昆明鼠卵母细胞的孤雌发育及对其干扰核移植试验的预防措施

本文着重研究了在昆明鼠细胞核移植过程中，卵母细胞孤雌发育的激活原因、形成过程，并提出了一些防止其干扰细胞核移植的措施。     

提高猪核移植效率的研究进展

哺乳动物体细胞核移植(克隆)经过多年的发展，获得了多种后代。猪的核移植研究意义重大，应用价值颇高，是当今生物技术的热点研究之一。尽管猪核移植已取得了很大进展，但移植效率依然很低。本文就目前已有的资料，综述了提高猪体细胞核移植效率的各项技术环节的研究进展。     

卵母细胞核因子促进核移植四倍体胚胎早期发育研究

研究旨在探讨猪卵母细胞核因子在重编程过程中发挥的作用。将体细胞引入未去核的MⅡ期卵母细胞中,构建体细胞核与卵母细胞核共存的核移植四倍体胚胎。通过分析核移植四倍体胚胎的早期发育情况探讨卵母细胞核因子对核移植四倍体胚胎早期发育的影响。结果显示,核移植四倍体胚胎、孤雌二倍体胚胎及孤雌单倍体胚胎这3组胚胎的卵裂率极显著高于核移植二倍体胚胎（P<0.01）,且核移植四倍体囊胚率及总细胞数也极显著高于核移植二倍体囊胚（P<0.01）。与通过标准核移植程序构建的核移植二倍体胚胎相比,核移植四倍体胚胎具有更强的发育能力。本研究建立了一个体细胞核与完整卵母细胞核因子物质共存的四倍体胚胎模型,有助于研究供体核与卵母细胞核之间的联系,为研究核因子在重编程过程中发挥的作用提供了平台。     

哺乳动物克隆技术研究进展及前景

本文简要回顾了动物克隆技术研究的历史,重点介绍了当代哺乳动物细胞核移植方法和进展情况、体细胞核移植的应用前景。     

分子育种手段之微卫星技术的应用与前景

在国内，1995年，西北农业大学窦忠英等用胚胎细胞核移植产生了6头猪。1996年，湖北农科院魏庆信等得到了胚胎细胞核移植猪。1997年赵浩斌等和2000年Li等分别获得猪胚细胞核移植后代1998年，东北农业大学的李光鹏等把猪胚胎的细胞核通过电融合移植到去核的体内和体外成熟卵母细胞中，出生了2头克隆猪。2003年，西北农林科技大学冯秀亮等得到了人体细胞和猪卵母细胞异种核移植囊胚。     

卵母细胞去核方法及其对卵母细胞发育的影响

自1938年Spermann为研究不同发育时期细胞核的发育能力而提出的细胞核移植构想以来,核移植技术已经取得了极大的成就,特别是1997年由英国科学家Wilmut等经体细胞核移植克隆出绵羊"多莉"而带来的克隆风暴更是以迅猛之势席卷全球。     

奶牛卵母细胞化学激活与电激活比较研究

目前,体细胞核移植技术已在牛、羊、小鼠、猪等动物上获得成功, 然而该技术还存在许多问题,如核移植成功率普遍比较低、重构胚的发育率低、畸形胚的比率高等.影响这些问题的因素很多,其中就包括受体卵母细胞的体外培养成熟率和成熟质量[1]以及激活率[2]低下,本研究的目的就是探索出一套有效的牛卵母细胞体外成熟和激活的方法,为进一步的胚胎工程技术研究提供实验基础.     

猪卵巢卵母细胞体外成熟体系研究进展

猪卵母细胞体外成熟培养中存在的问题是如何进一步提高卵母细胞的采集效率、急待解决的问题是成熟率不高和成熟质量差的问题。综合论述了猪体外受精技术所包含的猪卵母细胞体外成熟(IVM)培养和受精卵的体外培养两项密切相关的技术与方法，以及完善现有的成熟体系及成熟过程。     

牛卵母细胞体外成熟的培养体系及影响因素研究

目前牛卵母细胞体外成熟培养（IVM）技术体系已经建立起来，并在不断的探索与完善当中。国内外的研究热点主要集中在各种因素对体外生产步骤的影响上，尤其是对卵母细胞IVM和胚胎发育阻滞的研究，突破这些难点将有利弄清卵母细胞成熟的机理，促进胚胎操作技术和商业化胚胎IVP快速发展，在奶牛与肉牛的扩繁与母畜资源利用方面发挥巨大作用。本文将就现阶段牛卵母细胞体外成熟培养体系及影响因素的研究情况加以综述。     

动物胚胎生物技术的研究进展与应用前景

胚胎生物技术是在胚胎移植技术的基础上，以胚胎为研究对象，经过20多年的试验研究而迅速发展和成熟起来的技术，主要包括：超数排卵、卵母细胞体外培养成熟、体外受精、胚胎移植、胚胎冷冻保存、胚胎性别鉴定和性别控制、胚胎克隆、体细胞克隆和基因转移等一系列有关胚胎的生产、操作和改造的技术。     

JIVET技术在绒山羊新品系选育中的应用

JIVET(Juvenile In Vitro Embryo Transfer)简称吉威特技术,即牛羊幼畜超数排卵及体外胚胎培养移植技术,是由澳大利亚南澳研究与开发院(简称SARDI)生殖与发育研究所独家研究开发的     

动物体细胞克隆机理的几个关键问题

克隆即clone的音译,来源于希腊文,表示用离体的细枝或小树枝增殖。动物克隆即动物的无性繁殖,就是将供体细胞核移人去核的卵母细胞中,使后者不经精子穿透等有性过程即可被激活、分裂并发育成个体,使得核供体的基因得到完全复制,也称为动物体细胞克隆。1997年2月,英国罗斯林研究所的Wilmut等人利用绵羊乳腺细胞进行核移植试验,获得了世界上第一头体细胞克隆绵羊-多利(Dolly),这一成果开创了哺乳动物核移植的新的里程碑。1998年,美国夏威夷大学等率先在小鼠上进行了成年体细胞的克隆。1998年,(Science)杂志报道了美国科学家用培养的携带外源基因的胎牛成纤维细胞作为供核获得4头转基因克隆牛。     

羔山羊超数排卵及体外胚胎生产技术研究进展

幼畜超数排卵的研究起始于20世纪50年代。1990年旭日干等用FSH和HCG对2．5～7月龄的羔山羊进行超排处理获得体内成熟卵母细胞，经体外受精后移植给母山羊，得到了世界上第一胎试管山羊，从而证明羔羊卵母细胞经体外受精后可以发育为正常的个体。利用羔山羊超数排卵得到的卵子进行体外受精，可以扩大体外受精所需卵子的来源．同时将此技术应用于山羊育种，还可以缩短育种过程的世代间隔。     

体细胞克隆牛的研究进展

体细胞核移植是目前生物技术领域研究的热点之一,具有重大的科学意义和应用价值.牛有产奶量高等独特优势,具有巨大的应用潜力,不同国家已相继诞生了体细胞克隆牛及转基因牛.本文回顾了牛体细胞核移植简史,对体细胞核移植方法、体细胞供核细胞的种类、受体卵母细胞去核方法、重构胚的激活、体外培养体系以及限制牛体细胞核移植应用的因素等进行了综述,并展望了牛体细胞核移植的应用前景.     

动物胚胎生物技术研究进展

胚胎生物技术是在胚胎移植技术的基础上,对哺乳动物的胚胎进行人为的工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要的成体动物的新技术.主要包括:超数排卵、卵母细胞体外成熟培养、体外受精、胚胎移植、胚胎冷冻保存、性别控制、胚胎克隆等一系列 有关胚胎体外操作和改造的技术.本文就这些技术的发展及其应用作一综述.     

小鼠皮肤成纤维细胞的体细胞核移植

取成年小鼠唇部皮肤进行培养，分离成纤维细胞并血清饥饿培养1周，用作核供体。对成年小鼠进行超排，取卵母细胞用作核受体，核移植重构胚经SrCl2激活处理6h后，同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养，把发育到早期囊胚的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上，添加ES细胞条件培养液，消化分离ICM，然后接种培养，对孵出的ES细胞样集落进行鉴定培养。结果显示，小鼠唇部皮肤成纤维细胞为核供体，核移植重构胚2-细胞率为54．05％，桑椹胚率17．14％，囊胚率6．90％，对照组卵丘细胞的核移植重构胚2-细胞率为60．00％，桑椹胚率21．85％，囊胚率11．69％，但2种供体细胞在支持核移植重构胚发育能力上差异不显著。成纤维细胞重构囊胚中6个囊胚分离出ES细胞样集落，3个ES细胞样集落可稳定传代；对照组卵丘细胞重构囊胚中9个囊胚中分离出ES细胞样集落，5个ES细胞样集落可稳定传代。从核移植重构胚中分离出的ES细胞样集落具有岛状或巢状群体生长形态，生长旺盛的集落可自发分化成单个散在或片状存在的上皮样或梭形细胞，碱性磷酸酶检测为阳性，常规冻存复苏，仍显示ES细胞特征。     

羔山羊超数排卵及体外胚胎生产技术研究进展

幼畜超数排卵的研究始于20世纪50年代.1953年Marden[1]在小牛上通过注射促性腺激素超数排卵的方法诱发小牛卵巢卵泡发育并获得了超数排卵的卵子,Black[2]等也在1953年用超数排卵的方法从小牛体内采集到受精卵.Onuma等1969年将超数排卵得到的小牛受精卵进行体外培养以后得到了体外发育的卵子,1971年相马等用同样的方法从1.5～3.5月龄羔山羊上也得到了发育正常的超排卵.