肌肉生成抑制素基因的研究

动物肌肉生成抑制素(Myostatin,MSTN)是Mcpherron等研究小鼠转化生长因子-β(TGF-β)超家族时发现的一种新的生长因子。当时命名为生长分化因子-β(GDF-β),后经研究发现,其对骨骼肌的生长具有负调控作用,因此改名为肌肉生成抑制素[1-3]。该基因编码的蛋白质对骨骼肌有负调控作用,动物缺乏MSTN时出现肌肉增大,骨骼肌肌群分布广,而且不增生脂肪等现象。MSTN主要在胚胎期的骨骼肌中表达,它的缺失使一些动物表现双肌性状[4-7]。1MSTN基因的发现及组织分布Mcpherron等(1997)根据TGF-β超家族的保守区设计一对简并引物,通过PCR扩增…     

牛肌肉生长抑制素基因的研究进展

肌肉生长抑制素,属TGF-β超家族,是一种骨骼肌生长发育的负调控因子。其生物活性的丧失或受到抑制,会导致骨骼肌增生从而引起动物肌肉的过度发育,表现为双肌性状。本文综述了MSTN基因的发现、结构特点、作用机制、在牛科物种中的研究进展及其应用前景。     

肌生成抑素的研究现状

肌生成抑素(Myostatin,MSTN)是1997年发现的一种新的生长因子,是转化生长因子β(TGF-β)超家族的新成员,经研究发现其对骨骼肌的生长具有负调控作用,因此科学工作者将其命名为肌生成抑素。本文将对MSTN基因的定位、结构、功能、表达等方面进行阐述。1MSTN基因的定位和结构SongstegardTS.等对猪的MSTN基因进行染色体遗传图和物理图进行了研究,结果表明该基因位于15q2.3。到目前为止,已经至少对人、牛、猪的肌生成抑素基因的染色体定位进行了研究。LeeSJ.报道猪MSTNcDNA全部序列为1756bp,MSTN基因为6015bp,包括两个内含子和三…     

肌肉生长抑制素在动物生产中的应用

肌肉生长抑制素(MSTN)属于TGF-β超家族成员,是骨骼肌生长发育的负调节因子。MSTN作为胞外信号分子可与成肌细胞膜上的受体结合引起受体自身的磷酸化,启动细胞内一系列信号传导途径,作用于生肌决定因子(MyoD)靶基因的调控区,调节肌肉组成蛋白基因的表达,从而对骨骼肌的生长发育进行调控。     

牛肌生成抑制素功能基因的克隆与原核表达

Mcpherron等在研究转化生长因子-β(TGF-β)超家族时,用该家族的蛋白质同源保守序列设计引物,以小鼠基因组DNA为模板,应用PCR扩增得到一种新的生长因子,命名为生长分化因子-8(GDF-8)。GDF-8基因突变的牛为双肌牛,MSTN基因发生突变,会引起肌肉过度发育,肌纤维数增加或肌纤维直径     

肌肉生长抑制素对骨骼肌作用研究进展

肌肉生长抑制素(MSTN)是转化生长因子β超家族的成员之一,又称生长分化因子8。MSTN主要在骨骼肌中广泛表达,并可在心肌、脂肪、乳腺等多个组织中表达,其作用主要体现在抑制骨骼肌生长发育、诱发肌萎缩等方面。MSTN可以通过多种途径协同作用于骨骼肌,即通过激活TGF-β、p38MAPK、ERK1/2、JNK等信号途径以及抑制IGF-AKT、Wnt信号途径来抑制肌细胞增殖分化;通过调控AKT途径、泛素-蛋白水解酶系统、自噬溶酶体系统来影响骨骼肌蛋白的合成与分解;MSTN还参与了与骨骼肌生成相关的脂肪代谢及骨形成等生理活动。论文重点阐述MSTN在肌细胞增殖分化、肌蛋白合成与分解、脂肪代谢、骨骼发育等方面的作用机制,并对其应用前景进行展望,为相关科学研究提供参考。     

肌肉生成抑制素基因的研究进展

肌肉生成抑制素(MSTN)属TGF-β超家族成员之一,主要分布在骨骼肌,对肌肉生长起负调控作用,MSTN的研究在畜牧业及医学领域具有重要意义.作者就MSTN的发现、分布、结构、生物学功能、作用机制及影响MSTN的因子如生长激素、生长分化因子11、T-cap蛋白、卵泡发育素、类胰岛素高亲和性结合蛋白、生肌决定因子等进行了综述,并展望了MSTN研究的发展趋势和应用前景.     

海兰鸡MSTN基因的表达检测

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是1997年McPherron等根据TGF—β超家族的保守区设计一对简并引物,通过PCR扩增而发现的骨骼肌特异性因子,属于转化生长因子(transforming growth factor beta,TGF—β)超家族成员之一,又名生长分化因子8(growth and differentiation factor 8,GDF-8)。2001年,由Michel Georges领导的研究组,历经十余年的研究,发现比利时蓝牛(Belginm Blue)的双肌性状是由于MSTN基因突变造成的。     

肌肉生长抑制素基因(MSTN)的研究进展及应用前景

肌肉生长抑制素（myostatin）又称GDF-8（growth differentiation factor-8）,属TGF-β（transforming growth factorbeta,转化生长因子）超家族。肌肉生长抑制素基因（myostatin,MSTN）是负向调控肌细胞生长发育,是在1997年美国JohnHopking大学医学院的研究小组发现的。     

Myostatin基因的克隆及免疫载体构建

肌肉生成抑制素基因(Myostatin,MSTN),又称GDF-8,是TGF-β超家族中GDF亚族的成员之一,其对肌肉的生长发育具有负调控作用,该基因的缺失或突变可以造成肌纤维数目的增多或直径的增大。本试验根据Gen Bank已发表的牛的MSTN基因序列,设计特异性引物,利用巢式PCR方法,扩增MSTN基因的编码区。为构建具有高免疫原性的免疫载体,将MSTN基因插入到HBs Ag基因S区的3'末端,得到HBs Ag与MSTN基因相连接的融合表达质粒。经酶切和测序鉴定表明,重组质粒p EF1α-DsRed-S-MSTN构建成功,为后续的细胞和动物实验奠定基础。     

肌抑素对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响

本研究旨在揭示肌抑素（MSTN）与基质金属蛋白酶（MMPs）的调控关系,探明MSTN对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响。对MSTN单等位基因敲除猪背膘组织进行转录组测序分析,复苏前期制备的MSTN基因敲除PK15细胞系：单等位基因敲除的PK3108细胞系和双等位基因敲除的L18细胞系,通过实时荧光定量PCR和Wesrern blotting分别检测PK15、PK3108和L18细胞系中MSTN、MMP-2/7/9基因的mRNA和蛋白表达水平。结果发现,与野生型猪相比,MSTN单等位基因敲除猪背膘组织转录因子C/EBPδ、MMP-2/7基因mRNA表达量均极显著下调（P < 0.01）;细胞外基质中纤连蛋白（FN）和层连接蛋白（LN）含量均极显著增加（P < 0.01）。复苏的PK3108和L18细胞呈现绿色荧光。实时荧光定量PCR结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的mRNA表达量均极显著低于PK15细胞（P < 0.01）;Western blotting结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的蛋白表达量均明显低于PK15细胞。本研究结果表明,在MSTN基因敲除的PK15细胞中,MSTN功能缺失能显著降低MMP-2/7/9的表达,且MMP-2/7/9蛋白表达降低的趋势与MSTN蛋白表达的趋势相一致。     

三穗鸭肌肉生长抑制素基因的生物信息学分析

采用PCR产物直接测序的方法获得肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）基因的编码区序列,并运用生物信息学方法对该基因编码蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、二级结构、三级结构和功能结构域进行分析。结果表明,三穗鸭MSTN蛋白是一个疏水性不稳定蛋白,作为信号肽的可能性很大;含有22个α螺旋、26个β折叠、26个T转角、20个无规则卷曲,有1个跨膜结构,具有TGF-β的主要结构。研究结果为MSTN基因的进一步研究提供参考。     

Polymorphisms of MSTN Gene and Its Association with Meat Quality Traits in Chishui Black-bone Chicken

This study was aimed to analyze the association of myostatin (MSTN) gene polymorphisms with meat quality traits in Chishui Black-bone chicken. The DNA pooling was constructed and the direct sequencing technology of PCR product was used to detect the single nucleotide polymorphism (SNP) of MSTN gene. The results showed that C324T were detected in exon 1 of MSTN gene in Chishui Black-bone chicken. However, there was not found SNP site in exon 2 and exon 3 of MSTN gene. The C324T site was devised into three genotypes of CC, CT and TT. The association relationships between the genotype of MSTN gene and meat quality traits revealed that chest muscle pH and leg muscle pH value of Chishui Black-bone chicken with CT genotype were significantly higher than that of CC and TT genotypes (P<0.05), the shear force of CT genotype was significantly higher than that of TT genotype (P<0.05), there was no significant difference in other meat quality traits (P>0.05). This results suggested that the pH value and shear force of MSTN gene had a larger genetic effect in Black-bone chicken,MSTN gene was one of genes which could control the preliminary inference, might affect the pH value and shear force or with the main gene chain in Black-bone chicken, and could be used as pH value and shear force of molecular markers of Black-bone chicken.     

赤水乌骨鸡肌肉生长抑制素基因多态性及其与肉质性状的关联分析

本研究旨在探讨肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）基因多态性及其与赤水乌骨鸡肉质的关联性。采用DNA池、PCR产物直接测序方法对赤水乌骨鸡MSTN基因的外显子进行多态性检测,结果发现,在赤水乌骨鸡MSTN基因的外显子1中检测到1个SNP位点C324T,表现为3种基因型,分别命名为CC、CT和TT,而在MSTN基因外显子2、3上没有发现多态位点。对基因型与肉质性状关联分析显示,CT基因型胸肌、腿肌pH均显著高于CC和TT基因型（P<0.05）,CT基因型剪切力显著高于TT基因型（P<0.05）,其他肉质性状在不同基因型间差异均不显著（P>0.05）。此结果提示,MSTN基因对赤水乌骨鸡pH和剪切力具有较大的遗传效应,初步推断 MSTN是控制这一性状的众多基因之一,且可能是影响赤水乌骨鸡pH和剪切力的一个主效基因或与主效基因相连锁,可作为选育赤水乌骨鸡pH和剪切力的分子标记,用于标记辅助选择意义重大。     

大骨鸡MSTN基因的表达检测

以大骨鸡为试材,采用RT-PCR法检测了MSTN基因在大骨鸡不同器官中的表达情况。结果表明,MSTN基因在大骨鸡骨骼肌中表达水平较高,在心肌、肾脏、脑、肠、舌中也有微量表达,但在肺、肝脏中未检测出MSTN mRNA,而且在14日龄时表达水平高于35和56日龄。     

MSTN基因在不同月龄滩羊不同肌肉组织中的定量表达研究

[目的]研究MS删基因在不同月龄滩羊不同肌肉组织中的表达差异。[方法]根据GenBank已发表的绵羊MSTN基因序列（NM001009428．1）设计l对引物,以滩羊肌肉组织cDNA为模板,采用实时荧光定量PCR技术（Real—timePCR）检测MS7Yv基因在不同月龄滩羊的背最长肌、腿肌和胸肌中的表达量。[结果]MS驯基因在背最长肌中的表达量最高,其次为胸肌,腿肌中的表达量最低;随着月龄的增加,滩羊3种肌肉组织中的表达量均呈先升高、后降低、再升高的趋势。[结论]不同月龄滩羊肌肉中的MSTNmRNA表达量存在差异．这些差异可能会影响其生长发育和产肉性能等指标。     

干扰MSTN对牛骨骼肌卫星细胞增殖分化的影响

为研究肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响,本试验以牛骨骼肌卫星细胞体外诱导成肌分化模型为对象,以前期设计合成3个干扰RNA（si-MSTN-1、si-MSTN-2、si-MSTN-3）并对其进行干扰效果筛选为基础,将干扰效果极显著的si-MSTN-2（si-MSTN）转染牛骨骼肌卫星细胞,通过EdU染色法检测干扰MSTN对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响;进一步对干扰MSTN的牛骨骼肌卫星细胞进行体外成肌诱导分化,通过肌管形成状态和分化标志因子综合分析干扰MSTN对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响：首先通过显微镜观察牛骨骼肌卫星细胞分化时期的肌管形成状态,然后利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测牛骨骼肌卫星细胞分化标志因子MyoG和MyHC在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果显示,干扰MSTN后,牛骨骼肌卫星细胞中EdU阳性细胞率极显著增加（P < 0.01）,说明下调MSTN表达极显著促进了牛骨骼肌卫星细胞的增殖;牛骨骼肌卫星细胞诱导分化后形成的肌管数量和直径均呈现增大趋势,牛骨骼肌卫星细胞成肌分化标志因子MyHC在mRNA和蛋白水平的表达均极显著高于对照组（P < 0.01）,说明下调MSTN表达能够促进牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。本研究结果表明,干扰MSTN可以显著促进牛骨骼肌卫星细胞的增殖及成肌分化过程。本试验结果为进一步开展MSTN对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的调控机制研究提供了参考。     

不同杂交组合与营养水平对牛肌肉中MSTN基因表达的影响

以夏洛莱杂交牛（夏杂牛）和利木赞杂交牛（利杂牛）为研究对象,旨在明确营养水平与不同杂交组合对肉牛半腱肌中肌生成抑制素（MSTN）基因表达量的影响及MSTN基因表达量与产肉率的关系。将夏杂牛和利杂牛随机分成3组,分别饲喂以高、中、低3种营养水平的日粮,饲喂10个月后,屠宰采样,利用实时定量荧光PCR技术测定半腱肌中MSTN基因相对表达量,并对半腱肌的产肉率与MSTN mRNA相对表达量作了相关分析。结果表明,低营养和中营养条件下,夏杂牛的半腱肌中MSTN表达量极显著高于利杂牛（P〈0.01）,而高营养条件下,两者差异不显著（P〉0.05）。对于利杂牛,中营养组牛半腱肌中MSTN基因表达量极显著高于低营养组和高营养组（P〈0.01）,而低营养组和高营养组间差异不显著（P〉0.05）。对于夏杂牛,低营养组MSTN基因的表达量显著高于中营养组和高营养组（P〈0.01）,而中营养组MSTN基因的表达量也显著高于高营养组（P〈0.01）,且高营养水平下的2种杂交组合牛半腱肌的产肉率都与MSTN mRNA表达量成强负相关。研究结果表明不同杂交组合和营养水平对牛MSTN基因在半腱肌中的表达均有显著影响,对于2个杂交组合,高营养水平下牛半腱肌MSTN基因的表达量均显著低于低营养水平下的各组试验牛,且高营养条件下,MSTN基因表达量和产肉率之间存在着强负相关。     

鲁西黄牛MSTN基因上游序列多态性对转录表达的影响

肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）基因是转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）超家族的新成员。为了研究鲁西黄牛MSTN基因上游序列多态性与转录表达的关系,本试验提取鲁西黄牛腿肌组织细胞的基因组,扩增出MSTN基因上游序列,构建进化树并通过基因测序确定其上游序列中存在单核苷酸多态位点,多态位点位于起始密码子上游805 bp处。构建表达载体,在体外对C2C12细胞进行转染,从而验证MSTN基因上游序列多态位点对转录的影响。结果显示,MSTN基因上游序列中单个核苷酸的改变会影响其下游基因的表达水平。推测在体内MSTN基因上游序列中单核苷酸多态性能够影响基因的转录活性,在调节基因转录的过程中起着重要作用。