广西猪链球菌2型的分离及PCR鉴定

无菌操作采取疑似猪链球菌病的仔猪组织,接种血平板,对染色镜检为链球菌的菌落分纯、液体培养后进行DNA抽提,用荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白基因、胞外蛋白因子基因的特异性引物分别扩增出236bp、572bp和867bp大小的目的片段,鉴定确认该菌株为猪链球菌2型。     

猪链球菌2型福建株的分离鉴定

从临床表现为败血症的濒死病猪肝脏、肺脏、淋巴结中分离到一株链球菌,进行形态学、生化特性、小白鼠感染试验及PCR鉴定和CPS2 J序列测定.结果表明:该分离菌的形态、培养和生化特性基本符合链球菌的特点;人工感染试验显示,小白鼠腹腔接种0.2 mL分离菌培养物不发病,但接种1 mL能在48 h内致小白鼠死亡,并能从脏器中分离到接种菌;分离菌的PCR扩增产物与猪链球菌2型阳性参考菌株JA070109大小一致、长度为675 bp的特异性条带,其PCR产物的核苷酸序列与GeneBank上公布的猪链球菌2型不同菌株的同源性高达98%-100%.可见,该分离菌为猪链球菌2型,并首次证实福建存在猪链球菌2型.     

浙江部分地区猪源链球菌的分离鉴定

通过染色镜检、PCR检测和VITEK 鉴定系统分析,从2016—2018年浙江部分地区规模化猪场采集的412份病死猪病料样品中共鉴定出51株猪源链球菌,其中猪链球菌25株,检出率为49.02%(25/51),非猪链球菌26株,检出率为50.98%(26/51)。猪链球菌中,1、2、7、8、9及29型菌株的检出率分别为4.0%(1/25)、48.0%(12/25)、8.0%(2/25)、16.0%(4/25)、12.0%(3/25)和4.0%(1/25),2株未定型,占8.0%(2/25);非猪链球菌中,乳房链球菌、粪肠球菌、浅绿色气球菌和屎肠球菌各分离到3株,分离率均为11.54%(3/26);毗邻链球菌分离率为7.69%(2/26);停乳链球菌马样亚种、血链球菌、伪豕链球菌、猪肠链球菌、盲肠肠球菌、乳酸片球菌、耳炎差异球菌各分离到1株,分离率均为3.85%(1/26);5株未确定到种,占19.23%(5/26)。     

猪源致病性链球菌的分离鉴定及药敏试验

2006年4月新乡某猪场2～6周龄仔猪发生了急性、热性、败血性传染病.根据病、死猪的发病情况、临床症状和剖检特征,疑似链球菌病.为了确诊,无菌采集病料, 经细菌培养分离出3株链球菌,并对其进行了生化鉴定、动物致病性和药物敏感性试验.结果表明,此病原菌为猪源致病性链球菌,并且分离菌对该猪场常用的几种抗菌药物有不同程度的耐药性.     

长春地区猪源链球菌分离株的病原特性研究

2000～2001年从长春地区分离到20株猪源链球菌,结合培养特征、生化特性及血清学反应等对其进行鉴定,其形态、染色、培养特征及理化特性基本符合猪链球菌的特点,大多具有α或β溶血,生化试验结果不稳定。用国际通用的链球菌A～G乳胶分型诊断试剂盒检测20株分离菌,5株为C群链球菌,9株为D群链球菌,1株为G群链球菌,2株与D群和G群有交叉反应,3株不在检测范围。20株链球菌对小白鼠致病性有所差异。本实验可证实长春地区猪链球菌病的病原已不局限于原有的C群链球菌,因此研制针对本地区流行株的多价灭活疫苗已成为控制该病的当务之急。     

猪链球菌2型临床分离株的分离鉴定和生物学特性分析

为了确定2019年江苏省某规模化猪场仔猪疑似发生猪链球菌病的病原菌及其毒力特性,进行了细菌分离培养、生化试验、PCR分型鉴定以及毒力基因检测和药敏性测定。结果表明:分离株在血平板上形成浅灰色、半透明的有α溶血环的圆形细小菌落,镜检呈散在排列的革兰氏阳性短链球菌,结合生化试验、基因分型,确定该病原菌为猪链球菌2型,命名为HA21。毒力基因检测结果显示,HA21主要毒力基因分布为sly~+/epf~+/mrp~+,提示HA21为强毒株。药敏试验结果显示,HA21对β-内酰胺类抗生素如青霉素、阿莫西林等敏感,但对阿奇霉素、卡那霉素等细菌蛋白质合成抑制剂类抗生素耐药。     

一株猪链球菌的分离鉴定及其防治

从福建某发病规模猪场保育猪的肺脏中分离到1株细菌,根据分离细菌的形态观察、生化试验、培养特性、PCR鉴定和动物攻毒试验,结合发病猪的临床症状和病理变化,表明该分离菌为偏向厌氧型链球菌,具有在血平板上培养良好且能致小白鼠发病死亡等特性.药敏试验表明:分离链球菌对万古霉素、亚胺培南、利奈唑胺和菌必治高度敏感,对阿莫西林、氟...     

广东省某猪场链球菌的分离与鉴定

为了解广东省茂名某猪场暴发猪链球菌病的详细情况及制作灭活疫苗给猪群接种免疫。该研究通过分离细菌、PCR鉴定、生化试验等方法分离、鉴定细菌,并通过动物试验了解该分离菌的致病性。最后通过药敏试验找出高敏药物用于临床治疗及了解该猪场细菌病的耐药性,指导临床合理用药。     

猪2型圆环病毒福建株的分离与鉴定

根据猪圆环病毒GenBank中登录的猪圆环病毒2型(PCV2)特征,设计引物对福建省某地疑似PCV2感染病例进行检测。对阳性病料进行猪圆环病毒分离鉴定,得到一株PCV2,命名为FJ11株。     

猪链球菌的分离与鉴定

从发病猪场死亡仔猪的肝、脾和淋巴结病料中分离到一株细菌，经细菌形态学观察、鉴别培养和生化分析，鉴定为链球菌。该菌株对小白鼠存在致病性。药敏试验表明，该菌株对氨苄青霉素、阿莫西林和先锋V高度敏感，对青霉素、磺胺类药、蒽诺沙星、环丙沙星低敏。     

猪链球菌亚种及1、2、9型四重PCR检测方法的建立

根据序列分析设计了4对引物,分别扩增猪链球菌gdh、cps1、cps2J和cps9G基因的725、212、387bp和556bp大小的片段,利用合成的4对引物并通过对反应条件与反应体系的优化建立了四重PCR,结果显示,猪链球菌阳性出现1条725bp目的带,猪链球菌1型阳性出现725bp和212bp两条目的带,猪链球菌2型阳性出现725bp和387bp两条目的带,猪链球菌9型阳性出现725bp和556bp两条目的带。应用该多重PCR检测了分离到的链球菌1095株,检出猪链球菌阳性667株、猪链球菌1型8株、2型33株、9型16株。研究结果表明,该方法特异性高、敏感性强,可广泛应用于猪链球菌病的快速诊断及流行病学研究。     

漯河地区猪源致病性链球菌的分离鉴定及药物敏感性试验

漯河市某猪场发生一起临床症状、剖检病变疑似猪链球菌病例,从中分离到2株细菌,对病菌进行分离培养、生化试验和动物试验,鉴定为猪链球菌。药物敏感试验结果表明分离菌株对磺胺六甲氧嘧啶、头孢曲松、氧氟沙星、克林霉素较敏感。而对青霉素、链霉素、环丙沙星、庆大霉素产生了耐药性。     

猪链球菌病病原的分离鉴定及药敏试验

采集疑似猪链球菌病的病猪病料,经病原分离培养、生化鉴定、动物试验和药教试验,结果表明所分离的细菌为α溶血链球菌(α-hemolytic streptococci.),该菌对霸王金针、利福平、沙拉噻呋极敏,对替米考星、头孢唑啉钠、氨苄西林钠、猪康2号为高敏.     

冀东地区猪链球菌病流行病学调查

为了解猪链球菌病在冀东地区的流行规律,对从秦皇岛、唐山等地区分离获得的48株猪源链球菌,用国际通用的标准链球菌兰氏血清分群诊断试剂进行了鉴定,结果表明,猪源链球菌血清群以兰氏D群为主(23/48,占47.9%),其次为C群(18/48,占38.5%)。同时,通过对280例猪链球菌病临床病例资料统计分析及流行病学调查,结果显示,猪链球菌病在冀东地区广泛存在,尤以寒冷季节多发,主要病型包括败血型、脑膜炎型和关节炎型;猪链球菌病发病率为15.2%~81%,死亡率为8.1%~50.4%。     

多杀性巴氏杆菌的分离和PCR鉴定

从甘肃省某县一猪场病死猪剖解肺部分离,经过涂片镜检观察,为革兰氏染色为阴性的球杆菌,经过生化试验鉴定初步定为多杀性巴氏杆菌.设计1 对引物进行PCR扩增、克隆之后,送往大连宝生物公司测序,测序结果运用BLAST软件比对,与多杀性巴氏杆菌同源性为100%.对分离株进行药敏试验,其对青霉素、链霉素、四环素等抗生素和磺胺类药物敏感.