影响绵羊超数排卵效果因素的研究

通过对绵羊超数排卵技术的主要环节进行研究,得出适用于规模化生产的一套简便、稳定、低成本、高效、实用的羊胚胎生产技术.其结果如下①超排处理的499只供体羊平均排卵、回收胚、可用胚分别是14.41枚±4.34枚、12.56枚±4.05枚、9.13枚±4.03枚,育成羊组的此3项指标均高于经产羊组(P＜0.01);②对6个品种的412只供体羊进行超排处理,罗米利希尔斯羊的排卵、回收胚胎及可用胚胎平均数均高于其他品种(P＜0.01),其他品种之间无显著差异(P＞0.05),帮德羊的可用胚胎平均数显著低于其他品种(P＜0.01);③舍饲和放牧条件下供体羊排卵黄体平均数没有显著差异(P＞0.05).但是,舍饲羊的回收胚和可用胚胎平均数显著高于放牧羊(P＜0.01);④3种方式发情羊的排卵黄体平均数无显著差异(P＞0.05),但是,自然发情羊的回收胚及可用胚平均数均明显高于其他两组(P＜0.01);⑤用宁波和加拿大生产的FSH制剂进行超排处理,黄体平均数并无差别(P＞0.05),但回收胚胎平均数前者低于后者(0.01＜P＜0.05),尤其是后者的可用胚胎平均数明显高于前者(P＜0.01);⑥宁波生产的FSH制剂分为4个剂量等级进行超数排卵,4组之间无显著差异(P＞0.05).150 u剂量组的回收胚胎平均数均低于其他剂量组(0.01＜P＜0.05),180 u剂量组可用胚平均数显著低于其他3个剂量组(P＜0.01); ⑦超排1次或2次,排卵数无显著差异(P＞0.05);但超排2次以上,黄体数明显下降(P＜0.01).超排3次以上回收胚胎数明显低于其他两组(P＜0.01);⑧精液质量直接影响超排效果,精液活力越高效果越好.     

绵山羊CIDR放置时间对超排效果的影响

研究主要针对CIDR放置时间长短对绵山羊超排效果的影响进行研究,以期为羊胚胎工程技术产业化提供坚实的基础.研究结果表明绵羊第10天起针的供体,平均回收数8.94枚±3.78枚,平均可用胚7.67枚±3.76枚,胚胎可用率90.34%.第13天起针超排的供体绵羊,平均回收8.38枚±3.79枚,平均可用胚6.37枚±3.03枚,胚胎可用率为76.03 %;第10天起针平均可用胚高于第13天起针的超排效果,两者差异显著(P＜0.05),两者之间平均回收胚基本一样,无显著差异(P＞0.05),但第10天起针的胚胎利用率高于第13天起针的胚胎可用率,差异极显著(P＜0.01).CIDR放置9天起针的供体山羊,平均可用胚为17.59枚±3.22枚,胚胎可用率87.40 %;CIDR放置15天起针的供体,平均可用胚数为12.73枚±4.01枚,胚胎可用率为67.95 %.CIDR放置9天起针平均可用胚高于CIDR放置15天起针的超排效果,差异极显著(P＜0.01),CIDR放置9天起针的胚胎可用率高于放置15天的胚胎可用率,差异极显著(P＜0.01).波尔山羊在11月、12月这种结果更明显;4月份虽然9天比15天高,但平均可用胚数和胚胎可用率之间没有差异(P＞0.05),而3月份平均可用胚差异显著(P＜0.05),胚胎可用率差异显著(P＜0.05).     

影响杜泊羊超数排卵和胚胎移植效果的因素研究

在生产条件下,探讨了胚胎回收部位、移植胚胎数量、胚胎发育阶段和季节等因素对杜泊羊超数排卵胚胎移植效果的影响.超数排卵处理了39只供体和移植了179只受体,结果表明,从输卵管平均回收胚胎数显著多于从子宫角平均回收胚胎数(10.57 vs 8.41)(P<0.05).移植2枚或3枚胚胎的妊娠率明显高于移植1枚胚胎的妊娠率(63.89% vs 66.67% vs 52.63%) (P<0.05).秋季、冬季和春季超排处理平均回收胚胎数(8.83 vs 9.50 vs 6.83)、平均可用胚胎数(7.92 vs 8.28 vs 5.17)和可用胚胎所占比例(88.68% vs 87.13% vs 75.61%)均显著高于春季(P<0.05).在秋季和冬季进行胚胎移植,妊娠率分别为57.89%和59.43%,高于春季移植的妊娠率(53.33%),但差异不显著(P>0.05).2～8-细胞胚胎的移植妊娠率与桑椹胚/囊胚移植妊娠率差异不显著(60.05% vs 57.47%)(P>0.05).     

弥勒红骨山羊重复超数排卵及胚胎移植研究

①弥勒红骨山羊两次超排间排卵数、回收胚胎数、回收率、可用胚数、可用胚率均无显著性差异(P＞0.05),但第2次超排后的排卵数、回收胚胎数、可用胚胎数的标准差较大,说明供体羊第2次超排效果均匀度较第1次低.②放牧+补饲和全舍饲两种养殖模式奶山羊同期发情率无显著差异(94.12％vs 88.89％)(P＞0.05),但发情受体的利用率差异显著(81.25％vs 56.25％) (P＜0.05).③放牧+补饲条件下饲养的奶山羊和圭山山羊同期发情率无显著差异(94.12％vs 84.85％) (P＞0.05),但圭山山羊发情受体的利用率较奶山羊低(57.14％vs 81.25％),差异显著(P＜0.05).④移植单胚的圭山山羊和奶山羊妊娠率、产羔率、胚胎获得羔羊的效率无明显差别,移植1～3枚胚胎的奶山羊受体,随移植胚胎数的增加,受体妊娠率逐步提高,从单胚的58.33％提高到双胚的65.22％和三胚的88.89％,母羊产羔率也显著提高,但胚胎获得羔羊的效率无明显差别.     

无角陶赛特母羊超排效果影响因素分析

为了加快国内引进无角陶赛特绵羊的杂交改良和扩繁,将MOET技术应用于生产,迅速增加现有种羊的群体.进行了不同厂家生产的FSH超排、青年羊和经产羊超排、母羊重复超排、母羊诱导发情后超排、黄体退化及超排母羊发情延迟对收集胚胎及可用胚胎数的影响比较.结果表明:用加拿大FSH(剂量160～200 mg/只)超排效果比较成功,可以收获12.91枚±7.80枚胚胎/卵和8.64枚±7.99枚可用胚胎;经产羊的超排效果优于处女羊(P＜0.05);连续超排和手术会降低总胚胎/卵回收数,但是对可用胚胎数无明显影响;用观察自然发情母羊超排,可以回收到较高的总胚胎/卵数(13.83枚±4.64枚)和可用胚胎数(12.00枚±5.76枚),显著高于诱导发情母羊和未知发情周期母羊超排后获得的总胚胎/卵数(7.00枚±4.9枚和5.94枚)和可用胚胎数(4.22枚±3.42枚和3.19枚±2.56枚)(P＜0.05);超排处理母羊发情推迟24 h获得的总胚胎/卵数和可用胚胎数(0.92枚±1.51枚和0.42枚±0.90枚)显著低于正常发情母羊(P＜0.01;超排后黄体正常母羊获得的胚胎/卵数和可用胚胎数分别为8.83枚±5.75枚和6.66枚±5.41枚,显著高于黄体退化母羊(5.88枚±5.09枚和3.59枚±4.30枚)(P＜0.01).结论:在胚胎移植中,通过使用加拿大FSH(Fotropin V)再结合选择经产母羊、自然发情母羊进行超排处理,冲胚时选择按时发情母羊及黄体正常母羊,可以收获到理想的总胚胎/卵数和可用胚胎数.     

胚胎移植技术在无角陶赛特羊选育中的应用

对60只无角陶赛特羊供体羊按年龄分2组进行超排处理,有效超排率为95%;共采集可用胚胎799枚,移植受体566只,产羔率为76.13%.分析结果表明①育成羊与经产母羊一样有较好的超排效果.其采集的可用胚胎数量为13.50±8.5(育成羊)、14.22±4.47(经产母羊),经t检验两者无显著差异(P＞0.05);②补饲条件下的产羔率(80.67%)显著高于不补饲条件下的产羔率(74.52%,P＜0.05).③移植2枚、3枚胚胎的受体羊产羔率(80.56%、83.33%)显著高于移植1枚胚胎受体羊产羔率(72.29%,P＜0.05).     

不同处理方法对萨福克肉羊超排回收效果的影响

对119只萨福克肉羊进行超排处理,其中48只为首次超排处理,71只为第二次超排处理。结果表明,首次超排胚胎回收率显著高于二次超排胚胎回收率(P＜0.05);首次超排和二次超排间供体羊平均黄体数、胚胎可用率均差异不显著(P＞0.05);供体羊经第二情期或埋栓同期发情处理后均能达到预期的效果,但首次超排和二次超排供体羊胚胎回收率均差异显著(P＜0.05)。     

绵羊超排效果研究

采用FSH-LH常规超排方法,共处理供体羊230只,有效反应221只(96.08%),获卵3032枚,可用胚2 606枚.统计分析结果舍饲组可用胚胎数显著(P＜0.05)高于放牧组;适龄(3～6岁)羊组超排效果最佳,显著(P＜0.05)高于育成(2岁以下)和老龄(7岁以上)羊组;胎次1～3胎之间超排效果差异不显著(P＞0.05),但产次4胎以上时,可用胚胎数明显下降(P＜0.05);FSH剂量适合范围在120～150Iu之间,超出此范围将影响超排效果.     

波尔山羊重复超排FSH用量的调整方法与效果

根据218只2～5岁经产波尔山羊的第1次超排反应及回收胚胎数将第2次超排母羊分为5个组（1组只有卵泡未排卵;2组母羊处理后未发情;3组黄体数≤4个;4组黄体数5～14个;5组黄体数≥15个）,2次连续超排时间间隔60 d以上,采用递减法用FSH（Folltropin V）进行超排处理,第2次FSH给量根据第一次的超排效果进行调整。结果表明,1～5组的有效供体利用率分别为100%、75%、71.88%、93.10%和93.65%,5组有效供体比例差异不显著（P＞0.05）;1～5组的总胚胎数分别为14.00±5.73、12.10±6.78、11.77±7.26、13.84±7.04、18.03±9.06枚,5组的总胚胎数极显著高于其他4组(P＜0.01);1～5组的回收可用胚胎数分别为12.81±6.04、10.33±8.12、10.08±7.14、11.34±6.58和15.37±7.64枚,5组超排后可用胚胎数显著高于2、3、4组(P＜0.05),与1组间差异不显著（P＞0.05）。根据供体首次超排效果调整波尔山羊重复超排FSH给量方案可行,首次超排无反应或超排反应差的个体,重复超排时增加FSH给量,可以使70%以上的个体成为有效供体。     

泌乳期波尔山羊的重复超排及胚胎移植效果分析

对26只泌乳期波尔山羊实施2次重复超排处理。其结果如下:①第一次超排有效率为84.62%,平均排卵数为19.5±6.42(枚/只),平均采集胚胎数为15.86±1.84(枚/只),平均采集可用胚胎数为10.5±8.32(枚/只)。第二次重复超排处理时有1只羊推迟发情,超排有效率为96.15%,平均排卵数为28.36±5.26(枚/只),平均采集胚胎数21.48±7.42(枚/只),平均采集可用胚胎数为18.64±4.12(枚/只);②两次重复超排所获得的可用胚胎数差异极显著(P<0.01)。泌乳期供体羊第一次采集的可用胚胎数量[10.50±8.32(枚/只)]显著低于断奶后供体羊[18.64±4.12(枚/只)];③胚胎移植后的2组羊产羔率差异不显著(P>0.05)。     

努比山羊胚胎移植效果初报

采用进口激素对 5只努比山羊和 14只杂交一代羊 (努比♂×云南黑山羊♀ )进行超排处理后 ,共回收胚胎2 2 6枚 (平均 11.9枚 ) ,其中可用胚胎 192枚 (平均 10 .1) ,努比羊平均排卵 2 0 .8± 4 .91枚 ,较杂交羊多 (杂交羊平均排卵 14 .0± 1.5 2枚 ) ,努比羊回收胚胎 14 .8± 4 .5 3枚 ,杂交羊回收胚胎 10 .9± 1.13枚 ,二者差异不显著。重复超排结果表明第 2次超排排卵数没有降低 ,第 3次超排亦无明显下降 ,但随超排次数的增加 ,羊只不发情数增加     

努比亚山羊黑色品系超排影响因素及效果比较

采用CIDR+oFSH 成熟的山羊超排技术方案,选择45只努比亚黑色品系山羊进行超排效果研究。结果表明：超排剂量育成羊低于成年母羊20%,育成羊获得的黄体数、可用胚数分别达到12.5±11.21和11.3±10.11枚,经检验差异不显著;超排季节的超排效果10月份明显优于6月份,6、10月份回收总胚数分别为8.8±7.65和15.6±6.59枚,可用胚数分别为8.2±6.97和14.0±7.29枚,总胚数10月份是6月份的1.77倍,可用胚数是1.71倍,两季节获得总胚数、可用胚差异不显著（P＞0.05）;在超排技术体系中,舍饲和放牧+补饲饲养方式回收胚胎数、可用胚数差异不显著（P＞0.05）;两次超排的效果第1次明显好于第2次,可用胚总数第1次比第2次多1.7枚;超排年龄以4、3、2岁母羊超排效果较好,可用胚数分别为21.2±13.38、14.8±7.25、13.6±5.53枚, 4岁羊与1、5岁羊之间差异显著（P＜0.05）;左右两侧卵巢观察到的黄体数差异不显著（P＞0.05）,结果表明努比亚黑色品系山羊具有较好的繁殖性能。     

无角陶赛特羊超数排卵技术研究

为了探索FSH剂量和不同超排处理方法对无角陶赛特羊超数排卵的效果,分别用总剂量为120 IU、180 IU、240 IU和300 IU四个剂量水平的FSH进行超数排卵.结果表明：240 IU的FSH对无角陶赛特羊的超排效果最好,回收胚胎数和可用胚胎数显著高于120 IU（P≤0.05）,同时效果也明显优于120 IU和180 IU剂量组;两种超排方案FSH＋PG和CIDR＋FSH进行超数排卵对无角陶赛特羊排卵数、回收胚胎数以及可用胚胎数之间无显著差异（P＞0.05）.     

绵羊超排效果研究

采用FSH－LH常规超排方法，共处理供体羊230只，有效反应221只（96.08%)，获卵3032枚，可用胚2606枚。统计分析结果：舍饲组可用胚胎数显著（P＜0.05)高于放牧组；适龄（3－6岁）羊组超排效果最佳，显著（P＜0.05)高于育成（2岁以下）和老龄（7岁以上）羊组；胎次1－3胎之间超排效果差异不显著（P＞0.05)，但产次4胎以上时，可用胚胎数明显下降（P＜0.05)；FSH剂量适合范围在120－150Iu之间，超出此范围将影响超排效果。     

超排技术在无角陶赛特羊胚胎移植生产中的应用研究

在胚胎移植生产中,用从新西兰引进的肉用绵羊品种无角陶赛特羊作供体进行规模化胚胎移植生产.超排结果表明:两次超排分别回收平均卵数为5.62枚和9.08枚;从不同年龄的无角陶赛特羊上获得总卵数差异不显著;配种后第7天冲取胚胎,以桑椹胚为最多,占总回收胚胎数的75.78%,配种后第8天回收的胚胎,以扩展囊胚和孵出囊胚数所占比例为最多,分别占总数的25.89%和31.75%;从两侧卵巢所观察到的黄体数和所回收的胚胎数差异不显著;用人工授精法比试验中的其它方法能显著提高所获得的有效胚胎数;用促卵泡素恒量注射、孕马血清两次注射法进行超排效果好,所获得的平均胚胎数为8.53枚,有效胚占回收总胚的百分率则增加到82.11%.     

分离后精子输精对超排奶牛卵子受精和胚胎质量的影响

研究应用性控精液对超排育成牛和成母牛输精,生产性控胚胎。结果表明:非性控精液组受精卵数同性控精液组相比差异不显著(P>0.05),但可用胚胎比例高于性控精液组(90.17%对89.73%,66.03%对63.57%)。育成牛群组受精卵比例高于成母牛群组(92.74%对84.93%)差异不显著(P>0.05);但可用胚胎比例显著高于成母牛群组(68.77%对55.28%)(P<0.05)。1次输2支性控精液组中,育成牛群组受精卵数、可用胚胎比例都显著高于成母牛群组(90.83%对79.69%,67.89%对53.13%)(P<0.05)。2次人工授精,每次输1支性控精液组中,育成牛群组受精卵及可用胚胎比例都显著高于成母牛群组(93.75%对87.41%,69.23%对56.30%)(P<0.05)。     

黑安格斯牛体内性控胚胎生产影响因素的研究

为了对黑安格斯牛体内性控胚胎生产过程中的相关影响因素,如月龄、卵泡刺激素(FSH)剂量和精液质量进行研究,试验使用性控分离精液生产黑安格斯牛体内性控胚胎,选择90头13~25月龄黑安格斯牛为供体,分别使用260 mg、340 mg FSH对供体进行超数排卵(简称超排)处理,同时选择3头公牛性控分离精液进行人工授精。结果表明:260 mg、340 mg FSH对不同月龄供体超排获得的平均胚胎数、平均可用胚胎数、平均不可用胚胎数、供体卵巢平均黄体数差异均不显著(P0.05);使用3头不同公牛性控精液进行人工授精后获得的平均胚胎数分别为10.44枚、10.89枚、9.30枚,且差异不显著(P0.05);使用♂1和♂2性控分离精液获得的平均可用胚胎数分别为2.78枚、4.11枚,显著高于♂3性控分离精液获得的平均可用胚胎数(0枚)(P0.05);使用♂1和♂2性控分离精液获得的平均不可用胚胎数分别为7.66枚、6.78枚,显著低于♂3性控分离精液获得的平均不可用胚胎数(9.30枚)(P0.05)。因此,使用低剂量FSH对较早月龄黑安格斯牛进行超排,同时选择受精力高的性控分离精液能够进行体内性控胚胎生产。     

不同年龄阶段供体和受体绵羊对超数排卵胚胎移植效果的影响

采用同一种FSH用各自的最适剂量对育成羊(10～12月龄)、适龄羊(2～5岁)、老龄羊(6岁以上)进行超数排卵。其结果如下:①育成羊组所获得的平均可用胚胎数(14.15±4.45)和适龄羊组获得的平均可用胚胎数(13.4±3.56)均显著高于老龄羊组所获得的平均可用胚胎数(8.15±4.12)(P<0.05);②育成羊组获得的平均可用胚胎数和适龄羊组获得的平均可用胚胎数无显著差异(P>0.05);③经产受体羊妊娠率为68.71/,显著高于育成受体羊妊娠率(59.3/)。     

杜泊绵羊胚胎移植技术在哈密地区应用效果观察

2014年在新疆哈密地区伊吾县喀尔里克公司进行绵羊鲜胚移植。受体羊采用两次注射PG法同期发情处理本地哈萨克母羊460只,发情389只,同期发情率为84.5%。供体羊采用PG与阴道栓埋置法同期发情处理,结合FSH递减法超排处理。结果显示:79只供体羊冲出可用胚胎485枚,冷冻胚胎42枚,移植可用胚胎443枚,移植受体羊375只,移植A级胚胎302枚,B、C级胚胎141枚。通过移植,A级胚胎利用率与受胎率明显高于B、C级胚胎,差异均显著(P0.05);71只羊采用PG法,8只羊CIDR法同期处理超排可用胚胎6.24枚与5.25枚,差异不显著(P0.05);供体羊平均超排可用胚胎6.1枚,移植受胎率达76.2%,羔羊成活率为95%。     

利用腹腔内窥镜方法比较不同输精时间对羊体内胚胎生产效率的影响

为提高供体绵羊胚胎生产效率,实验选取99只供体母羊,用FSH+CIDR法诱导发情超排。将正常发情的供体母羊随机分成两组进行输精,分别在超排撤栓后的第48 h和54 h利用腹腔内窥镜法输精。其中48 h输精组供体母羊51只,54 h输精组供体母羊48只。其结果显示:撤栓后54 h输精胚胎回收率极显著高于48 h输精组(P0.01);54 h输精组供体卵母细胞受精率(97.27%)极显著高于48 h输精组(87.02%)(P0.01);54 h组供体平均可用胚数显著高于48 h组(P0.05);撤栓后54 h利用腹腔内窥镜输精组可用胚比率(89.70%)显著高于48 h组(80.53%)(P0.05);移植后受体妊娠率,54 h组(70.44%)极显著高于48 h组(56.92%)。本研究结果显示,利用本实验超排方案,供体撤栓后54 h利用内窥镜一次定时输精相对于48 h输精显著提高了供体胚胎生产效率,对羊体内胚胎生产提供理论和技术支持。