水牛体外胚胎移植技术研究

本文以每头次 2枚体外胚胎 (鲜胚或冻胚 )移植受体母牛 4 5头计 84头次 ,试验结果表明 ,鲜胚移植受胎率为 3 6 .2 % ( 2 5 / 6 9) ,平均每头受体移胚 1 .82次 ,产下 2 1头试管水牛 ,繁殖率为 5 5 .3 % ( 2 1 / 3 8) ;冻胚移植受胎率为2 0 .0 % ( 3 / 1 5 ) ,平均每头受体移胚 2 .1 4次 ,产下 3头冻胚试管水牛 ,繁殖率为 4 2 .9% ( 3 / 7) ,共生产 2 4头试管水牛 ,全部成活。其中 3头冻胚试管水牛 ,2例试管双胞胎和 1例采用人工授精与胚胎移植共生的双胞胎     

试管水牛技术研究

水牛卵巢卵母细胞经体外成熟培养、体外受精和受精卵在体外培育的胚胎移植给受体母水牛,结果表明：①卵母细胞体外培养成熟率71．6％、受精分裂率52．8％、囊胚率(占授精卵母细胞)27．2％。②双鲜胚移植受胎率36．2％(30．0％～44．8％),双胎率24％;双冻胚移植受胎率20．0％;生产试管水牛24头,全部成活,其中冻胚试管水牛3头;双胞胎3对。③胚胎冷冻方面：采用玻璃化胚胎冷冻技术,冷冻胚胎解冻后存活率64．4%。     

影响水牛体细胞克隆胚胎移植的因素

从不同发情方式、不同胚胎类型、不同胚龄以及不同季节来探讨影响水牛体细胞克隆胚胎移植的效率。结果显示,自然发情与同期发情方法对水牛体细胞克隆胚胎的移植受胎率有显著影响。鲜胚和冻胚移植后受胎率没有显著差异,其受胎率分别是9.79%、14.5%。在移植中,不论是鲜胚还是冻胚,6日龄胚胎移植受胎率最高。而且不同日龄(5、6、7、8～10d)克隆胚胎移植受胎率差异不显著(鲜胚P=0.260 7,冻胚P=0。065 2)。克隆胚胎在秋季移植时受胎率最高,受胎率是16.06%,比其他季节高,且差异显著(P<00.05).其次是春季,但夏季和冬季克隆胚胎移植后受胎率差异不显著(P>0.05)。结果表明,水牛体细胞克隆胚胎在胚胎移植中是可行的,但效率比较低。     

应用体细胞克隆技术和胚胎移植技术生产克隆水牛

为了解决克隆水牛技术在供核细胞、受体细胞中的选用问题,探索不同条件对移植受孕的影响,完善克隆技术的理论体系。试验以摩拉奶水牛的耳成纤维细胞作为供核细胞,本地水牛卵母细胞为受体胞质进行细胞克隆构建重组胚胎;将发育5～10 d的重组胚胎移植于本地水牛、杂交水牛的子宫内,观察不同发情方式、胚胎类型、胚龄及季节对移植受孕的影响。结果表明:水牛的克隆胚胎妊娠率较低,分别为12.05%、12.04%、13.95%。自然发情和同期发情对克隆胚胎移植受胎率的影响差异不显著;鲜胚胎移植186头,受胎22头,受胎率为11.83%(22/186);冻胚胎移植174头,受胎23头,受胎率为13.22%(23/174)。克隆水牛从出生至12月龄体尺增长明显高于本地水牛;水牛克隆胚胎移植受胎在秋季最好,秋季受胎数占全年的53.33%,显著高于其他季节。     

安格斯牛胚胎移植的试验研究

以沈阳市奉东优良畜禽繁育基地饲养的纯种安格斯牛为供体,以基地和东陵区农户饲养的杂种牛为受体,进行胚胎移植,共获得169枚胚胎,其中可移植胚胎95枚,平均每头（次）获得可用胚胎数5．9枚。将13枚鲜胚和16枚冻胚移植给同期发情的受体牛,结果为鲜胚的产犊率为38．5％（5／13）,冻胚为43．8%（7／16）;将61枚冻胚移植给自然发情的受体牛时,产犊率为42．6％（26／61）;冻胚的总产犊率为42．9％（33／77）。     

牛胚胎移植技术发展概况

家畜胚胎移植是家畜胚胎工程的重要组成部分,目前已成为一项比较成熟的生物技术。我国目前在牛的超数排卵、同期发情、胚胎移植、胚胎冷冻、胚胎分割、性别鉴定等技术已与国外基本同步。在正常情况下,平均每头供体牛获可用胚5．6枚,鲜胚移植受胎率为55％～70％,冻胚移植受胎率为45％～60%．每年移植受体牛在5000头以上。     

奶水牛活体采卵胚胎移植的应用

主要探讨利用胚胎移植技术加快优良奶水牛的繁育。本研究共进行175头次胚胎移植,受胎44头,流产8头,产下36头健康犊牛,受胎率为25.14%(44/175),流产率为18.18%(8/44)。数据分析,受胎率方面,后备牛>干奶牛>挤奶牛;鲜胚移植受胎率优于冻胚;自然发情移植受胎率与同期发情移植受胎率相差不显著;两种同期发情（CIDR+PG和GnRH+PG+GnRH）方法处理移植受胎率相当。流产率方面,挤奶牛>后备牛>干奶牛;鲜胚移植流产率与冻胚移植流产率基本一致;自然发情流产率小于同期发情流产率;CIDR+PG移植流产率高于GnRH+PG+GnRH移植流产率。结论：OPU胚胎移植技术可用于育种扩群。胚胎移植前后,加强饲养管理,减少应激,纠正内分泌平衡,有利于提高受胎率和降低流产率,获得更好的经济效益。     

牛胚胎性别鉴定与取样胚胎移植应用技术的研究

本研究应用ＰＣＲ技术扩增牛ＳＲＹ序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经１０９枚鲜、冻胚的移植，获鲜胚移值妊娠率５８．６％（３４／５８），常规冷冻胚胎移植妊娠率４４．４％（１２／２７），一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率１６．７％（４／２４）。犊牛性别验证与ＳＲＹ鉴定结果均相符合。实验中对胚胎发育时期的划分，胚胎质量评定和胚龄的确定，胚龄与受体发情时间在移植中的关系，胚胎的切割取样，取样胚胎的冷冻进行了研究。     

水牛胚胎移植技术研究试验报告

选用摩拉杂交水牛一代为供体,进行超数排卵,用摩拉水牛冻精进行人工授精生产水牛胚胎。试验共超排供体牛7头,非手术法冲胚5头,获胚胎7枚及未受精卵13枚,胚胎中可用的A级胚2枚,B和c级胚各1枚,退化胚3枚;移植受体牛4头。     

不同胚胎移植方法对天祝白牦牛受胎率的影响

为提高胚胎移植技术在牦牛上的运用效果,选用51头甘肃省天祝县健康黑牦牛作为受体,以纯种天祝白牦牛作为供体生产胚胎,分别对同期发情处理和自然发情的受体牛进行鲜胚和冻胚移植试验。结果,同期发情处理的受体牛鲜胚移植的受胎率显著高于冻胚移植的受胎率(P0.05),分别为52%和38.5%;在自然发情受体牛的胚胎移植中也得到了相似结果,鲜胚和冻胚的移植受胎率分别为60%和50%,同期发情处理牛的平均妊娠率则低于自然发情受体牛的平均妊娠率(P0.05),二者分别为47.5%和54.5%。结论,牦牛鲜胚移植的受胎率明显高于冻胚移植的受胎率,而且自然发情受体牛的受胎率高于同期发情处理牛。     

摩拉水牛冻精改良本地水牛试验研究

引进摩拉水牛冻精改良本地水牛试验，通过采取去势本地公牛，观察、掌握母牛发情规律、冻精保存方法，实施多次重复输精和犊牛早期培育补饲，我市水牛冻精改良首次获得成功，冻精改良配种受胎率达到36．19％，其摩杂一代公、母牛周岁体重分别较本地同龄水牛提高45．30％和49，89％，各阶段体尺体重都比本地牛有大幅度提高，经济效益非常明显，深受农户欢迎和喜爱，值得推广应用。     

提高奶牛胚胎移植妊娠率的措施

随着奶牛价格的大幅降低,奶牛胚胎移植技术推广应用受到了大大限制,要想推广技术必须提高奶牛胚胎移植妊娠率,降低胚胎移植犊牛生产成本。1胚胎方面除了选择优秀供体奶牛外,还要选择品质优良种公牛,精液活力高,一般冻精活力在0.6以上,精子含量在1000万个/m L。一般鲜胚A、B、C级胚胎受胎率分别为64%、45%、33%;冷冻胚胎A级受胎率为45%,B级受胎率为40.02%,C级受胎率为12.19%。所以一般冻胚移植A、B级胚胎,C级胚胎直接进行鲜移植,不进行冷冻。由于冷冻对胚胎有一定的危害,当条件允许时,尽量采用鲜胚进行移植。2受体方面受体牛选择要按照严…     

一胎二犊 品种各异

８月２２日晚１０时３０分，中国农科院水牛所的一头纯种尼里－拉菲水牛顺利产下了一对双胞胎水牛犊，其中一头是利用人工授精的纯种尼里－拉菲水牛，体重３５公斤；另一头是利用胚胎移植的摩拉杂交水牛，体重３１公斤。目前，这两头水牛犊生长发育正常。据了解，在一头母水牛身上同时利用人工授精和胚胎移植技术使其受孕，且产下两个不同品种水牛犊，这在国际上尚属首次。这一研究的成功对于提高水牛的受胎率和繁殖率具有十分重要的意义。一胎二犊 品种各异@水牛所 @曾庆坤     

胚胎移植技术的现状与展望

统计与分析了1991－2000年国际胚胎移植状况，结果表明胚胎移植已成为畜牧产业中最活跃的领域之一，胚移比例最大的依然是牛，其它各类的动物胚胎移植，如：绵羊、山羊、猪、马、鹿、美洲驼、羚羊等，也十分活跃。牛的胚胎移植，有几个重要指标分析结果如下：（1）供体牛的品种分布基本相同，肉牛与奶牛所占比例接近，但不同国家之间差别很大；（2）每头供体所得可用胚数在5－6枚之间；（3）鲜胚移植与冻胚移植的比例基本持平，但近年来冻胚移植的比例稍大于鲜胚移植；（4）通过IVF体外方式生产胚胎数目有所增长，目前每年大约在3－4万枚；（5）妊娠率、鲜胚移植妊娠率在60％以上，冻胚移植妊娠率在50％以上，IVF体外方式生产胚胎妊娠率在40％左右；（6）胚胎移植技术的发展状况在全世界分布不均衡，北美和欧洲胚移技术最成熟；（7）胚胎贸易有所增长。最后，对该技术存在的问题与发展前景提出了探讨和展望。     

MOET奶牛育种方案及胚胎移植技术试验

胚胎移植技术是MOET奶牛育种的重要手段．但由于胚胎移植受胎率偏低，尚不能在生产中广泛应用，如何尽快将这一技术在生产中应用和推广,是摆在广大畜牧科技人员面前亟待解决的问题。从2009年1月至2010年6月，经过技术人员的共同努力．初步确立了MOET核心群方案，同时胚胎移植取得了较好的效果：供体牛同期发情率达95．6％，受体牛同期发情率达89％，供体牛冲胚平均每头（6．2±0．8）枚，移植受体牛128头（其中移植鉴别母胚84枚、混合胚44枚），妊娠78头，妊娠率达60．9％（母胚妊娠率63．1％），鲜胚性别鉴定率为100％．均达到了国内先进水平。     

退掉性别控制胚胎移植试验

试验的目的是研究分选X型冻精与常规冻精品质的比较，结果显示：分选X精子的精液密度、活率、存活指数等各方面指标均明显低于常规冻精（P〈0．05）；使用4支分选X型冻精进行体内受精胚胎生产，结果对排卵数小于17枚的供体母牛进行体内受精胚胎生产效果良好，大于17枚则部分未受精；分选X型冻精奶牛鲜胚双胚移植与分选X型冻精奶牛鲜胚单胚移植进行比较，结果性控奶牛鲜胚双胚移植与单胚移植产犊率差异不大，双胚移植经济效益较高；分选X型冻精与常规冻精所产母犊比较，结果性控胚胎移植所产犊牛初生和60日龄各项指标与常规冻精所产犊牛差异不显著（P〉0．05）。     

绵羊非繁殖季节体内与体外冻胚移植效果研究

在非繁殖季节，利用萨福克、无角道塞特和边区菜斯特品种羊的体内或体外冷冻胚胎，以小尾寒羊为受体进行胚胎移植，结果如下：受体羊的同期发情率达76．1％，体内冻胚的受胎率（54．5％）和胚胎利用率（50，0％）均明显高于体外冻胚的受胎率（26．1％）和胚胎利用率（22.7％）（p＜0.001），差异极显著。     

自然发情黄牛作奶牛胚胎移植受体可行性分析

在奶牛胚胎移植黄牛试验中，选用自然发情母牛作受体，移植鲜胚的受胎率为５７．１％（ｎ＝２１）。相反，用同期发情处理的母牛作受体，移植群胚的受胎率只有２６．１％（ｎ＝２３）。农区各人工授精站每天都有数头自然发情黄牛登门配种，因此认为，应用奶牛胚胎称植黄牛时，选择自然发情的作受体，既可提高移植成功率，又能省去同期发情处理费用，是今后在奶牛胚胎移植实践中，值得推广的一项措施。     

牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究

进行了牛胚胎冷冻技术研究，重点研究了提高超排效果和冷冻胚胎移植受胎率的方法。头均获可用胚胎数达到７．０－７．４枚，牛冷冻胚胎移植受胎率达到４６．７％（５７／１２２），其中１９９６年达到５５．６％（２０／３６），Ａ级胚胎达到７７．８％（２１／２７）。在我国首次获得中国荷斯坦牛冷冻胚胎二分胚的同卵孪生牛犊，二分胚移植受胎率达到４２．９％（３／７）。     

皮埃蒙特牛超数排卵及胚胎移植试验

用国产激素ＦＳＨ、氯前列烯醇对皮埃蒙特纯种肉牛进行二批次共４头超数排卵，回收胚胎２０枚，平均每头采卵５枚，平均每头采可用胚３．７５枚，超排有效率７５％，用南阳母牛作受体牛，共移植鲜胚１０枚，鲜胚移植受胎率５０％。