灵芝菌丝体活性三萜抗肿瘤活性的研究

探讨活性灵芝三萜对各种癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。采用MTT观察活性三萜对癌细胞的生长抑制作用,采用共聚焦扫描电镜和流式细胞术检测了该活性三萜对各种癌细胞的促凋亡作用。该活性灵芝三萜能够剂量依赖性地抑制各种癌细胞的增殖,并且在流式细胞术检测出现亚二倍体峰,共聚焦扫描电镜可观察到凋亡细胞。该活性灵芝三萜能够抑制各种癌细胞的生长并能诱导细胞发生凋亡。     

高温胁迫对香菇菌丝体脂肪酸的影响

香菇是一种广泛栽培的食用菌,高温环境对其生长影响巨大。本试验借助GC-MS技术,测定了在37℃高温胁迫不同时间下(0, 4, 8, 12, 18和24 h),香菇菌株18和18N44菌丝体中脂肪酸含量变化情况。结果发现：在高温胁迫过程中,两个香菇菌株的脂肪酸种类均未发生改变,但总脂肪酸含量均逐渐降低;随着高温胁迫时间的延长,两个菌株的主要饱和脂肪酸棕榈酸的占比持续升高,主要不饱和脂肪酸亚油酸的占比持续降低,并且耐高温菌株18N44的饱和脂肪酸占比要显著高于18 (高温胁迫24 h除外)。本研究结果表明：高温下香菇中饱和脂肪酸占比与其耐热性存在正相关关系,为耐高温香菇新品种的选育提供了一定的理论依据。     

杏鲍菇菌丝体水溶性多糖提取条件的优化

以多糖得率为测定指标,通过单因素和L9(34)正交试验,对杏鲍菇菌丝体水溶性多糖的提取条件进行了研究。结果表明,杏鲍菇菌丝体水溶性多糖的提取条件为:料水比1∶40,提取温度80℃,提取时间4 h。在此条件下,水溶性多糖得率为8.27%。     

超声波提取羊肚菌菌丝体多糖的研究

以液体深层发酵培养的羊肚菌新鲜菌丝体为原料,在单因素实验的基础上,采用正交试验研究了羊肚菌多糖超声波提取的最佳方法,确定的优化条件为:提取时间为20min,料液比为1∶10,超声波功率为960W,提取次数为2次,样品中的羊肚菌多糖提取率为1.14%。     

代料不同配方培养基对木耳菌丝体生长影响的研究

通过代料不同配方培养基对木耳菌丝体生长影响的研究,明确配方1培养基上木耳菌丝体生长较快,菌丝体浓白、稠密、生长茁壮,栽培袋污染率低.这是由于配方1的营养、碳氮比和物理性状适于木耳菌丝体生长的缘故.配方1的成份为:棉子皮48%,锯末48%,石膏1%,磷肥1%,石灰1.5%,尿素0.5%.     

决明原生质体的分离与培养研究

用决明（ＣａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａＬ．）子叶和下胚轴为材料,游离和培养原生质体。结果表明,１５日龄无菌苗的子叶和下胚轴比较适于游离原生质体,每１ｇ材料的原生质体产量高达１．６×１０４个;ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３是分离原生质体所必需的;用含２,４－Ｄ０．４ｍｇ／Ｌ（以下单位同）,ＮＡＡ１．０与ＫＴ０．１的ＫＭ８Ｐ漂浮培养利于原生质体的分裂。培养４ｄ后,原生质体开始分裂,１５ｄ后其植板率约为１９．２％,３０ｄ形成了细胞团或小愈伤组织。增殖愈伤组织在分化培养基上培养,可分化出芽。芽在生根培养基上培养１４ｄ生根,从而再生决明小植株。     

姬松茸富硒菌丝体蛋白质提取条件的优化

为探讨姬松茸富硒菌丝体蛋白质的提取工艺,深入研发食用菌富硒菌丝蛋白质保健品,本研究通过单因素试验和正交试验,对碱溶酸沉法提取姬松茸富硒菌丝体蛋白质的条件进行优化,结果表明:最佳提取工艺参数为:Na OH浓度0.15 mol·L~(-1)、料液比1∶25(g/m L)、浸提温度35℃、浸提时间2.5 h,在此工艺条件下姬松茸富硒菌丝体蛋白质的提取量及其硒含量分别达到337.1 mg·g-1和35.8μg·g-1(菌丝干重)。     

小鼠睾丸间质细胞的分离培养

寻求一种简单有效的方法分离纯化睾丸间质细胞并寻求较适宜的培养条件。采用机械撕碎、密度梯度离心等分离、纯化细胞,设对照组寻求较适宜的培养条件。刚分离的细胞经苔盼蓝染色,存活率〉90%;体外培养的细胞形态完整、增殖速度快、贴壁生长状态良好。用17-α羟化酶和用雄激素结合蛋白RT-PCR扩增进行纯度鉴定,前者出现特异片段,后者未出现。该方法简单、经济、快速、有效,适合睾丸间质体外分离培养。     

野生白棕口蘑菌种分离及培养条件优化

本研究对从江西赣州采集的一株野生食用菌子实体经组织分离获得菌丝纯培养物,通过形态特征分析和ITS技术进行鉴定,鉴定其为口蘑属的白棕口蘑Tricholoma albobrunneum。序列上传GenBank,登录号为MT539126。本研究还通过不同培养基配方对白棕口蘑进行分离纯化培养,并设计分析不同碳源和氮源培养基对白棕口蘑菌丝生长的影响。结果表明加入菌根泥土浸提液的4号培养基菌丝的生长速度最快,菌丝长势强,色素分泌少,得到纯化菌种。白棕口蘑菌丝生长最佳碳源为红糖,最佳氮源为酵母膏,最佳培养基组合为：马铃薯200 g,红糖20 g,酵母膏5 g,琼脂20 g,KH₂PO₄0.6 g,MgSO₄0.6 g,pH自然。本研究为后续白棕口蘑栽培试验提供了一定理论基础。     

黄芪水提物活性成分测定及对五种食用菌菌丝体生长的影响

为了解黄芪水提物中主要有效成分的含量,并研究其对黑平菇、香菇、黑木耳、白灵菇、杏鲍菇菌丝体生长的影响。采用紫外分光光度法测定了黄芪水提物中总皂苷、总黄酮、总酚酸、总多糖含量;采用高效液相色谱法测定了毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷。结果表明,黄芪水提物中含有毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷两种特征成分,总皂苷、总黄酮、总酚酸、总多糖含量分别为62.67、56.48、12.19、564.26 mg/g。在检测浓度范围内,黄芪水提物对香菇菌丝体生长会产生抑制作用;当黄芪水提物浓度小于一定阈值时可以促进黑平菇、黑木耳、白灵菇、杏鲍菇菌丝生长,高于该阈值时,生长速度则会被明显抑制;其中黄芪水提物对杏鲍菇菌丝体生长产生抑制作用时的阈值浓度最高,为1.5 g/100mL。黄芪水提物中主要成分为黄芪多糖、黄芪皂苷和黄芪黄酮,黄芪水提物在低浓度时可以促进食用真菌菌丝体的生长,但在高浓度时则抑制食用真菌菌丝体的生长。     

3个铁线莲品种组培快繁体系的建立

本试验以铁线莲'卡西斯'(ClematisCassis)、'大河'(Clematis Taiga)、'倾盆大雨'(Clemotis Cloud-burst)为外植体,研究在3、4月外植体的消毒最佳时长时间,结果表明,3、4月中,'卡西斯'的最佳消毒时长分别是3 min和4min,'大河'的最佳消毒时间均为4 min,'...     

6株拮抗酵母对梨毛霉菌(Mucor sp.)和青霉菌(Penicillium sp.)防效测定

采用稀释涂布平板法从拉萨市城关区的12种市售水果中分离酵母菌,并采用平板划线法对酵母菌菌株进行纯化;采用病斑法对皿内抑菌效果较强的6株拮抗酵母进行活体防效测定,并采用26S r DNA D1/D2区域序列测定法对酵母菌进行了分子鉴定。结果表明,193和233号两株酵母对梨毛霉菌(Mucor sp.)有明显的抑菌作用,其发酵液防效强于菌悬液;193号菌株对梨青霉菌(Penicillium sp.)有明显防效,其菌悬液抑菌作用大于发酵液。分子鉴定结果显示,6株酵母菌归为5个种,48号菌株为隐球酵母(Cryptococcus adeliensis),77号为葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),193号为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii),230和235号为禾本红酵母(Rhodotorula graminis),233号为胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)。     

小青杨叶肉原生质体分离条件的研究

为获得大量、有活力的原生质体,建立起高效的小青杨（Populus pseudo-simonii Kitag.）原生体分离体系,本研究以小青杨无菌苗叶片为材料进行原生质体分离条件的研究。结果表明：酶的种类和浓度、渗透压稳定剂浓度、酶解时间、叶龄是影响原生质体分离的重要因素;将叶龄35天的无菌苗第2~3片叶片置于酶液组成为CPW+3.0% 纤维素酶R-10+0.5% 离析酶 R-10+0.1% 果胶酶Y-23+0.6 mol/L甘露醇+0.6 g/L MES+1 g/L BSA中酶解8 h,原生质体产量和活力分别为2.44×107个/g和78.7%。通过该分离体系稳定的获得了高产量、高活力的原生质体,可以满足进一步的原生质体培养等技术的要求。     

1种食用菌细菌隐性污染栽培种的菌种分离研究

研究1种以木屑为主要配方的食用菌细菌隐性污染栽培种的菌种分离。稀释涂布平板法分析细菌总数。栽培种捣碎后悬于无菌水,分别以短时(5 min)涡漩振荡、摇床振荡(180 r/min)、低温静置(4℃) 3种方式处理;灭菌纱布过滤收集、无菌水淋洗木屑接种至PDA斜面,培养使其生长。以未经处理木屑为接种物作为对照。结果显示栽培种细菌数为15500 cfu/g;对照（30支）以及采用短时涡漩振荡处理所接30支斜面全部细菌污染;摇床振荡1、2、3、4天纯化率分别为20%、30%、46.67%及63.3%;低温静置1、2、3、4天纯化率分别为3.3%、10%、46.67%和60%。以木屑为主要配方的细菌隐性污染栽培种悬于无菌水经1~4天振荡或浸湿再分离的基内菌丝分离法可有效分离纯化菌种。     

LAS高效降解菌的分离鉴定及其降解性能的初步研究

从环境中筛选分离出能高效降解直链烷基苯磺酸钠（LAS）的菌株,研究其降解性能,以期为LAS污染治理提供菌种资源。利用富集培养技术从重庆市某地区经含洗涤剂污水长期浸泡的污泥中分离获得1株对直链烷基苯磺酸钠（LAS）具有较强降解能力的菌株,命名为L1。通过对菌株形态、生理和生化特性分析,初步鉴定菌株L1为黄单胞菌属（Xanthomona sp.）。经研究,该菌的生长和LAS降解率在pH 5.0~7.5之间比较稳定,其中在pH为7.0时效果最佳,并且具有一定的酸碱调节能力。LAS浓度为150 mg/L,是该菌生长和LAS降解的最适浓度,48 h菌体生长量测定的吸光值可达0.413,LAS降解率可达87.64%,表明菌株L1具有治理LAS污染的潜在应用价值。     

烟草不同组织总RNA的提取方法初探

【研究目的】寻找烟草各个组织总RNA最佳的提取方法。【方法】以烟草K326的根、茎、叶、蕾、花和种子为材料,分别采用试剂盒法、Trizol法和CTAB法提取烟草6个组织总RNA进行对比。【结果】烟草不同组织总RNA提取方法有所不同,试剂盒法和Trizol法只能提取出根、茎、叶、蕾和花的总RNA,而不能提取种子总RNA;CTAB法能提取出6个组织的RNA。3种方法提取的RNA质量好,均能满足RT-PCR以及后续实验的要求。【结论】试剂盒法较Trizol法和CTAB法简单、快捷,适合于烟草除种子以外其余组织总RNA快速提取,CTAB法适合烟草所有组织总RNA提取。     

变绿红菇子实体多糖的理化性质及其抗肿瘤活性

从变绿红菇子实体中提取出4种多糖,检测了它们的化学组成和分子量,并通过体内和体外实验,检测其抗肿瘤活性。结果表明,变绿红菇子实体的4种多糖为杂多塘,含有的单糖组分分别为木糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖以及果糖,其中葡萄糖为主要单糖组分。这4种多糖的重均分子量分别为3.1×107,6.5×105,5.1×105,8.0×105Da;多糖RVP2有较好的抗肿瘤活性,此发现为变绿红菇的深入开发利用提供了有价值的依据。     

濒危药用植物沙冬青内生真菌分离及其抑菌活性初步研究

为探明濒危药用植物沙冬青内生真菌资源的多样性及其抑菌活性特征,通过组织块法对内生真菌进行了分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。结果显示,从沙冬青不同组织器官中分离出41株内生真菌,根部最多,其次为叶部,茎部最少,经形态学初步分类鉴定归于5个目,6个科,19个属;有31株菌对2种或多种指示菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的75.6%,15株内生真菌对1种或多种供试细菌指示菌具有不同程度的抑制作用,占分离菌株总数的36.6%,其中5株内生真菌分别对4种植物病原真菌指示菌具有明显的抑制作用,占菌株总数的12.2%,8株内生真菌对1种供试细菌指示菌有明显的抑制作用,占分离菌株总数的19.5%, 4株内生真菌菌株即对供试植物病原真菌指示菌又对供试细菌指示菌有明显抑制作用, 抑菌范围宽,属于青霉属、束丝菌属、茎叶核菌属。濒危药用植物沙冬青具有丰富的内生真菌资源,其开发和利用具有重要的生态学意义和经济价值。     

福建山樱花组培快繁研究

以福建山樱花(Prunus campanulata Maxim.)嫩枝作为外植体,接种到1 / 4MS＋BA1.0mg/L+IBA0.01 mg/L,可诱导大量丛生芽。增殖阶段,培养基MS＋BA1.0mg/L+GA0.3 mg/L有利于苗的快速繁殖,提高繁殖系数。最佳生根培养基配方为：1/2MS＋NAA1.0 mg/L＋IBA0.2 mg/L。     

0.3%苦豆子总碱防治枸杞蚜虫田间药效试验

以0.3%苦豆子总碱水剂为试药,在三个地区的枸杞蚜虫上进行田间防效试验。结果表明：稀释800倍药液防效好于1000倍,药后7d三地防效均达90%以上,持效期长达15d。与对照相比,不产生药害,且有一定的增产作用,是理想的防治枸杞蚜的无公害药剂。