桔梗茎总黄酮的纯化工艺及其抗氧化性研究

为探索大孔吸附树脂纯化桔梗茎总黄酮的工艺条件及其体外抗氧化活性,以总黄酮的比吸附量、吸附率及比洗脱量、洗脱率为考察指标,采用单因素试验对桔梗茎总黄酮的纯化工艺进行考察;采用分光光度法探索了桔梗茎总黄酮对DPPH·、亚硝酸盐、ABTS阳离子自由基、·OH的清除活性。结果表明,桔梗茎总黄酮纯化的较佳工艺条件为:桔梗茎浸提液采用石油醚脱脂,控制其总黄酮质量浓度1.1 mg/mL,桔梗茎浸提液的上柱体积与树脂质量比6∶1(mL/mg),吸附流速控制1.0 mL/min,洗脱液为70%乙醇水溶液,洗脱流速控制2.0 m L/min,洗脱液体积与树脂质量比7∶1(mL/mg)。在此纯化条件下,LX-36型树脂对桔梗茎总黄酮的比吸附量平均为5.933 mg/g、吸附率平均为89.89%,比洗脱量平均为5.627 mg/g、洗脱率平均为94.83%,干浸膏中总黄酮含量由6.35%提高到40%以上。研究结果表明,桔梗茎总黄酮对DPPH·、亚硝酸盐、ABTS阳离子自由基、·OH均具有清除活性,而且均随着其质量浓度的增加,清除活性均逐渐增强。该结果为桔梗茎的进一步开发利用提供了依据。     

桔梗多糖的分离纯化与含量测定

利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗多糖,并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋白质含量测定。桔梗饮片经热水浸提、乙醇分步沉淀得桔梗粗多糖PPS80,Sevage法脱蛋白后,通过DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephadex G-75凝胶柱层析进行纯化鉴定。分别采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝染色法测定纯化后各组分的糖和蛋白质含量。试验结果表明,从桔梗粗多糖PPS80中分离得到2个均一性组分PPS80-I和PPS80-II,糖含量分别为90.32%和86.75%,蛋白质含量分别为0.48%和1.96%。该试验首次采用DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析结合Sephadex G-75凝胶柱层析有效分离纯化出桔梗多糖均一性组分,为桔梗多糖的进一步研究提供基础。     

桔梗、白花蛇舌草不同组分对人肺癌细胞A549的抑制作用

为筛选桔梗和白花蛇舌草中的抗肿瘤活性成分,制备桔梗总黄酮、总皂苷提取物,白花蛇舌草总黄酮、总蒽醌提取物,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法检测总黄酮含量,香草醛法检测总皂苷含量,紫外吸收法检测总蒽醌含量,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测四种提取物对人肺癌细胞A549的抑制作用。结果表明：桔梗和白花蛇舌草总黄酮含量分别为5.51% 和1.19%,桔梗总皂苷含量为1.71%,白花蛇舌草总蒽醌含量为7.81%。桔梗总皂苷浓度为0.04 mg/mL时,对人肺癌细胞A549抑制率达到87.59%,桔梗总黄酮浓度为0.5 mg/mL时,抑制率达到89.16%。白花蛇舌草总蒽醌浓度为1.2 mg/mL时,抑制率达到34.76%;白花蛇舌草总黄酮浓度为0.3 mg/mL时,抑制率达到24.33%。试验认为,桔梗总黄酮和总皂苷对肺癌细胞A549的抑制作用较强,可为抗肿瘤药物的研究提供参考。     

葛根总黄酮的纯化及抗氧化活性研究

采用水杨酸法研究从葛根中提取总黄酮产物的抗氧化性,同时采用AB-8大孔吸附树脂对葛根总黄酮进行纯化研究。结果表明,葛根总黄酮对.OH自由基具有良好的清除作用,是一种天然的抗氧化剂。在树脂体积量相同的情况下,动态吸附的吸附率和解析率都比静态吸附的高;动态吸附中,柱子长度一样,直径较小的吸附能力优于直径相对较大的吸附能力。     

桔梗提取物的主要成分和抗氧化性的测定

为评价桔梗提取物中主要成分的含量和体外抗氧化性,通过回流提取法制备桔梗水提物和醇提物,水提醇沉法制备桔梗多糖;高效液相色谱法检测桔梗皂苷D含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法检测总黄酮含量,硫酸-苯酚法检测多糖含量;采用分光光度法检测不同提取物清除羟基和DPPH自由基的能力。结果表明:安徽和吉林产地桔梗醇提物中总黄酮在生药中含量分别为1.35%和1.30%,均高于陕西桔梗1.08%,安徽和吉林产地桔梗醇提物对DPPH·和·OH的清除率均高于陕西桔梗醇提物;安徽、吉林和陕西桔梗多糖在生药中含量分别为0.45%、0.39%和0.35%。3个产地桔梗多糖对DPPH·和·OH的清除作用安徽最高,吉林次之,陕西最低。桔梗醇提物对DPPH·和·OH的清除作用均高于桔梗水提物和桔梗多糖对DPPH·和·OH的清除作用。试验认为,桔梗醇提物对于DPPH·和·OH均具有较好的清除作用,以期为开发相关的抗氧化性产品提供参考。     

响应面法优化蜡梅叶片总黄酮的提取工艺

为了优化蜡梅叶片总黄酮含量的提取方法,本研究采用超声波提取,及以乙醇浓度、超声时间和超声温度为自变量,以总黄酮含量为响应值设计的响应面(RSM)优化方案。结果显示,以超声波及响应面法提取蜡梅叶片中总黄酮的最优提取方案为:乙醇浓度为85%,超声时间为34 min,超声温度为46℃,理论上预测的总黄酮含量为23.46 mg/g,测定的实际总黄酮含量为23.52±0.76 mg/g,模型的预测值与实际实验结果值相差很小,说明利用响应面法得到的提取参数比较可靠,可用于实际操作。另外,响应面法可以找出整个区域上因素的最佳组合和最优值,可信度较高。     

苍耳子、田基黄中黄酮类物质提取含量测定及对比研究

为考察苍耳子和田基黄中黄酮提取优化的研究和总含量的测定,及对两者黄酮总含量的对比研究。通过芦丁作为标准物测定总黄酮含量,采用L9(34)正交试验法确定乙醇浸提回流法的最佳浸提工艺条件。试验结果显示,苍耳子最佳浸提条件为乙醇浓度为60%,提取温度70℃,提取时间4 h,料液比为1:30 (g/mL),此条件下苍耳子总黄酮提取率为3.89%。田基黄最佳浸提条件为：乙醇浓度为50%,提取温度为80℃,提取时间为1 h,料液比为1:50 (g/mL)。以总黄酮浸提率作为考察指标,苍耳子最佳浸提工艺下总黄酮的提取率为3.89%;而田基黄总黄酮提取率为4.31%。结果表明田基黄中黄酮含量较于苍耳子高。本工艺简单可行,有较好的参考价值。     

黄芪皂苷的提取和纯化工艺研究

[摘要]： 目的：研究黄芪皂苷的最佳提取和纯化工艺。方法：采用正交设计法,以浸膏得率和黄芪皂苷含量为检测指标优选提取工艺;采用单因素考察法对黄芪皂苷纯化工艺中各影响参数进行优选。结果：黄芪皂苷最佳提取工艺为：黄芪药材加入10倍量的水、煎煮2次、每次1.5小时;黄芪皂苷最佳纯化工艺为：黄芪提取液上AB-8大孔吸附树脂,用3个柱体积的40%的酒精除杂,再用5个柱体积的80%的酒精进行纯化。结论：所建立的提取纯化工艺简单,所得到的皂苷含量高,适合工业化生产。     

超临界流体提取金银花中总黄酮研究初报

为探讨采用超临界CO2萃取技术萃取金银花中总黄酮的工艺条件;采用分光光度法测定总黄酮的含量,考察压力、温度、时间和夹带剂对总黄酮提取率的影响,并同热醇浸泡提取法、微波提取法和超声提取法的得率进行比较;得到超临界CO2萃取最佳条件为：压力30Mpa、温度40℃、时间120min和夹带剂用量4.5ml/g时,提取得率最高。同热醇浸泡提取法、微波提取法和超声提取法相比,其总黄酮得率分别为8.92%、9.56%、9.32%、和10.24%;超临界CO2提取方法同其他方法相比,得率高、时间短,是一种合适的提取金银花中总黄酮的方法。     

栾树不同部位总黄酮的提取及含量测定

通过微波辅助提取的L9(34)正交实验方法与索氏回流提取法,分别提取栾树果实、枝叶中总黄酮,确定微波辅助提取法较适宜,并得到其最佳提取工艺参数是：微波处理1min、水浴10min、固（原料）液（提取溶剂）比为1:20。以微波助提最佳工艺提取栾树总黄酮,通过NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系的510nm分光光度法测定其含量,得栾树果实、枝、叶中总黄酮含量分别为1.78%、0.27%、0.45%。对2003年9月、10月、11月分别采集的栾树果实进行提取及测定,3个采集时间的栾树果实中总黄酮含量分别为0.71%、1.78%、2.70%,总黄酮含量随果实趋向成熟而显著递增。     

啤酒花CO_2萃余物中总黄酮的提取纯化工艺研究

研究了啤酒花CO2萃余物中总黄酮的提取纯化工艺。采用单因素试验确定乙醇体积分数、提取时间、提取温度和料液比对提取效果的影响;通过正交试验,得到最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数为60%,料液比为1∶30,温度为70℃,提取时间为90 min,在该提取条件下总黄酮质量分数为62.7 mg/g;经饱和的水正丁醇溶液萃取,可得到纯度为20.3%的黄酮提取物;经聚酰胺树脂分离纯化,可得到总黄酮纯度为62.2%的提取物。     

苦荞麦黄酮含量萃取工艺的研究

为了研究其总黄酮的提取工艺,以苦荞麦不同器官为原料,采用高压提取、超声波萃取、高压提取+超声波萃取混合萃取苦荞麦黄酮含量。结果表明：高压15 min,测定黄酮含量：叶片5.46%、茎秆1.27%、根系0.54%;超声波萃取为60 min,测定黄酮含量：叶片5.72%、茎秆1.71%、根系0.84%;实施高压 + 超声波混合提取,以高压10 min + 超声波30 min,提取的黄酮含量最高：其叶片黄酮含量的平均值为6.34%,比相同条件的高压提取(5.07%)增加1.27%,比相同条件的超声波萃取(5.53%)增加0.81%。高压10 min+超声波30 min的回收率最高,为96.7%。     

藤三七茎总黄酮微波提取工艺优化

以自然生长的藤三七茎为原料,利用不同浓度的乙醇作为提取剂,采用微波法提取总黄酮。在单因素试验的基础上,分别研究不同部位、料液比、乙醇浓度、微波功率及微波时间对藤三七总黄酮提取率的影响,并得出影响因素主次和最佳提取方案。结果表明,藤三七茎较其他部位总黄酮含量高,且茎不易被氧化;藤三七茎中总黄酮的最佳提取工艺为:微波时间70 s,微波功率320 W,乙醇浓度70%,料液比1∶80(g/mL),在此条件下,黄酮提取率为7.42%。影响提取率的因素主要为微波功率和乙醇浓度,在生产加工中应对其加以控制。     

微波技术提取冰糖脐橙皮中的总黄酮

采用微波技术,用碱性乙醇水溶液浸提、盐酸酸析,从冰糖脐橙皮中提取总黄酮。以总黄酮得率为评价指标,用紫外可见分光光度法检测,L16(45)正交实验筛选出的最佳工艺条件为:料液比1∶10,乙醇体积分数为60%,微波时间5min,微波功率350W,NaOH质量分数为1%。按优选的最佳工艺实验3次,总黄酮得率为6.11%,相对标准偏差(RSD)为0.43%(n=3)。     

白桦叶黄酮超声波提取及纯化工艺研究

以白桦叶为原料,采用超声波法提取其黄酮化合物,以黄酮粗提物得率为指标筛选试验条件,进而进行响应面优化试验;采用NKA-9大孔吸附树脂对白桦叶黄酮粗提物进行纯化优化试验。结果表明:在料液比1∶41(g/g),乙醇质量分数90%,超声时间44 min的工艺条件下进行提取,黄酮得率可达6.12%。NKA-9大孔吸附树脂纯化粗提物的工艺条件为:上样浓度0.8 mg/mL,上样量3 BV,上样速率1.5 mL/min,pH 3,洗脱液乙醇体积分数90%,洗脱液用量2.5 BV。在此工艺条件下所得到的纯化物黄酮含量可达68.5%。     

响应面法优化超声辅助提取桑叶总黄酮工艺研究

为研究不同提取条件对桑叶总黄酮提取率的影响,以便优化桑叶总黄酮的提取工艺条件。选取液料比、超声时间和超声温度为影响因子,在单因素试验的基础上,进行3因素3水平的Box-Behnken中心组合试验设计。以桑叶总黄酮提取率为响应值,进行响应面分析,优化超声辅助提取桑叶总黄酮的提取条件。试验结果表明,超声辅助提取桑叶总黄酮的最佳工艺条件为：75%乙醇,在液料比为50:1、超声温度64℃,超声45 min后,桑叶总黄酮提取率理论值可达到4.29%,验证值为4.23%。实验结果为确定桑叶总黄酮的超声辅助提取工艺提供了实验依据。     

山竹果皮总黄酮富集工艺研究

研究D101大孔树脂富集山竹果皮总黄酮的工艺。通过静态、动态相结合的方法,确定D101大孔树脂富集的最佳工艺参数。结果表明,D101大孔树脂对总黄酮动态解析附的效果好于静态,动态解析附的最佳条件为:以流速2 m L/min上样30 m L 2 mg/m L的提取物,且用60 m L 70%乙醇以2 m L/min的流速洗脱,此条件下提取物总黄酮含量由原先的57.8 mg/m L增加到174.2 mg/m L。     

银杏愈伤组织细胞中总黄酮提取工艺的比较

为探索从药用植物细胞中提取黄酮类活性物质,用简单、易工业实现的低成本工艺获得较大的总黄酮提取率,为工业生产提供理论依据和实践指导,以银杏愈伤组织为材料提取总黄酮并测定含量。利用乙醇提取、超声波提取和水提取3种方法对银杏愈伤组织中黄酮类化合物进行提取,以络合分光光度法测定的黄酮得率为衡量指标,得到各自最佳的提取条件。结果表明：利用乙醇法提取愈伤组织中总黄酮提取最佳条件是：80%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶7（m∶v）,于60℃提取3次,总黄酮得率为3.67%;超声波法提取最佳条件为60%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶34（m∶v）,提取65 min总黄酮,得率为4.57%;水提法的最佳条件是：水温90℃,料液比为1∶30（m∶v）,提取3.5 h,总黄酮得率为2.95%。3种优化后的提取方法黄酮得率依次为：超声法＞乙醇法＞水提法。     

大叶羊蹄甲总黄酮的提取及其对羟自由基的清除作用研究

为了研究大叶羊蹄甲中总黄酮的提取、鉴别方法及对羟自由基的清除作用。用乙醇提取法提取大叶羊蹄甲中黄酮类物质,采用分光光度法对提取物中总黄酮含量及羟自由基清除能力进行测定。提取大叶羊蹄甲中总黄酮的最佳工艺条件为：回流温度为80℃,乙醇体积分数为80%,固液比1:20,提取时间为1 h,在此条件下,黄酮的提取率为11.81%。此方法实验步骤简便,无污染,是提取大叶羊蹄甲中黄酮类化合物的有效途径,大叶羊蹄甲中总黄酮提取液对Fenton体系产生的?OH自由基有很好的清除作用。     

药食植物鱼腥草对亚硝化反应抑制作用的研究

在固液比1∶10,提取温度80℃,提取时间60 min条件下,研究五种溶剂提取鱼腥草活性物质中的总黄酮和总酚含量及其对亚硝胺合成的阻断作用与对亚硝酸钠的清除效果。结果表明,55%丙酮提取鱼腥草活性物质中的总黄酮和总酚含量最高,对亚硝胺合成的阻断作用与对亚硝酸钠的清除效果最好,其最佳浓度下提取的鱼腥草活性物质对亚硝胺合成的阻断率达92.81%,对亚硝酸钠的清除率达89.53%;当提取物中的总黄酮含量和VC溶液浓度均为2 mg/mL时,二者对亚硝胺的阻断率分别为51.08%和66.91%,对亚硝酸钠的清除率分别为23.04%和38.22%。