率、死亡或褐化率及诱导率的影响;以诱导的愈伤组织为材料,采用单因素试验,研究100～1 000 mg/L PVPP、100～300 mg/L V_C、200～1 000 mg/L AC、30～100 mg/L V_B对愈伤组织增殖生长量、增殖率、褐化率及PPO、POD活性的影响。【结果】① 不同质量浓度NAA、2,4-D和IBA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率总体高于茎段,各生长素对福建柏鳞叶和茎段愈伤组织的诱导率均表现为NAA＞IBA＞2,4-D,所有处理中以1.0 mg/L NAA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率最高,为83.33%;以0.5 mg/L NAA对茎段愈伤组织的诱导率最高,为61.11%;愈伤组织生长状态和抗褐化效果优劣依次为NAA、2,4-D、IBA。②仅100 mg/L V_C+200 mg/L AC处理的愈伤组织污染率低于不添加抗褐化剂的对照;死亡或褐化率仅500 mg/L PVPP处理与对照相同,均为0.00%,其余处理均高于对照;诱导率则以不同质量浓度PVPP、1 000 mg/L VC、100 mg/L V_C＋200 mg/L AC处理与对照相当或高于对照,其余处理均低于对照;愈伤组织生长状态总体以PVPP处理表现最优。③仅300 mg/L PVPP、200和400 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率高于对照,增殖生长量仅100和200 mg/L PVPP、100 mg/L V_C、200 mg/L AC处理高于对照;所有处理中以200 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率和增殖生长量最高,分别为70.00%和10.07 g;各抗褐化剂对福建柏愈伤组织增殖效果的优劣依次为PVPP、AC、V_C、V_B。④不同抗褐化剂处理的愈伤组织褐变率均呈先增加后趋于稳定的变化趋势,但变化幅度存在显著差异;各抗褐化剂的抗褐化效果优劣依次为AC、PVPP、V_C、V_B。⑤不同质量浓度PVPP、V_C、AC处理对福建柏愈伤组织PPO和POD活性的影响具有显著差异,但各处理PPO活性均与对照无显著差异,POD活性以500 mg/L AC处理显著高于其他处理。【结论】在福建柏愈伤组织诱导阶段,愈伤组织的褐化与生长素种类有关,生长素NAA、2,4-D适用于福建柏愈伤组织的诱导,IBA诱导的愈伤组织容易褐化,添加适量抗褐化剂能减少愈伤组织的褐化情况。在愈伤组织增殖培养阶段,适宜质量浓度的PVPP、AC作为抗褐化剂能有效减缓福建柏愈伤组织的褐化进程,保持愈伤组织的正常增殖生长,但高质量浓度的抗褐化剂会抑制愈伤组织的生长。     

水稻愈伤组织发生褐变的影响因素研究

本文研究了水稻愈伤组织诱导过程中与褐变发生有关的五种影响因系。结果表明,水稻基因型的影响在所研究的诸因系中居首位。水稻不同基因型间愈伤组织发生褐变的褐化率差异很大,品种间最低与最高褐化率可相差6.67倍。培养基的不同pH值对愈伤组织褐变发生也有明显的影响。在灭菌前培养基pH6.0～6.4(灭菌后pH5.6～6.0)范围内,愈伤组织的褐化率最低,而当大于或小于此pH范围时,褐化率则明显上升。培养持续期在1～3周内,愈伤组织的褐化率与褐化指数均随培养期延长而增加。用水预先浸胚处理可增加愈伤组织的诱导率和在一定程度上降低其褐化率。紫外光预先照射稻胚处理也会增加愈伤组织的褐化率,但其影响程度基因型间有很大差异。     

枣树组织培养养愈伤组织诱导的研究

将枣树不同品种的不同器官及其部位的外植体接种含有不同激素的培养基中培养，对其愈伤组织诱导条件进行了条件，结果表明，灌阳长枣（中国）和普通枣（日本）为较适宜组培的品种，胚，嫩枝顶部，芽为适宜组培的器官；以ＭＳ（１／２ＮＯ＾－３）的作基本培养基，并添加３μｍｏｌ左右Ｚｅａｔｉｎ和约３０μｍｏｌＮＡＡ或ＩＡＡ可以获得数量较多，质量较好的愈伤组织，叶所产生的愈伤组织颜色较深，数量也较少，并在初代培养时易产     

激素对黑松愈伤组织褐变和增殖的作用

用成熟胚接种于 1 2MS +2 ,4 -D10 .0mg L +KT4 .0mg L +6 -BA4 .0mg L的培养基中 ,在 2 7± 1℃黑暗条件下诱导 ,成功地诱导出黑松和马尾松的愈伤组织 ,且诱导率分别高达 89%和 90 %。附加激素对黑松愈伤组织褐变和增殖作用研究的结果表明 ,在原有培养基[8] 的基础上 ,附加GA30 .2mg L能促进愈伤组织的生长 ,而附加0 .6mg L或 1.0mg L的GA3能明显改善褐变程度 ;加入LH能提高愈伤组织的增殖倍数 ,且当加入LH 10 0mg L或5 0 0mg L时 ,可降低褐变指数 ;加入 6 -BA既不能降低褐变度 ,也不能提高增殖率 ;2 ,4 -D用量为 1.0mg L时 ,褐变指数为 0 ,这是所试培养基配方中最低的 ,且其增殖倍数在该组试验中最高。结合褐变指数和增殖倍数两项指标 ,培养基组成以 1 2MS +NAA 0 .5mg L +IBA 0 .1mg L +GA31.0mg L +LH 10 0mg L +2 ,4 -D 1.0mg L最佳。使用该配方继代 6代诱导出的黑松愈伤组织没有明显褐变 ,10d增殖倍数保持在 1.5以上     

银杏不同组织器官及愈伤组织培养中端粒酶活性测定

为了研究端粒酶在植物细胞分裂中的作用,探讨端粒酶活性与细胞分裂能力的相关性,本研究以银杏为材料,通过改良的TRAP 法分别测定了银杏不同组织器官(种胚、叶片、小孢子、愈伤组织)的端粒酶活性,研究发现具有旺盛分裂能力的愈伤组织具有较高的端粒酶活性。同时以银杏的成熟种胚为材料,采用培养基MS + 1.0 mg/L6-BA +2.0 mg/L NAA 诱导出银杏的愈伤组织并采用培养基MS + 1.0 mg/L 6-BA + 2.0 mg/L NAA + 0.3 mg/L 2,4-D +0.2%活性炭进行继代,检测不同代银杏愈伤组织的端粒酶活性,发现不同代愈伤组织均具有较高端粒酶活性。初代愈伤组织的端粒酶活性较高,但愈伤组织继代初期端粒酶活性降低,而后缓慢升高,恢复并超越初代愈伤组织水平后,端粒酶活性处于一个相对稳定的状态,表明愈伤组织继代培养后期细胞具有旺盛且稳定的分裂增殖能力。      

珍稀濒危植物掌叶木愈伤组织诱导与褐化抑制研究

以掌叶木[Handeliodendron bodinieri (Lévl.) Rehd.]的叶片、茎段为外植体,在含有不同植物激素的培养基上诱导愈伤组织。结果表明,最佳诱导培养基为MS+2,4-D1.0mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L,最佳增殖培养基为3/4B5+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+VC0.1%。2,4-D与NAA联合使用利于诱导率的提高;适量的6-BA、KT利于愈伤组织质量的改善;6-BA加KT的双因子组合没有单因子的诱导效果显著;采用B5培养基代替MS培养基,且将大量元素降为3/4,外加VC0.1%,并进行暗培养,能有效抑制愈伤组织的褐化。     

香蕉愈伤组织诱导培养中褐化抑制剂的筛选

为解决香蕉愈伤组织诱导培养过程中的外植体的褐化现象,分别用AgNO3(10,20 mg·L-1),AC(1,2,3 g·L-1),PVP(1,2 g·L-1),VitC(100,200 mg·L-1)等防褐化剂,对香蕉的愈伤组织诱导进行防褐化研究。结果表明:外植体培养10 d后,所有防褐化处理实验组的褐化率均低于对照组,说明在愈伤组织诱导的早期,不同的防褐化剂均有一定的防褐化效果;随着培养时间延长,不同的防褐化处理逐渐出现差异,在愈伤组织诱导培养40 d后,活性炭的防褐化效果最好,其中1 g·L-1活性炭的褐化率仅为20%,效果最佳。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

山药茎段愈伤组织褐变与外源药物抑制效应的研究

以山药节间部茎段愈伤组织及其分化出的组培苗为外植体.在外源药物预处理、培养基中添加抗氧化剂及不同培养基质等方面进行试验.结果表明,将茎段外植体在接种前用100mg/L Vc溶液浸泡30min,褐变现象能得到明显抑制;MS培养基中添加150mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)能有效抑制茎段分化过程中的褐变;在山药组培苗的快繁阶段采用液体基质培养方式能显著降低褐变程度,提高组培苗成活率.     

金钱树愈伤组织的诱导及其褐化的防止

试验结果表明,采用培养基MS+NAA1mg/L+6-BA2mg/L,对金钱树的老熟叶片进行培养,35天后其愈伤组织的诱导率高达80%。在继代培养中,采用液体培养对防止愈伤组织的褐化效果最佳,在培养基中添加1g/L的活性炭,采用N6培养基而不用MS培养基,对防止愈伤组织的褐化也有较好的效果。     

连香树愈伤组织诱导研究

[目的]为珍稀濒危树种连香树寻求组培快繁方法。[方法]以1/4MS、1/2MS、MS添加不同浓度的NAA、KT、GA3为培养基,以连香树当年生带芽茎段为外植体进行愈伤组织诱导。[结果]以4月份采集的带芽茎段作为外植体愈伤组织诱导效果相对较好;在1/4MS+NAA 1.0 mg/L+KT 0.2 mg/L+GA31.00 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果相对较好,但总体而言愈伤组织诱导率较低。[结论]连香树愈伤组织诱导具有可行性,需进一步研究。     

马尾树愈伤组织的诱导与褐化控制研究

[目的]为保护和开发利用马尾树资源提供科学的理论依据。[方法]以MS为基本培养基,用IBA和6-BA以及不同浓度配比的抗褐化剂AC、VC和Na2S2O3诱导马尾树愈伤组织。[结果]在诱导过程中马尾树愈伤组织的褐化现象很突出,接种几小时后外植体周围即出现褐化物质。以冬芽和春芽为外植体时,这些抗褐化剂均不起作用。以嫩叶为外植体时,抗褐化剂AC起显著作用。3种抗褐化剂组合使用时,仅AC的作用显著,而VC和Na2S2O3的作用不显著。仅在以嫩叶为外植体的培养中诱导出了愈伤组织。MS+IBA 1.5mg/L+6-BA2.5 mg/L+AC3.0 g/L最适于马尾树嫩叶愈伤组织的诱导。[结论]马尾树的嫩叶可用于诱导愈伤组织,这为马尾树的细胞培养奠定了基础。