犬、猪转移因子对犬淋巴细胞体外转化增殖影响的比较研究

无菌采取犬抗凝血,分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验,探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素P(PHA-P)、犊牛血清(FCS)对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上,研究不同浓度犬、猪转移因子(transferfactor,TF)对犬淋巴细胞增殖的影响,增殖的结果用MTT法测定。结果表明,当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml,PHA-P为12.5μg/ml,FCS为10%时,淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下,犬、猪TF浓度在0.195￣25mg/ml时,对淋巴细胞转化增殖均有促进作用,但犬、猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml,且犬、猪TF单独作用于淋巴细胞的效应明显优于与PHA-P的协同作用。结果证实,同源或异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果,同时研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了实验依据。     

猪转移因子对犬淋巴细胞转化增殖的影响

无菌采取犬抗凝血,分离淋巴细胞并制备成不同浓度.应用正交试验,探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素(PHA-p)、犊牛血清(FCS)对淋巴细胞增殖的影响.在此基础上,研究不同浓度猪转移因子(transfer factor,TF)对犬淋巴细胞增殖的影响,增殖的结果用MTT法测定.试验结果表明,当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml,PHA-P为12.5μg/ml,FCS为10%时,淋巴细胞增殖效果最佳.在最佳培养条件下,猪TF浓度在0.195～25mg/ml时,对淋巴细胞转化增殖均有明显促进作用,猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml,且猪TF单独作用于淋巴细胞的效果优于与PHA-P的协同作用.试验结果证实,异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果,同时本研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了试验依据.     

犬红细胞培养上清液对淋巴细胞增殖转化的影响

无菌采取犬血、肝素抗凝、分离出红细胞,制备不同浓度的红细胞悬液,接种24孔板中进行培养,在培养不同时间分别收集红细胞培养上清液,采用淋巴细胞增殖转化试验,检测其单独及协同不同丝裂原(PHA-P、ConA和LPS)对犬淋巴细胞增殖转化的影响,淋转结果用MTT法测定。结果显示,无论单独或是协同不同丝裂原(PHA- P、ConA和LPS),红细胞培养上清液对淋巴细胞均有明显的促增殖转化作用(P<0．05);单独及协同丝裂原PHA-P、ConA和LPS刺激淋巴细胞时,红细胞浓度分别为1×108,1×109,5．0×107和1×108mL1,培养时间分别为56,72, 56和72 h的红细胞培养上清效果最佳。表明,犬红细胞培养上清液对犬淋巴细胞的增殖转化有明显的促进作用。     

不同中药多糖体外对鸡外周血和脾脏淋巴细胞增殖能力的比较

为比较玉竹多糖、桑叶多糖、杜仲多糖、商陆多糖、淫羊藿多糖体外增强免疫活性,采用酶学检测法测定各中药多糖对鸡胚成纤维细胞的安全浓度,根据安全浓度测定结果,选择250.000μg/ml、125.000μg/ml、62.500μg/ml、31.250μg/ml、15.625μg/ml 5个浓度,用MTT法比较5种中药多糖单独和PHA协同刺激对外周血T淋巴细胞增殖指数的影响,以及比较5种中药多糖单独和LPS协同刺激对脾脏B淋巴细胞增殖率的影响。结果显示,玉竹多糖、桑叶多糖、杜仲多糖、商陆多糖、淫羊藿多糖对鸡胚成纤维细胞的安全浓度分别为1 250.0μg/ml、625.0μg/ml、625.0μg/ml、625.0μg/ml、312.5μg/ml。玉竹多糖、桑叶多糖、杜仲多糖和淫羊藿多糖无论是单独还是协同PHA刺激外周血T淋巴细胞,均不同程度地表现出增强T淋巴细胞的活性。桑叶多糖、杜仲多糖和淫羊藿多糖无论是单独还是协同LPS刺激脾脏B淋巴细胞,均不同程度地显示出良好的增强B淋巴细胞的活性。桑叶多糖和杜仲多糖体外增强免疫效果最佳,在62.500μg/ml和125.000μg/ml时,均显示出较强的增强外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞增殖的能力。     

苦马豆素对小鼠细胞免疫功能的影响

【目的】探索苦马豆素(SW)对小鼠免疫器官发育、外周血液中细胞数及淋巴细胞增殖功能的影响,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将80只昆白系小鼠随机分为8组,其中5个试验组按0.05,0.2,0.8,3.2和6.4 mg/kg剂量每天灌服不同质量浓度的SW生理盐水溶液,连续21 d;其他3组均为对照组(分别为生理盐水组、环磷酰胺组和空白对照组)。检测小鼠胸腺和脾脏指数,用细胞分析仪检测外周血液中白细胞、红细胞及淋巴细胞数;用MTT法检测脾脏淋巴细胞的增殖活化。【结果】在SW剂量为0.2~0.8 mg/kg,小鼠脏器(胸腺和脾脏)指数及外周血液中的细胞数均增加;SW单独作用或其协同刀豆蛋白A(ConA)和植物血凝素P(PHA-P)刺激时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性增强,SW协同脂多糖(LPS)刺激时,小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性降低。SW剂量为6.4mg/kg时,小鼠的脏器指数和外周血液中的细胞数均减少;无论小鼠脾脏淋巴细胞受丝裂原刺激与否,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性均降低。【结论】SW可以通过提高小鼠脏器指数及外周血液中细胞数提高淋巴细胞的增殖活性,增强小鼠的细胞免疫功能;SW剂量为6.4 mg/kg对小鼠细胞免疫功能有抑制作用,提示SW对小鼠细胞免疫功能的影响具有选择性和双向调节作用。     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

去铁胺对T淋巴细胞体外增殖、活化以及细胞周期的影响

分别采用MTT法、CFSE染色结合流式细胞术、双色荧光抗体染色结合流式细胞术、PI染色法检测去铁胺(DFO)对小鼠T淋巴细胞的药物毒性、对T淋巴细胞增殖、对Con A刺激下的小鼠T细胞CD69表达和淋巴细胞周期的影响。研究结果表明:DFO对淋巴细胞的毒性T细胞体外增殖、活化和细胞周期无影响;不同浓度的DFO(5、10、20、40μmol/L)能显著抑制受Con A刺激48 h和72 h后的T淋巴细胞增殖;低浓度的DFO(5、10μmol/L)对小鼠T淋巴细胞CD69的表达没有影响,高浓度(20、40μmol/L)的DFO可抑制T淋巴细胞CD69的表达;Ph能将T淋巴细胞抑制在G0/G1期。说明DFO除可通过抑制T淋巴细胞活化外,可能还通过其他机制抑制T淋巴细胞增殖,且DFO可以将淋巴细胞周期抑制在G0/G1期,可望发展成为一种新的免疫抑制干预药物。     

Luman-N-端融合蛋白的表达、纯化及小鼠免疫效果评价

Luman-N-端基因转化菌BL21在IPTG的诱导下,用SDS-PAGE检测表达情况,经电洗脱法纯化,利用纯化的蛋白免疫BALB/C小鼠,通过间接ELISA和淋巴细胞增殖转化试验评价免疫效果。结果显示:细菌经IPTG诱导后在56 kD处,出现了特异性蛋白条带,与预计融合蛋白大小一致,融合蛋白经电洗脱纯化后免疫小鼠,间接ELISA显示抗体效价达到1∶4000,淋巴细胞增殖试验表明与空白组相比,Luman-N-端融合蛋白质量浓度为10、20、40和60μg/mL时,能显著刺激淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度为80、100μg/mL能极显著地刺激淋巴细胞的增殖(P<0.01)。     

白术多糖的提取、纯化和活性研究

[目的]提取和纯化白术多糖,并探讨多糖中蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。[方法]采用醇沉分级、脱蛋白和Sephadex G-75制备柱从中药白术中提取分离得到cPAM、zPAM和PAM 3种多糖,并对这3种多糖进行体外淋巴细胞转化试验。[结果]3种白术多糖对ConA诱导的T淋巴细胞增殖均有促进作用;浓度为5μg/ml的zPAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用;浓度为5和10μg/ml的PAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用。[结论]白术多糖的纯化程度与脾淋巴细胞增殖有一定关系;纯化程度高的多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖有促进作用;白术粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

催产素和苯甲酸雌二醇对小尾寒羊外周血淋巴细胞增殖的影响

【目的】研究催产素(OXT)和苯甲酸雌二醇(E2)对淋巴细胞增殖的影响,探讨OXT和E2的相互作用机制。【方法】分别以静息和Con A刺激下的雌性绵羊外周血淋巴细胞为研究对象,用不同质量浓度(低质量浓度(OXT 10ng/mL,E2 50pg/mL)、中质量浓度(OXT 100ng/mL,E2 500pg/mL)和高质量浓度(OXT 1 000ng/mL,E25 000pg/mL))和处理方式(单用、联用(二者同时加入、E2预处理12h后加OXT、OXT预处理12h后加E2))的OXT、E2处理细胞,用MTT试验检测淋巴细胞的增殖水平,评估雌激素、催产素的相互作用方式。【结果】OXT对活化和静息状态的淋巴细胞均有抑制作用,且呈剂量依赖性。低质量浓度的E2可促进Con A刺激的T淋巴细胞增殖,但对静息状态的淋巴细胞无明显影响;随E2质量浓度的增加,高质量浓度的E2对不同状态的淋巴细胞增殖均有抑制作用。低质量浓度OXT和E2联用条件下,Con A活化的T淋巴细胞的刺激指数(SI)值介于2种激素单独作用之间;静息状态下的淋巴细胞增殖明显受到抑制,该抑制作用均强于2种激素单独作用;用生理浓度的OXT(10ng/mL)和E2(50pg/mL)对活化状态的淋巴细胞分别进行先后处理,对不同状态淋巴细胞增殖的影响偏向于后加入的激素的作用。【结论】高质量浓度的E2可抑制静息和Con A刺激活化的淋巴细胞的增殖,低质量浓度的E2对Con A刺激活化的淋巴细胞增殖有促进作用,而OXT抑制淋巴细胞的增殖。高质量浓度OXT和E2联用,在静息状态的淋巴细胞上体现了协同作用;低质量浓度OXT和E2联用,在活化状态的淋巴细胞上体现了相互颉颃和"利他作用"2种作用模式,显示了二者相互作用方式的多样性。     

小麦3414试验

本试验通过土壤养分测试,建立施肥指标体系,为施肥分区和肥料配方提供依据。     

塞拉菌素制剂的豚鼠最大化试验和Buehler试验

为检验塞拉菌素制剂对皮肤的过敏性,以化学药物指导原则为指导,进行了豚鼠最大化试验(GPMT)和Buehler豚鼠封闭斑贴试验(BT).用2,4-二硝基氯笨溶液作为阳性对照物,在GPMT试验和BT试验的阳性时照组的致敏率分别为80%和70%,对豚鼠的致敏率较高,2个试验受试物组的致敏率均为0,表明塞拉菌素时豚鼠没有致敏性...     

玉米品种比较试验

针对黑龙江省二九一农场的农业生态特点和土质气候条件,进行了玉米品种比较试验,筛选出4个适宜该地区栽培的高产玉米品种,增产幅度达10.5%-22.4%,对促进本地区玉米产业化发展具有重要意义。     

水产养殖知识考试系统随机组卷算法的实现

水产养殖知识考试系统基于浏览器/服务器结构,采用基于随机算法抽题,试题库中的试题以单个试题的形式存放且不形成成套试卷,按题型、难度、区分度、题分、知识点等分别进行分类管理。考生按考题要求完成通用浏览器向服务器传送,该系统使用类和对象对考生上传的文件进行实例化,从中读取相应属性进行判分,再把最终分数写入考生成绩数据库中。